三七破壁饮片对人体血凝因子检测的影响研究

CJCM 中医临床研究 2018年第10卷第19期 -23-
三七破壁饮片对人体血凝因子检测的影响研究Efficacy of Sanqi Pobi Yinpian on detection of human blood clotting factor
吴燕*殷网虎孙海春陆素琴胡建慧李佳
（镇江市中医院，江苏镇江，212003）中图分类号：R284.5文献标识码：A文章编号：1674-7860（2018）19-0023-
【摘要】目的：研究三七破壁饮片对凝血和抗凝血系统的影响，对其止血及活血功能的进一步探讨，对临床保健及治疗用药给予指导。

方法：2015年9－10月期间，随机选择在我院体检者的40例健康者作为研究对象。

空腹采集枸橼酸钠抗凝血液，测定分别加入不同剂量（2mg和10mg）的三七破壁颗粒前后凝酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、抗凝血酶Ⅲ（AT III）、纤维蛋白原（FIB）、蛋白C（PC）的变化。

结果：研究显示2mg组较对照组PT略缩短，在正常范围，大剂量三七使APTT呈延长趋势，FIB缩短， ATIII活性降低，PC明显升高。

10mg组比2mg组差异更明显，差异具有统计学意义（P＜0.05）。

结论：在一定剂量内服用三七对凝血和抗凝血系统各因子影响不大，但高剂量时各因子结果变化很大，临床医师可以根据研究结果评估服用三七的风险以合理用药，以及应依据指标变化采取调控措施。

【关键词】三七破壁颗粒；凝血因子；抗凝血系统
【Abstract】Objective:To study effects of Sanqi Pobi Yinpian (三七破壁饮片) on coagulation and anticoagulation system, further discuss hemostatic and blood circulation function, and guide clinical care and medication. Methods: From September to October 2015, 40 healthy persons in our hospital as the research objects were randomly selected. Sodium citrate anticoagulation in fasting blood was collected, to test PT, APTT, ATIII, FIB and PC before and after adding different doses of the Sanqi Pobi granules (三七破壁颗粒). Results: The results showed that the PT in the 2mg group was slightly shorter than that in the control group. In normal range, large dose of Sanqi (三七) showed an extension of APTT, FIB was shortened, ATIII activity were decreased, PC were increased significantly. Those in 10mg group was more significantly than the 2mg group, with a statistical significance difference (P<0.05). Conclusion: A certain dose of Sanqi shows fewer effects on the coagulation and anticoagulation system. However, each factor were varied greatly at high dose. Clinicians may be able to assess the risk of taking Sanqi according to the results of the study, as well as regulate measures based on changes in the index.
【Keywords】The Sanqi Pobi granules; Coagulate factor; Anticoagulation system
doi:10.3969/j.issn.1674-7860.2018.19.009
三七是主要产于我国云南的传统名贵药材，人们服用三七保健、治疗的现象较普遍。

《中国医药大辞典》记载：三七功用为补血，祛瘀损，止血衄，能通能补，是方药中之最珍贵者。

生吃可祛瘀生新，消肿定痛，并有止血不留瘀血的优点；熟服可补益健体、扩张血管、抗炎镇痛等功效[1]。

目前三七常被加工成粉末，主要用于活血止血。

药理研究表明三七主要含黄酮、皂苷、氨基酸、多糖、三七素等成分[2]。

其中，三七皂苷为止血活性的主要成分，能通过内源性和外源性凝血系统的凝血因子达到止血作用，并且止血和活血双向调节。

三七能明显缩短凝血酶原时间（PT）和降低纤维蛋白原（FIB）含量[3,4]，但三七对抗凝血系统的因子影响鲜有报道。

实验选用三七破壁饮片是因为细胞壁打破后更利于人体吸收[5]，研究其对人体凝血因子检测的影响对临床凝血功能的判断具有重要意义。

根据国内外的研究作为依据，以活化部分凝血活酶时间（APTT，内源凝血系统较敏感的筛选试验）、血浆凝血酶原时间（PT，筛查外源性凝血系统常用试验）等作为判断出血倾向的指标；FIB和血栓病有关，能促使血栓形成[6] ；ATⅢ、PC系统具有多方面的抗凝血、抗血栓功能。

我们选用PT、APTT、FIB、ATⅢ、PC联合检测，选取三七破壁饮片对凝血及活血功能的影响进行探讨，对临床保健及治疗用药给予指导。

1资料与方法
1.1 一般资料
选择2015年9－10月本院健康体检者40例，（男22例，女18例），年龄20～45岁，排除肝脏、出凝血系统及血小板异常等疾病，血小板数量正常，PLT＞450或PLT＜100患者。

早晨空腹采血并在抽血前未使用任何药物，标本符合实验要求。

1.2 仪器与试剂
血小板检测使用深圳迈瑞公司五分类血球计数仪BC5300，纤维蛋白原检测用STAGO Compact全自动血凝仪检测，使用原装配套试剂及质控品，所有操作均按仪器的标准操作规程进行。

PC采用ELISA法检测，酶联免疫试剂
Clinical Journal of Chinese Medicine 2018 V ol.(10) No.19 -24-
盒购自美国进口试剂BIO TSZ，405nm读取吸光度，PC浓度与吸光度成正比。

洗板机型号为PW960，酶标仪为上海MULTISKAN FC 全自动处理酶标仪，离心机使用湘仪LC600 型台式离心机。

三七破壁颗粒购自中山市中智中药饮片有限公司，批号20160201。

1.3 方法
早晨空腹采集静脉血2ml于生化试管作肝功能检测、EDTA-K2抗凝血作血小板检测及3管1∶9抗凝血（1.8ml静脉血加入含有0.2ml枸橼酸钠抗凝管中）。

采集完血液立即向2ml枸橼酸钠抗凝血中加入三七破壁颗粒粉末，混匀后静置60min待检。

将血凝检测管3500r/min离心10min，在2h内完成各血凝项目的检测。

剩余血浆收集起来-19℃冻存以备PC的检测。

因三七破壁颗粒呈颗粒状不易溶解，试验前研磨成细粉，并称量好分装2mg和10mg各40份。

肝功能使用雅培C800全自动生化仪检测，试剂及质控均为仪器配套制品，质控品使用一个高值一个低值2个水平质控。

1.4 统计学处理
应用SPSS 18.0统计软件进行分析处理，正态分布的计量资料结果以
）表示，组间比较采用t检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2结果
40例健康者血液检测结果显示血小板（181±15）×109/L，处在正常范围内，提示排除血小板异常疾病。

肝功能指标选取了谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST），检测结果为ALT：（28±4）U/L，AST：(32±6）U/L，均在正常范围内，肝功能处在良好水平。

受检样本加入三七破壁颗粒后PT缩短、APTT延长，ATIII活性降低，FIB、P C检测结果比较，加入三七破壁颗粒后FIB值较未加入明显降低，差异具有统计学意义（P ＜0.05），PC普遍升高，且10mg组比2mg组差异更明显，差异具有统计学意义（P＜0.05）。

结果见表1、表2。

表1健康对照组和三七组凝血和抗凝血系统各指标水平比较
组别对照组三七破壁颗粒组
PT（s）12.6±1.0111.1±1.3
APTT（s）35.1±1.2241.9±1.27
ATIII（%）110.4±12.589.9±8.1
PC（μg/ml） 5.1±0.379.72±2.21
FIB（mmol/L） 2.95±0.32 2.13±0.51
P＜0.05
表2加入不同剂量三七破壁颗粒（2mg和10mg）后两组凝血和抗凝血系统各指标水平比较
三七剂量n PT（s）APTT（s）FIB（mmol/L）ATIII（μg/ml）PC（%）2mg组4012.1±1.237.6±1.27 2.63±0.1196.2±4.17.12±0.21 10mg组4010.1±1.1346.3±1.12 1.96±0.2283.6±7.213.2±0.73注：P＜0.05。

3讨论
现代药理学研究发现，三七具有多种有效的药理成分，如三七皂苷、黄酮类、三七素等[7]，对疾病的预防与治疗起到较好的疗效。

中医学专家们依据临床应用经验总结出了以下三七功效：①三七与凝血的关系密切，能显著缩短凝血的时间，对血小板有显著的抗聚集作用；②增强造血能力；③降低氧利用率；④能抗衰老、止痛及消炎、抗肿瘤的功效。

在临床治疗中，三七主要应用于与血液系统密切相关的疾病中[8]，如出血、跌打损伤等，也应用于心脑血管疾病，防治血栓性疾病。

机体的凝血系统是非常精妙的平衡系统，由凝血和抗凝两部分组成，正常生理状态下维持着动态平衡，血液在血管中维持着流动状态，而血管损伤时便快速形成凝块，当止血功能障碍时，便发生血栓栓塞或出血现象。

凝血机制表明，血液凝固是由多种凝血因子参与的复杂过程。

而抗凝血系统的因子可以调节血液凝固系统，减少纤维蛋白的形成、降低凝血因子的活化水平[9]。

三七止血活性成分较复杂，包括三七皂苷、三七素、钙离子和槲皮苷等。

研究表明三七总皂苷具有改善纤溶活性，三七抑制PT的作用，降低纤维蛋白原，抑制血小板聚集，改善血液流变学，防止血栓形成等作用[10]。

三七素、槲皮苷、Ca2＋能通过内源性和外源性凝血系统的凝血因子达到止血作用。

所以三七具有止血和活血双向调节功效。

当抗凝系统中某些因子的数量或功能发生改变的时候，就有可能导致出血或血栓形成。

本课题研究选取了健康体检人群，其肝功能正常、血小板数也在参考范围之内。

凝血系统与抗凝血系统在人体内是动态平衡的，外界作用与任何一个环节的因子均会引起止血、出血的变化。

对三七采用恒温气流下破壁，保留了活性成分，常用剂量时对人体是比较安全的，大剂量的三七主要是活血作用，可延长凝血时间，且随剂量的增大，作用增强[11]。

从表2中可以看出，加入大剂量的三七后，血浆各指标有明显的变化，比常用剂量变化幅度增大，与文献研究相符，说明常规用量比较安全。

凝血酶原时间是筛查外源性凝血系统是否正常的较敏感的和最为常用的试验。

凝血酶原时间应用于外源性凝血途径凝血因子（因子Ⅱ、因子Ⅴ、因子Ⅶ、因子Ⅹ）筛查，是判断出血倾向的重要指标，主要反映外源性凝血功能是否正常。

参考范围11～15s。

小剂量三七可缩短凝血酶原时间，达到止血的效果。

APTT是筛查内源性凝血系统（因子VIII、IX、XI、XII）是否正常的较敏感试验，测定原理：37℃条件下，以白陶土激活因子Ⅻ，以脑磷脂（部分凝血活酶）代替血小板第三因子，在Ca2＋参与下，观察血浆凝固所需的时间，即为活化部份凝血活酶时间。

本实验数据显示大剂量的三七破壁饮片可以使APTT明显延长。

FIB更是血栓病的主要基质，能增强红细胞和血小板聚集性，使血液处于高凝和高粘状态，
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促使血栓形成，用于出血性疾病和血栓性疾病的诊断。

血浆FIB升高是心脑血管疾病的重要致病因素，检测FIB的含量具有重要的意义。

三七具有降低人体凝血因子I的特殊作用。

口服生三七粉可以通过降低纤维蛋白原水平，以利于控制心、脑血管病的发生。

抗凝血酶Ⅲ是凝血酶及因子Ⅻ、XIa、IX、Xd等丝氨酸的蛋白酶抑制剂。

它与凝血酶通过精氨酸一丝氨酸肽键相结合，形成 ATⅢ凝血酶复合物而使酶灭活。

ATⅢ由肝细胞产生，是体内主要的抗凝物质，反映机体抗凝系统功能，在人体凝血和纤溶抗凝系统的平衡中起了重要的作用[12]。

三七使血浆 ATⅢ活性显著下降，主要原因可能是三七活性成分可同时激活体内、外源性凝血途径，由此产生的凝血酶使ATⅢ出现消耗性的下降。

蛋白C系统是微循环抗血栓形成的主要调节物质，活化的蛋白C具有多方面的抗凝血、抗血栓功能。

APC能刺激纤溶酶原激活物的释放，从而增强纤溶活性而增强纤维蛋白的溶解。

蛋白C系统对凝血和纤溶有重要的调节作用[13]。

通过试验我们发现三七对蛋白C具有一定的的影响，蛋白C结果明显升高。

我们选择三七破壁饮片作为研究对象，是因为植物的细胞壁被打破后易溶解，而且保留了生三七90%的活性，人体吸收好，利用率是普通三七粉的3～5倍。

本研究采用体外溶解的方法给药，按照常规口服剂量浓度计算出三七颗粒的添加量，通过全自动仪器检测用药前后各因子的变化来评估生三七对凝血因子的影响。

从表1看出，三七可明显缩短凝血酶原时间，降低ATⅢ活性，延长APTT，降低FIB含量，明显升高PC。

表2显示，大剂量的三七可延长出凝血时间，随剂量的增大，作用增强。

有论文指出，三七可显著增加血小板数量，可通过对机体新陈代谢的调控进而参与机体的凝血反应过程，如血小板释放相关的凝血因子、血小板因子Ⅲ和 Ca2+，最终达到止血的功效。

作为三七止血主要成分的三七总皂苷可调控 GATA-1 和GATA-2 蛋白的合成，进而上调分化相关蛋白的表达，促进造血细胞的增殖能力，起到补血的功效。

应用于临床治疗时应严格注意用药剂量[13,14]。

综上所述，三七具有双重作用，既能止血，又能活血，两个相互矛盾的作用在三七上却是统一的。

既可促进血细胞的合成，即中医所说的活血，又有止血的功效。

一般说，三七粉属于比较安全的中药，科学定量地吃一般不会有不良反应[15]。

应注意以下几方面：①用量：按照平均体重50～60kg，三七破壁饮片每人每天不要超过5g，一次不要超过3g；②月经期间不要用；③孕妇禁用。

虽然三七毒性较小，但其活血化瘀的功效是有目共睹的，科学合理用药是必须要做到的。

目前仍需不断深入研究三七的药理作用，为临床治疗保健用药提供坚实的理论基础。

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基金项目：
三七破壁饮片对人体血凝因子检测的影响研究，项目编号YB2015143，主管部门江苏省中医药局。

作者简介：
吴燕，通讯作者，女，副主任技师，主要从事临床医学检验血液学检验。

编辑：田杏茹编号：EA-4171013056（修回：2018-07-07）。