实验十一、细胞的冻存与复苏

实验十一、细胞的冻存与复苏
细胞的冻存与复苏是一种有效的保存和传播生物样品的方法。

该方法可以通过冷冻和贮存，将生物样品保存到未来任意时候使用。

本实验将介绍细胞的冻存和复苏实验步骤及注意事项。

实验步骤：
1. 细胞的收集和分装
首先，需要使用无菌采集工具收集待冻存细胞，如细胞培养板上的细胞。

然后，将细胞分装到无菌冷冻管中。

注意，每个冷冻管中应该放入适量的细胞，并确保其密封性。

2. 冷冻
将装有细胞的冷冻管放入无菌水浴中，降温至-80℃或更低温度。

然后，将冷冻管转移到液氮罐中，进行长期保存。

3. 冻存的解除和复苏
在复苏前，需要进行以下步骤：
① 快速去除细胞上的冷冻剂：将冷冻管直接转移到37℃预热好的培养基中，震荡或轻轻地摇晃，使其中的冷冻剂快速融化。

② 细胞生长：将冻存细胞转移到新的培养板中，并添加适量的培养基。

然后将培养板放入培养箱中，进行细胞的生长。

注意事项：
1. 冷冻剂的熟练使用
DMSO是一种常用的冷冻剂，其作用是帮助细胞避免冷冻伤害。

然而，DMSO也具有一定的毒性。

因此，在使用过程中，需要注意浓度的控制以及操作时的保护措施。

2. 细胞处理的无菌性
细胞的无菌性是决定细胞冻存和复苏成功的关键。

在操作期间，需要保持实验环境的无菌性，并避免细胞样品受到污染。

3. 冷冻剂和液氮的注意事项
冷冻剂和液氮是极冷的物质，具有很强的腐蚀性和危险性。

在操作过程中，需要戴上
手套和护目镜等防护器具，避免皮肤接触。

同时，要注意放置位置，避免冷冻剂和液氮的
泄漏。

总结：细胞的冻存和复苏是一种非常有用并且实践的实验方法。

如果正确操作和保护，可以保证样品的保存和传播，并且为后续的实验提供便利。