猪乙型脑炎病毒EDⅢ蛋白的原核表达、纯化及活性检测

合集下载

1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。

１ ‘ １．ＩＩｌｎｌｉｌ１．１ ¨ｌ】ｌＩｉｉｔ ’ ｝ｌ ¨ｌＩｉｌ｛１２Ｉ
（ＤＥ３）．Ｔｈｅ
ｅｎｃｏｄｉｎｇＥ１）Ｉｌｉ￣ｔｅｉｎＷＬＩＳａｍｐｌｉｆｉｅｄｗｉｔｈＩ、一ＲｔＩＩｈｅ ‘ ‘ ｍＩＳｌｒｔｌｃｔｅ（Ｉｒｅ（ ‘ ｏｍｌｉｆｍｕ｝ｌｉ）ｌａｓｍｉ￣Ｉ１）１＂２８ａ —ｌ＿＝Ｉ）ｍｗＨｓ
ｌｒａｎｓｉｆｎ ’ ｒｌｌ（￣（Ｊｉｎｋ）ＢＩ２Ｉ（ＤＥ３）．ＥＤＩＩＩｓｏｈＩＩ）ｉｌｉｔｙｐｒｏｔｅｉｎｔ）ｙＩＩ１、（；ｗａｓｅＸＪ）ｌＰｓＰ（１，Ｉ）ｔＩｒｉｆｌｅｄｈｙＮｉ —Ｎ＇Ｉ、Ａａｉｆｉｎｉｔｙ（ ’ Ｊｌｒ（ＨｌＩｔｌｌＯｇｌａ１）ｈ＞，ＬＩＩｌｔｌｉ —
Ｍｅｄｉ（ｔｉｎｅ，ＨｅｎａｎＡｇｒｉ（、ｕＩｌＬ． ‘ ａｌ［１ｎｉｖＰＪ ’ ｓｉｔｖ，Ｚｈｅ，ｌｇｚｈｏｕ４５０００２，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｅ１）ｍｐＪ ’ ｏｌｅｉｌｌＩｌｆ－Ｊａｐａｎｅｓ（ｅｌｌ（＇ｅ１）ｈａｌｉｔｉｓｖｉｔ ‘ ＬＩｓ（ＪＥＶ）ｗａｓｅｘｊＨＰＩｌ，ｐｕｒｉｌｉｅｄ
ＮＴＡ亲和析纯化，最后通过ＳＤＳ—ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎ—Ｂｌｏｔ检测表达蛋关键词：乙腑病毒；ＥＤｍｎ；表达蛋门中图分类号：￥８５２．６５１文献标志码：Ａ
ＥＤｍ蛋白ＢＩ２１（ＤＥ３）菌已表达，鲐Ｎｉ —ＮＴＡ获得纯化白，经＼Ｖｅｓｔｅｌ ’ ｉｉ —Ｂｌｏｔ检ｉＮ￣：Ｌ４ｊ ‘ 反
文章编号：０５２９６００５（２０１７）０９００２８０３
ＰｒｏｋａｒｙｏｔｉｃＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎ，ＰｕｒｉｉｆｃａｔｉｏｎａｎｄＡｃｔｉｖｉｔｙＤｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆＰｏｒｃｉｎｅＪＥＶＥＤＩｌｉＰｒｏｔｅｉｎ
ＺＨＡＮＧｑｉｎ’ 一
，
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
ＴＥＮ（．Ｍａｎ，ＬＵＯＪｕｎ，ＺＨＡＯＭｅｎｇ．ｍｅｎｇ，ｘｕＱｉａ ‘ ＬＺＨＡ（）ＩＩｇ，，
ＤＥＮＧＲｕｉ — ｇｕａｎｇ‘ ，ＺＨＡＮＧＧａｉ・ｐｉｎｇ
２８
ＩｆｒＩ
ＩＫ杂忠
２０Ｉ７，｛（第５３港）９期
猪乙型脑炎病毒ＥＤ川蛋白的原核表达、纯化及活性检测
张二芹。 ’ ，滕蔓，罗俊’ ，赵孟孟，许倩茹，赵东‘ ，邓瑞广，张改平
（Ｉ．河ｆ｝『＝竹农、科学院竹动物免疫学雨点实验室农，ｌｋｆ：ｌｆ￣动物免疫学ｍ点验．河南ｊ：ｆ；州Ｉ４５０００２２．｛Ｉ１Ｊ南农、Ｉ大学牧Ｊ矢ｌ程学院，Ｉ＋Ｊ邛州４５００（）！）摘要：拒火肠杆菌ＢＩ２１（ＤＥ３）ｒ｛ ’ ｉ表达乙脑病毒（ＪＥＶ）ＥＤＩｌｌ蛋门、镍朴纯化并检测表达蛋采片ｊ一Ｉ＞ＣＩ｛ ‘ 法扩增
ＥＤⅢ
片段，构建重组表达载体｝１ＥＴ一２８ａ —ＥＤｌ１）Ｉ：转化刽ＢＩ２１（ＤＥ３），ＩＦｌ、Ｇ诱导ｒＩ达，表达【Ｊ ‘ 溶，：物经Ｎｉ — 结果成功构建卡发达载怵ｌ，一２８ａ—ｌ１）ｌＪ１：
ｆｌ１．ＨｌａｉｉＫｅｙＬａｂｏｌ ’ ａｔｏｒｙｏｆＡｎｉｍａｌｈｎｍｕｎｏｌｏｇｙ．ＫｅｙＬａ１）ｏｒａｔｏＤ＇ｏｉＡ１１￣１］ｈｎｍｕｎｏｌｏｇｙｔＪｆｔｈｅＭｉｎｉｓｎ５（ＡｇＪｊ（ ’ ．１ｉｔ．ｔ．ＨｅｎａｎＡｃａｄｅｍｙｏｆＡｇｒｉｅｕｈｕｒａ１Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ４５０００２，Ｃｈｉｎａ；２．Ｃｏｌｌｅｇｅ０ｆＡｎｉｍａｌＳ（ ‘ ｉｎｅｃｅＬＩＩＩｌＪＶｔｉｉｔＩ，Ｈｒｖ