热休克蛋白60基因定点诱变导致其在细胞内定位的改变

热休克蛋白60基因定点诱变导致其在细胞内定位的改变
王银;游丽琴;李云鸿;滕鹏;成文静;张玉梅;苗珍花;蒲静;马娇;张楠
【期刊名称】《宁夏医科大学学报》
【年(卷),期】2011(033)007
【摘要】目的研究将热休克蛋白60(HSP60)蛋白序列中第70位的丝氨酸(serine)突变为丙氨酸(alanine)后,HSP60在细胞内定位的改变.方法将PrC/CMV -
HSP60P1重组质粒中HSP60P1编码第70位丝氨酸的碱基定点诱变为编码丙氨
酸的碱基序列,转染至小胶质细胞BV -2细胞株中表达.细胞经10h缺氧处理后,裂
解细胞,应用差速离心方法分离细胞膜、细胞质和线粒体,应用Western- blot方法检测各细胞器中HSP60的含量.结果在转染未诱变PrC/CMV - HSP60P1质粒的
细胞中,正常情况下,HSP60大部分分布在线粒体,少部分在胞浆,细胞膜中未见表达；缺氧刺激后,HSP60在细胞膜、胞浆和线粒体中均有表达；然而70位丝氨酸突变
为丙氨酸后,只观察到HSP60在胞浆和线粒体中的表达,而在细胞膜上未见表达.结
论作为磷酸化位点的Serine70对HSP60在细胞内的定位具有关键作用.
【总页数】4页(P609-611,618)
【作者】王银;游丽琴;李云鸿;滕鹏;成文静;张玉梅;苗珍花;蒲静;马娇;张楠
【作者单位】宁夏医科大学科学技术中心,银川750004;宁夏医科大学基础医学院
神经生物系,银川750004;宁夏医科大学基础医学院医用化学系,银川750004;宁夏
医科大学科学技术中心,银川750004;宁夏医科大学基础医学院神经生物系,银川750004;宁夏医科大学基础医学院神经生物系,银川750004;宁夏医科大学基础医
学院医用化学系,银川750004;宁夏医科大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学系,
银川750004;宁夏医科大学基础医学院医用化学系,银川750004;宁夏医科大学基础医学院医用化学系,银川750004;宁夏医科大学基础医学院医用化学系,银川750004
【正文语种】中文
【中图分类】R345.05
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