用PCR技术克隆细小病毒H－1部分非结构蛋白基因

用PCR技术克隆细小病毒H－1部分非结构蛋白基因
黄青山;黄建;罗祖玉;王顺德;刘为平
【期刊名称】《中国病毒学》
【年(卷),期】1995(10)4
【摘要】应用ＰＣＲ技术定向克隆了细小病毒Ｈ－１的非结构蛋白（ＮＳ）部分基因片段。

自行设计并合成了ＰＣＲ引物△Ｐ３和△Ｐ４，在两个引物中分别引入两个突变碱基，使扩增后的ＤＮＡ片段的两端含有限制性核酸内切酶ＨｉｎｄⅢ或ＢａｍＨＩ的酶切位点，经双酿切法把该ＤＮＡ片段重组到ｐＵＣ１１８质粒中。

对插入片段的ＤＮＡ序列测定和分析结果证实该片段为Ｈ－１ＮＳ－１基因序列。

以此重组质粒为探针，采用分子杂交的方法，分别测定了Ｈ－１及ＭＶＭＤＮＡ在细胞内的复制水平。

这一基因的克隆为制备Ｈ－１的质量监测、Ｈ－１及ＭＶＭＮＳ－１蛋白抑瘤作用机理及其在肿瘤细胞及正常组织中的转录表达等研究奠定了基础。

【总页数】9页(P323-331)
【关键词】细小病毒H-1;聚合酶链反应;非结构蛋白基因
【作者】黄青山;黄建;罗祖玉;王顺德;刘为平
【作者单位】复旦大学生理学与生物物理学系,复旦大学遗传工程国家重点实验室【正文语种】中文
【中图分类】Q939.406
【相关文献】
1.用PCR技术克隆细小病毒H-1部分非结构蛋白基因 [J], 黄青山;黄建;罗祖玉
2.转染及表达细小病毒H-1非结构蛋白1基因对人胃癌细胞的抑制作用 [J], 赵笛;蔡晨雯;刘炯;萧树东;郑青
3.细小病毒H-1非结构蛋白NS1基因对人胃癌细胞的抑制作用研究 [J], 王园园;刘炯;李金辉;萧树东;郑青;汪铮
4.肝癌干细胞标志物及细小病毒H-1非结构蛋白NS-1对肝癌干细胞生长的影响[J], 张洁;俞翀曌;汪铮;葛海良
5.细小病毒H-1非结构蛋白NS1在人肝癌细胞内的超显微结构定位 [J], 施志仪;林万敏;李健宏;罗祖玉
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