第17章__PCR基因扩增仪
分子生物学实验室仪器使用说明书
分子生物学实验室仪器使用说明书一、引言分子生物学实验室仪器的使用是进行基因研究和分析的重要环节，正确的仪器操作和维护对于保证实验结果的准确性具有至关重要的作用。
本说明书旨在提供对分子生物学实验室仪器的正确使用方法和维护技巧的指导，以确保实验室工作的顺利进行。
二、常用仪器1. 基因扩增仪基因扩增仪是分子生物学实验室常用的仪器之一，其中最常见的是PCR仪。
以下是PCR仪的使用步骤：- 将待扩增的DNA模板、引物和试剂添加至PCR管或96孔板中；- 根据所需的扩增程序，在PCR仪面板上设置合适的温度和时间参数；- 启动PCR仪，开始扩增；- 扩增结束后，及时取出试管或孔板，并进行下一步实验操作。
2. 凝胶电泳仪凝胶电泳仪主要用于观察DNA、RNA或蛋白质的迁移情况以及分子大小的测定。
以下是凝胶电泳仪的使用步骤：- 准备所需的琼脂糖凝胶，并注入到电泳槽中；- 将待检测的样品混合液加入到电泳槽中的样品孔中；- 在电泳槽两侧连接正负极电源，并设置合适的电压和时间参数；- 启动电源，进行电泳；- 电泳结束后，取出凝胶，进行染色或进一步分析。
3. 离心机离心机用于分离混合物中的固体颗粒和液体，是分子生物学实验室必备的仪器之一。
以下是离心机的使用步骤：- 将待离心的样品均匀加入离心管中，并保持离心管的平衡；- 将离心管放入离心机转盘的相应位置，并注意转盘的平衡；- 根据离心速度和时间要求，设置合适的参数；- 启动离心机，开始离心过程；- 离心结束后，小心取出离心管，注意避免离心管的倾斜或颠倒。
三、常见问题及处理方法1. 仪器出现异常- 若仪器出现异常操作或显示异常，应首先检查是否按照正确的使用步骤进行操作；- 仔细阅读仪器说明书，查看是否存在使用特殊注意事项；- 若仍无法解决问题，及时联系仪器维修人员进行检修。
2. 仪器维护- 每次使用仪器后，应进行基本的清洁和消毒，保持仪器干净整洁；- 定期检查仪器是否正常，如电源是否接触良好，仪器表面是否有明显损坏等；- 根据仪器的要求，及时更换耗材和维护配件。
pCR仪操作流程
pCR仪操作流程PCR（聚合酶链反应）仪是一种广泛应用于分子生物学实验室的设备，用于扩增和复制DNA序列。
正确的操作流程对于获得准确的实验结果至关重要。
本文将介绍pCR仪的基本操作流程，以确保您能够正确操作和利用该设备。
1. 准备实验材料和试剂在进行pCR实验之前，确保准备齐全所需的实验材料和试剂。
这些包括DNA模板、引物、dNTPs（脱氧核苷酸三磷酸盐）、聚合酶、反应缓冲液、电泳试剂等。
确保所使用的试剂和材料都在保质期内，并按照实验要求进行储存。
2. 设定PCR参数根据实验需要，设置PCR参数，包括温度和时间控制。
一般来说，PCR反应需要进行一系列的循环，每个循环包括三个主要的步骤：变性、退火和延伸。
根据模板DNA的GC含量和引物的特异性，可以确定合适的变性温度和时间，引物的退火温度和延伸温度。
确保参数的设定符合实验要求。
3. 加入试剂和混合根据PCR反应的体积要求，将所需试剂和混合物精确配制。
通常情况下，将DNA模板、引物、dNTPs、聚合酶和反应缓冲液组合在一起，并轻轻混合。
通过离心操作，使反应混合物沉淀在管底，减少液面上的气泡。
4. 加热反应混合物将反应混合物置于已预热的PCR仪中。
确保反应管的盖子紧闭，以防止外界的污染和蒸发。
根据设定的PCR参数，在仪器中进行加热和循环操作。
确保温度的变化符合实验要求，以保证DNA的扩增和复制过程能够进行顺利。
5. 检测PCR产物PCR反应完成后，取出反应管，并将反应产物进行检测。
最常用的方法是利用琼脂糖凝胶电泳，将PCR产物在电泳仪中进行分离。
通过比较PCR产物与分子量标准品之间的迁移距离，可以确定扩增的目标DNA片段的大小。
6. 结果分析和记录根据电泳结果，分析PCR反应的结果。
正常情况下，目标DNA片段应该有明确的条带出现。
记录结果，并进行数据分析和解读。
如果实验结果不符合预期，可能需要重新优化PCR反应的条件或调整试剂的浓度。
总结：pCR仪操作流程涉及到实验前的准备、PCR参数的设定、试剂的加入和混合、反应体系的加热、PCR产物的检测、结果分析和记录等步骤。
PCR基因扩增
PCR 基因扩增一、原理1985美国PE-Cetus 公司的Mullis 等人建立了一种大量快速扩增特异DNA 片段的系统，称之为聚合酶链式反应（PCR, polymerase chain reaction ）。
由于这一技术在分子生物学以至整个生命科学领域的广泛应用，Mullis 获得了1993年诺贝尔化学奖。
它的实质就是一个体外酶促DNA 复制反应体系，包括模板DNA 、引物（对）、热稳定DNA 聚合酶、dNTP 和反应缓冲液。
一般PCR 反应可扩增100~5000bp 的目的DNA 片段。
一个PCR 反应包括了三个步骤：变性（denature ）、退火（annealing ）和延伸（extention ）。
在94℃下模板热变性而双链解开；继而将反应体系降低温度使DNA 复性，若模板DNA 和引物有足够长度互补序列，则引物链可以和互补的模板链特定区域结合形成杂交分子；在72℃保温一定时间，在DNA 聚合酶的催化下，从引物3′不断合成模板链的互补链。
经过连续的重复反应过程，就可以对模板DNA 上与双引物结合序列之间的片段进行指数式扩增。
（一）、PCR 基本成分PCR 标准反应条件：模板 1pg-1μg引物 0.5-1μMDNA 聚合酶 1－5 单位Mg 2＋ 1.5-3mMdNTPs 200μMKCl 50 mM第n1、模板模板是PCR 的关键，模板的质量是PCR 成功的先决条件。
可以是DNA，也可以是cDNA；可以是双链DNA，也可以是单链DNA；可以是线性DNA，也可以是环状DNA。
最佳模板量取决于基因组的大小，100ng 到1µg 的人类基因组DNA，相当于3×104 到3×105 个分子。
所以对于单拷贝基因，这需要0.1μg 的人基因组DNA，10ng的酵母DNA，1ng 的大肠杆菌DNA.扩增多拷贝序列时，用量更少。
灵敏的PCR 可从一个细胞，一根头发，一个孢子或一个精子提取的DNA中分析目的序列。
pcr仪原理
pcr仪原理
PCR（聚合酶链反应）仪是一种用于扩增DNA片段的仪器。
其工作原理基于DNA的特性和一系列温度循环。
PCR仪主要由三个步骤组成：变性、引物S、延伸。
在PCR过程中，DNA模板首先被变性，即在高温下（通常为94-96°C），DNA双链分离成两个单链。
然后，在较低温度下（通常为50-65°C），引物S与DNA模板的互补序列结合形
成双链。
引物S是两条单链的DNA分子，它们分别与DNA
模板的起始和终止序列互补。
这两个引物将定义所需扩增片段的起始和终止位置。
最后，在适当的温度下（通常为72°C），DNA聚合酶将合成与DNA模板互补的新DNA链。
这个过程将重复多次（通常为20-40次），每一次循环都会在DNA模板基础上扩增两倍的DNA片段。
这样，通过PCR循
环反应，从一份很小的DNA样本可以得到大量的目标DNA。
PCR仪通过对温度的控制来实现PCR过程中的温度循环。
它
具备设定不同的温度值和时间，在不同的温度下完成PCR的
不同步骤。
通常，PCR仪能够快速升温和降温，以及精确控
制温度的稳定性。
总结来说，PCR仪利用温度循环的方法，通过变性、引物S
和延伸步骤，对DNA模板进行扩增，从而得到所需的DNA
片段。
PCR基因扩增原理
PCR 基因扩增实验原理﹑仪器试剂和操作步骤实验原理：PCR(Polymerase Chain Reaction)-聚合酶链式反应，可以选择性扩增一段DNA序列。
其基本步骤是，首先将待扩增的模板DNA变性使之成为单链，DNA样品中，特异性的引物能够与其互补的序列杂交，在dNTPs和Taq酶存在时，就可以合成模板DNA的互补链，反应完成后，将反应混合物加热使DNA双链变性，温度下降后，过量的引物又可以开始第二轮的合成反应。
这种延伸—变性—退火—延伸的循环可以重复多次，使所需要的DNA片段得到特异性的扩增。
1.变性：加热使模板DNA在高温下（94℃）变性，双链间的氢键断裂而形成两条单链。
2.退火：使溶液温度降至50～60℃，模板DNA与引物按碱基配对原则互补结合.3.延伸：溶液反应温度升至72℃，耐热DNA 聚合酶以单链DNA为模板，在引物的引导下，利用反应混合物中的4种脱氧核苷三磷酸（dNTPs），按5ˊ→3ˊ方向复制出互补DNA上述3 步为一个循环，即高温变性、低温退火、中温延伸3个阶段。
从理论上讲，每经过一个循环，样本中的DNA量应该增加一倍，新形成的链又可成为新一轮循环的模板，经过25～30个循环后DNA可扩增106～109倍。
典型的PCR反应体系由如下组分组成：DNA模板、反应缓冲液、dNTP、MgCl2、两个合成的DNA引物、耐热Taq聚合酶。
影响PCR的主要因素PCR技术必须有人工合成的合理引物和提取的样品DNA，然后才进行自动热循环，最后进行产物鉴定与分析。
引物设计与合成目前只能在少数技术力量较强的研究院、所进行，临床应用只需购买PCR检测试剂盒就可开展工作，PCR自动热循环中影响因素很多，对不同的DNA样品，PCR反应中各种成份加入量和温度循环参数均不一致。
现将几种主要影响因素介绍如下。
一、温度循环参数在PCR自动热循环中，最关键的因素是变性与退火的温度。
如操作范例所示，其变性、退火、延伸的条件是：94℃60s, 37℃60s, 72℃120s，共25～30个循环，扩增片段500bp。
PCR基因扩增仪操作步骤
PCR基因扩增仪操作步骤
1、首先准备好反应管；
2、打开机盖，将反应管平稳、端正的置入，盖好机盖；
3、打开电源开关，按照机器屏幕显示的提示设定程序，用
proceed键启动扩增，结束时出现“complete”，待风机停止工作，关闭电源。
注意事项：
（1）使用PCR仪时要严格注意本机的使用环境条件和对电源的要求；
（2）打开PCR仪机盖要轻，防止损坏机锁；
（3）PCR基因扩增仪工作时严禁打开机盖；
（4）要定期使用肥皂水清洗仪器的样品槽，不能使用强碱，高浓度酒精和有机溶剂擦洗；
（5）产品出现故障时要请专业的维修人员或厂家维修人员维修
冷冻离心机操作步骤
1、登记离心机使用登记本，检查使用状况。
2、检查箱体内是否有水分。
3、物体离心时应平衡物品：将需要离心的液体导入专
用离心杯内，要求液体的装量不要超过总体积的4/5,
然后在相应的天平进行平衡，旋紧盖筒。
4、装转子：打开离心机上盖，将相应的转子装入，调
试转子直到转好为之，盖上转子上盖，旋紧。
5、设置参数，当温度指针移到设定温度时，绿灯亮，
按下“START”键，此时机器开始正式工作。
在预
设时间完成以后，“STOP”键指示灯闪烁，机器停
止工作。
6、等待机器完全停止下来，“STOP”灯熄灭，转速为
零，打开机器上盖，打开转子上盖，取出离心物体，此时离心工作完成。
注意事项：
（1）、离心物体必须平衡，对称放入离心机转子内。
（2）、注意加速度调整，转子大小与加速度成反比。
PCR仪的使用步骤及原理
PCR仪的使用步骤及原理引言聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction，简称PCR）是一种在分子生物学研究中广泛应用的技术。
PCR仪作为PCR操作的关键工具，能够快速无误地扩增目标DNA 序列，为科学研究和临床诊断提供了重要的支持。
本文将介绍PCR仪的使用步骤及原理。
PCR仪的使用步骤以下是PCR仪的使用步骤：步骤一：准备反应体系1.准备PCR反应液，包括DNA模板、引物、核酸酶、缓冲液等。
2.将反应液分配到PCR试管中，确保每个试管的反应体系一致。
3.在一个试管中加入水作为空白对照。
步骤二：设置PCR仪的程序1.打开PCR仪，确保仪器处于正常工作状态。
2.设置PCR仪的反应程序，包括温度、时间等参数。
根据不同的PCR实验设计，设置合适的程序。
步骤三：装载样品1.将准备好的PCR试管放置在PCR仪的样品架上。
2.检查样品架是否放置正确，确保试管紧密接触PCR仪的加热块。
步骤四：运行PCR程序1.关闭PCR仪的盖子，启动程序运行。
2.PCR仪将根据设定的程序依次进行加热、变性、退火和延伸等反应步骤。
3.在PCR反应结束后，PCR仪会保持在设定温度，以保持PCR产物的稳定。
步骤五：PCR产物分析1.关闭PCR仪的电源，打开PCR试管。
2.可通过凝胶电泳、PCR产物可视化试剂等方法对PCR产物进行分析。
3.根据实验需求，进一步处理PCR产物。
PCR仪的原理PCR仪采用了温度循环技术，利用特定的酶（聚合酶）和核酸引物来引导DNA链的复制。
其原理主要包括以下三个步骤：1.变性（Denaturation）：通过升高温度（通常为95℃），使DNA双链分离成两条单链DNA。
2.引物结合（Annealing）：降低温度（通常为55-60℃），使引物与目标序列的单链DNA互补结合。
3.延伸（Extension）：增加温度（通常为72℃），使聚合酶在引物的引导下合成新的DNA链。
通过不断重复这三个步骤，PCR仪可以在短时间内扩增特定的DNA序列。
PCR基因扩增仪习题
4．压缩机PCR基因扩增仪：属于第二代PCR基因扩增仪，由压缩机自动控温，金属导热。
5．Overshooting：指升温过程中，由于一些加热元件，比如半导体、金属块本身会积蓄能量，虽然温度探头探测到温度到达了设定温度，但半导体、金属块上积蓄的能量仍然会传给PCR体系，造成实际的温度高于设定的温度。
3．PCR基因扩增仪按照变温方式的不同可分哪几类？分别有什么特点。
答：PCR基因扩增仪按照变温方式通常有以下三类：
（1）水浴式PCR仪：变温快、时间准、温度均一，但体积大，自动化程度不高。
（2）变温金属块式PCR仪：通过半导体加热和冷却，并由微机控制恒温和冷热处理过程。装置比较牢固耐用，温度变换平稳，有利于保持Taq DNA聚合酶的活性。
（3）变温气流式PCR仪：以空气作为热传播媒介，由大功率风扇及制冷设备提供外部冷空气而制冷。成本较低；安全程度高。微机配上软件，可灵活编程。
4．什么是梯度PCR仪？它有什么优点？
答：梯度PCR仪是由普通PCR仪衍生出的带梯度PCR功能的基因扩增仪。在反应过程中每个孔的温度控制条件可以在指定范围内按照梯度变化，根据结果，一步就可以摸索出最适合的反应条件。使用梯度PCR仪，多次实验可在一台仪器上完成，既节省实验时间，提高实验效率，又节约实验成本。
（3）各孔独立控温的定量PCR仪：各孔独立控温，适合多指标快速检测。但是上样不如传统方法方便，而且需要独特的扁平反应管，使用成本较高。
7．PCR基因扩增仪的温度控制包括哪些方面？
答：PCR基因扩增仪的温度控制是决定PCR反应能否成功的关键，主要包括温度的准确性、均一性以及升降温速度等方面。
PCR仪的原理和使用
PCR仪的原理和使用PCR（聚合酶链反应）仪是一种用于扩增和复制DNA序列的实验仪器。
PCR反应是一种体外的快速扩增DNA序列的方法，其原理是在适当的反应条件下，使用DNA聚合酶及其引物以及模板DNA，通过反复进行三步循环的温度变化（变性、退火、扩增），最终可以快速扩增目标DNA。
PCR仪是为了实现PCR反应而专门设计的仪器，它可以精确控制反应体系的温度和时间。
PCR仪的主要组成部分包括温控模块、光学检测模块、控制模块和显示模块。
温控模块负责精确控制反应体系的温度，通常由Peltier元件和温控系统组成。
光学检测模块用于检测PCR反应过程中产生的荧光信号，通常采用光电二极管或光电倍增管等光电检测器件进行信号检测。
控制模块用于控制PCR反应的参数，如温度、时间等，通常由控制电路和软件程序组成。
显示模块用于实时显示PCR反应的结果，通常采用液晶显示屏或数码显示器。
1.准备反应体系：准备PCR反应所需的试剂和试管，如模板DNA、引物、dNTPs等。
根据实验需求确定反应体系的配比和容量。
2.设定PCR程序：在PCR仪的控制模块中设定PCR反应的程序，包括变性温度、变性时间、退火温度、退火时间和扩增温度等参数。
根据模板DNA的碱基序列和引物设计合理的PCR程序。
3.装载反应体系：将预先配制好的PCR反应体系装入PCR管或PCR片中，确保反应体系的充分混匀和无气泡。
4.温度调节：将装载好的PCR反应体系放入PCR仪中，并通过温控模块将温度快速升至设定的变性温度，保持一段时间进行DNA的变性。
5.引物退火：将温度降至设定的退火温度，以使引物与模板DNA结合。
通常，引物的退火温度低于模板DNA的熔解温度，以保证引物与DNA的特异性结合。
6.DNA扩增：将温度升至设定的扩增温度，此时DNA聚合酶开始工作，引物在模板DNA上进行扩增反应。
在每个PCR循环中，DNA的复制数量将翻倍。
7.反复循环：根据设定的PCR程序，反复进行温度变化循环，以使DNA的扩增倍数不断增加。
PCR基因扩增仪
第二节 PCR扩增仪的分类与结构
SmartCyclerⅡ荧光定量PCR仪
第三节 PCR扩增仪的性能指标、 操作规程及常见故障的排除
一、PCR扩增仪的性能指标 （一）温度控制 温度的准确性 温度的均一性 升降温的速度 不同模式下的相同温度特性
第三节 PCR扩增仪的性能指标、 操作规程及常见故障的排除
第二节 PCR扩增仪的分类与结构
Rotor-Gene 3000荧光定量PCR仪
Light CycleTM荧光定量PCR仪
第二节 PCR扩增仪的分类与结构
Light CycleTM荧光定量PCR仪结构示意图
第二节 PCR扩增仪的分类与结构
各孔独立控温的定量PCR仪 不同样品槽分别拥有独立的智能升降温模块， 各孔独立控温，适合多指标快速检测。 SmartCyclerⅡ的软件允许一台仪器同时操 作六个样品模块，既满足高速批量要求，又 能灵活运用，还可实现任意梯度反应。 SmartCyclerⅡ上样不如传统方法方便，而 且需要独特的扁平反应管，使用成本较高。
第四节 PCR扩增仪的应用
一、感染性疾病的分子诊断和研究 二、遗传性疾病的分子诊断和研究 三、恶性肿瘤的分子诊断和研究 四、PCR扩增仪在移植配型上的应用 五、PCR扩增仪在法医学上的应用 六、PCR扩增仪在分子生物学其他领域的应用
第一节 PCR基因扩增仪的工作原理
以不同温度的水浴锅串联成一个控温 体系。 样品与水直接无缝接触，控温准确， 温度均一性好，无边缘效应。 体积大，自动化程度不高，需人为干 预，更换水浴锅时控温不稳定。
第一节 PCR基因扩增仪的工作原理
由半导体自动控温，金属导热，控温方便， 体积小，相对稳定性好。 仍有边缘效应，温度均一性尚有欠缺，各 孔扩增效率可能不一致，并且仍存在温度 overshooting现象。
基因扩增仪用途
基因扩增仪用途概述基因扩增仪是一种常用的实验室设备，用于在分子生物学和遗传学研究中扩增DNA片段。
它通过PCR技术（聚合酶链式反应）将少量的DNA模板扩增成大量的DNA产物。
基因扩增仪的使用广泛，对于基因测序、基因突变分析、基因克隆等研究具有重要意义。
本文将详细介绍基因扩增仪的用途及其在科研领域的重要性。
基因扩增基因扩增是指通过PCR技术将特定的DNA片段扩增成大量的复制品。
PCR技术是一种体外的DNA扩增技术，通过在试管中模拟DNA的自然复制过程，在特定的温度条件下，通过DNA引物与DNA模板的互补配对，聚合酶将DNA模板复制成两条新的DNA 链。
PCR技术可以在短时间内扩增出特定的DNA片段，从而满足科研工作者的需求。
基因扩增仪的用途1. 基因测序基因扩增仪在基因测序中起到关键作用。
在测序之前，需要对待测DNA片段进行扩增，得到足够多的DNA产物。
基因扩增仪可以在短时间内将DNA扩增到足够的数量，为后续的测序提供足够的样本。
2. 基因突变分析基因突变是指DNA序列发生改变，可以导致基因功能的变化。
通过基因扩增仪，可以将突变位点的DNA片段扩增，从而对突变进行分析。
这对于研究基因功能以及相关疾病的发生机制具有重要意义。
3. 基因克隆基因克隆是指将特定的DNA片段插入到载体中，形成重组DNA分子。
基因扩增仪可以在短时间内扩增出需要的DNA片段，为基因克隆提供充足的材料。
通过基因克隆，可以实现基因的表达和功能研究。
4. 基因表达分析基因扩增仪也在基因表达分析中得到广泛应用。
通过扩增目标基因的DNA片段，可以制备出大量的DNA模板，然后可以进行蛋白质表达分析。
这对于研究基因功能以及相关疾病的发生机制具有重要意义。
基因扩增仪的重要性基因扩增仪在科研领域的重要性不言而喻。
它为研究人员提供了快速、高效的DNA扩增方法，极大地促进了基因研究的进展。
通过基因扩增仪，科研人员可以在短时间内扩增出大量的DNA片段，为后续的研究提供了充足的样本。
PCR仪使用说明书
PCR仪使用说明书一、产品概述PCR仪是一种用于聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）的仪器，可以在短时间内扩增DNA片段。
本产品适用于科研、生物医学、检验检疫等领域的实验室使用。
二、安全注意事项1. 在操作PCR仪之前，请阅读本说明书并按照指导进行操作。
2. 在进行任何操作前，请确保仪器已通电并离开其他设备等易燃物。
3. 使用PCR仪时，请佩戴防护眼镜和手套，避免接触到热表面。
4. 请确保PCR仪处于平稳的工作台上，并避免晃动或移动仪器。
5. 操作结束后，请先关闭电源并等待仪器冷却后再进行其他操作。
三、仪器准备1. 将PCR仪放置在平稳的工作台上，确保周围环境通风良好。
2. 将仪器连接电源，并按下电源按钮打开仪器。
3. 在仪器上方放置一个金属均热模块，保证其与PCR反应试管完全贴合。
4. 打开仪器顶部的盖子，将PCR反应试管放置于金属均热模块中。
四、操作步骤1. 打开PCR仪的控制面板，选择所需的温度和时间参数。
2. 使用移液器将反应物溶液加入PCR反应试管中，确保反应试管不溢出。
3. 关闭仪器盖子，并按下启动按钮开始PCR反应。
4. 反应结束后，仪器会自动停止运行并发出提示音。
5. 打开仪器盖子，使用取样针取出PCR反应试管。
五、维护保养1. 每次使用后，请用干净的软布擦拭PCR仪表面，确保无杂质残留。
2. 定期检查仪器电源线是否破损，并及时更换。
3. 如发现仪器有异常情况或功能故障，请立即停止使用并联系售后服务。
六、常见问题解决1. 仪器无法启动：请检查电源是否连接正常，仪器是否处于工作状态。
2. PCR反应过程中仪器发出异常噪音：请检查反应试管是否放置正确，金属均热模块是否贴合紧密。
3. PCR反应结果异常：请检查反应液配制是否准确，温度和时间参数设置是否合适。
七、技术支持如需进一步的技术支持或相关咨询，请联系我们的售后服务团队，我们将竭诚为您解答问题并提供帮助。
pcr 仪工作原理
pcr 仪工作原理PCR（Polymerase Chain Reaction）是一种重复扩增DNA序列的技术，在医学、生物学和犯罪学等领域被广泛应用。
PCR仪是PCR技术的关键设备，它基于热循环反应原理，通过在不同温度下的一系列扩增步骤，迅速产生大量目标DNA。
下面将详细介绍PCR仪的工作原理。
PCR仪主要由热循环装置、温度控制系统、检测装置和数据采集与分析系统组成。
热循环装置通常由Peltier元件构成，能够迅速调整反应体系的温度。
温度控制系统利用传感器监测反应体系的温度，并对Peltier元件进行精确的温度调节。
PCR反应按照一定的温度程序进行，通常包括三个主要步骤：变性、退火和延伸。
在变性步骤中，PCR反应管中的目标DNA被替代为两个单链DNA，需要高温（95°C）来使DNA双链断裂。
在退火步骤中，反应管中的引物结合到目标DNA的两个单链上，温度被降低到适宜引物结合的温度（一般为50-65°C）。
在延伸步骤中，温度被升高到恶劣范围，使DNA聚合酶酶活化，并沿着引物从3'末端向5'末端逐渐合成新的DNA链。
PCR仪通过精确控制反应体系的温度，在一个PCR循环内完成上述三个步骤。
循环的次数决定了扩增DNA的量，并且可以进行数十到数百次。
每次循环都会使目标序列的数量成倍增加，从而使其扩增到检测或研究所需的程度。
PCR仪还配备了光学系统，用于实时监测PCR反应的进展。
在PCR反应中，DNA的含量与荧光信号的强度相关联。
检测装置通过激发和检测荧光信号，可以定量检测PCR反应的结果，并即时输出结果。
数据采集与分析系统则负责收集、处理和分析PCR反应过程中产生的数据，如荧光信号强度、时间和温度等。
根据系统预设的阈值和算法，可以实现结果的定量分析、目标序列的定位和检测。
综上所述，PCR仪通过精确控制温度和光学检测系统，将目标DNA在体外进行大规模的扩增。
其工作原理基于热循环反应，通过不同温度下的一系列扩增步骤，使目标DNA得以迅速扩增。
生物实验常用仪器和实验室技能
生物实验常用仪器和实验室技能生物实验常用仪器和实验室技能随着时间的推移，生物学研究技术的不断进步，新的仪器和技术不断涌现。
在生物学研究过程中，仪器和技能的使用是不可或缺的。
本文将着重探讨2023年生物学实验室中常用的仪器以及相应的实验技能。
一、PCR扩增仪PCR扩增仪是生物学实验室中的一个核心设备，它是进行多种分子生物学和遗传学实验的关键工具。
PCR扩增仪是通过PCR技术不断复制DNA片段，从而产生大量可用于研究的DNA样品。
随着技术的发展，PCR扩增仪不断升级，不断推陈出新，具有更高的准确性和更高的扩增速度。
要想在PCR实验中取得良好的结果，必须具备一些实验室技能。
首先，需要精确制备PCR反应体系，测量反应物的浓度，并控制反应过程中的时间和温度。
其次，灵敏的 PCR 扩增仪需要有良好的维护和管理，以确保每次实验都能够得到准确的结果。
二、电泳仪电泳仪是常用的生物学实验室仪器之一，用于分离和分析DNA、RNA和蛋白质。
电泳仪分为几种不同类型，包括聚丙烯酰胺凝胶电泳仪和琼脂糖凝胶电泳仪。
每种仪器都有各自的优势和劣势，可以根据需要进行选择。
在实验技能方面，电泳仪的操作相对简单，但仍需要注意实验条件。
例如，正确的样品制备和反应缓冲液的选择对分离结果的准确性和重现性至关重要，需要在实验过程中专注和准确。
三、细胞培养箱细胞培养箱是生物实验室中不可或缺的设备之一。
它提供了一种控制温度、湿度和CO2水平的环境，保护细胞不受外界环境的影响，帮助实验人员进行不同类型的细胞实验。
在2023年，细胞培养箱的性能和功能将更加智能化和高效。
正确维护细胞培养箱是至关重要的。
实验室技能包括维护箱子的清洁，替换污染过滤器和确保温度和湿度的准确性。
管理员需要了解温度和湿度传感器的性能和特性，以确保细胞培养过程的成功。
四、显微镜显微镜是生物学实验室中最基本的工具之一。
它被广泛用于观察和分析细胞、组织和器官的形态和结构。
随着时间的推移，显微镜的分辨率和分析能力有了极大的提高。
分子生物学领域常用的实验室仪器介绍
分子生物学领域常用的实验室仪器介绍分子生物学领域是现代生命科学的重要分支之一，它研究的是生物分子层面的生命过程，旨在深入揭示生命的本质和机制。
而在分子生物学研究中，实验室仪器则是不可或缺的工具，它们不仅可以帮助研究者进行实验操作，还能够提高实验结果的可靠性和精度。
本文将为大家介绍分子生物学领域常用的实验室仪器。
一、PCR扩增仪PCR（聚合酶链式反应）扩增技术是分子生物学领域中最常用的实验技术之一，是通过对核酸单链进行不断反复的扩增，从而获得足够多的样品用于后续的实验研究。
PCR扩增仪是一种能够精确控制温度并产生稳定温度的设备，它可以通过快速升温和降温的方式对PCR反应的反应体系进行加热和冷却，以满足PCR反应各个步骤所需的不同温度条件。
根据不同的实验需求，PCR扩增仪通常有单块、双块和四块等不同规格型号。
二、电泳仪电泳是一个常见的探测和分离生物分子的方法，尤其在DNA和RNA分子的研究中应用广泛。
电泳仪则是进行电泳实验的设备。
电泳仪根据不同的实验需求、对样品大小和数量的要求，可以选择垂直电泳仪、平板电泳仪、毛细管电泳仪、聚丙烯酰胺凝胶等不同类型的电泳仪。
其中，聚丙烯酰胺凝胶电泳仪是目前应用最广泛的电泳仪之一，它可以以高效、稳定和可重复的方式对生物分子进行分离、检测和纯化。
三、荧光定量PCR仪荧光定量PCR（实时PCR）技术是PCR技术的一种延伸，它通过检测PCR反应过程中荧光信号的变化动态监测扩增产物的累积情况，从而实时定量测定PCR反应产物的含量。
荧光定量PCR仪是荧光定量PCR技术实验的核心设备，它通过荧光信号的强度或增长速率来定量PCR反应物质的含量。
荧光定量PCR仪可根据实验数量和复杂程度的不同分为单通道和多通道两种类型。
四、显微镜生物显微镜是分子生物学领域中经常使用的设备，它主要用于观察、研究和记录细胞和组织样品的结构和形态特征，以及细胞间和分子间的相互作用和动态过程。
在生物领域中广泛应用多种类型的显微镜如荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、超高分辨率显微镜等。
PCR核酸扩增仪2解析课件
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30次循环后靶序列扩增的数量 ---（10亿）
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二、PCR核酸扩增仪工作原理与控温方式
❖ 在PCR反应中需以变性、退火、延伸三种温度为一 个循环，因此，设计PCR基因扩增仪就要能精确控 制温度，这对PCR反应十分关键。
❖ Taq DNA聚合酶的应用大大提高了PCR的效率，无 需在PCR反应过程中反复加入新鲜酶。Taq DNA聚 合酶酶促反应最适温度为70～75℃。
PCR仪温度控制，有：
水浴锅控温
压缩机控温
半导体控温
离心式空气加热控温 12
水浴锅控温
❖ 以不同温度的水浴锅串联成一个控温体系。 ❖ 样品与水直接无缝接触，控温准确，温度均
一性好，无边缘效应。 ❖ 体积大，自动化程度不高，需人为干预，更
换水浴锅时控温不稳定。
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压缩机控温
❖ 由压缩机自动控温，金属导热，控温较水浴锅方便， 一台机器便可完成整个PCR流程。但 压缩机故障率 高，边缘效应及温度overshooting现象严重。
❖ overshooting：升温过程中，由于一些加热元件， 比如半导体、金属块本身会积蓄能量，虽然温度探 头探测温度到达了设定温度，但这些积蓄的能量仍 然会传给PCR体系，造成实际的温度高于设定的温 度的现象。
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半导体控温
❖ 由半导体自动控温，金属导热，控温方便， 体积小，相对稳定性好。
❖ 缺点：仍有边缘效应，温度均一性尚有欠缺， 各孔扩增效率可能不一致，也存在温度 overshooting现象。
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第一节 PCR基因扩增仪工作原理
一、PCR技术的历史发展及原理 ❖ 聚合酶链反应(polymerase chain reaction，PCR)是一
种体外DNA扩增技术。在它发明以前，对于检测对象浓 度非常低的标本，人们没有办法用常规方法测定。 1971年，Kleppe等人首次在文章中准确、客观地阐述 了PCR方法。 1985年，美国PE-Cetus公司的Kary Mullis等人发明PCR技术。它推动了现代医学由细胞水 平向分子水平、基因水平发展，是DNA测序的基础，它 成为现代分子生物学发展过程中的一座里程碑。
PCR重点习题
PCR重点习题第十七章PCR基因扩增仪首页习题习题参考答案习题名词解释选择题简答题一、名词解释1．PCR技术2．TaqDNA聚合酶3．水浴锅PCR基因扩增仪4．压缩机PCR基因扩增仪5．overshooting6．undershooting7．半导体PCR基因扩增仪8．离心式空气加热PCR基因扩增仪9．梯度PCR仪10．原位PCR仪11．原位PCR技术12．荧光实时定量PCR技术13．位置的边缘效应14．模块温控模式15．反应管温控模式7．一步就可以摸索出最适合反应条件的PCR仪为（）A．普通PCR仪B．梯度PCR仪C．原位PCR仪D．荧光PCR仪E．实时PCR仪8．能在细胞内进行PCR扩增的PCR仪为（）A．普通PCR仪B．梯度PCR仪C．原位PCR仪D．荧光PCR仪E．实时PCR仪9．SteadySlope技术是下列哪一家公司的专利技术（）A．eppendorf公司B．MJ公司C．Cepheid公司D．Roche公司E．ABI公司10．应用SteadySlope技术的是哪种PCR仪（）A．普通PCR仪B．梯度PCR仪C．原位PCR仪D．荧光PCR仪E．实时PCR仪11．在下列哪种PCR仪扩增样品可以了解样品中DNA 原始拷贝数（）A．普通PCR仪B．梯度PCR仪C．原位PCR仪D．荧光实时PCR仪E．定性PCR仪12．以下是经过PCR扩增后得到的Ct值，哪个样品的DNA原始拷贝数最多（）A．样品A，Ct = 20B．样品A，Ct = 22C．样品A，Ct = 24D．样品A，Ct = 26E．样品A，Ct = 2813．以空气为加热介质的PCR仪是（）A．金属板式实时定量PCR仪B．96孔板式实时定量PCR仪C．离心式实时定量PCR仪D．各孔独立控温的定量PCR仪E．荧光实时定量PCR仪14．以下哪个PCR扩增仪的PCR扩增样品槽被设计为离心转子（）A．ABI 7500B．ABI 7900C．Light Cycle TMD．SmartCyclerⅡE．RG300015．以下哪个PCR扩增仪使用的是同一个激发光源和检测器（）A．ABI 7500B．ABI 7900C．Light Cycle TMD．SmartCyclerⅡE．RG300016．可以在同一台定量PCR仪上分别进行不同条件定量PCR反应的是（）A．ABI 7500B．ABI 7900C．Light Cycle TMD．SmartCyclerⅡE．RG300017．拥有独立智能升降温模块的是（）A．ABI 7500B．ABI 7900C．Light Cycle TMD．SmartCyclerⅡE．RG300018．容纳样品量大，无需特殊耗材的是（）A．ABI 7500B．ABI 7900C．Light Cycle TMD．SmartCyclerⅡE．RG300019．PCR基因扩增仪最关键的部分是（）A．温度控制系统B．荧光检测系统C．软件系统D．热盖E．样品基座20．“位置的边缘效应”是指（）A．温度的准确性欠佳B．温度的均一性欠佳C．边缘升降温速度快D．边缘升降温速度慢E．梯度模式和标准模式温度不一致21．PCR扩增仪升降温速度快有很多优点，以下哪一项应除外（）A．缩短反应时间B．提高工作效率C．消除位置的边缘效应D．缩短非特异性反应时间E．提高反应特异性22．在梯度模式下得出最佳反应条件，并以此条件在标准模式下单独做，但结果却不如人意，最有可能的原因是（）A．样品孔温度与设定温度不一致B．样品孔间的温度有差异C．样品孔位置的边缘效应较高D．升降温速度不够快E．不同模式温度特性有差异23．定量PCR扩增仪的关机次序一般为（）A．关软件→关PCR仪→关电脑B．关软件→关电脑→关PCR仪C．关PCR仪→关软件→关电脑D．关PCR仪→关电脑→关软件E．关电脑→关PCR仪→关软件【X型题】每题的备选答案中有两个或者两个以上正确答案。
pcr基因扩增仪实验内容
pcr基因扩增仪实验内容PCR基因扩增仪实验内容引言：PCR（Polymerase Chain Reaction）是一种重要的分子生物学技术，可以在短时间内扩增特定的DNA片段。
PCR基因扩增仪是实施PCR 技术的关键工具，它能够提供稳定的温度环境和反应条件，使得PCR反应可靠、高效。
本文将介绍PCR基因扩增仪实验的内容和步骤。
一、实验前准备：在进行PCR基因扩增仪实验之前，需要准备以下材料和试剂：1. 目标DNA样本：待扩增的DNA片段所在的起始DNA样本。
2. 引物：用于扩增目标DNA片段的两个引物，通常是15-30个碱基对长。
3. 反应液：包括Taq DNA聚合酶、缓冲液、dNTPs（脱氧核苷酸三磷酸盐）和MgCl2等。
4. PCR试管：用于装载反应液和DNA样本的小管子。
5. PCR基因扩增仪：提供稳定的温度环境和反应条件。
二、实验步骤：1. 实验前的准备工作：a. 将PCR试管放入PCR基因扩增仪中，预热至95°C，以灭活可能存在的DNA污染物。
b. 准备PCR反应液，根据反应体系比例将Taq DNA聚合酶、缓冲液、dNTPs和MgCl2等按需加入。
c. 加入目标DNA样本和引物，混匀。
2. PCR扩增程序的设置：PCR基因扩增仪通常具有程序设置的功能，根据所需扩增的DNA片段长度和引物特性，设置合适的PCR程序。
一般包括以下几个步骤：a. 热解：将反应体系加热至95°C，使DNA双链解开成单链。
b. 延伸：将温度降低至50-60°C，使引物与目标DNA序列的互补部分结合。
c. 扩增：将温度升高至72°C，Taq DNA聚合酶在此温度下活性最高，开始合成新的DNA链。
d. 延伸和扩增步骤循环进行，一般重复25-35次，以扩增目标DNA片段。
3. PCR反应后的处理：a. 保存PCR扩增产物：将PCR扩增产物保存在低温环境下，以防止降解。
b. 分析PCR产物：可以使用琼脂糖凝胶电泳等方法，对PCR扩增产物进行分析和检测。
简述pcr扩增仪的基本工作原理
简述pcr扩增仪的基本工作原理随着科技的发展，从手工制作到机械化自动制作，从手工检测到机械化自动检测，机械化自动化的检测技术也给人们的生活带来了极大的便利，PCR扩增仪就是其中的一种重要设备。
PCR（Polymerase Chain Reaction，聚合酶链反应）扩增仪是一种以聚合酶链反应技术为基础的现代生物技术，它以模拟人类体内DNA复制的方式，在体外实现生物分子化学反应，从而实现大量基因片段的复制，并对特定的基因进行定位检测，从而更多的为其它生物学研究打下基础。
PCR扩增仪的工作原理是：首先将需要扩增的DNA放入PCR反应管中，然后添加一种特殊的酶（叫做聚合酶），加入一定量的核酸引物，最后将反应管放入PCR扩增仪中，PCR扩增仪完成模拟体内DNA 复制的流程。
首先PCR扩增仪会将反应管中DNA模板温度降至94-95°C，使其可以分离出DNA双链，然后将温度提高至55-65°C，使DNA聚合酶可以催化核酸引物，形成DNA片段，最后将温度提高至72-75°C，使聚合酶可以催化DNA片段的界面，完成DNA的复制。
整个过程会迭代多次，一次反应的DNA片段的复制数会指数增长，最终得到大量的样品片段，实现对特定基因的检测。
PCR扩增仪是一台具备复杂功能的精密仪器，其检测的精度和效率取决于控制反应温度的精度。
因此有些PCR扩增仪使用了温度控制芯片，可以实现更加精确的温度控制，这样一来，能更好地保证检测精度和效率。
此外，有些PCR扩增仪还搭载了双聚合酶系统，可以将反应时间缩短，并实现更大范围的基因检测，具有更好的检测效果。
PCR扩增仪已经成功应用于医学诊断领域，特别是在HIV、乙肝病毒、癌症等重大疾病诊断方面，它可以使检测者在最短的时间内得到准确的检测数据，为疾病的早期诊断和干预提供了技术支持。
而PCR扩增仪也广泛用于生物分子研究领域，如检测基因组，可调节基因，小RNA等，为科学家提供大量的研究素材。
pcr仪的结构
pcr仪的结构PCR仪，也称为PCR扩增仪或聚合酶链反应仪，是一种实验室设备，用于执行聚合酶链反应（PCR）。
PCR仪的主要功能是在精确控制的条件下提供PCR所需的温度变化，以实现DNA的扩增。
PCR 仪的结构通常包括以下几个主要部分：1. 加热块：PCR仪的核心部分，用于加热和冷却反应混合物。
加热块通常由铝或不锈钢制成，具有良好的热传导性能。
2. 温控系统：包括温度传感器（如热敏电阻或热电偶）和加热/冷却元件（如加热器、珀尔帖元件或压缩机）。
温控系统确保加热块能够快速准确地达到和维持预设的温度。
3. 反应室或孔板：PCR反应混合物放置的地方。
这些可以是标准的PCR板（通常有96孔），也可以是特殊设计的反应室，用于更小的或特殊形状的管。
4. 盖子或盖子加热器：用于保持反应混合物在扩增过程中密封，并防止污染。
一些PCR仪具有盖子加热器，用于在热循环过程中保持盖子的温度，以防止凝结。
5. 控制面板：用于输入和显示操作参数，如温度、时间、循环次数等。
现代PCR仪通常具有触摸屏或图形用户界面。
6. 计算机控制系统：用于控制PCR循环过程，存储和执行程序，以及记录实验数据。
一些PCR仪可以通过计算机或网络进行远程控制。
7. 电源和接口：PCR仪需要有稳定的电源供应，并且可能包括用于数据传输的接口，如USB、以太网或Wi-Fi。
8. 安全特性：包括过热保护和紧急停止按钮，以确保操作安全。
PCR仪的设计和功能可能因型号和制造商而异，但上述组成部分是大多数PCR仪共有的基本结构。
随着技术的发展，PCR仪也在不断进步，例如，实时PCR仪（qPCR仪）还包括光学系统，用于检测扩增过程中产生的荧光信号，从而实现定量分析。
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第二节 PCR扩增仪的分类与结构
MJ公司Chromo 4荧光定量PCR仪
ABI 7500荧光定量PCR仪
Bio-rad公司 iCycler荧光定量 PCR仪
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第二节 PCR扩增仪的分类与结构
离心式实时定量PCR仪 温度均一性较好 使用的是同一个激发光源和检测器，随时 检测旋转到跟前的样品，有效减少系统误 差 可容纳样品量少，有的需用特殊毛细管作 样品管，增加了使用成本，也不带梯度功 能
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第三节 PCR扩增仪的性能指标、 操作规程及常见故障的排除
升降温的速度： 升降温速度快，可以提高工作效率， 提高PCR反应特异性。 样品管与基座接触的紧密性、基座的 导热性、邻近样品管的相互影响都会影 响样品的实际升降温速度。
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第三节 PCR扩增仪的性能指标、 操作规程及常见故障的排除 不同模式下的相同温度特性： 带梯度功能的PCR仪，应考虑仪器在梯度 模式和标准模式下是否具有同样的温度特 性。 现有专利技术，能以同样的温度变化速率 到达所有设定的梯度温度。
1.掌握PCR基因扩增仪的工作原理和主要性能指标。 2.掌握梯度PCR仪和原位PCR仪的功能和特点。 3.掌握实时荧光定量PCR扩增仪的种类；金属板式实 时定量PCR仪和离心式实时定量PCR仪的特点。 4. 熟悉PCR技术的原理；PCR扩增仪的种类；荧光实 时定量PCR（RQ-PCR）技术原理。 5.了解PCR扩增仪的操作规程；PCR扩增仪常见故障 的排除；PCR扩增仪的应用。
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第二节 PCR扩增仪的分类与结构
梯度PCR仪 由普通PCR仪衍生出的带梯度PCR功能的 基因扩增仪。 每个孔的温度可以在指定范围内按照梯度 设置， 根据结果，一步就可以摸索出最适 反应条件。 使用梯度PCR仪，多次实验可在一台仪器 上完成，既节省实验时间，提高实验效率， 又节约实验成本。
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第一节 PCR基因扩增仪的工作原理
由半导体自动控温，金属导热，控温方便， 体积小，相对稳定性好。 仍有边缘效应，温度均一性尚有欠缺，各 孔扩增效率可能不一致，并且仍存在温度 overshooting现象。
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第一节 PCR基因扩增仪的工作原理
由金属线圈加热，采用空气作为导热媒介， 温度均一性好，各孔扩增效率高度一致 满足荧光定量PCR的高要求，直接发展为 离心式的定量PCR仪。
PCR扩增仪的性能指标 PCR扩增仪的操作规程 PCR扩增仪常见故障的排除
4. PCR扩增仪的应用
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内容提要
3.
① ② ③
PCR扩增仪的性能指标、操作规程及常见故障的 排除
PCR扩增仪的性能指标 PCR扩增仪的操作规程 PCR扩增仪常见故障的排除
4.
PCR扩增仪的应用
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教学基本要求
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第二节 PCR扩增仪的分类与结构
普通定性PCR扩增仪 水浴式PCR仪：由三个不同温度的水浴槽 和机械臂组成。 变温金属块式PCR仪：中心是由铝块或不 锈钢制成的热槽，上有不同数目甚至不同 规格的凹孔，用来放置样品管。 变温气流式PCR仪：由机壳、热源、冷空 气泵、控制器及辅助元件等组成。
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第三节 PCR扩增仪的性能指标、 操作规程及常见故障的排除
温度的准确性： 指样品孔温度与设定温度的一致性。 对PCR扩增仪而言温度控制就意味着质 量。
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第三节 PCR扩增仪的性能指标、 操作规程及常见故障的排除
温度的均一性： 指样品孔间的温度差异，关系到不同样 品孔之间反应结果的一致性。 “位置的边缘效应”会影响结果的可重 复性。
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第二节 PCR扩增仪的分类与结构
Rotor-Gene 3000荧光定量PCR仪
Light CycleTM荧光定量PCR仪
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第二节 PCR扩增仪的分类与结构
Light CycleTM荧光定量PCR仪结构示意图
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第二节 PCR扩增仪的分类与结构
各孔独立控温的定量PCR仪 不同样品槽分别拥有独立的智能升降温模块， 各孔独立控温，适合多指标快速检测。 SmartCyclerⅡ的软件允许一台仪器同时操 作六个样品模块，既满足高速批量要求，又 能灵活运用，还可实现任意梯度反应。 SmartCyclerⅡ上样不如传统方法方便，而 且需要独特的扁平反应管，使用成本较高。
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第二节 PCR扩增仪的分类与结构
SmartCyclerⅡ荧光定量PCR仪
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第三节 PCR扩增仪的性能指标、 操作规程及常见故障的排除
一、PCR扩增仪的性能指标 （一）温度控制 温度的准确性 温度的均一性 升降温的速度 不同模式下的相同温度特性
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第三节 PCR扩增仪的性能指标、 操作规程及常见故障的排除
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第二节 PCR扩增仪的分类与结构
原位PCR仪 由普通PCR仪衍生出的带原位扩增功能的 基因扩增仪。 其样品基座上有若干平行的铝槽，每条铝 槽内可垂直放置一张载玻片，每张载玻片 面均与铝槽紧密接触，温度传导极佳，控 温很精确。 配有支持原位PCR模块的PCR仪可以一机 两用，比较经济。
以不同温度的水浴锅串联成一个控温 体系。 样品与水直接无缝接触，控温准确， 温度均一性好，无边缘效应。 体积大，自动化程度不高，需人为干 预，更换水浴锅时控温不稳定。
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第一节 PCR基因扩增仪的工作原理
由压缩机自动控温，金属导热，控温较水浴锅方 便，一台机器便可完成整个PCR流程。 压缩机故障率高，边缘效应及温度overshooting 现象严重。 升温过程中，由于一些加热元件，比如半导体、 金属块本身会积蓄能量，虽然温度探头探测温度 到达了设定温度，但半导体、金属块上积蓄的能 量仍然会传给PCR体系，造成实际的温度高于设 定的温度，即overshooting。
（二）荧光检测系统
激发光源
检测器
卤钨灯光源 发光二极管
超低温CCD 光电倍增管
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第三节 PCR扩增仪的性能指标、 操作规程及常见故障的排除
（三）软件 简便的人性化设计最能满足其需求。新型 的PCR仪很注重程序编写的简易性，易学 易用，还具有实时信息显示、记忆存储多 个程序、自动倒记时、自动断电保护等功 能，很多还可以免费升级。
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第三节 PCR扩增仪的性能指标、 操作规程及常见故障的排除
（四）其他 多样化样品基座设计、 热盖等都使PCR仪越 来越人性化。
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第三节 PCR扩增仪的性能指标、 操作规程及常见故障的排除
二、PCR扩增仪的操作规程 普通PCR扩增仪的操作非常简便，接通电 源，仪器自检，设置温度程序或调出储存 的程序运行即可。 定量PCR扩增仪的操作和普通PCR仪基本 相同。 三、PCR扩增仪常见故障的排除
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第一节 PCR基因扩增仪的工作原理
PCR的基本原理
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第一节 PCR基因扩增仪的工作原理
二、PCR基因扩增仪的工作原理 从PCR反应基本原理可以看出，PCR 基因扩增仪工作关键是温度控制。
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第一节 PCR基因扩增仪的工作原理
PCR仪温度控制 水浴锅控温 压缩机控温 半导体控温 离心式空气加热控温
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第一节 PCR基因扩增仪的工作原理
一、PCR技术的发展及原理 1971年，Kleppe等人首次在文章中准确、 客观地阐述了PCR方法。 1985年，美国PE-Cetus公司的Kary Mullis等人发明PCR技术。
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第一节 PCR基因扩增仪的工作原理
PCR技术的本质是体外核酸扩增，加热使 双链DNA解开螺旋，在退火温度条件下引 物同模板DNA杂交，在Taq DNA聚合酶， dNTPs，Mg2+和合适pH缓冲液存在条件 下延伸引物，重复 “变性→退火→引物延 伸”过程至25-40个循环，呈指数级扩大待 测样本中的核酸拷贝数。
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第四节 PCR扩增仪的应用
一、感染性疾病的分子诊断和研究 二、遗传性疾病的分子诊断和研究 三、恶性肿瘤的分子诊断和研究 四、PCR扩增仪在移植配型上的应用 五、PCR扩增仪在法医学上的应用 六、PCR扩增仪在分子生物学其他领域的应用
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第一节 PCR基因扩增仪的工作原理
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第二节 PCR扩增仪的分类与结构
实时荧光定量PCR仪 金属板式实时定量PCR仪 离心式实时定量PCR仪 各孔独立控温的定量PCR仪
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第二节 PCR扩增仪的分类与结构
金属板式实时定量PCR仪 可作为普通PCR仪使用 可带梯度功能 可容纳的样本量大，无需特殊耗材 温度均一性欠佳，有边缘效应，标准曲线 的反应条件难以做到与样品完全一致