中华补血草盐腺细胞发育的扫描电镜观察

中华补血草盐腺细胞发育的扫描电镜观察
摘要利用扫描电镜技术观察盐腺细胞在中华补血草不同发育时期叶芽中的生长发育情况,结果表明:中华补血草盐腺细胞的发育时期远远早于气孔的发育时期。

关键词中华补血草;盐腺细胞;扫描电镜
中华补血草(Limonium sinense Kuntze)是蓝雪科补血草属植物,它之所以能在含盐量较高的环境中生长发育,是因为它的叶片上长有独特的植物微形态结构——盐腺。

该文利用扫描电镜技术观察了盐腺细胞在中华补血草不同发育时期叶芽中的生长发育情况。

1材料与方法
1.1试验材料
培育了6个月的中华补血草幼嫩的叶组织。

1.2试验方法
1.2.1盐处理。

将单株盆栽中华补血草植株第1次用100 mmol/L的NaCl溶液进行处理,第2次用200mmol/L的NaCl溶液进行处理,第3次以及以后均用300mmol/L的NaCl溶液进行处理。

1.2.2清洗。

分别取经过NaCl处理的和未经NaCl处理的植株各8株,把植株清洗干净,并将外部的大叶片去除,留下内部的6层幼叶幼芽,用刀片将其根部的外表皮切除。

1.2.3戊二醛固定。

用生理盐水将幼芽表面污物清洗干净,然后将幼芽按照幼叶的生长顺序剥离,并放入装有 2.5%戊二醛溶液(用0.1mol/L的磷酸缓冲液配制,pH值7.2～7.4)的EP管中,把EP管放入4℃冰箱中固定材料24h(中间换1次新液)。

1.2.4锇酸固定。

把EP管从冰箱中取出,将其中的戊二醛溶液倒出,然后用0.1mol/L的磷酸缓冲液清洗浸泡材料3h(中间每隔1h换1次新液);然后将磷酸缓冲液倒出,用1%锇酸固定材料1.5h;最后将锇酸倒出,用双蒸水清洗材料至无锇酸气味(约2h以上)。

1.2.5脱水。

用30%、50%、70%、85%、95%的梯度乙醇溶液对材料进行脱水处理,每个浓度处理15min,最后用无水乙醇处理2次,每次20min;脱水处理后的
材料,用醋酸异戊酯置换处理30min,然后进行常规临界点干燥。

1.2.6观察。

将处理好的材料粘于扫描样品台上,IB-5离子溅射仪中进行金属导电处理,镀铂1.5min;用日立S-570扫描电镜观察并拍照。

2结果与分析
2.1中华补血草幼叶表面盐腺细胞形态
将未经NaCl处理和经过NaCl处理的中华补血草盐腺细胞的扫描电镜照片(图1)进行对照。

对不同放大倍率的照片进行比例换算,得到不同处理下等面积叶片表面的盐腺数量。

分析数据可以看出,经过盐处理的中华补血草幼叶中的盐腺细胞的数目比未经盐处理的中华补血草幼叶中的盐腺细胞数目要多。

2.2中华补血草盐腺细胞发育和气孔发育的比较
在观察的过程中发现,在中华补血草肉眼可见的第1枚幼叶上,只有盐腺细胞的分化,而没有气孔的分化;在第4枚幼叶上,当有大量的盐腺时,才开始出现气孔的分化,而在第1,2,3枚幼叶上,没有气孔的分化。

3讨论
通过对2组补血草盐腺细胞发育的扫描电镜照片观察,可以看出:①未经盐处理的幼叶表面是光滑的,而经过盐处理的幼叶的表面有类似分泌物的物质出现,说明经过盐处理的中华补血草的盐腺细胞能够分泌一些不知名的、不能被戊二醛溶解的物质。

②经过盐处理的中华补血草盐腺细胞的数目比未经盐处理的盐腺细胞要多,说明盐处理对中华补血草盐腺细胞的发育有诱导作用。

③盐腺细胞出现在最内层的幼叶中,而气孔却在第4层幼叶中才出现,说明盐腺细胞要比气孔的发育早得多。

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