高效液相色谱法同时测定三氯异氰脲酸_粉_中三聚氰酸和三聚氰胺的含量

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超高效液相色谱法测定动物源性食品中的三聚氰胺

含量虚假增高。动物饲料中添加三聚氰胺将直接导致某些动物体内三聚氰胺的积累及动物源性食品中三聚氰胺的残留。
目前国内外关于三聚氰胺的检测方法主要有液相色谱 - 紫外法、液相色谱 - 二极管阵列法、液质联用法、气质联用法和气相色谱法等[3-6]。检测的对象主要为饲料、
收稿日期：2009-06-05 作者简介：连庚寅(1962 －)，男，工程师，学士，研究方向为食品安全。E-mail：lgyciq@ * 通讯作者：林勤保(1968 －)，男，副教授，博士，研究方向为食品分析化学。E-mail：qblin@
2. Institute of Applied Chemistry, Shanxi University, Taiyuan 030006, China)
Abstract ：A method for the determination of melamine in animal-derived foods by ultra performance liquid chromatography (UPLC) was established. Egg samples were extracted with a mixture of 1% trichloroacetic acid and acetonitrile (3:1, V/V) and cleaned
UG80 column for the chromatographic separation. The detection was performed at UV wavelength of 236 nm. For the analysis
using CR column, the calibration curve was linear in the range of 1.00－5.00 mg/L. The average recoveries of melamine in eggs spiked at three levels (1.00, 2.00 and 5.00 mg/kg) were 89.24% － 91.06%, with a relative standard deviation less than 6.00%. For the

固相萃取一高效液相色谱法测定液态奶中三聚氰胺含量

固相萃取一高效液相色谱法测定液态奶中三聚氰胺含量作者：丁苏会刁玉华来源：《中国食品》2019年第02期摘要：经过三氯乙酸、乙腈超声震荡离心提取，混合型阳离子交换固相萃取柱净化后的样品采用HPLC法测定。

色谱条件：AgilentEclipseXDB-C8柱（4.6x250mm），流动相为乙腈一离子对缓冲液（pH=3.0），体积比]6：84，流速为1.OmL/min;检测波长为240nm;柱温40℃;进样量为20μL。

本法相对标准偏差为0.34%，最低检出限为0.05 μ9/rnL，回收率为90%-]05%。

本法操作简便，样品出峰快，经济省时，准确可靠，适用于液态奶中三聚氰胺的含量测定。

关键词：高效液相色谱法;液态奶;三聚氰胺一、实验仪器与试剂仪器。

安捷伦Agilent1260高效液相色谱仪;电子天平;固相萃取柱;pH计;数控超声波萃取器;可控温震荡箱;离心机（转速不低于4000r/min）;漩涡混合器;电热恒温水浴锅;超纯水器。

试剂。

甲醇（色谱纯）、乙腈（色谱纯）以及辛烷磺酸钠（色谱纯25g/瓶）;三氯乙酸（1%）;氨水：含量为25% - 28%;甲醇水溶液：甲醇+水（v/v体积比）=50+50;氨化甲醇溶液（5%）：氨水+甲醇（v/v体积比）-5+95;离子对缓冲液：准确称取2.lOg柠檬酸和2.16g辛烷磺酸钠，加入980mL水溶解，调节pH至3.0，定容到IL备用。

二、样品处理提取。

称取2.Og（精确至O.Olg）试样于50mL具塞塑料离心管中，加入15mL三氯乙酸溶液和SmL乙腈，超声提取20min，再震荡提取lOmin，以6000r/min离心20min。

上清液经三氯乙酸溶液润湿的滤纸过滤后，用三氯乙酸溶液定容至25mL，移取5mL滤液，用超纯水定容至lOmL容量瓶中混匀做待净化液。

净化。

将待净化液转移至已活化的固相萃取柱中，依次用3mL水和3mL甲醇洗涤，抽至近干，用6mL氨化甲醇溶液洗脱。

高效液相色谱法测定牛肉中三聚氰胺的残留量

胺标准品于１ｍＬ容量瓶中，甲醇溶解并定容至０用
生产三聚氰胺一甲醛树脂（）同时广泛用于木ＭＦ，材、塑料、涂料、造纸、纺织、革、皮电气等行业。但有些不法商家通过向饲料原料中添加三聚氰胺来提高其产品的含氮量，取不法利润，国Ｆ谋美ＤＡ先后从我国进口的小麦蛋白粉中检出三聚氰胺，要求我并国对此事件进行调查，质检总局迅速做出反应，求要对列入法检目录的出口植物源性蛋白及其辅料进行
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分析仪器
２１年第６０１．期
高效液相色谱法测定牛肉中三聚氰胺的残留量
林玲杨春亮刘丽丽
（国热带农业科学院农产品加工研究所，江，５４０）中湛２０１
摘
要
建立了一种测定牛肉中三聚氰胺的残留量的高效液相色谱法。样品中加入三氯乙酸作为提取溶剂，
ｍｉ；ｎ进样量２￣波长：４ｎＯｔＬ；２０ｍ。
１３实验方法．
１３１提取．．
称取２０搅碎的样品于５ｍＬ离心管中，．０加入
５ｍＬ三氯乙酸溶液，涡旋混匀ｌｎ再加入５ｍｉ，ｍＬ乙酸铅溶液，涡旋混匀ｌｎ，Ｏ０／ｎ离心ｌｍｉ，ｍｉｌ０ｒｍｉＯｎ取全部上清液待净化。
检测。２００７年３月中旬，美国发生４０在００多起猫、

高效液相色谱HPLC法测定三聚氰胺成分含量

高效液相色谱法测定奶制品中三聚氰胺1引用标准按照国家标准GB/T 22388-2008，三聚氰胺简称三胺，是一种重要的氮杂环有机化工原料。

因三聚氰胺分子中含有大量氮元素，一些不法厂商通过添加这种化工原料，提高产品中蛋白质含量。

2方法原理：采用HPLC法测定三聚氰胺，成本低，不需要衍生，简便易行。

采用外标法进行定量分析。

本方法采用南京科捷LC-600二元高压梯度，按照国家标准GB/T 22388-2008对牛奶中三聚氰胺进行检测。

该方法稳定可靠，检测范围广泛。

3. 仪器和试剂LC-600二元高压梯度系统：输液泵，配梯度单元和在线脱气装置；LC-600紫外检测器；手动进样器7725i，色谱工作站N2000P,离心机1台（转头6*50ml）；固相萃取小柱和萃取装置；氮吹仪；三聚氰胺对照品购自sigma公司，样品液态奶购买于超市，实验中用到的其他试剂如三氯乙酸、氢氧化钠、柠檬酸和辛烷磺酸钠均为分析级。

4. 色谱条件色谱柱：V enusil ASB-C18 4.6×250mm （也可选用C8柱）缓冲液：10mM柠檬酸, 10mM辛烷磺酸钠流动相：缓冲溶液:乙腈=90：10进样量：20uL流速：1.0mL/min柱温：40℃5. 样品制备按照GB/T 22388-2008中3.4节进行：称取2g（精确到0.01g）试样（液态纯牛奶）于50mL 具塞塑料离心管中，加入15ml 1%三氯乙酸提取液和5mL乙腈，充分混匀，超声提取20min，再振荡提取10min后，以4000r/min离心10min。

上清液经三氯乙酸溶液润湿的滤纸过滤后，用三氯乙酸溶液定容至25mL，移取5mL滤液，过混合型阳离子固相萃取小柱(PCX)。

洗脱液于50℃下氮气吹干，残留物用20%甲醇的水溶液定容至1mL。

6. 定性分析称取三聚氰胺标准品适量，流动相溶解，按照上述色谱条件，进入色谱仪分析。

保留时间分别为4.75min。

7. 样品测试按照上述样品处理方法和色谱条件，对样品进行测定，得到色谱图如图1所示。

高效液相色谱法同时测定三氯异氰脲酸_粉_中三聚氰酸和三聚氰胺的含量

在 1. 2项的色谱条件下, 比较乙腈 - 10 mmo l /L 乙酸铵水溶液的体积比分别为 80 20、85 15、90 10 和 95 5时, 三聚氰酸和三聚氰胺的分离情况, 结果见表 1。
通过表 1 的数据比较得知, 当乙腈和 10 mmo l /L乙酸铵水溶液体积比为 90 10时, 三聚氰酸和三聚氰胺的分离情况良好, 且二者的保留时间更符合实验要求, 因此实验选用乙腈 - 10 mm ol /L 乙
10. 03 4. 66 6. 17 11. 34 108. 27
2. 8 供试品含量测定
精密吸取供试品溶液 10 L, 注入高效液相色谱仪, 按照 1. 2色谱条件进行测定, 按外标法以峰面
积计算含量, 结果见表 4。
表 4 供试品含量测定结果 ( n = 4 )
%
供试品
三氯异氰尿酸粉三氯异氰尿酸
表 3 三聚氰酸加标回收试验结果
添加水取样量 / 本底值 / 添加量 / 测得值 / 回收率 / 平均回收
平 /%
mg
mg
mg
mg
%
率 /%
8. 83 4. 10 4. 41 9. 06 112. 47
80
10. 45 4. 85 4. 06 9. 65 118. 23 117. 41
9. 80 4. 55 4. 04 9. 46 121. 53
17. 36
2. 4 检测器的选择
由于三聚氰酸的紫外吸收较弱且吸收位于末
端, 所以选择检测器时, 以三聚氰酸溶液为研究对象。在 1. 2色谱条件下, 通过对检出限 ( S /N = 3) 和
重复性的考察, 比较了蒸发光散射检测器和紫外检

固相萃取一高效液相色谱法测定液态奶中三聚氰胺含量

固相萃取一高效液相色谱法测定液态奶中三聚氰胺含量一、引言三聚氰胺是一种有机化合物，化学式为C3H6N6，是一种白色结晶性固体，可溶于水和乙醇，主要用作工业生产中的原料，如氰酸酯树脂、氰酸脂和脲醛树脂等。

但由于其高氮含量，三聚氰胺还可以在一定条件下成为一种良好的氮肥料。

三聚氰胺在奶制品中的使用引起了广泛的争议。

2008年，中国发生了因三聚氰胺被加入奶粉中而导致大量儿童发生尿路结石的事件，震惊了全国。

由于三聚氰胺过量摄入会对人体肾脏造成严重危害，因此对奶制品中三聚氰胺的含量进行准确检测和控制成为了至关重要的工作。

二、实验目的本实验旨在利用固相萃取-高效液相色谱法对液态奶中三聚氰胺进行含量测定，以确保奶制品中三聚氰胺的安全性。

三、实验原理固相萃取技术是一种分离和富集化合物的方法，其原理是利用吸附剂（固相萃取柱）对样品中的目标化合物进行富集，并通过一系列的洗脱步骤将目标化合物从吸附剂上洗脱出来。

在本实验中，我们将使用固相萃取技术将液态奶中的三聚氰胺富集到吸附剂上，并进行洗脱处理以得到纯化的三聚氰胺化合物。

高效液相色谱法是一种分离和定性化合物的方法，其原理是利用固定在色谱柱上的填料对化合物进行分离，通过流动相的作用使化合物在填料中进行逐步分离，并通过检测器对分离后的化合物进行检测和定量。

在本实验中，我们将使用高效液相色谱法对洗脱后的三聚氰胺进行检测和定量分析。

四、实验步骤1. 样品准备：将液态奶样品装入适当的容器中，以备后续的固相萃取处理。

2. 固相萃取：将样品经过预处理后注入固相萃取柱中，利用固相萃取柱对三聚氰胺进行富集。

3. 洗脱处理：使用洗脱液将固相萃取柱中富集的三聚氰胺进行洗脱处理，得到纯化的三聚氰胺化合物。

4. 高效液相色谱分析：将洗脱后的三聚氰胺样品注入高效液相色谱仪中，利用色谱仪对三聚氰胺进行检测和定量分析。

5. 数据处理：根据高效液相色谱仪得到的检测结果，计算出液态奶中三聚氰胺的含量。

五、实验结果根据实验数据分析，我们得到了液态奶中三聚氰胺的含量为x mg/L。

高效液相色谱法测定乳制品中的三聚氰胺

2010级化学教育仪器化学综合性与设计性实验—高效液相色谱法测定乳制品中三聚氰胺的含量——2012-06-03一、实验题目：乳制品中三聚氰胺的含量的测定（高效液相色谱法）二、摘要、关键词：[摘要]三聚氰胺是一种三嗪类含氮杂环有机化合物,被用作化工原料。

它是白色单斜晶体,为建立乳制品中三聚氰胺含量的高效液相色谱测定方法, 通过超声提取,离心, 结合高效液相色谱进行样品测定。

A液：0.9508 g辛烷磺酸钠（5mmol/L）+ 1.0640 g柠檬酸（pH=3-4）用高纯水品配制1L溶液；B液：甲醇；色谱条件：30%B+70%A。

色谱柱：CNWSIL C18液相色谱柱（4.6×250mm，5 µm）,检测波长：240nm。

[关键词] 高效液相色谱; 三聚氰胺; 乳制品三、引言1、对三聚氰胺的概述：三聚氰胺(Melamine) (化学式:C3H6N6 ) ,俗称密胺、蛋白精,国际纯粹与应用化学联合会命名为「1 ,3 ,5 - 三嗪- 2 ,4 ,6 - 三氨基」,是一种三嗪类含氮杂环有机化合物,被用作化工原料。

它是白色单斜晶体,几乎无味,微溶于水(311g/PL常温) ,可溶于甲醇、甲醛、乙酸、热乙二醇、甘油、吡啶等,对身体有害,不可用于食品加工或食品添加物。

三聚氰胺的结构式如下：三聚氰胺最主要的用途是作为生产三聚氰胺甲醛树脂(MF) 的原料。

三聚氰胺还可以作阻燃剂、减水剂、甲醛清洁剂等。

该树脂硬度比脲醛树脂高, 不易燃,耐水、耐热、耐老化、耐电弧、耐化学腐蚀,有良好的绝缘性能、光泽度和机械强度,广泛运用于木材、塑料、涂料、造纸、纺织、皮革、电气、医药等行业。

蛋白质主要由氨基酸组成。

蛋白质平均含氮量为16 %左右,而三聚氰胺的含氮量为66 %左右。

通用的蛋白质测试方法“凯氏定氮法”是通过检测含氮量来估算蛋白质含量,因此,添加三聚氰胺会使得食品的蛋白质测试含量偏高,从而使劣质食品通过食品检验机构的测试。

高效液相色谱电喷雾串联质谱联用测定植物源性蛋白中三聚

高效液相色谱－电喷雾串联质谱联用测定植物源性蛋白中三聚氰胺残留丁涛 1，李建忠 2，徐锦忠 1，沈崇钰 1，吴斌 1，陈惠兰 1，李淑娟 2，刘飞 3（1. 江苏出入境检验检疫局动植物与食品检测中心，南京，210001；2.中国检验检疫科学研究院，北京，100025；3. 赛默飞世尔科技（上海）有限公司）摘要：研究报导了高效液相色谱－电喷雾串联质谱联用（HPLC/MS/MS）测定植物源性蛋白中三聚氰胺残留的方法。

三氯乙酸溶液沉淀样品中的蛋白，同时提取目标分析物，强阳离子固相萃取柱进一步富集净化后，利用电喷雾串联质谱进行检测。

检测低限为0.5 μg/kg，添加回收率84 ～ 98％之间（基质匹配曲线校正），相对标准偏差（RSD）在1.8 ％～ 7.4 ％。

2007年3月中旬以来，美国发生多起宠物猫、狗中毒死亡事件。

美国食品药品管理局(FDA)从江苏和山东两家公司出口美国的部分小麦蛋白粉和大米蛋白粉中检出三聚氰胺成分，并初步认定为宠物食品中含有的大量三聚氰胺是导致猫、狗中毒死亡的原因。

三聚氰胺(melamine)简称三胺(结构式见图一)，是一种重要的氮杂环有机化工原料。

这种化学品常被用于生产塑料、胶水和阻燃剂，在部分亚洲国家，它也被用以制造化肥。

同时三聚氰胺也是一种名为灭蝇胺的农药的代谢产物[1]。

三聚氰胺是一种禁止用于宠物食品及动物饲料的化学物质，为提高宠物饲料中蛋白质测定含量而加入大量三聚氰胺后，动物食用可发生肾衰竭并导致死亡[1]。

目前测定三聚氰胺的检测方法包括气相色谱法[2]、气质联用法[3-4]、液相色谱－紫外或二极管阵列和串联质谱检测方法[5-8]。

气质联用方法需要衍生化，过程比较繁琐。

液相色谱配合紫外或二极管阵列由于其无需衍生化是目前最为常用的检测方法。

高效液相色谱串联质谱方法灵敏度高、抗干扰能力高，在部分实验室做为确证方法使用。

由于三聚氰胺一直作为灭蝇胺的代谢产物来测定，因此测定基质以农作物为主，国内外还没有关于植物源性蛋白中三聚氰胺的检测方法。

高效液相色谱法测定蛋白粉中的三聚氰胺

高效液相色谱法测定蛋白粉中的三聚氰胺摘要:蛋白粉经萃取,过PCX柱提纯后,采用Symmetry-C18柱,以庚烷磺酸钠缓冲溶液-甲醇(95∶5,V/V)为流动相,流速 1.0 mL/min,测定蛋白粉中三聚氰胺的含量｡该方法在1~100.0 mg/L范围内,相对标准偏差小于0.04%,标准曲线呈良好的线性关系(R2=0.999 1),最低检出限为1.0 mg/L,样品加标回收率为98.7%~104.0%,相对标准偏差小于0.4%,该方法能快速有效地测定蛋白粉中三聚氰胺的含量｡关键词:三聚氰胺;阳离子交换柱;蛋白粉Determination of Melamine in Protein Powder with HPLCAbstract: A HPLC method for the determination of melamine in protein powder was developed. Melamine in sample was extracted and purified by PCX column, then separated in Symmetry-C18 column with a mobile phase consisting of sodium heptanesulfonate and methanol(95:5,V/V) at 1.0 mL/min. The method showed a good linear relationship (r=0.999 1) for melamine of 1~100.0 mg/L with relative standard deviation was less than 0.4%, the detection limit was 1.0 mg/L, the recoveries ranged from 98.7% to 104% with relative standard deviations less than 0.04%. The method was a fast and accurate one for detecting melamine in protein powder.Key words: melamine; PCX column; protein powder德国化学家李比希在1834年最早合成了三聚氰胺｡该化合物作为一种重要的氮杂环有机化工原料,主要用于生产三聚氰胺-甲醛树脂,广泛用于木材加工､塑料､涂料､造纸､纺织､皮革､电气､医药等行业｡由于三聚氰胺每分子中的氮元素比例较大,测定掺假饲料和食品中的蛋白质含量时,常规定氮方法(如凯氏定氮法)会将三聚氰胺中的氮误判为蛋白质中的氮,使得蛋白质结果偏高｡因此少数不法商贩将其添加到饲料和食品中,冒充蛋白质,导致了动物体内､动物产品及食品中三聚氰胺的残留问题,危害动物及人体健康｡例如2007年“宠物饲料事件”和2008年“三鹿奶粉事件”,都极大损害了消费者利益和我国饲料工业以及奶业的国际声誉｡本实验通过高效液相色谱对蛋白粉中三聚氰胺进行测定,可为三聚氰胺的快速分析提供实验依据｡1材料与方法1.1仪器Waters高效液相色谱仪,Waters 1525泵,Waters 2487双通道紫外检测器,Breeze 色谱系统管理工作站,色谱柱:Symmetry-C18柱(5 μm,10 cm×4.6 mm),阳离子交换小柱(PCX)｡1.2试剂三聚氰胺:分析纯,纯度不低于99.5%;三聚氰胺标准溶液:精密称取三聚氰胺10.0 mg,以流动相定容至10 mL,作为标准液;乙醇､甲酸为分析纯;0.01 mol/L庚烷磺酸钠溶液,用柠檬酸调节pH值为3.3;乙腈:色谱纯;实验用水为去离子水｡1.3仪器测定条件检测波长设为240 nm;流动相为庚烷磺酸钠缓冲溶液-甲醇(95∶5,V/V);流速设为1.0 mL/min;进样量为20 μL｡1.4线性关系用20%(V/V)甲醇-水溶液将三聚氰胺标准液稀释成1､5､10､25､50及100 mg/L 系列标准工作液,过0.45 μm滤膜过滤后,进色谱系统分析｡以标准工作液浓度及其峰面积做线性回归分析,得标准工作曲线及线性方程｡1.5样品处理1.5.1样品的提取准确称取5 g左右蛋白粉(精确至0.000 1 g)至具塞锥形瓶中,加入1%(V/V)三氯乙酸20 mL,超声波振荡提取20 min,取部分溶液转移至10 mL 离心管中,7 500 rpm/min离心10 min,取上清液3 mL过混合型阳离子交换小柱(PCX)｡1.5.2样品净化(PCX小柱,60 mg/3 mL)①活化及平衡:3 mL甲醇,3 mL水;②上样:加入提取液3p2.2线性范围及检出限将不同浓度三聚氰胺标准液做液相色谱分析,以质量浓度和峰面积作线性回归,得线性方程为y=2.529 2x+3.655 7,相关系数为R2=0.999 1,在1~100 mg/L范围内线性较好｡将标准样品稀释进样,以被测组分峰高为基线噪音的3倍浓度为最低检出浓度,本方法三聚氰胺的最低检出限为1 mg/L｡2.3精密度试验在选定的色谱条件下,将浓度为10 mg/L的标准样品连续进样5次,按1.3中色谱条件要求进行检测,保留时间和峰面积的RSD值分别为0.08%和3.96%(n=5)｡结果见表2｡2.4加标回收试验取蛋白样品,分别添加3个水平的标准样,按照处理方法进行提取分离后,测定三聚氰胺的含量,平行测5次,计算其加标回收率｡结果见表3｡2.5样品测定本实验条件下,三聚氰胺标准品色谱图如图1所示,经提取和净化后的蛋白粉样品色谱图如图2所示｡由图可知,在被检样品中未检测出三聚氰胺｡3结论本研究采用庚烷磺酸钠-柠檬酸溶液作为流动相,能有效分离蛋白粉中的三聚氰胺;采用阳离子交换柱可有效降低样品杂质的干扰,提高了检测灵敏度｡本法可用于对蛋白粉中三聚氰胺的分析检测,其结果稳定可靠,能有效保证蛋白粉制品的质量安全｡参考文献:[1] 黄芳,黄晓兰,崔永立,等.高效液相色谱-质谱法对饲料及食品添加剂中三聚氰胺的测定[J]. 分析测试学报,2008,3(37):313-315.[2] 王浩,刘艳琴,曹红,等. 固相萃取与高效液相色谱联用测定宠物食品中三聚氰胺[J]. 分析化学,2008,2(36):273.[3] 何强,孔祥虹,李建华,等.离子交换色谱-紫外检测法测定乳制品中三聚氰胺[J].中国乳品工业,2008,6(36):55-57.[4] 杨云霞,刘彤,周桂英,等.小麦元粉中三聚氰胺的高效液相色谱法测定[J].分析测试学报,2008,3(27):322-324.[5] ANDERSEN W C,TURNIPSEED S B,KARBIWNYK C M,et al. Determination of Melamine Residues in Catfish Tissue by Triple Quadrupole LC-MS-MS with HILIC Chromatography[J]. Laboratory Information Bulletin,2007,23:4396.[6] HAMILTON D W,O’NEAL P A. Analytical methods for the quantification of free melamine and cyanuric acid in Nylon 6/6,6 copolymer[J]. J. Sep. Sci, 2003,26,510-514.[7] SANCHO J V, IBANEZ M. Residue-determination of cyromazine and its metabolite melamine in chard samples by ion-pair liquid chromatography coupled to electrospray tandem mass spectrometry[J]. Analytica Chimica Acta,2005,530(2):237-243.。

高效液相色谱法测定饲料中三聚氰胺

ＡｂｔａｔＡｈｇｅｆｒｎｅｌｕｄｃｒｍｔｇａｈｓｍｅｏａｅｅｐｄｆｒｔｅｄｔｒｎｔｎｏｌｍｎｏｔｎｎｆｅ，ｓｇＷａｅｓｒｃｉｐｒｍａｃｉｉｈｏａｏｒｐｉｈｏｑｔｄｗｓｄｖｌｅｅｅｍｉａｉｆｍｅａｉｅｃｎｅｔｉｅｄｕｉｔｒｈｏｏｈｏｎｓ
Ｘｅｒｃｌｎ４６ｍｔａｏｍ（．ｍ×１０ｍ５ｔ），ｅｎｒｅａｄ１ｎｏＬＳｄｕ一Ｏｔｅｌｎｔ—ｃｒｃｏｔｎ（０９，Ｖ）ｗｒｒｕ５ｍ，ｎａｔｉｉ０ｒｎｌｏｉ１ｃｓｆａａｏｔｌｎｒ／ｍｎａｕｏｅｉｉａｉＳｌｉ１：０Ｖ：ｔｃｄｕｏｅｅ
ｕｅｒｈｓｍｅｏ．ＴｅｒｓｌｓｏｅａｓｎａｅＷａｔ４ｍ．１ｅｒｔｎｏｉａｂｕ．３ｍｉ１ｅｓｄｒｕｖａｅｓｄｆｉｏｔｔｄｈｈｅｕｔｈｗｔｔｅｔｇｗｖｓａ０ｎｄｈｔｉ２１ｅｅｆｎｔｈｉｍｅＷａｏｔ２ｎ．１ｔａｄｃｒｅｗｂ．ｓ６ｈａｎｓ
ｔｅｎ１０ｔ／Ｌａｄ０ｔ／ＬＲ＝．９６．ｎｅｒｃｖｒｓａｔｅｒｆａｏｖｌ２，０１０ｍ／ｇｗｒ９％一９％ｗｔｗｅ．ｃｍｎｃｍ（２０９９）Ａｄｔｏｅｅｔｈｅｆｔｃｔｎｌｅ（０５，０ｇｋｅ０，５，９ｈｅｉｒｏｉｉｅｓｉｅ５ｉｈ
ｍ／Ｌ用甲醇配置，￣保存；准中间液用２％甲ｇｍ）４Ｃ标０

高效液相色谱法快速检测酸奶及蛋白饮料中三聚氰胺

高效液相色谱法快速检测酸奶及蛋白饮料中三聚氰胺作者：肖淑贞来源：《中小企业管理与科技·下旬刊》2012年第01期摘要：三聚氰胺是非常亲水的小分子，在常规的反相色谱中不保留，因此不能与其他物质进行分离。

本方法的原理是试样中三聚氰胺经水和乙腈提取后，用高效液相色谱测定，外标峰面积法定量。

标准工作曲线相关系数为R=0.99998。

精密度试验RSD为0.3%，样品的加标回收率在98.37～99.75%之间。

酸奶及蛋白饮料中三聚氰胺快速检测方法灵敏度及准确度符合要求。

关键词：三聚氰胺高效液相色谱法快速酸奶蛋白饮料蛋白质主要由氨基酸组成，其含氮量一般不超过30%，而三聚氰胺的分子式含氮量为66％左右。

通用的蛋白质测试方法“凯氏定氮法”是通过测出含氮量来估算蛋白质含量，因此，添加三聚氰胺会使得食品的蛋白质测试含量偏高，从而使劣质食品通过食品检验机构的测试，终于爆发了三鹿奶粉事件。

三聚氰胺简称三胺，学名三氨三嗪，别名蜜胺、氰尿酰胺、三聚酰胺，分子式C3N6H6、其结构式①分子量126.12，为纯白色单斜晶体，比重1.573(14℃)，熔点354℃，300℃升华，显弱碱性，能溶于甲醛、乙酸、热乙二醇、甘吡啶，微溶于水(3.1g/L，常温)及醇，不溶于醚、苯和四氯化碳，能够与各种酸反应生成三聚氰胺盐。

在强酸或强碱液中，三聚氰胺发生水解，氨基逐步被羟基取代，生成三聚氰酸二酰胺、三聚氰酸一酰胺和三聚氰酸。

三聚氰胺是非常亲水的小分子，在常规的反相色谱中不保留，因此不能与其他物质进行分离。

一般情况下，对于亲水性的化合物可以在溶剂中加入离子对试剂，使样品在反相柱上保留，与其他杂质进行分离。

在对三聚氰胺的检测中，加入的是辛烷磺酸钠(sodium octane sulfonate)。

但是国标方法检测需4个小时，这对于企业来说有一定的局限性，尤其是乳品企业。

现在介绍一种利用高效液相色谱法检测原料乳中的三聚氰胺的快速方法，本方法的定量限为2mg/kg。

高效液相色谱法测定水产品中三聚氰胺的含量

A b s tra c t: The a na ly tic a l m e thod of m e lam ine in fis he ry p rod uc ts b y ion - p a ir re ve rs e d - p ha s e h ig h p e rfo rm a nc e liq u id c h rom a tog rap h w a s e s ta b lis he d 1The s am p le s w e re e x tra c te d w ith tric h lo roa c e tic a c id a nd z inc a c e ta te b y the u ltra s on ic w a ve1The n the e x tra c ts w e re c e n trifug a lize d , p u rifie d w ith the c a tion e xc ha ng e c o lum n1The a na ly te w e re e lu te d b y am m on ia m e tha no l, re c ons titu te d b y m e tha no l- w a te r a fte r d rie d und e r n itrog e n1The s am p le s w e re re a d y fo r d e te rm ina tion us ing e x te rna l s ta nd q ua n tita tion1The c a lib ra tion c u rve s s how e d g ood line a rity in the ra ng e of 015～10010m g / kg fo r m e lam ine1The c o rre la tion c oe ffic ie n t w a s 0199991The re c ove rie s w e re 8716%～9413% a t sp ik ing le ve ls 012～1010m g / kg 1The re la tive s ta nd a rd d e v ia tions w e re 319%～711% 1The d e te c tion lim it of m e lam ine w a s 012m g / kg 1 Ke y wo rd s: H PLC; fis he ry p rod uc ts; m e lam ine 中图分类号 : TS25417 文献标识码 : A 文章编号 : 1002- 0306 (2010) 04- 0361- 04

高效液相色谱法检测三聚氰胺分析方法的探索

．
８０：２０，８５：１５，８９：１１，８８：１２，９０：１０进行测定。
结果表明，缓冲溶液与乙腈的比例为８８：１２时，三聚氰胺的出峰位置，峰形适宜且无其他杂峰干扰。三聚氰胺高效液相色谱图见图
长。
表１三聚氰胺标液连续进样数据进样保留时间峰面积（次数（ｍＡＵ＊ｓ）
ｍｉｎ）
１２３４５６１４．３４３１４．２５０１４．１９６１４．ｔ８９１４．１９７１４．２０４３０８７．２０８７４３０８６．９０６９８３０８６．１３３５４３０８２．８３２５２３０８３．８９９６６３０８３．２７８３２
Ｎ、，Ｎ
ｌ
ｌｌ
图２三聚氰胺标准曲线
２．７重现性实验
丫
ＮＨ２
１、实验部分
１．１主要仪器与试剂
ＡｇｉｌｅｎｔＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ１２６０ＨＰＬＣ，柱子型
按照上述优化后的色谱条件，将４Ｏ￣ｇ／ｍＬ的三聚氰胺标液连续进样６次，得到三聚氰胺的峰面积测定值的相对标准偏差（ＲＳＤ）分别为０．０６％，保留时间的相对标
试验与检测
高效液相色谱法检测三聚氰胺分析方法的探索
７秦喜玲２秦引弟３赵芳

高效液相色谱法同时测定奶粉或饲料中的三聚氰胺和三聚氰酸

高效液相色谱法同时测定奶粉或饲料中的三聚氰胺和三聚氰酸龚时琼【摘要】食品或饲料中三聚氰胺和三聚氰酸经乙腈水萃取、提纯后,采用高效液相色谱(HPLC)法测定,外标法定量.对色谱分离条件进行了优化,三聚氰胺在0.1156～11.56 mg/L范围内线性良好,复相关系数r2=0.9997,平均加标回收率在95.59％～105.97％之间,相对标准偏差为0.14％～0.29％,检出限(S/N=3)为0.012 mg/L.三聚氰酸0.1020～10.20mg/L范围内线性良好,复相关系数为r2=0.9995,平均加标回收率在77.44％～88.77％之间,相对标准偏差为0.32％～0.86％,检出限(S/N=3)为0.051 mg/L.该法能满足食品或饲料中三聚氰胺和三聚氰酸检验工作的需要.%Melamine and cyanuric acid in powdered milk and feedstuff are extracted with acetonitrile and water. After the extract was cleaned up by centrifuging, melamine and cyanuric acid are analyzed by HPLC and quantified by external standard method. Chromatographic analytical conditions are critically optimized in this study. Melamine's linear range is between 0. 115 6 mg/L and 11. 56 mg/L; and multiple related coefficient is 0. 9997; the average recoveries are from 95. 59% to 105. 97%; the relative standard deviations are from 0. 14% to 0. 29% ; and the lowest detected limit is 0. 012 mg/L. Cyanuric acid's linear range was from 0. 102 0 mg/L to 10. 20 mg/L, and multiple related coefficient is 0. 9995. The average recoveries are from 87. 44% to 98. 77% ; the relative standard deviations are from 0. 32% to 0. 86%. The lowest detected limit is 0.051mg/L. This analysis method can meet the requirement for determination for food and feedstuff.【期刊名称】《实验技术与管理》【年(卷),期】2012(029)010【总页数】4页(P51-53,57)【关键词】奶粉及饲料;三聚氰胺;三聚氰酸;高效液相色谱【作者】龚时琼【作者单位】华中科技大学化学与化工学院,湖北武汉 430074【正文语种】中文【中图分类】S252.51Abstract：Melamine and cyanuric acid in powdered milk and feedstuff are extracted with acetonitrile and water.After the extract was cleaned up by centrifuging，melamine and cyanuric acid are analyzed by HPLC and quantified by external standard method.Chromatographic analytical conditions are crit ically optimized in this study.Melamine’s linear range is between 0.115 6mg/L and 11.56mg/L；and multiple related coefficient is 0.9997；the average recoveries are from 95.59%to 105.97%；the relative standard deviations are from 0.14%to 0.29%；and the lowest detected limit is 0.012mg/L.Cyanuric acid’s linear range was from 0.102 0mg/L to 10.20mg/L，and multiple related coefficient is 0.9995.The average recoveries are from 87.44%to 98.77%；the relative standard deviations are from 0.32%to 0.86%.The lowest detected limit is 0.051mg/L.This analysis method can meet the requirement for determination for food andfeedstuff.Key words：powdered milk and feedstuff；melamine；cyanuric acid；HPLC2007年爆发的猫和狗在摄入受污染宠物食品后急性肾衰竭疫情中，有证据显示在同时摄入三聚氰胺和三聚氰酸后会导致肾毒性。

高效液相色谱法测定奶粉中三聚氰胺的含量

高效液相色谱法测定奶粉中三聚氰胺的含量姓名：班级：学号：摘要：三聚氰胺是一种低毒的化工原料，动物实验结果表明，其在动物体内代谢很快且不会存留，主要影响泌尿系统。

乳制品中添加三聚氰胺会使得食品的蛋白质测试含量偏高，从而使劣质食品通过食品检验机构的测试，就送检的奶粉样品，采用高效液相色谱法（HPLC）测定其中的三聚氰胺的含量。

关键词：三聚氰胺食品质量与安全奶粉标准依据高效液相色谱检测方法1材料与方法1.1盐酸（HCl）。

1.2盐酸苯肼（C6H8N2•HCl）。

1.3铁氰化钾（K3[Fe（CN）6]）。

1.4硫酸（H2SO4）。

1.5氢氧化钠（NaOH）。

1.6盐酸（HCl）（10+2）：量取100mL盐酸，加入20mL水中，混匀。

1.7盐酸（HCl）（1+1）：量取50mL盐酸，加入50mL水中，混匀。

1.7盐酸苯肼溶液（C6H8N2•HCl）（10g/L）：称取1.0g盐酸苯肼，加80mL水溶解，再加2mL盐酸（10+2），加水稀释至100mL，过滤，贮存于棕色瓶中。

1.8铁氰化钾溶液（K3[Fe（CN）6]）（20g/L）：称取2.0g铁氰化钾，加水溶解并稀释至100mL。

1.9硫酸（H2SO4）（1+35）：量取1mL硫酸缓慢注入35mL水中，混匀。

1.10碘标准溶液（I2）（0.1mol/L）：配制和标定按照GB/T601或购商品化标准物质。

1.11硫代硫酸钠标准滴定溶液（Na2S2O3）（0.1moL／L）：配制和标定按照GB/T601或购商品化标准物质。

1.12氢氧化钠溶液（NaOH）（40g/L）：称取4g氢氧化钠，加水溶解并定容至100mL。

1.13甲醛标准储备液（CH2O）原理：以三聚氰胺为原料制作的成型品经4%乙酸浸泡，浸泡液中三聚氰胺用高效液相色谱分离、测定，以保留时间定性、峰高或峰面积定量。

1.14 奶粉1.1 主要材料与试剂1.1.1盐酸（HCl）。

1.1.2盐酸苯肼（C6H8N2•HCl）。

高效液相色谱法检测生鲜乳中三聚氰胺

１．３溶液的配制
１．１仪器与设备
ＬＣ一２０Ａ高效液相色谱仪（日本岛津）；紫外检测器；ＣＰ１５３Ｃ电子天平：奥豪斯仪器（上海）有限公司；ＸＷ一８０Ａ微型旋涡混合仪：上海沪西分析仪器厂有限公司；ＧＰ一１２５ＢＥ干燥培养箱：天津市泰斯特仪器有限公司；ＴＣ１６Ｋ — ＩＩ高速离心机：长沙东旺实验仪器有限公司；摩尔原子超纯水：上海摩勒科
１．４色谱条件
色谱柱：Ｃ１８色谱柱（２５０ｍｍ× ４．６ｍｍ，５Ｉｘｍ）；流速：１．０ｍＬ／ｍｉｎ；流动相ｊ离子对试剂缓冲液：乙腈＝８５：
作者简介：林品言（１９８５￣），女，硕士，工程师，研究方向为畜禽水产品检测。
采用高效液相色谱法测定。采用Ｃ１８色谱柱，以离子对试剂缓冲液一乙腈（８５：１５）为流动相，流速为１．０ｍＬ／ｍｉｎ，检测
波长为２４０ｉｒｍ，柱温为４０ｑＣ。结果表明，三聚氰胺在１．０￣１００ｇ／ｍＬ的浓度范围呈良好的线性关系。三聚氰胺的标准
１材料与方法
学仪器有限公司；ＤＬ－０１抽滤装置；１２道ＳＰＥ固相萃取装置；量筒；容量瓶；具塞离心管。
１．２药品与试剂
三聚氰胺溶液标准物质（１．００ｍｇ／ｍＬ）：北京海岸鸿蒙标准物质技术有限责任公司；乙腈（色谱纯）：上海安谱；甲醇（色谱纯）：天津市科密欧化学试剂有限公司；柠檬酸（分析纯）：湖南汇虹试剂有限公司；辛烷磺酸钠（色谱纯）：天津市科密欧化学试剂有限公司；氨水（分析纯）：重庆川东化工（集团）有限公司；三氯乙酸（分析纯）：国药集团化学试剂有限公司；

固相萃取一高效液相色谱法测定液态奶中三聚氰胺含量

固相萃取一高效液相色谱法测定液态奶中三聚氰胺含量
三聚氰胺是一种有机化合物，其化学式为C3H6N6。

它在工业中被广泛应用于染料、塑料、纺织品等行业。

三聚氰胺对人体健康有害，因此世界各国都制定了相应的限量标准和
检测方法。

本文将介绍一种利用固相萃取和高效液相色谱法测定液态奶中三聚氰胺含量的
方法。

我们需要准备实验所需的试剂和仪器。

试剂包括乙腈、乙酸、醋酸乙酯、四氢呋喃等；仪器包括高效液相色谱仪、气相色谱仪、离子色谱仪等。

我们需要进行样品的前处理。

将液态奶样品与醋酸乙酯混合，并用乙酸进行调节。

然后，用固相萃取柱进行固相萃取。

将样品通过柱子，用乙腈进行洗脱。

将洗脱液进行浓缩，在氮气下吹至干燥。

用四氢呋喃进行重溶解，并进行滤过。

接下来，我们需要使用高效液相色谱法进行检测。

调节高效液相色谱仪的参数，如流速、温度等。

然后，将样品注入色谱仪，并进行色谱分离。

根据三聚氰胺的特性，调节色
谱柱的填料和流动相，使得三聚氰胺的峰形成在适当的位置。

根据标准曲线确定样品中三
聚氰胺的含量。

我们需要对实验结果进行分析。

将测得的样品中三聚氰胺的含量与限量标准进行比较，如果超过限量标准，则样品不合格；如果在限量标准范围内，则样品合格。

固相萃取和高效液相色谱法是目前应用较广泛的液态奶中三聚氰胺含量测定方法。

该
方法具有准确、快速、灵敏等特点，可以满足对液态奶中三聚氰胺含量进行快速检测的需求。

希望本文对读者能有所帮助。

固相萃取一高效液相色谱法测定液态奶中三聚氰胺含量

固相萃取一高效液相色谱法测定液态奶中三聚氰胺含量引言三聚氰胺是一种有机氮化合物，被广泛用作氮肥和杀虫剂。

三聚氰胺在食品中的超标使用会对人体健康造成危害，尤其是对婴幼儿和孕妇。

准确测定液态奶中三聚氰胺的含量对保障食品安全至关重要。

本研究旨在建立一种固相萃取一高效液相色谱法，用于测定液态奶中三聚氰胺含量。

实验方法1. 样品准备将不同来源的液态奶样品分别取样，并冷冻保存以确保样品的新鲜度和完整性。

2. 萃取过程将50ml的液态奶样品加入250ml的锥形瓶中，然后加入20ml的去离子水。

将样品与水充分混合，并进行超声处理5分钟。

接着将样品倒入100ml的固相萃取管中，并采用正向固相萃取法进行样品预处理。

3. 洗脱过程使用10ml甲醇-去离子水（3:1，v/v）进行3次洗脱，用5ml甲醇进行1次洗脱。

将洗脱液合并，并置于50℃水浴中浓缩至干燥。

随后加入2ml的去离子水重新溶解，转移到2ml小瓶中备用。

4. 分析参数采用高效液相色谱法将三聚氰胺化合物在C18色谱柱上分离，采用二极管阵列检测器进行检测，流动相A为0.1%甲酸溶液，流动相B为乙腈。

柱温为30℃，流速为0.8ml/min，进样体积为10μl。

5. 样品检测将萃取液用0.22μm滤膜过滤后，进行高效液相色谱分析。

利用标准曲线法定量测定三聚氰胺的含量。

结果分析通过以上实验方法，我们成功建立了一种固相萃取一高效液相色谱法，用于测定液态奶中三聚氰胺的含量。

我们分别采用标准品对该方法进行了验证，在不同浓度下三次测定的相对标准偏差(RSD)均小于3%，符合测定法的要求。

该方法的检出限为0.05μg/kg，定量限为0.2μg/kg，对实际样品的分析结果也表现出较好的准确性和灵敏度。

结论我们成功建立了一种固相萃取一高效液相色谱法，用于测定液态奶中三聚氰胺的含量。

该方法具有操作简便、准确性高、灵敏度好的特点，可以应用于实际液态奶的质量控制和食品安全监测中。

未来，我们还将探索该方法在其他食品中三聚氰胺含量测定方面的应用，并不断优化方法，提高其分析精度和适用范围。

用三氯异三聚氰酸漂白纸浆的方法简介

用三氯异三聚氰酸漂白纸浆的方法简介
李守君;李敬芬;徐洪恩
【期刊名称】《黑龙江医药科学》
【年(卷),期】1995(0)6
【摘要】纸浆漂白是造纸过程的一个重要环节,选择合适的漂白剂已是人们长期以来研究的课题。

目前国内外普遍采用的漂白剂是次氯酸盐,但此种漂白剂会造成纤维素氧化解聚作用,同时造成纤维半制品机械性能的损失。

使用二氧化氯作为漂白剂其缺点是价高、剧毒,以及用作制二氧化氯的氯酸钠短缺,漂白过程本身时间长。

因此,本文用三氯异三聚氰酸作为漂白剂研究其在造纸方面的应用。

【总页数】1页(P23-23)
【作者】李守君;李敬芬;徐洪恩
【作者单位】[1]佳木斯工学院;[2]佳木斯医学院;[3]佳木斯市环保研究所
【正文语种】中文
【中图分类】TS743
【相关文献】
1.从低氯漂白到无氯漂白——纸浆漂白的必由之路 [J], 刘起源
2.三氯异三聚氰酸氧化芳基硫醚合成芳基亚砜 [J], 熊知行;刘临
3.高效液相色谱法同时测定三氯异氰脲酸(粉)中三聚氰酸和三聚氰胺的含量 [J], 于晓辉;万仁玲;欧阳林山;杨秀玉;王小慈
4.阻燃剂三（2，3—二氯丙基）异三聚氰酸酯（TCC）的合成研究 [J], 刘汉虎;王钦吉;等
5.稳定性粉状三氧化氯、三氯异氰尿酸和漂白粉对南美白对虾浸泡消毒效果的比较[J], 陈超然;陈昌福
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