血清VAP-1、VCAM-1在甲状腺癌患者中的变化及意义
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作者简介:张燕妮,女,主管技师,主要从事临床检验方面的研究㊂ ә 通信作者,E -m a i l :2434377339@q q
.c o m ㊂㊃论 著㊃
D O I :10.3969/j
.i s s n .1672-9455.2023.18.019血清V A P -1㊁V C AM -1在甲状腺癌患者中的变化及意义
张燕妮,胡玉海ә
湖北省武汉市汉口医院检验科,湖北武汉430013
摘 要:目的 探讨血清血管黏附蛋白-1(V A P -1)㊁血管细胞黏附分子-1(V C AM -1)
在甲状腺癌患者中的变化及意义㊂方法 选取2020年7月至2022年5月该院收治的甲状腺癌患者57例作为甲状腺癌组,另选取同期确诊的甲状腺腺瘤患者47例作为甲状腺腺瘤组,同期体检健康者30例作为健康对照组㊂采用酶联免疫
吸附试验检测各组血清V A P -1和V C AM -1水平,分析不同临床病理参数的甲状腺癌患者血清V A P -1和
V C AM -1水平差异,绘制受试者工作特征(R O C )曲线分析血清V A P -1和V C AM -1诊断甲状腺癌的效能㊂结果 甲状腺癌组术前血清中V A P -1水平显著低于甲状腺腺瘤组和健康对照组(P <0.05),而血清V C AM -1水平显著高于甲状腺腺瘤组和健康对照组(P <0.05)㊂血清中V A P -1㊁V C AM -1水平在甲状腺腺瘤组和健康对照组间差异无统计学意义(P >0.05)㊂与术前相比,甲状腺癌组术后血清V A P -1水平显著升高(P <0.05),而血清V C AM -1水平显著降低(P <0.05)㊂术前血清V A P -1㊁V C AM -1水平在不同肿瘤最大径㊁
肿瘤病理类型㊁T NM 分期㊁肿瘤分化程度和有无淋巴结转移的甲状腺癌患者中差异有统计学意义(P <0.05)
,而不同年龄㊁性别的甲状腺癌患者中术前血清V A P -1㊁V C AM -1水平差异无统计学意义(P >0.05)㊂R O C 曲线分析结果显
示,血清V A P -1和V C AM -1联合检测诊断甲状腺癌的A U C 为0.904(95%C I :0.854~0.954)
,灵敏度为98.25%,特异度为53.25%㊂结论 血清V A P -1和V C AM -1与甲状腺癌患者临床特征密切相关,二者联合检测对甲状腺癌有较高的诊断效能,同时可以用于评估甲状腺癌患者疾病进展,指导临床㊂
关键词:甲状腺癌; 血管黏附蛋白-1; 血管细胞黏附分子-1; 诊断
中图法分类号:R 446.1文献标志码:A 文章编号:1672-9455(2023)18-2715-05
C h a n g e s a n d s i g n i f i c a n c e o f s e r u m V A P -1a n d V C A M -1i n p a t i e n t s w i t h t h y
r o i d c a n c e r Z HA N G Y a n n i ,HU Y u h a i
ә
D e p a r t m e n t o f C l i n i c a l L a b o r a t o r y ,W u h a n M u n i c i p a l H a n k o u H o s p
i t a l ,W u h a n ,H u b e i 430013,C h i n a
A b s t r a c t :O b j
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f i c a n c e o f v a s c u l a r a d h e s i o n p r o t e i n -1(V A P -1)a n d v a s c u l a r c e l l u l a r a d h e s i o n m o l e c u l s -1(V C AM -1)i n t h e p a t i e n t s w i t h t h y
r o i d c a n c e r .M e t h o d s F i f t y -s e v e n p a t i e n t s w i t h t h y r o i d c a n c e r a d m i t t e d t o t h i s h o s p i t a l f r o m J u l y 2020t o M a y 2022w e r e s e l e c t e d a s t h e t h y r o i d c a n c e r g r o u p ,47p a t i e n t s w i t h t h y r o i d a d e n o m a d i a g n o s e d d u r i n g
t h e s a m e p e r i o d w e r e s e l e c t e d a s t h e t h y r o i d a d e n o m a g r o u p ,a n d 30h e a l t h y s u b j e c t s u n d e r g o i n g t h e p h y
s i c a l e x a m i n a t i o n i n t h e s a m e p e r i o d w e r e s e l e c t e d a s t h e h e a l t h y c o n t r o l g r o u p .E L I S A w a s u s e d t o d e t e c t s e r u m V A P -1a n d V C AM -1l e v e l s i n a l l g r o u p s .T h e d i f f e r e n c e s o f s e r u m V A P -1a n d V C AM -1l e v e l s a m o n g t h y
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h a r a c t e r i s t i c (R O C )c u r v e s w e r e d r a w n t o a n a l y z e t h e d i a g n o s t i c e f f i c i e n c y o f s e r u m V A P -1a n d V C AM -1i n d i a g n o s i n g t h y
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P <0.05).T h e s e r u m V A P -1a n d V C AM -1l e v e l s h a d n o s t a t i s t i c a l l y s i g n i f i c a n t d i f f e r e n c e b e t w e e n t h e t h y r o i d a d e n o m a g r o u p a n d t h e h e a l t h y
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e s a n d ㊃
5172㊃检验医学与临床2023年9月第20卷第18期 L a b M e d C l i n ,S e p
t e m b e r 2023,V o l .20,N o .18Copyright ©博看网. All Rights Reserved.
g e n d e r s(P>0.05).T h e R O C c u r v e a n a l y s i s s h o w e d t h a t t h e a r e a u n d e r t h e c u r v e(A U C)o f s e r u m V A P-1 a n d V C AM-1c o m b i n e d d e t e c t i o n i n t h e d i a g n o s i s o f t h y r o i d c a n c e r w a s0.904(95%C I:0.854-0.954),t h e s e n s i t i v i t y w a s98.25%a n d t h e s p e c i f i c i t y w a s53.25%.C o n c l u s i o n S e r u m V A P-1a n d V C AM-1a r e c l o s e l y c o r r e l a t e d t o t h e c l i n i c a l c h a r a c t e r i s t i c s o f t h e p a t i e n t s w i t h t h y r o i d c a n c e r,a n d t h e i r c o m b i n e d d e t e c t i o n h a s h i g h d i a g n o s t i c e f f i c i e n c y f o r t h y r o i d c a n c e r,m e a n w h i l e i t c o u l d b e u s e d t o e v a l u a t e t h e d i s e a s e p r o g r e s s i o n o f t h e p a t i e n t s w i t h t h y r o i d c a n c e r a n d g u i d e t h e c l i n i c.
K e y w o r d s:t h y r o i d c a n c e r;v a s c u l a r a d h e s i o n p r o t e i n-1;v a s c u l a r c e l l u l a r a d h e s i o n m o l e c u l s-1;d i a g-n o s i s
甲状腺癌是临床上最常见的恶性内分泌系统肿瘤,流行病学显示,近年来甲状腺癌在全球范围内的发病率均呈明显上升趋势㊂尽管有75%~85%的甲状腺癌患者为甲状腺乳头状癌,预后较好[1]㊂然而由于肿瘤侵袭性较强,长期随访显示超过25%的甲状腺乳头状癌患者经过常规治疗后仍会出现复发和转移,其中大部分需经二次手术并辅以放射治疗和靶向药物治疗;另一部分仍无法根治,最终死亡[2]㊂甲状腺髓样癌和甲状腺未分化癌因为侵袭性较强,进展迅速,预后较差[3]㊂因此,深入研究甲状腺癌进展标志物,对早期诊断和疾病病情监测,以及改善患者预后具有十分重要的作用㊂
血管黏附蛋白-1(V A P-1)为内皮细胞黏附分子,主要参与白细胞滚动黏附和向炎症部位转移,其水平高低与胃癌㊁肝癌等疾病的复发和预后差密切相关[4-5]㊂血管细胞黏附分子-1(V C AM-1)是一类通过介导白细胞黏附等导致血管内皮细胞功能受损的黏附分子,与多种肿瘤的预后也密切相关[6]㊂研究表明V A P-1和V C AM-1的水平与甲状腺癌细胞侵袭㊁黏附和远处转移密切相关[7-8]㊂因此本研究拟通过比较血清V A P-1和V C AM-1在甲状腺癌患者㊁甲状腺腺瘤患者和健康者间的变化,进而评估这2项指标联合检测对甲状腺癌的诊断价值,为临床诊断提供参考㊂1资料与方法
1.1一般资料选择2020年7月至2022年5月在本院行甲状腺全切术并经病理检查确诊的甲状腺癌患者57例作为甲状腺癌组,另选取同期确诊的甲状腺腺瘤患者47例作为甲状腺腺瘤组,同期体检健康者30例作为健康对照组㊂甲状腺癌组:男13例,女44例;年龄19~69岁,平均(43.77ʃ11.85)岁;甲状腺乳头状癌32例,甲状腺滤泡状癌14例,甲状腺髓样癌10例,甲状腺未分化癌1例;T NM分期,Ⅰ~Ⅱ期39例,Ⅲ~Ⅳ期18例;有淋巴结转移36例㊂甲状腺腺瘤组:男16例,女31例;年龄20~52岁,平均(38.60ʃ8.16)岁㊂健康对照组:男8例,女22例;年龄21~53岁,平均(37.57ʃ8.62)岁㊂3组研究对象性别㊁年龄比较,差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性㊂甲状腺癌组纳入标准:(1)为首次确诊甲状腺癌,术前未接受其他相关治疗;(2)未合并高血压㊁心脏病等心脑血管疾病;(3)临床资料完整㊂排除标准:(1)合并其他系统相关疾病;(2)患有传染性疾病;
(3)合并其他甲状腺相关疾病;(4)近期服用可能影响本研究结果的药物㊂本研究符合相关医学伦理学要求并获得本院医学伦理委员会批准㊂
1.2仪器与试剂 P W350全自动洗板机(深圳市汇松科技发展有限公司),R T-6100全自动酶标仪(深圳雷杜生命科学股份有限公司),B Y-300C低速台式高速离心机(北京白洋医用离心机有限责任公司),DW-86L338J医用超低温保存冰箱(青岛海尔生物医疗股份有限公司),人V A P-1酶联免疫吸附试验(E L I S A)检测试剂盒(E K1646,武汉博士德生物工程有限公司),人V C AM-1E L I S A检测试剂盒(E K0537,武汉博士德生物工程有限公司)㊂
1.3方法甲状腺癌患者分别于术前和术后第3天晨起空腹采集外周静脉血3m L,甲状腺腺瘤组和健康对照组均晨起空腹采集外周静脉血3m L,3000r/ m i n离心15m i n,取血清于-80ħ冰箱冻存备用㊂采用E L I S A检测血清V A P-1和V C AM-1水平㊂E L I S A严格按照产品说明书进行操作㊂具体如下:每孔加入250μL稀释血清(即25μL血清加入225μL 标本稀释液),封板后37ħ孵育90m i n,吸弃酶标板内液体,每孔加入100μL生物素标记抗人抗体,37ħ孵育60m i n,1ˑ洗涤缓冲液洗板3次,每孔加入100μL A B C工作液,37ħ孵育30m i n,1ˑ洗涤缓冲液洗板5次,最后每孔加入90μL T M B显色液,37ħ避光25m i n,每孔加入100μL终止液,使用酶标仪在450n m检测吸光度(A)㊂
1.4统计学处理采用S P S S21.0统计软件进行数据分析㊂符合正态分布的计量资料以xʃs表示,两组间比较采用独立样本t检验,多组间比较采用单因素方差分析,多组间两两比较采用S N K-q检验;绘制受试者工作特征(R O C)曲线,分析血清V A P-1和V C AM-1对甲状腺癌的诊断效能㊂以P<0.05为差异有统计学意义㊂
2结果
2.1各组血清V A P-1和V C AM-1水平比较甲状
㊃6172㊃检验医学与临床2023年9月第20卷第18期 L a b M e d C l i n,S e p t e m b e r2023,V o l.20,N o.18
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腺癌组术前血清中V A P -1水平显著低于甲状腺腺瘤
组和健康对照组(P <0.05),而血清V C AM -1水平显
著高于甲状腺腺瘤组和健康对照组(P <0.05
)㊂血清V A P -1和V C AM -1水平在甲状腺腺瘤组和健康对照
组间差异无统计学意义(P >0.05
)㊂见表1㊂表1 各组血清中V A P -1和V C AM -1水平
检测比较(x ʃs ,n g
/m L )组别n
V A P -1V C AM -1
甲状腺癌组57361.39ʃ121.75①680.38ʃ142.53①
甲状腺腺瘤组47632.53ʃ196.70*579.46ʃ60.50*健康对照组
30
697.79ʃ201.73
*
591.76ʃ71.92
*
F 49.9014.17P
<0.05
<0.05
注:与甲状腺癌组比较,*P <0.05;①
为术前水平㊂
2.2 甲状腺癌组手术前后血清V A P -1和V C AM -1水平比较 和术前相比,甲状腺癌组术后血清V A P -1水平显著升高(P <0.05),而血清V C AM -1水平显著降低(P <0.05
)㊂见表2㊂2.3 不同临床病理参数的甲状腺癌患者术前血清V A P -1和V C AM -1水平比较 术前血清V A P -1㊁
V C AM -1水平在不同肿瘤最大径㊁
肿瘤病理类型㊁T NM 分期㊁
肿瘤分化程度和有无淋巴结转移的甲状腺癌患者中差异有统计学意义(P <0.05),而不同年龄㊁性别的甲状腺癌患者中术前血清V A P -1㊁V C AM -1水平差异无统计学意义(P >0.05
)㊂见表3㊂表2 甲状腺癌组手术前后血清中V A P -1和V C AM -1
水平比较(x ʃs ,n g
/m L )时间n
V A P -1V C AM -1
术前57361.39ʃ121.75680.38ʃ142.53术后
57
620.73ʃ92.02
580.85ʃ80.77
t -12.714.55P
<0.05
<0.05
2.4 血清V A P -1和V C AM -1诊断甲状腺癌的R O C
曲线分析 R O C 曲线分析结果显示,血清V A P -1㊁V C AM -1单项检测诊断甲状腺癌的曲线下面积(A U C )分别为0.883(95%C I :0.828~0.939)㊁0.698(95%C I :0.604~0.793),2项联合检测诊断甲状腺癌患者的A U C 为0.904(95%C I :0.854~0.954)㊂见表4和图1㊂
表3 不同临床病理参数的甲状腺癌患者术前血清V A P -1和V C AM -1水平比较
临床病理参数n
V A P -1
水平(x ʃs ,n g /m L )t 或F
P
V C AM -1
水平(x ʃs ,n g /m L )t 或F
P
年龄(岁)-0.63
0.53
1.41
0.17
<5546356.35ʃ124.80695.78ʃ143.74 ȡ5511382.45ʃ105.48628.57ʃ114.92性别0.690.49-0.220.83
男13382.11ʃ97.36
675.06ʃ116.77 女
44355.27ʃ127.43685.09ʃ149.10肿瘤最大径(c m )5.86<0.05-4.38<0.05
ɤ125446.76ʃ96.31600.86ʃ69.87
>132
294.69ʃ94.95
746.83ʃ151.59病理类型8.30<0.05
16.29<0.05
乳头状癌32395.62ʃ102.00619.79ʃ86.24
滤泡状癌14393.34ʃ113.90677.82ʃ134.99 髓样癌10225.14ʃ77.69855.51ʃ104.18
未分化癌1
180.96ʃ0.00
1042.07ʃ0.00T NM 分期
7.03<0.05
-6.62
<0.05
Ⅰ+Ⅱ期39418.28ʃ100.82618.36ʃ95.79
Ⅲ+Ⅳ期18
238.13ʃ52.09
822.44ʃ125.97淋巴结转移7.33<0.05
-5.19<0.05
无32437.12ʃ93.89610.67ʃ83.36 有
25
264.45ʃ78.91
775.15ʃ85.94
㊃
7172㊃检验医学与临床2023年9月第20卷第18期 L a b M e d C l i n ,S e p
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续表3 不同临床病理参数的甲状腺癌患者术前血清V A P -1和V C AM -1水平比较
临床病理参数n
V A P -1
水平(x ʃs ,n g /m L )t 或F
P
V C AM -1
水平(x ʃs ,n g /m L )t 或F
P
肿瘤分化程度34.75
<0.05
16.83
<0.05
高分化26612.73ʃ93.42605.04ʃ78.67
中分化20327.82ʃ74.20680.65ʃ141.54 低分化
11
211.73ʃ54.28
852.38ʃ117.06
表4 血清V A P -1和V C AM -1单项及联合检测诊断甲状腺癌的效能
指标A U C
A U C 的95%C I
最佳截断值(n g
/m L )灵敏度(%)特异度(%)似然比
V A P -1
0.8830.828~0.939473.180.5284.215.100V C AM -1
0.6980.604~0.793674.392.2149.121.8122项联合检测
0.904
0.854~0.954
-
98.25
53.25
30.35
注:-表示无数据
㊂
图1 血清V A P -1和V C AM -1检测诊断甲状腺癌的
R O C 曲线
3 讨 论
据国家癌症中心最新统计数据显示,
我国甲状腺癌不仅发病率和病死率呈现持续上升趋势,而且5年生存率与发达国家相比仍有14%左右的差距㊂因此加大高危人群的早期筛查和诊治势在必行㊂目前超声检查由于其具有无创㊁易操作㊁快速等诸多优势,成为临床上对甲状腺癌筛查的首选方法㊂但是众多研究表明,单纯依靠超声方法对甲状腺癌诊断的灵敏
度㊁特异度和准确度均不足80%
[9-10]
㊂这与超声检查主要依据病变形态㊁大小㊁病灶钙化㊁病灶血流状况等指标进行诊断密切相关㊂而细针穿刺活检技术,由于其可以在超声引导下准确判断组织病变状况,故具有较好的临床诊断特异度,但是由于其具有有创性,且研究显示部分经该技术穿刺的患者会增加淋巴结转移㊁骨转移和肺转移等情况的发生,增加致死率[
10]
㊂因此寻找血液标志物有其重要的临床意义㊂
近年来有关甲状腺癌患者血清标志物㊁患者清除甲状腺癌术后的残余甲状腺组织(简称为清甲)效果㊁清甲治疗后对患者预后的影响等研究已取得了较大进步,如促甲状腺激素(T S H )㊁甲状腺球蛋白(T g )和甲状腺球蛋白抗体(T g A b )等已在临床广泛应用,其中T g 被美国甲状腺协会(
A T A )等推荐为临床上行甲状腺癌全切术后复发及转移的重要监测指标[
11]
㊂但由于T g 水平受到T S H 调控,同时易受患者生理状态㊁血液中其他免疫因子的影响,故在2015版A T A
指南[12]及我国关于甲状腺癌的指南[13
]中已明确术前
血清T g 水平增高不能作为诊断甲状腺癌的依据㊂但鉴于术后T g 水平升高可能提示甲状腺癌术后体内残留甲状腺组织或癌组织,且T g 的最佳区分水平仍未明确,故术后T g 水平仍不足以用于监测甲状腺癌的
预后,需辅以影像学证据[14-15
]㊂因此,有必要筛选更
为敏感的血清生物学标志物来辅助诊断和监测甲状腺癌㊂
V A P -1是一种内皮黏附分子,可促进淋巴细胞黏附于血管内皮,还可以通过调节转录因子㊁趋化因子
和其他黏附分子来调节炎症微环境[
16
]㊂在结直肠癌患者中,癌组织的V A P -1无论是在m R N A 水平还是
蛋白水平均显著降低,血清V A P -1水平也显著低于
健康对照者[
17
]㊂因此本研究分析了甲状腺癌患者血清V A P -1的水平,结果显示甲状腺癌患者血清V A P -
1水平也显著降低,术后V A P -1水平明显增高,
术前血清V A P -1水平在不同肿瘤最大径㊁肿瘤病理类型㊁T NM 分期㊁
肿瘤分化程度和有无淋巴结转移的甲状腺癌患者中差异有统计学意义(P <0.05),而不同年龄㊁性别的甲状腺癌患者术前血清V A P -1水平差异
无统计学意义(P >0.05)㊂采用R O C 曲线分析甲状
腺癌患者血清V A P -1水平对甲状腺癌的诊断价值,
结果显示血清V A P -1单项检测诊断甲状腺癌的
A U C 分别为0.883(95%C I :0.828~0.939)
㊂这说明甲状腺癌患者血清V A P -1水平可以很好地用于诊断甲状腺癌,同时也是甲状腺癌患者疾病进展的一个重要标志物㊂
V C AM -1可通过介导细胞间及细胞与间质之间的黏附从而参与细胞分化㊁炎症㊁对移植组织的反应
和肿瘤扩散等多种生物学过程[
18
]㊂前期研究表明在㊃
8172㊃检验医学与临床2023年9月第20卷第18期 L a b M e d C l i n ,S e p
t e m b e r 2023,V o l .20,N o .18Copyright ©博看网. All Rights Reserved.
甲状腺乳突状癌中V C AM-1水平升高,其水平增加可能与组织分化㊁T细胞活化和肿瘤细胞的传播密切相关,但确切作用仍不清楚[19]㊂在本研究中发现甲状腺癌患者V C AM-1水平显著高于甲状腺腺瘤患者和健康对照者㊂与术前相比,术后甲状腺癌患者V C AM-1水平显著降低㊂通过对不同病理类型的甲状腺癌进行研究,发现不同甲状腺癌类型的患者血清V C AM-1水平差异较大,未分化型甲状腺癌患者血清V C AM-1水平显著高于分化型甲状腺癌㊂此外甲状腺癌患者术前血清中V C AM-1水平在不同肿瘤最大径㊁肿瘤病理类型㊁T NM分期㊁肿瘤分化程度和有无淋巴结转移的甲状腺癌患者中差异有统计学意义(P<0.05),而不同年龄㊁性别的甲状腺癌患者术前血清V C AM-1水平差异无统计学意义(P>0.05)㊂采用R O C曲线分析血清V C AM-1对甲状腺癌的诊断价值,结果显示V C AM-1单项检测诊断甲状腺癌患者的A U C为0.698(95%C I:0.604~0.793)㊂
R O C曲线分析显示血清V A P-1和V C AM-1联合检测诊断甲状腺癌的A U C为0.904(95%C I: 0.854~0.954),大于2项指标单项检测,因此血清V A P-1和V C AM-1联合检测可用于辅助临床对甲状腺癌的早期诊断和疾病进展的判断,这样有助于临床对不良预后甲状腺癌患者早期采取必要手段进行干预治疗,进而提升患者生存率㊂
综上所述,本研究发现甲状腺癌患者血清V A P-1水平明显降低,V C AM-1水平明显升高,这2项指标的水平在不同肿瘤最大径㊁肿瘤病理类型㊁T NM分期㊁淋巴结转移和肿瘤分化程度的甲状腺癌患者中有差异㊂V A P-1和V C AM-1联合检测可以提高对甲状腺癌早期诊断的效能,有助于临床早期诊断和监测疾病进展㊂
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(收稿日期:2023-02-23修回日期:2023-07-10)
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