WATERS液相操作规程

WATERS2695液相色谱仪
操作规程
一、液相主机操作：
1、准备流动相，不同的流动相组分放在不同的溶剂瓶中。

注意：D瓶为洗泵杆溶液（甲醇-水）20：80，E瓶为洗针头溶液（甲醇-水）80：20。

2、打开液相主机电源开关，机器进行自校，约5分钟。

3、在线脱气（Degasser）：光标移到(Mode)下按Enter选On后按Enter。

4、样品池温度（Sample）：光标移到（Set）下直接输入温度数值按Enter。

5、柱温（Column）：光标移到（Set）下直接输入温度数值按Enter。

6、流动相比例（Composition）：光标移到相应位置直接输入比例数，每输一个数值按Enter确认；比例数之和应为100。

7、更换管路流动相：按直接功能（Direct Function）进入直接功能菜单选（2 Wet Prime）按Enter输入流速（Flow Rate）和时间(Time)按OK开始。

8、更换完成后自动返回主页面，按Next Page回到主菜单。

9、光标移到流速（Flow）下输入流速值，按Enter，液相主机开始工作。

10、打开样品室门，选择要操作的样品盘，按顺序放入样品，记下样品与样品位置号，关上样品室门。

11、实验完毕后，先关检测器电源以延长紫外灯寿命，色谱柱处理完毕后，再关主机电源。

二、紫外检测器操作：
打开紫外检测器电源开关，机器进行自校，自检完毕后两个指示灯长亮。

三、软件操作：
1、打开显示器电源，再打开主机电源，启动Windows XP。

2、点击桌面上的“Empower 登录”图标启动软件。

输入用户名“hplc”按“确定”进入主选单。

3、点击“运行样品”，“确定”进入运行样品界面。

选择一种仪器方法，单击“编辑”进入仪器状态设置界面，选择色谱仪的脱气状态、输入样品室温度、柱温箱温度、流动相比例、积分波长范围、监视波长；设定完成后注意保存。

4、单击“监视器”钮，色谱仪按重新设定后的参数运行。

5、待基线稳定后，在样品卡上点击“单一”子卡，输入样品瓶号、进样体积、运行时间，点击“进样”按钮,观察样品的出峰时间。

6、确定样品的出峰时间后，点击“样品”子卡，输入样品的进样瓶号、样品名称、进样体积、每个样品的进样次数、运行时间；功能选“进样”，方法组选“一般方法”。

7、所有样品设定完毕，点击工具栏“运行”钮，输入样品组名称后，按“运行”钮，开始运行设定的样品。

查看样品的运行情况可点“正在运行”子卡，但不能更改运行状态。

8、运行过程中要改变流动相比例请点左下方的“改变流量”图标，输入新的流动相比例，确定后仪器按新设定的流动相比例运行。

9、实验完毕按左下方的“停止液流”图标，仪器停止运行。

四、图谱处理：
1、点击登录界面的“查看数据”、选“查看样品组”确定后打开数据项目界面。

2、双击要查看的样品组，打开查看主窗口。

3、在左边选择要查看的样品，中间出现该样品的轮廓图，在图上单击右键选提取色谱，双击波长输入需要的波长数，中间出现该波长处的液相图谱。

4、在上方输入峰宽和阈值后，点击菜单栏的“工具—积分”得到该液相图的积分数据。

5、按键盘“印屏幕”键复制画面，打开画图程序，点击“编辑—粘贴”用“选定”功能选择需要的区域，在选定区域内点鼠标右键复制。

点击“文件—新建”旧图不保存，点击“编辑—粘贴”，点击“文件—另存为”，为该图谱选存放位置和图谱名，点击“保存”。

6、回到查看主窗口，选择下一色谱图，积分数据按设定的波长和峰宽、阈值自动显示，此时不要更改积分参数。

按步骤5重复操作保存图谱。

7、所有图谱保存完毕，粘贴到WORD文档，打印。

8、实验完成后，先关主机，再关显示器。

五、注意事项
1、流动相与样品溶液必须经滤过才能使用。

2、关机后不要立即开机。

3、注意安全防护。

4、盛放样品溶液的瓶子，用过后及时清洗烘干。

5、含盐流动相不得在色谱柱中停留。

6、做好仪器使用登记。