止血血栓系统新标志物-

用同一批号试剂 每天测定2 个不 同浓度质控品， 连续测定20 次 ，计算均值、 SD 和CV
携带污染率
取高值临床样本一份，连续测定3 次；再取低值临床样本 一份，连续测定3 次。将测定结果分别记为H1、H2、H3 和L1、L2、L3，按公式CR=(L1-L3)/(H3-L3)×100% 计算。
稳定性试验
不精密度
取高中低3个不同 浓度的临床样本 ，每个样本连续 测定20次，计算 算术平均值、标 准差（SD）和变 异系数（CV）
用同一批号试剂 每天测定2 个不 同浓度质控品， 连续测定20 次， 计算均值、SD 和CV
不精密度
取高中低3个不同 浓度的临床样本 ，每个样本连续 测定20次，计算 算术平均值、标 准差（SD）和变 异系数（CV）
血管内皮细胞
受损
组织纤溶酶原激活物
纤溶酶原激活物抑制剂-1
（t-PA）
tPAI・C
（PAI-1）
纤溶酶原 （PLG）
纤溶酶
纤维蛋白原 纤维蛋白
PIC α2-纤溶酶抑制剂 （α2-PI）
FDP和D-二聚体
c
血栓调节蛋白(TM)
TM与凝血酶结合，抑制凝血酶活性，发挥抗凝血作用 TM升高，提示血管内皮细胞损伤 TM通过肾脏代谢，肾功能损害时TM也升高
枸橼酸抗凝的血浆(正常值、高值)分别于室 温、冷藏（4℃）、冷冻（-20℃以下）的 环境下，放置0、1、 3、5、7天测定，确 认标本的保存稳定性。
线 性 验 证
方法：取高浓度混合血浆(H) 、HISCL标本稀释液 (D)各一份，按5H、4H+D、3H+2D、2H+3D、 H+4D、5D配成6个浓度梯度的混合血浆，按浓度 从低到高各测定2次。
凝血酶
蛋白C
凝血酶
TM
血管内皮细胞 受损
活化蛋白C
蛋白 S
FV, FVIII 失活
c
TAT和PIC预示血栓形成风险
12例因房颤接受经食管心脏电复律的患者分别在复律前、后3天和7天检 测血浆中血小板活化标志物（PF4，β-TG）、血栓标志物（TAT、F1+2 、D二聚体）和纤溶标志物（D二聚体、PIC） 复律后血浆血小板活化标志物没有变化，但是复律后7天，与凝血和纤溶 相关的标志物（TAT、PIC、D-dimer）升高。 提示房颤患者进行心脏电复律后具有潜在血栓栓塞风险，有必要早期采取 预防血栓形成措施
Circ J 2004，68：1041-1044
c
TAT，PAI-1和PC活性可识别早期DIC
14个止血血栓标志物用于监测败血症 是否合并DIC TAT，PAI-1，PC活性是早期发现 DIC的最佳组合项目
c
对DIC治疗患者 TAT和PAI-1同时降低，28天生存 率明显高于TAT和PAI-1同时升高 者
-1 复合物)
• 血管系统标志物
• TM • t-PAI・C
c
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凝血酶-抗凝血酶复合物（TAT）
凝血酶抗凝血酶按1︰1比例结合形成的复合物 TAT升高，提示凝血酶生成增多，用于评估凝血激活状态
x
Xa
Va 凝血酶原
F1+2
PL, Ca2+
凝血酶
抗凝血酶（AT）
TAT
纤维蛋白原
Critical Care，2014，18R13
PIC与DIC基础疾病
DIC基础疾病不同，纤溶激活程度也不同
急性早幼粒 细胞白血病
n=22
急性 白血病
n=30
c
实体瘤
n=23
败血症
n=40
J Intensive Care ,2014,2:20
DIC分型
凝血激活见于DIC各型，纤溶亢进在DIC各型中不同 c
纤溶激活？
BT VWF 血小板 PT APTT TT 凝血因子 AT-III PC PS Fbg D-Dimer FDP ……
止血和血栓状态失衡易导致出血性或血栓性疾病
c
新指标
• 凝血系统标志物
• TAT(凝血酶-抗凝血酶复合物) • TM(血栓调节蛋白)
• 纤溶系统标志物
• PIC(纤溶酶-α2PI 复合物) • t-PAI・C(组织纤溶酶原激活物/纤溶酶原激活物抑制剂
纤维蛋白
可溶性纤维蛋白
①
纤维蛋白肽 纤维蛋白单体复合物
（FpA）
（FMC）
c
纤溶酶-α2PI 复合物 (PIC)
PIC 纤溶酶和α2-纤溶酶抑制剂按1︰1 的比例结合形成的复合物 PIC升高，提示纤溶酶生成增多 PIC特异地反映评估纤溶激活状态
FDP和D-二聚体 凝血激活，血栓形成，进而血栓发生溶解 凝血和纤溶二者激活的指标
止血血栓系统新标志物 TAT/PIC/tPAIC/TM
崔巍 中国医学科学院 北京协和医院
c
止血与血栓平衡
血管内皮损伤？ 凝血激活？
BT
VWF PLT PLT聚集试验
血管 血管内皮
血小板
血液凝固 抗凝血
纤溶 抗纤溶
PT APTT TT 凝血因子 AT-III PC PS Fbg D-Dimer FDP
组织纤溶酶原激活物（t-PA）
纤溶酶原(PLG)
纤溶酶 PIC α2-纤溶酶抑制剂(α2-PI)
纤维蛋白原 纤维蛋白
FDP和D-二聚体
c
组织纤溶酶原激活物/纤溶酶原激活物抑制剂-1 复合物 (t-PAI・C)
血管内皮细胞释放的t-PA与生理性抑制因子PAI-1:1结合而形成 tPAI・C升高，提示血中t-PA浓度增加，用于评估血管内皮细胞受损 tPAI・C是纤溶系统标志物，但其升高不意味着纤溶亢进,也见于纤溶受抑
ELISA
• 手工操作，误差大 • 检测时间长 • 灵敏度/பைடு நூலகம்异度不理想 • 没有被普及推广
高敏化学发光
• 自动化检测，速度快 • 检测精密度高 • 检测灵敏度提高
c
实验评估
依据
31 美国临床实验室标准化协会（CLSI）EP5-A2 2 CLSI EP6-A 3 临床血液学检验常规项目分析质量要求 WS/T 406-2012
J Intensive Care ,2014,2:20
tPAI-C与深静脉血栓（VTE）
102例VTE患者和113健康人群 与健康对照组相比， VTE组的PAI-1和tPAI-C均升高，其中， tPAI-C升高超过2倍
Thrombosis Research ,2014,134:1092
c
TAT/PIC/tPAIC/TM检测现状及临床研究
统计：按照CLSI EP6-A 文件提供的方案初步检查 数据，检查离群值，判断重复性。其预期浓度按照 公式: x =CH×VH/( VL+VD)计算，对检测结果及 预期浓度进行线性回归分析。