大鼠血管活性肠肽(VIP)ELISA试剂盒说明书
血管活性肠肽(VIP)对大鼠Leydig细胞FasL表达及介导Jurkat细胞凋亡的影响
［ ｙｗ ｒｓ Ｖ ｓｃｔ ｎｉ ｅｔ ａ ｐｐｉｅ Ｖ Ｐ ；ｅｄｇｃｌ Ｆｓ ； ｐｐｏｉ；ｍ ｕ ｅｐｉｉ ｇ Ｋｅ ｏ ｄ ］ ａｏａｉ ｔｓｎｌ ｅｔ （ Ｉ ） Ｌｙ ｉ ｅ ；ａＬ Ａ ｏ ｔ ｓＩ ｍ ｎ ｒ ｌ ｅ ｏ ｎ ｉ ｄ ｌ ｓ ｖｅ
Ｌ ｙｉ 胞 （ 丸 间 质 细 胞 ） 一 种 分 泌 雄 激 ｅｄｇ细 睾 是 素 的内 分 泌 细 胞 。Ｌ ｙ ｉ 胞 在 调 节 男 性 性 器 官 ｅｄｇ细
ｓｏ ＶＩ ｏ ｌ ｅ ｌｔ ａ ｅ ｄ ｇ ｃ ｌ ｉ ｉｎ： Ｐ ｃ ｕｄ ｒ ｇ ａｅ ｒｔＬ ｙ ｉ ｅ ｍｍｕ ｅ ｆ ｎ ｔ ｎ ａ ｄ ｐ ｒ ｃｐ ｔ ｎ ｔｅ ｒ ｇ ｌ ｔ ｎ ｏ ｕ ｎ ｕ ｃ ｉ ｎ ａｔ ｉ ａｅ ｉ ｈ ｅ ａｉ ｆｉ ｏ ｉ ｕ ｏ ｍｍｕ ｅｐ ｉｉ ｇ ｆ ｈ ｅ ｔ ． ｎ ｒ ｌ ｅ ｏ ｅ ｔ ｓｉ ｖｅ ｔ ｓ
Ｗ ＮＧ Ｂａ — ｕ Ａ ｏ Ｇ ｏ，Ｗ ＮＧ Ｗｅ ，Ｘ ｅＢ ｎ，Ｃ Ｎ ｕ ｎ —ｉ ＨＡ ，ｎ Ａ ｉ ＩＹ — ｉ ＨＥ Ｇ ａ ｇ Ｊｅ， Ｏ ｌ ｇ，Ｓ Ｎ ｉｎ Ｗｅ ， Ｉ ＮＧ Ｌ— ａ，Ｌ ｉ ｉ ＨＥ Ｔａ — ｉ ＪＡ ｉＨｕ ＩＷｅ—
基础医学院《生理学》考试试卷(38)
基础医学院《生理学》课程试卷（含答案）__________学年第___学期考试类型：（闭卷）考试考试时间：90 分钟年级专业_____________学号_____________ 姓名_____________1、A型题（37分，每题1分）1. 月经周期中控制排卵发生的关键因素是（）。
A．排卵前雌激素高峰B．孕激素高峰C．黄体生成素高峰D．卵泡刺激素高峰答案：C解析：2. 下列关于体温正常变动的叙述，正确的是（）。
[西医综合2015研]A．育龄期女性基础体温以排卵日为最高B．成年女性的体温平均高于男性0.3℃C．通常成年人体温高于儿童D．体温的昼夜变化可超过1℃答案：B解析：项，人体的温度是相对恒定的，波动不超过1℃。
项，通常情况下，成年女性的体温平均高于男性0.3℃。
项，育龄期女性的基础体温随月经周期而变动，体温在排卵日最低。
项，一般情况下，儿童的体温较高，新生儿和老年人的体温较低。
3. 关于动脉血压的叙述，下列哪一项是正确的？（）A．动脉血压偏正常水平愈远，压力感受器纠正异常血压的能力愈强B．心室收缩时，血液对动脉管壁的侧压称为收缩压C．其他因素不变时，心率加快使脉搏压增大D．平均动脉血压是收缩压和舒张压的平均值答案：解析：4. 下列关于兴奋性突触后电位的叙述，正确的是（）。
[西医综合2017研]A．由突触前神经元释放抑制性递质而引起B．通过突触后膜K＋通道开放而产生C．性质上属于动作电位，但幅度较小D．重复刺激可发生时间总和答案：D解析：项，兴奋性突触后电位是由兴奋性递质作用于突触后膜产生的。
项，兴奋性突触后电位是一种局部去极化电位。
项，局部去极化电位重复刺激可引起时间的总和。
项，兴奋性突触后电位由突触后膜Na＋和K＋通透性增加，且Na＋内流大于K＋外流，发生净内向电流。
5. 维生素B12是许多代谢过程所必需的，下列哪种情况不会引起其缺乏？（）A．外科切除回肠B．慢性胃炎引起的胃酸缺乏C．胃壁细胞的自家免疫性破坏D．外科切除空肠答案：D解析：6. 通常所说的血型是指（）。
SP及VIP
便秘实验方案1.VIP. SP检测（1）原理神经肽在便秘的发生过程中具有重要作用[1-3]。
胃肠肽由胃肠神经分泌释放，而肠神经广泛存在于肠道薪膜层、薪膜下层、肌层.神经肤是主要起传递信息作用的生物活性多肤，扮演着神经激素、神经递质、神经调质和细胞因子等多种角色，是调节胃肠功能的重要因素.一般来讲，薪膜下神经丛主要参与肠道分泌和吸收功能，而肌间神经丛主要参与肠道运动功能的调节[4].目前已确认的肠神经递质或调质多达数10种，其中兴奋性递质主要包括SP、乙酞胆碱等;抑制性递质包括VIP)、NO、三磷酸腺苷(ATp)等.小鼠结肠P物质(substance P, S P)是由胃肠道固有神经或外来神经释放，存在于胃肠道薪膜神经丛、肌间神经丛，是调节肠道作用最强的兴奋性肤能神经递质，能抑制肠道豁膜分泌，刺激肠道运动，可直接作用大肠纵行肌环行肌引起收缩，增加结肠收缩和运动[4]，SP可引起大鼠食道平滑肌收缩,促进食物下移。
其增高可有效促进胃肠运动,国内外学者对慢性传输型便秘患者结肠进行研究后认为慢性传输型便秘的产生可能与结肠肌间神经丛内SP含量减少有关[5-9]，可能是导致结肠传输功能减弱的原因之一VIP,血管活性肠肽(vasoactive intestinal polypeptide, VIP)能神经按神经元功能不同分为运动神经元和分泌神经元.前者其传出主要使胃肠括约肌舒张，后者则主要刺激肠液分泌[l0]，VIP是由28个氨基酸组成的肽类,是抑制性神经元的非肾上腺素能、非胆碱能递质。
它使结肠运动减弱,舒张肠管,参与水及电解质的吸收。
长期便秘患者远端结肠的VIP神经成分减少或缺失,肌层中的VIP含量少于正常。
VIP可以使结肠运动减弱.尽管VIP能神经是胃肠道运动的抑制性神经，但国内外大量学者通过对慢性便秘患者及慢性传输型便秘大鼠结肠VIP能神经进行免疫组化研究认为，其结肠肌层内VIP能神经呈减少趋势[11]，并认为VIP 是产生下行性抑制的重要因素，其含量降低可能导致肠神经系统传输障碍，产生传输减慢[12].同时由于VIP浓度降低可能引起结肠出现过度的阶段性蠕动，使有效推动减弱[13-16].【参考文献】1.Sjolund K,Fasth S,Ekman,Hulten L,JIborn H,Nordgren S,Sundler F.Neuropeptidesin idiopathic chronic constipation(slow transit constipation).Neruogastroenterol Motil 1997;9;143-1502.刘诗，高再荣，钱伟，易粹琼慢性便秘患者直肠P物质和血管活倒易肤含量的变化.中华内科杂志2001;40:6083.潘仁智，王业皇，张苏闽便秘患者血清NO检测及其临床意义的初步探讨.右江民族医学院学报2004;26:3684.王志均.胃肠激素.北京:科学出版社，1985: 210-3075.童卫东，张胜本，张连阳，高峰，杜文华，牟江洪.慢性传输型便秘肠神经系统一氧化氮合酶和P物质的分布意义.世界华人消化杂志1998; 6: 380-3826.丁义江，哈楠林，丁曙晴，徐文华，耿建祥.结肠h.R传输型便秘与突触素和P 物质及血管活恻易肤的临床研究.中华胃肠外科杂志2004; 7: 485-4877.高峰，张胜本，张连阳，陈俐.慢传输型便秘乙状结肠VIP, SP免疫组化研究.中华消化杂志1998;18: 34-368.Wedel T, Roblick UJ, Ott V, Eggers R, SchiedeckTH, Krammer HJ, Bruch HP. Oligoneuronalhypoganglionosis in patients with idiopathic slow-transit constipation. Dis Colon Rectum 2002; 45:54-629.童卫东.慢传输型便秘肠神经系统的研究进展.国外医学外科学分册1999; 26: 212-21410.张经济，连至诚，许冠荪.结肠运动的发生与调节，消化道病理生理学.广州:科技出版社，1997:10阵109011.何俊堂，刘海峰，房殿春，龙庆林，王国安.慢传输型便秘大鼠结肠肌间神经丛内VIP能神经、SP能神经的免疫组化研究.消化外科2004;3:122-12412.Wheatley JM, Hutson JM, Chow CW, Oliver M,Hurley MR. Slow-transit constipation in childhood.J Pediatr Surg 1999; 34: 829-832; discussion 832-83313.Cortesini C, Cianchi F, Infantino A, Lise M. Nitricoxide synthase and VIP distribution in entericnervous system in idiopathic chronic constipation.Dig Dis Sci 1995; 40: 2450-2455ner P, Crowe R, Kamm MA, Lennard-Jones JE,Burnstock G. Vasoactive intestinal polypeptidelevels in sigmoid colon in idiopathic constipationand diverticular disease. Gastroenterology 1990; 99:666-67515.Bl-Salhy M. Gastrointestinal transit in an animalmodel of human diabetes type 2: relationship togut neuroendocrine peptide contents. Ups ] Med Sci2002;107:101-110 16.Forrest A, Parsons M. The enhanced spontaneousactivity of the diabetic colon is not the consequence of impaired inhibitory control mechanisms. Auton Autacoid Phannacol 2003; 23:149-158附：方法:剪取小鼠近端结肠2 cm，纵行剖开，NaCI(含Na 9 glL)漂洗后，固定于40叭中性甲醛溶液中，常规脱水、石蜡包埋，常规切片机切片，厚约4 }m.分别进行HE染色和免疫组化染色.采用Envision免疫组化染色法(两步法)，光学显微镜下，采用中文IMS细胞图像分析系统，每张片随机取3个视野，对SP,VIP 含量进行定量分析，并对免疫组化指数进行统计.另可测大鼠VIP.SP（2）方法①结肠肌间神经丛标本制作大鼠禁食12 h,3%戊巴比妥钠麻醉后,通过腹部正中切口暴露腹腔,切取整段结肠。
和胃理气方对肝胃不和型功能性消化不良大鼠VIP与CGRP水平及相关受体影响研究-王宇
42第22卷 第12期 2020 年 12 月辽宁中医药大学学报JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCMVol. 22 No. 12 Dec .，2020和胃理气方对肝胃不和型功能性消化不良大鼠VIP 与CGRP 水平及相关受体影响研究王宇，陈海铭，李惠平，高学明（辽宁中医药大学附属医院，辽宁 沈阳 110032）基金项目：辽宁省自然科学基金（2019-ZD-0959）作者简介：王宇（1985-），女，辽宁锦州人，主治医师，硕士，研究方向：中医脾胃病、中医急症。
通讯作者：陈海铭（1965-），男，辽宁本溪人，主任医师，学士，研究方向：中医急症。
摘要：目的 探讨和胃理气方对肝胃不和型功能性消化不良大鼠肠黏膜组织中血管活性肠肽（vasoactiveintestinal peptide，VIP）与降钙素基因相关肽（calcitonin gene-related peptide，CGRP）的表达水平及相关受体的影响，阐明该方治疗肝胃不和型功能性消化不良的作用机理。
方法 对40只健康 Wistar SPF 级大鼠采取SPSS22.0软件平均分成4组，每组10只，分别为空白对照组、模型对照组、和胃理气方中药干预组和多潘立酮阳性药对照组。
观察试验后大鼠胃肠动力变化，采用胃排空试验和小肠推进试验来测定胃排空率和小肠推进率；采用western-blot 法及RT-PCR 检测大鼠肠黏膜组织VIP 及相关受体的表达。
结果 与多潘立酮阳性对照组大鼠及模型组大鼠相比较，中药组、西药组大鼠小肠推进率明显高于模型组，胃内残留率明显低于模型组，差异均有统计学意义（P <0.05）；模型组大鼠肠黏膜组织中VIP 及其受体血管活性肠肽1受体（vasoactive intestinal peptide receptor1，VPAC1）蛋白、CGRP 及其受体活性修饰蛋白质1（receptor activity modifying protein1，RAMP1）蛋白的表达水平明显高于空白对照组，差异有统计学意义（P <0.05）；中药组、西药组大鼠肠黏膜组织中VIP 及其受体VPAC1蛋白、CGRP 及其受体RAMP1蛋白表达水平明显低于模型组，差异有统计学意义（P <0.05）；模型组大鼠肠黏膜组织中VIP mRNA、CGRP 及其受体RAMP1 mRNA 的表达水平与空白组比较，明显高于空白组，差异有统计学意义（P <0.05）；中药组、西药组大鼠肠黏膜组织中VIP mRNA、CGRP 及其受体RAMP1 mRNA 的表达水平与模型组比较，明显降低，差异有统计学意义（P <0.05）。
脊髓损伤后大鼠结肠血管活性肠肽能神经元表达的变化
Ｓ ｕ ｙ ｏ ｈ ｈ ｎ ｅ ｏ ａ ｏ ｃ ｉ ｅ ｎ ｅ ｔ ａ ｅ ｔｄ ｒ ｉ ｅ ｒ ｎ ｘ ｒ ｓ ｉ ｎ ｉ ａ 。 ｃ ｌ ｎ ｆ ｌ ｗｉ ｇ ｓ ｉ ａ ｔ ｄ ｎ ｔ ｅ ｃ ａ ｇ ｆ ｖ ｓ ａ ｔｖ ｉ ｔ ｓｉ ｌ ｐ ｐ ｉ ｅ ｇ ｃ ｎ ｕ ｏ ｓ ｅ ｐ ｅ ｓｏ ｎ ｒ ｔ ｏ ｏ ｏ ｌ ｎ ｐ ｎ ｌ ｎ Ｓ ｏ
达变化 。
结 果 ： 鼠Ｓ Ｉ 大 Ｃ 后结肠黏膜充 血 、 水肿 、 糜烂 ， 毛减少 、 绒 倒伏 、 脱落 ， 结肠组织 中ＶＩ 的 ｍ Ｎ Ｐ Ｒ Ａ及蛋 白表 达水 平显 著下
调， 与假手术组 、 照组相 比差异具有显著性 （ ＜ ．５ 。 对 Ｐ 经元表达变化 可能是导致 大 鼠Ｓ Ｉ Ｎ Ｄ的病理机制之一 。 Ｃ后 Ｂ 关键词 脊髓损 伤 ； 血管活性肠肽 ； 神经源性肠道功能 障碍
中 复学 匍窟 匡 磐矗 ２１ ［第２卷， 期 ０ ＆， ７ 第２ ２￣
・
基础 研 究 ・
脊髓损伤后大 鼠结肠血管活性肠肽能神经元表达的 变化术
龙 志 华 徐
摘 要
青
王
磊
刘文 国
目的 ： 分析大 鼠脊 髓损伤 （Ｃ ） Ｓ Ｉ后结肠壁 病理结构及结肠 肌间神经丛 内血管 活性 肠肽能ｆ Ｉ） ｖ Ｐ神经元表 达变 化 ， 探讨 脊髓损伤所致神经源性肠 道功能障碍（ Ｂ ） Ｎ Ｄ 的病理机制 。 方法： 实验 动物分 为假 手术组 、 Ｎ Ｄ（ 非 Ｂ 对照组 ） Ｎ Ｄ（ 和 Ｂ 模型组 ） 大 鼠氯胺 酮 （０ ／ｇ 腹腔注射麻 醉 ， 用 Ｎ Ｙ ； ６ ｍｇ ） ｋ 利 ｕ
电针对IBS模型大鼠肠系膜微血管管径与血浆CGRP、VIP水平的影响
杨 磊 ， 孙 洁 ， 李 滢 ， 赵雅芳 。 ， 杨 帅。 ， 陈 磊。 ， 任晓暄 。 ， 张露芬 。
１航天 中心 医院 ， 北京 １ ０ ０ ０ ４ ９ ；２北京小汤 山医院；３北京 中医药大学针 灸推拿 学院 ［ 摘 要］ 目的： 观察 电针足三里 、 天枢 穴对肠 易激综合征模型大 鼠肠 系膜微血管管径及血 浆中降钙基 因
相 关肽 （ Ｃ Ｇ Ｒ Ｐ ） 、 血管活性肠肽 （ Ｖ Ｉ Ｐ ） 水平的影响， 探讨针刺治疗 Ｉ Ｂ Ｓ的可 能机制 方法： 以Ｗ ｉ ｓ ｔ ａ ｒ幼鼠为研 究 对 象， 分 为正常组 、 模型组 、 天枢组 、 足三里组 ， 天枢和足三里组， 采用联合作 用型方法制备 Ｉ Ｂ Ｓ大 鼠模型 ， 从第 ６周 束缚及 电针 干预 ， 隔日 １ 次， 共 ７次 。模 型组 只束缚 不针刺 ， 正常组 不做任 何处理 。 ａ ｃ ｔ Ｏ ｂ ｊ ｅ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ ： Ｔ ｏ ｅ ｘ ｐ ｌ ｏ ｒ ｅ ｔ ｈ ｅ ｍｅ ｃ ｈ ａ ｎ ｉ ｓ ｍ ｏ ｆ ａ ｃ ｕ ｐ ｕ ｎ ｃ ｔ ｕ ｒ ｅ ｉ ｎ ｔ ｒ ｅ ａ ｔ ｉ ｎ ｇ ｉ ｒ ｒ ｉ ｔ ａ ｂ ｌ ｅ ｂ ｏ ｗｅ ｌ ｓ ｙ ｓ ｔ ｅ ｍ（ Ｉ Ｂ Ｓ ） ｂ ｙ ｏ ｂ —
ｓ ｅ ｒ ｖ ｉ ｎ ｇ ａ ｃ ｕ ｓ ｅ ｃ ｔ ｏ ｒ ａ ｔ Ｚ ｕ Ｓ ａ ｎ Ｌ ｉ（ Ｓ Ｔ ３ ６ ） ａ ｎ ｄ Ｔ ｉ ｎＳ ａ ｈ ｕ（ Ｓ Ｔ ２ ５ ） ｏ ｎ ｍｉ ｃ ｒ ｏ ｖ ａ ｓ ｃ ｕ ｌ ａ ｒ ｃ ａ ｌ ｉ ｂ ｅ ｒ ， ｔ ｈ ｅ ｌ ｅ ｖ ｅ ｌ ｓ ｏ ｆ Ｃ ＧＲ Ｐ ａ ｎ ｄ ＶＩ Ｐ ｉ ｎ
血管活性肠肽是什么？
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血管活性肠肽是什么？
导语：血管活性肠肽是什么？说实话由于生物一直学的不太好我也不是很清楚呢？你知道血管活性肠肽是什么吗？如果你也和我一样不知道的话，我请教了
血管活性肠肽是什么？说实话由于生物一直学的不太好我也不是很清楚呢？你知道血管活性肠肽是什么吗？如果你也和我一样不知道的话，我请教了有关方面专家，整理了以下内容，就和我一起来看看吧。
血管活性肠肽是什么呢？对于血管活性肠肽是什么这个问题专家对我们做出了以下解释：
血管活性肠肽（vasoactive intestinal peptide，VIP）是神经递质的一种，存在于中枢神经和肠神经系统中。
食管下括约肌的舒张则是由迷走神经纤维末梢释放的血管活性肠肽介导的，血管活性肠肽又通过促进靶细胞合成NO而使平滑肌舒张。
也可由胰岛D1细胞分泌该活性多肽为从小肠粘膜提取的一种直链肽。
由28个氨基酸残基组成，其排列为一部分胰高血糖素（glucagon）和催胰液素（secretin），具有可使血管舒张降低血压的作用。
从肝动脉开始，对内脏血管具有较强的作用能力，但对股动脉则全无作用。
对肠液的分泌具有很强的促进作用，但对胰腺的分泌其促进作用很弱，对胃液的分泌可起抑制作用，对消化道平滑肌的收缩产生抑制作用。
对血糖的增高作用较弱，在生理上详细的作用尚不十分清楚。
以上的内容就是有关专家给我们介绍的血管活性肠肽是什么的具体情况了，大家都看清楚了吗？你知道血管活性肠肽到底是什么了吗？如果你还不是很清楚，想要了解更多更详细的话，可以通过下面的方式与我们的专家进行在线交流，相信他们会详细的告诉你你想要知道的内容，你会得到一个满意的答案。
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便秘实验方案1.VIP. SP检测（1）原理神经肽在便秘的发生过程中具有重要作用[1-3]。
胃肠肽由胃肠神经分泌释放，而肠神经广泛存在于肠道薪膜层、薪膜下层、肌层.神经肤是主要起传递信息作用的生物活性多肤，扮演着神经激素、神经递质、神经调质和细胞因子等多种角色，是调节胃肠功能的重要因素.一般来讲，薪膜下神经丛主要参与肠道分泌和吸收功能，而肌间神经丛主要参与肠道运动功能的调节[4].目前已确认的肠神经递质或调质多达数10种，其中兴奋性递质主要包括SP、乙酞胆碱等;抑制性递质包括VIP)、NO、三磷酸腺苷(ATp)等.小鼠结肠P物质(substance P, S P)是由胃肠道固有神经或外来神经释放，存在于胃肠道薪膜神经丛、肌间神经丛，是调节肠道作用最强的兴奋性肤能神经递质，能抑制肠道豁膜分泌，刺激肠道运动，可直接作用大肠纵行肌环行肌引起收缩，增加结肠收缩和运动[4]，SP可引起大鼠食道平滑肌收缩,促进食物下移。
其增高可有效促进胃肠运动,国内外学者对慢性传输型便秘患者结肠进行研究后认为慢性传输型便秘的产生可能与结肠肌间神经丛内SP含量减少有关[5-9]，可能是导致结肠传输功能减弱的原因之一VIP,血管活性肠肽(vasoactive intestinal polypeptide, VIP)能神经按神经元功能不同分为运动神经元和分泌神经元.前者其传出主要使胃肠括约肌舒张，后者则主要刺激肠液分泌[l0]，VIP是由28个氨基酸组成的肽类,是抑制性神经元的非肾上腺素能、非胆碱能递质。
它使结肠运动减弱,舒张肠管,参与水及电解质的吸收。
长期便秘患者远端结肠的VIP神经成分减少或缺失,肌层中的VIP含量少于正常。
VIP可以使结肠运动减弱.尽管VIP能神经是胃肠道运动的抑制性神经，但国内外大量学者通过对慢性便秘患者及慢性传输型便秘大鼠结肠VIP能神经进行免疫组化研究认为，其结肠肌层内VIP能神经呈减少趋势[11]，并认为VIP 是产生下行性抑制的重要因素，其含量降低可能导致肠神经系统传输障碍，产生传输减慢[12].同时由于VIP浓度降低可能引起结肠出现过度的阶段性蠕动，使有效推动减弱[13-16].【参考文献】1.Sjolund K,Fasth S,Ekman,Hulten L,JIborn H,Nordgren S,Sundler F.Neuropeptidesin idiopathic chronic constipation(slow transit constipation).Neruogastroenterol Motil 1997;9;143-1502.刘诗，高再荣，钱伟，易粹琼慢性便秘患者直肠P物质和血管活倒易肤含量的变化.中华内科杂志2001;40:6083.潘仁智，王业皇，张苏闽便秘患者血清NO检测及其临床意义的初步探讨.右江民族医学院学报2004;26:3684.王志均.胃肠激素.北京:科学出版社，1985: 210-3075.童卫东，张胜本，张连阳，高峰，杜文华，牟江洪.慢性传输型便秘肠神经系统一氧化氮合酶和P物质的分布意义.世界华人消化杂志1998; 6: 380-3826.丁义江，哈楠林，丁曙晴，徐文华，耿建祥.结肠h.R传输型便秘与突触素和P 物质及血管活恻易肤的临床研究.中华胃肠外科杂志2004; 7: 485-4877.高峰，张胜本，张连阳，陈俐.慢传输型便秘乙状结肠VIP, SP免疫组化研究.中华消化杂志1998;18: 34-368.Wedel T, Roblick UJ, Ott V, Eggers R, SchiedeckTH, Krammer HJ, Bruch HP. Oligoneuronalhypoganglionosis in patients with idiopathic slow-transit constipation. Dis Colon Rectum 2002; 45:54-629.童卫东.慢传输型便秘肠神经系统的研究进展.国外医学外科学分册1999; 26: 212-21410.张经济，连至诚，许冠荪.结肠运动的发生与调节，消化道病理生理学.广州:科技出版社，1997:10阵109011.何俊堂，刘海峰，房殿春，龙庆林，王国安.慢传输型便秘大鼠结肠肌间神经丛内VIP能神经、SP能神经的免疫组化研究.消化外科2004;3:122-12412.Wheatley JM, Hutson JM, Chow CW, Oliver M,Hurley MR. Slow-transit constipation in childhood.J Pediatr Surg 1999; 34: 829-832; discussion 832-83313.Cortesini C, Cianchi F, Infantino A, Lise M. Nitricoxide synthase and VIP distribution in entericnervous system in idiopathic chronic constipation.Dig Dis Sci1995; 40: 2450-2455ner P, Crowe R, Kamm MA, Lennard-Jones JE,Burnstock G. Vasoactive intestinal polypeptidelevels in sigmoid colon in idiopathic constipationand diverticular disease. Gastroenterology 1990; 99:666-67515.Bl-Salhy M. Gastrointestinal transit in an animalmodel of human diabetes type 2: relationship togut neuroendocrine peptide contents. Ups ] Med Sci2002;107:101-11016.Forrest A, Parsons M. The enhanced spontaneousactivity of the diabetic colon is not the consequence of impaired inhibitory control mechanisms. Auton Autacoid Phannacol 2003; 23:149-158附：方法:剪取小鼠近端结肠2 cm，纵行剖开，NaCI(含Na 9 glL)漂洗后，固定于40叭中性甲醛溶液中，常规脱水、石蜡包埋，常规切片机切片，厚约4 }m.分别进行HE染色和免疫组化染色.采用Envision免疫组化染色法(两步法)，光学显微镜下，采用中文IMS细胞图像分析系统，每张片随机取3个视野，对SP,VIP 含量进行定量分析，并对免疫组化指数进行统计.另可测大鼠VIP.SP（2）方法①结肠肌间神经丛标本制作大鼠禁食12 h,3%戊巴比妥钠麻醉后,通过腹部正中切口暴露腹腔,切取整段结肠。
基础医学院《生理学》考试试卷(154)
基础医学院《生理学》课程试卷（含答案）__________学年第___学期考试类型：（闭卷）考试考试时间：90 分钟年级专业_____________学号_____________ 姓名_____________1、A型题（37分，每题1分）1. 夹闭两侧颈总动脉可引起（）。
A．两者都有B．心输出量减少C．动脉血压降低D．两者都无答案：D解析：2. 在引起和维持细胞内外Na＋、K＋不对等分布中起重要作用的膜蛋白是（）。
[西医综合2016研]A．通道B．离子泵C．膜受体D．载体答案：B解析：维持细胞内外Na＋、K＋不对等分布中起作用的膜蛋白为钠泵，钠泵是哺乳动物细胞膜中普遍存在的离子泵。
3. 决定肺部气体交换方向的主要因素是（）。
A．气体的溶解度B．肺泡膜的通透性C．气体分子量的大小D．气体的分压差答案：D解析：肺部气体转移是指气体分子不停地进行无定向运动，当不同区域存在分压差时，气体分子从分压高处向分压低处发生净转移，分压差越大，扩散速率越快。
因此分压差是决定肺部气体交换方向的主要因素。
4. 下列哪种激素属于类固醇激素？（）A．肾上腺素B．甲状旁腺激素C．甲状腺激素D．抗利尿激素答案：解析：5. 下列哪种情况下可发生高血钾？（）A．代谢性碱中毒B．血容量减少C．应用非保钾利尿剂D．给予胰岛素处理答案：B解析：项，血容量减少使肾小球钾的滤过减少，因肾血流量不足使肾小管钾的分泌也减少，可导致高血钾。
项，非保钾利尿剂使尿量增加，钾排出增加。
项，胰岛素使细胞外的钾转入细胞内，不会引起高血钾。
项，在近端小管除有Na＋H＋交换外，还有Na＋K＋交换，两者之间是竞争性抑制关系。
代谢性碱中毒时，小管液中H＋减少，Na＋H＋交换减少而Na＋K＋交换加强，使血钾浓度降低。
E项，醛固酮增加可促进钾的分泌，血钾浓度降低。
6. 关于神经纤维轴浆运输的描述，正确的是（）。
A．顺向和逆向轴浆运输的速度相等B．轴突内的轴浆并非经常在流动C．狂犬病病毒可经顺向轴浆运输而扩散D．与神经的功能性和营养性作用有关答案：D解析：7. 葡萄糖的重吸收需要（）。
预算说明书参考模板
预算说明书参考模板(总9页)--本页仅作为文档封面，使用时请直接删除即可----内页可以根据需求调整合适字体及大小--预算说明书参考模版本项目经费合计***万元，其中直接费用：***万元，间接费用***万元。
具体预算说明如下：（一）直接费用1．设备费：万元。
（1）恒温摇床：万元***蛋白表达、纯化系统的优化和获得大量的***蛋白是进行***药效学，临床药代动力学和临床前安全性评价的重要前提，也是本项目实施过程中的重要环节。
而在蛋白表达和纯化过程中，首先需要利用恒温摇床进行摇菌，进而在***中获得重组蛋白。
因目前本课题组内较小，同时使用较频繁，为了保证本项目的顺利实施，计划添置水浴恒温摇床一台供***纯化表达专用，品牌为***，单价约18000元。
(2) -40℃低温冰柜：万元。
本项目计划获得大量的***蛋白用于***药效学，临床药代动力学和临床前安全性的评价。
为了保证本项目实施过程中纯化获得的***蛋白的存储，本项目计划添置*** LW-50L262 -40℃低温冰柜一台，存储不同批次的***蛋白，单价约万（2）冰箱：万元。
在进行***药效学、临床前药代动力学和临床前安全性评价过程中涉及大量的动物实验，需要储存大量的动物组织样本，本项目计划添置***BED-578WEPF冰箱一台，专门储存动物实验的组织样本，单价约万元。
2. 材料费：万元。
(1)蛋白纯化填料：合计24万元.利用带有***标签蛋白纯化填料和样品纯化填料***对带***标签的重组表达蛋白进行纯化，同时利用内毒素检测试剂盒去除内毒素，获得不含内毒素的纯化蛋白。
（2）凝血酶：万元。
用于将已纯化的带***标签的***进行酶解，以除去***标签，获得纯化蛋白。
（3）内切酶和连接酶：万元。
用于***纯化工艺的优化，对***的关键基因进行修饰，基因克隆及表达。
包括***Ⅰ、***Ⅰ、***Ⅲ、***Ⅰ、***Ⅰ等5种常用内切酶及***连接酶，用于构建重组表达质粒进行双酶切，***公司产品，500U/支，各约需6000U。
基础医学院《生理学》考试试卷(1772)
基础医学院《生理学》课程试卷（含答案）__________学年第___学期考试类型：（闭卷）考试考试时间：90 分钟年级专业_____________学号_____________ 姓名_____________1、A型题（37分，每题1分）1. 物质跨膜转运过程中，对单纯扩散速度无明显影响的因素是（）。
A．物质的脂溶性大小B．物质在膜两侧的浓度差C．膜通道的激活D．膜对物质的通透性答案：C解析：三项，扩散的速度和方向取决于物质在细胞膜两侧的浓度差和膜对该物质的通透性。
细胞膜是双层脂质结构，故膜对各种物质的通透性取决于它们的脂溶性、分子大小和带电状况。
项，单纯扩散是一种简单的物理扩散，故不涉及膜通道的激活。
2. 与维生素B12吸收有关的内因子是胃黏膜中哪种细胞产生的？（）A．主细胞B．贲门腺细胞C．壁细胞D．黏液细胞答案：C解析：3. 黑质纹状体通路中的主要递质是（）。
A．甘氨酸B．乙酰胆碱C．多巴胺D． 5羟色胺答案：C解析：4. 凝血FⅧ的作用是（）。
A．使FⅩa对FⅡ的激活加快B．使FⅡa对FⅠ的激活加快C．使FⅨa对FⅩ的激活加快D．激活FⅨ答案：C解析：5. 超极化抑制是指（）。
A．两者都是B．突触后抑制C．突触前抑制D．两者都不是答案：B解析：6. 耳蜗底部病变时常导致（）。
A．高频听力受损B．低频听力受损C．传音性耳聋D．感音性耳聋答案：A解析：按基底膜的振动和行波理论，声波振动→鼓膜→卵侧窗膜→外淋巴→前庭阶、鼓阶→导致前庭膜、基底膜振动。
振动的方向从基底膜的底部开始→耳蜗顶部的方向传播。
声音频率不同，行波传播的远近和最大振幅出现的部位不同。
声波频率越高，行波传播越近，最大振幅出现的部位越靠近卵圆窗处。
因此耳蜗底部受损时主要影响高频听力，耳蜗顶部受损主要影响低频听力。
7. 在胃黏膜壁细胞完全缺乏时，病人不会出现的表现是（）。
[西医综合2016研]A．维生素B12吸收障碍B．食物蛋白质消化不良C．胰腺分泌HCO3－减少D．肠道内细菌加速生长答案：D解析：三项，胃黏膜壁细胞完全缺乏时，内因子分泌减少，导致维生素12吸收障碍。
血管活性肠肽及其类似物对大鼠腹腔肥大细胞功能的影响
（ ｄｃｌ ｏ ｅ ｅ Ｈｅａ ｎ ｅ ｉ ｆ ｃｅｃ ｎ ｅｈ ｏｏｙ Ｌ ｏａ ｇ ７ ０ ３ Ｃ ｉａ Ｍｅｉａ Ｃ ｌ ｇ ， ｎ ｎＵ ｉ ｍ ｔ ｏ ｉ ｅａ ｄＴ ｃｎ ｌ ， ｕｙｎ １０ ， ｈｎ ） ｌ ｖ ｙ Ｓ ｎ ｇ ４ Ａ ｓｒｃ ： ｂｅｔ ｅ Ｔ ｖ ｓｇｔ ｔｅｒｌ ｏ Ｉ ｄＶ Ｐａ ａ ｇｉ ｅ ｈ ｓ ｌ ｉ ｎ ｔ ｎｏ ｔ ｂ ｔａ ｔＯ ｊ ｃ ｖ ｏｉ ｅｔ ａ ｅ ｆ ｆ Ｐａ Ｉ ｌ ｔ ｙｉ ｏ ｅ ｆ ｃｉ ｒ ｉ ｎ ｉ ｅ ｈ ｏ ｏＶ ｎ ｎ ｏ ｎｈ ｐ ｏ ｇ ａ ｕ ｏ ｆ ａ ｌ
河 南科技大学学报 （ 医学版）
・
２０ 年 ９ ０８ 月
第２ 卷 第 ３ ６ 期
基础 医学 ・
血 管活性肠肽及 其类似 物对大 鼠腹腔肥大细胞功能 的影响
张
摘
鑫， 常笑雪， 杨石强， 黄
鹂， 张春瑞
要： 目的 研究血管活性肠肽（ ｗ） ｖ 对大 鼠腹腔肥大细胞功能 的影响。方法 分离、 纯化 ｓ Ｄ大 鼠腹腔肥
ＶＰ６２ 作用后大鼠腹腔肥大细胞组胺释放及 ａ内流明显增加、 Ｉ － ８ ｃ 细胞内 ｃ Ｍ Ａ Ｐ水平 明显降低， 并且这种变化与
ＶＰ ＶＰ －８ 间呈剂 量效 应关 系 ；－－ Ｉ、 Ｉ ２ 之 ６ Ｌ８Ｋ对 ⅥＰ 导 的肥 大细胞 组胺 释放 、 Ｃ 内流 的变 化无 明显 影响 。结论 诱 ８
ｒｌａｅ ａ ｄ ４Ｃａ ｉｆ ｘ ｏ ｅ ｍａ ｔｅ ｎ ｒ ｎ ｒａ ｅ ａ ｄ ｔｅ ｃ ｅｅ ｓ ５ ｎ ｕ ｆｔ ｓ ｅ ｓｗｅｅ ｉｃｅ ｓｄ， ｎ ｌ ｈ ｎ ＡＭＰ ｉ ｈ ｓ ｃ Ｈ ａ ｅ ｒ ａｅ ｈ ｎ ｔｅ ｍａｔ ｅ ｓＷ ｄ ｃｅ ｓｄ， ｓ
人血管活性肠肽ELISA检测试剂盒VIP试剂盒是固相夹心法酶
人血管活性肠肽ELISA检测试剂盒VIP试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知VIP 浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。
先将VIP和生物素标记的抗体同时温育。
洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。
再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。
产生颜色。
颜色的深浅和样品中VIP的浓度呈比例关系。
安全性1．避免直接接触终止液和底物A、B。
一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。
2．实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3．不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
操作注意事项1．试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。
稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
2．实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
3．不用的其它试剂应包装好或盖好。
不同批号的试剂不要混用。
保质前使用。
4．使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
5．使用干净的塑料容器配置洗涤液。
使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6．洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7．底物A应挥发，避免长时间打开盖子。
底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。
避免用手接触，有毒。
实验完成后应立即读取OD值。
8．加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9．按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
人血管活性肠肽ELISA检测试剂盒样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。
使用不含热原和内毒素的试管。
收集血液后，1000×g 离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。
1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。
血管活性肠肽瘤是怎么回事？
血管活性肠肽瘤是怎么回事？*导读：本文向您详细介绍血管活性肠肽瘤的病理病因，血管活性肠肽瘤主要是由什么原因引起的。
*一、血管活性肠肽瘤病因胰岛细胞根据其分泌激素的功能分为以下几种：1、B细胞(β细胞)，约占胰岛细胞的60%～80%，分泌胰岛素，胰岛素可以降低血糖。
缺乏胰岛B细胞将导致糖尿病的发生。
2、A细胞(α细胞)，约占胰岛细胞的24%～40%，分泌胰高血糖素，胰高血糖素作用同胰岛素相反，可增高血糖。
3、D细胞，约占胰岛细胞总数的6%～15%，分泌生长激素抑制激素。
遗传（30%）：此病的发生与遗传有关，如果父母或者是其他亲属患此病，后代就有可能引起此病。
所以说，血管活性肠肽瘤的发生与遗传有很大关系。
*二、发病机理血管活性肠肽瘤绝大多数为单个、孤立性的肿瘤，瘤体大小差异较大，直径为1.5～10cm不等。
肿瘤位于胰腺者占84%，其余为神经节细胞瘤、神经母细胞瘤和神经节母细胞瘤等;这些肿瘤沿自主神经干分布，也有位于肾上腺者，它们都具有VIPoma 的特点，并能分泌VIP。
位于胰腺的血管活性肠肽瘤中，80%系单发肿瘤，20%为多中心性肿瘤。
75%分布在胰体、尾部，25%分布在胰头。
有50%的胰源性VIPoma为恶性肿瘤，其中半数病人在作出诊断时已转移至肝脏或周围淋巴结中，也有的可转移至肺、胃或纵隔。
大多数神经源性VIPoma为良性，恶性者仅占10%。
胰岛细胞增生也是VIPoma综合征的原因之一，此时并无肿瘤存在。
*温馨提示：以上就是对于血管活性肠肽瘤病因，血管活性肠肽瘤是由什么原因引起的相关内容叙述，更多有关血管活性肠肽瘤方面的知识，请继续关注疾病库，或者在站内搜索“血管活性肠肽瘤”找到更多扩展内容，希望以上内容可以帮助到您！。
养荣润肠舒合剂对慢性传输型便秘SD大鼠结肠5-HT、VIP的影响
养荣润肠舒合剂对慢性传输型便秘SD大鼠结肠5-HT、VIP的影响邹跃;张虹玺【期刊名称】《辽宁中医杂志》【年(卷),期】2024(51)3【摘要】目的探讨慢性传输型便秘大鼠结肠黏膜5-羟色(5-hydroxytryptophan,5-HT)、血管活性肠多肽(vasoactive intestinal polypeptide,VIP)的含量,以明确中药制剂养荣润肠舒合剂对大鼠结肠5-HT、VIP表达的调节作用。
方法将60只健康的SD大鼠随机分为空白组10只,造模组50只(模型组10只、莫沙必利组10只、养荣润肠舒合剂高、中、低剂量组各10只)。
应用复方地芬诺酯灌胃(2 mL/200 g体质量)以复制慢性传输型便秘大鼠模型(每天1次,连续10 d)。
期间记录大鼠首次排便时间,并收集粪便、测量粪便剂量、含水量以判断造模是否成功。
复制模型成功后进行药物治疗,每天1次,连续10 d。
然后采用间接酶联免疫吸附试验(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)观测大鼠结肠5-HT、VIP的光密度(optical density,OD)值。
结果①与空白组比较,模型组SD大鼠的首次排便时间延后,且新鲜粪便的剂量、含水量减少,差异有显著统计学意义(P<0.01)。
②与模型组比较,莫沙必利组和养荣润肠合剂低、中、高剂量组治疗后大鼠的首次排便时间均提前,且粪便的含水率、重量除使用养荣润肠低组外均有所增长(P<0.01)。
③与莫沙必利组比较,养荣润肠舒合剂中组剂量组大鼠的一般状况最好,首次排便时间最接近莫沙必利组且较短于莫沙必利组,差异无统计学意义(P>0.05),新鲜粪便剂量最接近莫沙必利组且较重于莫沙必利组,差异无统计学意义(P>0.05),含水量明显优于莫沙必利组,差异有统计学意义(P<0.05);养荣润肠舒合剂高剂量组大鼠排便状况与莫沙必利组相差不大,差异无统计学意义(P>0.05);莫沙必利组大鼠排便状况明显优于养荣润肠舒合剂低剂量组,差异有显著统计学意义(P<0.01)。
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大鼠血管活性肠肽(VIP)酶联免疫分析（ELISA）
试剂盒使用说明书
厦门慧嘉生物科技有限公司
本试剂盒仅供研究使用。
药品名称：
通用名：大鼠血管活性肠肽(VIP)酶联免疫分析试剂盒
使用目的：
本试剂盒用于测定大鼠血清，血浆及相关液体样本中血管活性肠肽(VIP)含量。
实验原理
本试剂盒应用间接法测定标本中大鼠血管活性肠肽(VIP)水平。
用纯化的大鼠血管活性肠肽(VIP)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入已知浓度的血管活性肠肽(VIP)标准品和未知浓度的血管活性肠肽(VIP)待检样品，温育后，加入生物素标记的抗IgG抗体，再与链霉亲和素-HRP结合，形成免疫复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的血管活性肠肽(VIP)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠血管活性肠肽(VIP)浓度。
试剂盒组成
1 20倍浓缩洗涤液50ml×1瓶
9 标准品S1（180ng/L）0.5ml×1瓶
2 链霉亲和素-HRP6ml×1瓶标准品S2（120ng/L）0.5ml×1瓶
3 酶标包被板12孔×8条标准品S3（60ng/L ）0.5ml×1瓶
4 生物素标记的抗-IgG抗体6ml×1瓶标准品S4（30ng/L ）0.5ml×1瓶
5 显色剂A液6ml×1瓶标准品S5（15ng/L）0.5ml×1瓶
6 显色剂B液6ml×1/瓶10 密封袋1个
7 终止液6ml×1瓶11 封板膜3张
8 样品稀释液6ml×1瓶12 说明书1份
标本要求
1．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
2．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
操作步骤
1.根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。
每个标准品和空白孔建议做复
孔。
每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品，其余各步操作相同）、标准品孔、待测样
品孔。
然后在标准品孔中加入标准品50μl，在样本反应孔中先加入待测样品10μl再加入样品稀释液40μl（样品最终稀释度为5倍），盖上封板膜，轻轻振荡混匀，37℃温育45分钟。
3.配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用
4.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此
重复4次，拍干。
5.加生物素标记的抗-IgG抗体：每孔加入生物素标记的抗-IgG抗体50μl。
37℃温育30分
钟
6.洗涤：操作同4。
7.加链霉亲和素-HRP：每孔加入50μl的链酶亲和素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30
分钟。
8.洗涤：操作同4。
9.显色：每孔先加入显色剂A 50μl，再加入显色剂B 50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色
15分钟.
10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。
测定应在加终止
液后15分钟以内进行。
计算
以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值待入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。
注意事项
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。
一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4．如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先将样本稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以稀释倍数（×5×n）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．本试剂不同批号组分不得混用。
显色剂B请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。
检测范围：1.56pg/ml-100 pg/ml
灵敏度：0.39 pg/ml
规格：
96人份/盒
保存条件及有效期
1．试剂盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6个月。