阿米巴利什曼原虫贾第虫隐孢子虫
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碘液染色检查包囊脓肿穿刺液涂片查滋养体利什曼原虫的生活史有前鞭毛体和无鞭毛体2个时期前者寄生于昆虫白蛉消化道内
实 验 五
（原虫1）
阿米巴、利什曼原虫 贾第虫、隐孢子虫
实验目的和要求
掌握:
溶组织阿米巴滋养体和包囊的形态特征； 利什曼原虫无鞭毛体； 隐孢子虫卵囊； 贾第虫滋养体的镜下形态特征； 各种常见原虫实验诊断方法。
形态变化大，大小为10-60μ m，具有侵袭性。
滋养体
包囊
滋养体（铁苏木素染色）
2、包囊：
包囊呈无色透明的圆球体，直径10-16μ m，胞质 内可呈棒状的糖原泡和拟染色体（营养储存结 构）。囊壁厚，囊内有泡状细胞核，四核包囊 为成熟包囊（感染期）。 碘染：呈棕黄色球形小体，可见核及核仁，胞质 内可见棕色的糖原泡及透明的拟染色体。 铁苏木素染色：包囊呈黑蓝色，核结构清晰。
（Leishmania）
利什曼原虫的生活史有前鞭毛体和无鞭毛体 2个时期，前者寄生于昆虫（白蛉）消化道内； 后者寄生于脊椎动物（如人、犬）单核吞噬细 胞内。
一、形态
1、无鞭毛体
又称利杜体，椭圆形或圆形，常见于Mφ 。 染色后，核较大，圆形，呈紫红色或红色，胞质蓝色。 内含有一个细小杆状的动基体，位于核旁。 动基体之前有一个点状基体，由此发出一条根丝体。
隐孢子虫
隐孢子虫卵囊抗酸染色
作
绘图：
业
溶组织阿米巴滋养体和包囊、 杜氏利什曼原虫前鞭毛体、 蓝氏贾第鞭毛虫滋养体。 思考题：溶组织阿米巴检查中的注意 事项？
熟悉:
利什曼前鞭毛体形态； 阿米巴和贾第虫的包囊碘液涂片染色的方法。
实验内容
示教内容（显微镜下）： (a) 利什曼前鞭毛体和无鞭毛体； (b) 蓝氏贾第虫滋养体和包囊 ； (c) 隐孢子虫卵囊； 观察内容：溶组织阿米巴滋养体和包囊；贾第虫滋养 体和包囊（铁苏木术染色）；利什曼无鞭毛体和前鞭 毛体（吉氏染色）；隐孢子虫卵囊（改良抗酸染色）。 操作内容：介绍淋巴结或者骨髓穿刺检查无鞭毛体 碘液涂片染色检查溶组织阿米巴的包囊； 电教：溶组织内阿米巴 作业：1、绘蓝第虫滋养体、溶组织阿米巴滋养体和包 囊、黑热病原虫前鞭毛体。 2、溶组织阿米巴检查中注意事项？
×400. Enlarged
×1000. Enlarged
×400. Enlarged
溶组织阿米巴包囊
二、实验诊断
病原学检查：
稀便：急性期稀便或脓血便中查滋养体，采用 生理盐水涂片法（注意事项：保温、防止尿 液污染、及时送检） 成形粪便：碘液染色检查包囊 脓肿穿刺液涂片查滋养体
免疫诊断：
杜氏利什曼原虫
二、诊断
1、病原学诊断： （1）粪便检查，为本病首选检查方法 对腹泻者，用NS直接涂片法查活动的滋养体；对成形粪 便，用碘液染色法查包囊。包囊形成有间歇，故检查 时应隔日1次并连续3次以上送检为宜。 （2）十二指肠液或胆汁检查： （3）小肠活组织检查，利用纤维胃镜取小肠粘膜组织 进行压片或切片染色检查滋养体。 2、免疫诊断： 3、DNA诊断：
Байду номын сангаас
溶组织内阿米巴
（Eatamoeba histolytica）
又称痢疾阿米巴，寄生于结肠和其 他组织内，引起阿米巴病。其生活 史中具有滋养体和包囊两种形态。
一、形态
1、滋养体：
活体时伸出伪足作活泼的变形运动-阿米巴动。 滋养体内外质分明，外质薄而透明，内质呈颗 粒状，可见被吞噬的红细胞和食物泡，具一 个圆形的泡状核。胞核直径4-7μ m，核膜薄， 其内缘有单层排列、大小一致的核周染色质 粒，核仁细小，居中，核仁与核膜之间隐约 可见网状的核纤丝。
×1000. Enlarged
铁苏木素染色
铁苏木素染色
瑞氏染色
2、包囊：
包囊椭圆形，囊壁较厚，大 小为8-14µm×7～10µm。 碘液染色后呈虫体黄绿色或 灰蓝色，囊壁与虫体之间有明 显空隙，核多偏于一端，数目 2-4个，囊内可见轴柱，鞭毛。 铁苏木素染色后，虫体呈蓝 黑色，囊壁透明，囊内结构清 晰可辨。
2、免疫诊断：用于个例辅助诊断或流行病 学调查。 （1）血清抗体检测： （2）循环抗原检测。 3、DNA诊断：PCR和分子杂交。
蓝氏贾第鞭毛虫
简称贾第虫，寄生于人体小肠， 引起以腹泻和消化不良为主要症状 的贾第虫病，分布于世界各地，儿 童和旅游者患病率较高，故有旅游 者腹泻之称。
一、形态
1、滋养体：
1、前鞭毛体
寄生于白蛉消化道内， 成熟虫体呈梭形. 核位于中部，动基体 在虫体前端，基体在 动基体之前. 由基体发出1根鞭毛 游离于体外，鞭毛摆 动活泼.
培养基中的前鞭毛体常聚集 呈簇，排列呈菊花状。
二、实验诊断
1、病原诊断：常用方法 （1）穿刺涂片检查：骨髓穿刺原虫检出率为80～ 90%， （2）培养法：将穿刺物接种于NNN培养基，置 22～250C温箱内，1周后查见运动活泼的前鞭毛 体则可确诊。 （3）动物接种法，将穿刺物接种于敏感动物，12月后取其肝、脾作涂片，染色镜检。 （4）皮肤组织检查法：
形似纵切的半个梨形， 前端钝圆，后端渐变尖 细，大小为9～ 21μ m×5～15µm，两侧 对称，背面隆起，腹面 扁平。 腹面的前部向内凹陷 而成吸盘，滋养体借此 吸附于肠粘膜上。
经铁苏木素染色 后，可见吸盘背侧胞质 内有2个圆形泡状核。 两核之间2条纵贯虫体 的轴柱，其前端有基体， 为鞭毛发源处，其中部 有1对半月形的中体。 虫体有4对鞭毛， 按伸出部位分别称为前 鞭毛，后鞭毛，腹鞭毛 和尾鞭毛。
实 验 五
（原虫1）
阿米巴、利什曼原虫 贾第虫、隐孢子虫
实验目的和要求
掌握:
溶组织阿米巴滋养体和包囊的形态特征； 利什曼原虫无鞭毛体； 隐孢子虫卵囊； 贾第虫滋养体的镜下形态特征； 各种常见原虫实验诊断方法。
形态变化大，大小为10-60μ m，具有侵袭性。
滋养体
包囊
滋养体（铁苏木素染色）
2、包囊：
包囊呈无色透明的圆球体，直径10-16μ m，胞质 内可呈棒状的糖原泡和拟染色体（营养储存结 构）。囊壁厚，囊内有泡状细胞核，四核包囊 为成熟包囊（感染期）。 碘染：呈棕黄色球形小体，可见核及核仁，胞质 内可见棕色的糖原泡及透明的拟染色体。 铁苏木素染色：包囊呈黑蓝色，核结构清晰。
（Leishmania）
利什曼原虫的生活史有前鞭毛体和无鞭毛体 2个时期，前者寄生于昆虫（白蛉）消化道内； 后者寄生于脊椎动物（如人、犬）单核吞噬细 胞内。
一、形态
1、无鞭毛体
又称利杜体，椭圆形或圆形，常见于Mφ 。 染色后，核较大，圆形，呈紫红色或红色，胞质蓝色。 内含有一个细小杆状的动基体，位于核旁。 动基体之前有一个点状基体，由此发出一条根丝体。
隐孢子虫
隐孢子虫卵囊抗酸染色
作
绘图：
业
溶组织阿米巴滋养体和包囊、 杜氏利什曼原虫前鞭毛体、 蓝氏贾第鞭毛虫滋养体。 思考题：溶组织阿米巴检查中的注意 事项？
熟悉:
利什曼前鞭毛体形态； 阿米巴和贾第虫的包囊碘液涂片染色的方法。
实验内容
示教内容（显微镜下）： (a) 利什曼前鞭毛体和无鞭毛体； (b) 蓝氏贾第虫滋养体和包囊 ； (c) 隐孢子虫卵囊； 观察内容：溶组织阿米巴滋养体和包囊；贾第虫滋养 体和包囊（铁苏木术染色）；利什曼无鞭毛体和前鞭 毛体（吉氏染色）；隐孢子虫卵囊（改良抗酸染色）。 操作内容：介绍淋巴结或者骨髓穿刺检查无鞭毛体 碘液涂片染色检查溶组织阿米巴的包囊； 电教：溶组织内阿米巴 作业：1、绘蓝第虫滋养体、溶组织阿米巴滋养体和包 囊、黑热病原虫前鞭毛体。 2、溶组织阿米巴检查中注意事项？
×400. Enlarged
×1000. Enlarged
×400. Enlarged
溶组织阿米巴包囊
二、实验诊断
病原学检查：
稀便：急性期稀便或脓血便中查滋养体，采用 生理盐水涂片法（注意事项：保温、防止尿 液污染、及时送检） 成形粪便：碘液染色检查包囊 脓肿穿刺液涂片查滋养体
免疫诊断：
杜氏利什曼原虫
二、诊断
1、病原学诊断： （1）粪便检查，为本病首选检查方法 对腹泻者，用NS直接涂片法查活动的滋养体；对成形粪 便，用碘液染色法查包囊。包囊形成有间歇，故检查 时应隔日1次并连续3次以上送检为宜。 （2）十二指肠液或胆汁检查： （3）小肠活组织检查，利用纤维胃镜取小肠粘膜组织 进行压片或切片染色检查滋养体。 2、免疫诊断： 3、DNA诊断：
Байду номын сангаас
溶组织内阿米巴
（Eatamoeba histolytica）
又称痢疾阿米巴，寄生于结肠和其 他组织内，引起阿米巴病。其生活 史中具有滋养体和包囊两种形态。
一、形态
1、滋养体：
活体时伸出伪足作活泼的变形运动-阿米巴动。 滋养体内外质分明，外质薄而透明，内质呈颗 粒状，可见被吞噬的红细胞和食物泡，具一 个圆形的泡状核。胞核直径4-7μ m，核膜薄， 其内缘有单层排列、大小一致的核周染色质 粒，核仁细小，居中，核仁与核膜之间隐约 可见网状的核纤丝。
×1000. Enlarged
铁苏木素染色
铁苏木素染色
瑞氏染色
2、包囊：
包囊椭圆形，囊壁较厚，大 小为8-14µm×7～10µm。 碘液染色后呈虫体黄绿色或 灰蓝色，囊壁与虫体之间有明 显空隙，核多偏于一端，数目 2-4个，囊内可见轴柱，鞭毛。 铁苏木素染色后，虫体呈蓝 黑色，囊壁透明，囊内结构清 晰可辨。
2、免疫诊断：用于个例辅助诊断或流行病 学调查。 （1）血清抗体检测： （2）循环抗原检测。 3、DNA诊断：PCR和分子杂交。
蓝氏贾第鞭毛虫
简称贾第虫，寄生于人体小肠， 引起以腹泻和消化不良为主要症状 的贾第虫病，分布于世界各地，儿 童和旅游者患病率较高，故有旅游 者腹泻之称。
一、形态
1、滋养体：
1、前鞭毛体
寄生于白蛉消化道内， 成熟虫体呈梭形. 核位于中部，动基体 在虫体前端，基体在 动基体之前. 由基体发出1根鞭毛 游离于体外，鞭毛摆 动活泼.
培养基中的前鞭毛体常聚集 呈簇，排列呈菊花状。
二、实验诊断
1、病原诊断：常用方法 （1）穿刺涂片检查：骨髓穿刺原虫检出率为80～ 90%， （2）培养法：将穿刺物接种于NNN培养基，置 22～250C温箱内，1周后查见运动活泼的前鞭毛 体则可确诊。 （3）动物接种法，将穿刺物接种于敏感动物，12月后取其肝、脾作涂片，染色镜检。 （4）皮肤组织检查法：
形似纵切的半个梨形， 前端钝圆，后端渐变尖 细，大小为9～ 21μ m×5～15µm，两侧 对称，背面隆起，腹面 扁平。 腹面的前部向内凹陷 而成吸盘，滋养体借此 吸附于肠粘膜上。
经铁苏木素染色 后，可见吸盘背侧胞质 内有2个圆形泡状核。 两核之间2条纵贯虫体 的轴柱，其前端有基体， 为鞭毛发源处，其中部 有1对半月形的中体。 虫体有4对鞭毛， 按伸出部位分别称为前 鞭毛，后鞭毛，腹鞭毛 和尾鞭毛。