营养肉汤适用性验证

营养肉汤适用性验证方案
目录
1、验证目的
2、参照标准
3、验证项目
4、验证小组
5、试验材料
5.1 被验证培养基
5.2 仪器设备
5.3 稀释剂
5.4 验证用菌株
6、菌液制备
7、培养基的无菌性检查
8、培养基灵敏度检查
8.1 检验频次
8.2 培养基接种
8.3 结果判定
9、验证周期
10、验证报告
1.验证目的
为证明营养肉汤适合于细菌的培养，特制定本验证方案。

2.参照标准
2015版中国药典通则1101无菌检查法。

3.验证项目
营养肉汤适用性检查。

4.验证小组
姓名部门职责
5.试验材料
5.1. 被验证培养基：
品名：营养肉汤
5.2. 仪器设备：
5.2.1.手提式压力蒸汽消毒锅
5.2.2.超净工作台
5.2.3.电热恒温培养箱（30～35℃）
5.3. 稀释剂：
0.9%无菌氯化钠溶液
5.4 验证用菌株：
验证菌株菌种编号代次6.菌液制备
金黄色葡萄球菌菌液、大肠埃希菌菌液、枯草芽孢杆菌菌液的制备：取金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌的培养物用0.9%无菌氯化钠溶液按10倍稀释法稀释到每1 ml 含菌量小于100CFU 的菌悬液。

7.培养基的无菌性检查
每批培养基均应进行无菌性检查。

检查时，每批培养基随机取不少于5支（瓶）置30～35℃培养14天，应无菌生长。

如有菌生长须重新制备培养基，再次验证培养基的无菌性，否则不能保证无菌检查结果的可靠性。

表1培养基的无菌性检查表
注：“+”为生长，“-”为不生长 8.培养基灵敏度检查
8.1.检查频次：营养肉汤灵敏度检查至少应进行3次独立的平行试验。

8.2.培养基接种
取每管装量为20ml 的营养肉汤培养基7支，分别接种小于100cfu/ml 的金黄色萄球菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌各2支，另1支不接种作为空白对照，置于30～35℃的温度下培养5天，逐日观察结果。

8.3.结果判断
空白对照管应无菌生长，若加菌的培养基管生长良好，判该培养基的灵敏度检查符合规定。

若加菌的培养基管不生长或生长不好，判该培养基灵敏度不符合规定，不得用于无菌试验，并寻找造成不合格的原因。

表2培养基灵敏度检查表
培养基 名称
管数 培养天数
培养
温度 备注
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 营养肉汤
1 30～35℃
2
3 4 5
结论
菌种类型 培养基装量 （ml ）
管号 培养天数
培养温度 备注
1 2 3 4 5 金黄色葡萄球菌 20 1 30～35℃
20 2 大肠埃希菌 20 3 20 4 枯草芽孢杆菌 20 5 20 6 空白对照 20
7
结论
注：“+”为生长，“-”为不生长 9 .验证周期
同种培养基的不同批号，不同生产厂家均应进行适用性验证。

10.验证报告
营养肉汤适用性验证报告。