中药制剂的含量分析

§3 中药制剂各剂型样品的预处理
固体中药制剂的预处理

丸剂预处理
蜜丸的处理
逍遥丸（大蜜丸）中炙甘草的测定
取本品18g，加硅藻土10g，研匀，加乙醇60ml，超声处理 30min，滤过，滤液蒸干，残渣加水30ml使溶解，用乙醚振 摇提取2次，每次10ml，弃去乙醚液，用水饱和的正丁醇振摇 提取3次，每次30ml，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的水洗涤 3次，每次20ml，弃去水洗液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1ml 使溶解，作为供试品溶液。
※ 控制温度在420℃以下
※不适用于含易挥发性金属（如汞、砷等，）有机样品的破坏。
§3 中药制剂各剂型样品的预处理
剂型繁多，干扰大→具体“剂型”具体分析
应根据制备工艺与剂型的不同、赋形剂的特点、被测 成分的理化性质和存在状态以及各类成分之间干扰的程度 等进行综合考虑。
固体中药制剂包括丸剂、片剂、散剂、颗粒剂、栓剂、滴 丸剂等 半固体中药制剂包括流浸膏剂、浸膏剂、糖浆剂和煎膏剂 液体中药制剂包括合剂、口服液、酒剂、酊剂、注射剂等
※ 使用前需要用有机溶剂除去杂质，有时还需用酸、碱清洗
聚酰胺：与溶质形成氢键而产生吸附作用，常用于含酚、酸、醌
类药物样品液的净化分离 硅土、纤维素：以水基质液作为固定相，与水不混溶的有机溶剂为
流动相的分配色谱

洗脱顺序：极性小→大
§2 样品的处理
样品的分离纯化

色谱法（层析法）
离子交换树脂：用于除去样品中的离子及萃取可离解化合物
第四章 中药制剂的含量测定
P63
楼一层
§1 含量测定的目的和意义
反映其制剂中有效成 分或者毒性成分的含 量
衡量其制剂工艺的稳 定性和中药材的质量 优劣
35.00% 30.00% 25.00% 20.00% 15.00% 10.00% 5.00% 0.00% 药典中中药及其制剂的含量测定所占 比例 1977 1990 1985 1995 2000
硅藻土、离子交换树脂、键合相硅胶C8、C18等
§2 样品的处理
样品的分离纯化

色谱法（层析法）
硅胶：酸性吸附剂，适用于中性或酸性成分的层析，强烈保
留碱性化合物

洗脱顺序：极性小→大
氧化铝：带有碱性，分离一些碱性中草药成分，不宜用于醛、
酮、醋、内酯等类型的化合物分离 中性氧化铝、酸性氧化铝：适用于酸性成分的分离
§3 中药制剂各剂型样品的预处理
液体中药制剂的预处理

酒剂与酊剂（醇性液体制剂）的预处理
杂质较少，前处理较简单
常用的净化方法：加热蒸去乙醇，然后再用有机溶剂萃取或
柱层析。
远志酊中远志皂甙元的含量测定（TLC）
精密吸取本品25ml，置100ml标准磨口烧瓶中，减压蒸去溶剂， 放冷，加50ml甲醇，密塞后超声振荡20min，放置过夜。精密 吸取上清液20ml，加入5倍量乙醚，放置使其沉淀完全。倾去上 清液，于沉淀中加入10%盐酸50ml，沸水浴中回流2h，过滤得 沉淀。将沉淀定量转入50ml容量瓶，用甲醇溶解并稀释至刻度。
§3 中药制剂各剂型样品的预处理
固体中药制剂的预处理

片剂预处理
赋形剂（淀粉、糊精、糖粉、硫酸钙等）的 影响
复方丹参片中丹参酮IIA的TLC测定
取本品20片，精密称定重量，研细，精密称出细粉适量（约相 当10片的重量），置100ml索氏提取器中，加乙醚100ml，置 50°C水浴中回流提取3h，提取液在水浴上蒸干，残渣用乙醇 溶解并移至5ml容量瓶中，用乙醇稀释至刻度，摇匀，作为供试 液。
§3 中药制剂各剂型样品的预处理
固体中药制剂的预处理

栓剂预处理
基质（油脂性基质和亲水性基质）的干扰
双黄连栓（小儿消炎栓）中绿原酸、黄芩甙的测定 取本品1粒, 加水20ml, 置温水浴中，用10%的氢氧 化钠溶液调节pH值至7.0～7.5， 使熔化，置冷处使基 质凝固，滤过，取滤液10ml，加无水乙醇4ml，至 水浴中振摇数分钟，放置，取上清液作为供试品溶液。
§2 样品的处理
样品的分离纯化

蒸馏法
适用于具挥发性的待测组分，如挥发油、小分子
的生物碱、丹皮酚等
最常用水蒸气蒸馏法

共水蒸馏法 通水蒸气蒸馏法 水上蒸馏法
利用盐析作用，提高蒸馏效果
§2 样品的处理
样品的分离纯化

液-液萃取法
直接萃取法

萃取剂的选择 亲脂性有机溶剂，如苯、氯仿或乙醚 弱亲脂性的溶剂，如乙酸乙酯、正丁醇等
(弱酸、弱碱药物)
活性炭：非极性吸附剂

使用前需要先用稀盐酸洗涤，其次用乙醇洗，再以水洗净， 于80℃干燥 分开水溶性芳香族物质与脂肪族物质，单糖与多糖，氨基 酸与多肽

§2 样品的处理
样品的分离纯化

消化法——测定中药制剂中的无机元素
湿法消化

硝酸—高氯酸法：适用于血，尿、组织等生物样品和含动 植物药制剂的破坏
固体中药制剂包括丸剂片剂散剂颗粒剂栓剂滴丸剂等半固体中药制剂包括流浸膏剂浸膏剂糖浆剂和煎膏剂液体中药制剂包括合剂口服液酒剂酊剂注射剂等医学ppt19丸剂预处理蜜丸的处理逍遥丸大蜜丸中炙甘草的测定取本品18g加硅藻土10g研匀加乙醇60ml超声处理30min滤过滤液蒸干残渣加水30ml使溶解用乙醚振摇提取2次每次10ml弃去乙醚液用水饱和的正丁醇振摇提取3次每次30ml合并正丁醇液用正丁醇饱和的水洗涤3次每次20ml弃去水洗液正丁醇液蒸干残渣加甲醇1ml使溶解作为供试品溶液
二氯乙烷 灵宝护心丹（牛黄、麝香等）中胆酸的含量测定
0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加石油醚 取本品适量，研细，取约 部分测定法 （60-90℃）4ml，浸泡1小时，滤过，滤渣及滤纸挥去溶剂，放回锥形 全部测定法 瓶中，精密加入冰醋酸无水乙醇溶液（1 → 10）15ml，摇匀，密塞， 优点：操作简单，适于热不稳定的样品，且提取杂质少 称定重量，浸泡 12小时，再称定重量，用冰醋酸无水乙醇溶液（1 → 10） 缺点：费时（12-24 h）、费溶剂（10-50倍） 补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。
§3 中药制剂各剂型样品的预处理
固体中药制剂的预处理

滴丸剂预处理
基质（水溶性基质和水不溶性基质）存在引 起的干扰
复方丹参滴丸中三七的测定 取本品40丸，加甲醇10ml，振摇10分钟，于4℃放 置24小时，使聚乙二醇析出完全，滤过，取滤液作为 供试品溶液
§3 中药制剂各剂型样品的预处理
半固体中药制剂的预处理

密度 d ~ 液体 → 溶解能力强 粘度 ~ 气体 → 传质快，有利于待测组分的扩散 表面张力几乎为 0 → 浸润性能好 密度受压力、温度的影响大→ 改变对溶质的溶解能力 加入甲醇、氯仿、苯等改变极性→ 提取不同极性的成分 节省溶剂、易于自动化，而且可避免使用易燃，有毒 的有机溶剂，能与色谱和光谱等分析仪器直接联用
§3 中药制剂各剂型样品的预处理
液体中药制剂的预处理

注射剂（水性液体制剂）的预处理
液-液萃取法、或柱色谱法等
注射用无菌粉末：可直接取样，用合适的溶剂溶解，直接进
行测定。
清开灵注射液中总胆酸的含量测定（比色法）
精密称取本品1ml，置离心管中，滴加6mol/l盐酸1滴，搅拌使 胆酸沉淀完全，离心分离，弃去上清液，沉淀用0.2mol/l盐酸 10滴洗2次，离心，洗液弃去，沉淀用冰醋酸15滴溶解，定量转 移于己于10ml容量瓶中，再用少量冰醋酸洗涤离心管理3-4次， 洗液移入量瓶中，再加冰醋酸至刻度，摇匀。
§3 中药制剂各剂型样品的预处理
外用中药制剂的预处理

软膏剂的预处理
基质材料、防腐剂、抗氧化剂等杂质的干扰 滤除基质测定法：加入适当溶剂，加热使软膏液化，再放 冷，待基质凝固后，与上清夜分开 提取分离法：在适宜的酸性或碱性基质中，用不混溶的有机 溶剂将基质提取后除去。或用有机溶剂将样品溶解，再用酸 或碱性水溶液进行萃取分离后测定。 灼烧法：将样品灼烧，使基质分解除尽，然后对灼烧后的无 机化合物进行测定。 离心法：取样品加适宜的溶剂，混匀，再进行离心，分取上 清液
冷浸法
§2 样品的处理
样品的提取

回流提取法
三黄片（黄连等）中盐酸小檗碱测定
+HCl-70%乙醇溶液，加热回流1h

连续回流提取法
保和丸（陈皮等）中橙皮甙测定
+甲醇，加热回流至提取液无色为止
§2 样品的处理
样品的提取

超声提取法
原理：超声波的助溶作用
优点：操作简便，提取速度快
※ 需对超声频率、提取时间、提取溶媒等进行考察

糖浆剂、煎膏剂预处理
萃取法、柱层析法、蒸馏法、加惰性材料（硅藻土、纤维素
等）处理，再用溶剂提取
健儿糖浆中总黄酮的定量分析 将糖浆用盐酸调节pH至1～2，再用醋酸乙酯萃取后 测定。 止咳糖浆中盐酸麻黄碱的含量测定 取一定量糖浆，加氢氧化钠碱化，进行蒸馏，收集 馏出液作为供试品溶液。
§3 中药制剂各剂型样品的预处理

多次萃取（3-4次）
调整水相酸度，提取有机酸、有机碱 利用盐析作用，提高提取率
§2 样品的处理
样品的分离纯化

液-液萃取法
离子对萃取法
BH+·In-（水相） BH+·In-（有机相）
BH+（水相）+ In-(水相)

适合于高度电离的有机酸、碱化合物的萃取
※ 水相酸度的控制 ※ 离子对试剂的选择
键合相硅胶（C18或ODS）：分开脂溶性和水溶性成分

操作程序：①柱的活化；②上样；③清洗；④洗脱。 洗脱顺序：极性大→小
§2 样品的处理
样品的分离纯化

色谱法（层析法）
大孔树脂

分为极性(丙烯酰胺聚合物)和非极性(苯乙烯和二乙烯苯的共聚物)型
非极性型（XAD-2等）：分开脂溶性和水溶性成分
§2 样品的处理
样品的分离纯化

色谱法（层析法）
分离的原理：吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱、
凝胶色谱
按操作方式：柱色谱、薄层色谱、纸色谱 装柱方法：湿法装柱、干法装柱 微柱色谱（固相萃取）

柱的大小：长5～15cm，内径0.5～1cm 柱填料：硅胶、氧化铝、氧化镁、活性炭、聚酰胺、大孔树脂、
※ 结果以每片中含被测成分的重量来表示。
§3 中药制剂各剂型样品的预处理
固体中药制剂的预处理

颗粒剂预处理
糖、糊精等辅料的影响
板蓝根冲剂中靛玉红的TLC测定
取研匀的冲剂样品35g，精密称定，置烧瓶内，加氯仿置水浴中 回流提取3次（50，25，25ml），合并滤液于蒸发皿中，蒸干， 残留物用氯仿定容至2ml，备用。
液体中药制剂的预处理
摇匀后再取样

合剂与口服液（水性液体制剂）的预处 理
合剂含杂质量较大，直接分析困难 口服液杂质含量相对较少，可直接进行分析或经净
西洋参精口服液中人参总皂甙的含量测定（ TLC） 化分离后分析
精密移取待测样品10ml，加入到处理好的大孔树脂柱上，加蒸馏 水80ml洗柱，洗液弃去，再用70%乙醇100ml洗柱，收集洗脱 液，于80°C低温水浴上蒸干，残留物用甲醇定容于10ml容量瓶 中。
§3 中药制剂各剂型样品的预处理
固体中药制剂的预处理

散剂预处理
药材粉末入药，而且分布也不均匀
九分散中士的宁的含量测定 → 注意取样的代表性
取本品10包，混合均匀。取约2g，精密称定，置具塞锥形瓶中， 精密加氯仿20ml与浓氨试液1ml，轻轻摇匀，称重，于室温放置 24小时，再称重，补足氯仿减失的重量，充分振摇，滤过。精密 量取续滤液10ml，用硫酸溶液（3→100）分次提取，至生物碱 提尽，合并硫酸液，置另一分液漏斗中，加浓氨试液使呈碱性， 用氯仿分次提取，合并氯仿液，蒸干，放冷，残渣中精密加氯仿 5ml使溶解，作为供试品溶液。 每包九分散按2.5g计，含士的宁应为4.5-5.5mg。
§2 样品的处理
样品处理的主要作用

释放被测组分，制成稳定试样
除去杂质，纯化
浓缩 试样形式符合测定的要求
样品的粉碎

目的——取样均匀，提取完全 粉碎设备——粉碎机、研钵、匀浆机
※ 粒度大小合适 ※ 防止污染或损失
§2 样品的处理
样品的提取

关键——提取完全
溶剂的选择
水、酸水、碱水 亲水性的有机溶剂：乙醇（酒精）、甲醇（木精）、丙酮 亲脂性的有机溶剂：石油醚、苯、氯仿、乙醚、乙酸乙酯、
优点：速度快、萃取效率高、方法准确度高、选择性较高、
§2 样品的处理
样品的分离纯化

沉淀法
蛇胆糖浆口服液含有大量糖，可用无水乙醇回流样品，冷后过 滤，除糖以消除其干扰。
复方益母草口服液中水苏碱的含量测定
利用雷氏盐（硫氰酸铬铵）作沉淀剂，在酸性介质中可与大部
分有机碱生成难溶于水的配合物与其它杂质分离。
硝酸—硫酸法 硫酸—硫酸盐法：常用于含砷或锑的有机样品的破坏，破 坏后得到三价砷或锑。
※ 对含氮杂环类有机物破坏不够完全。

※ 与硫酸形成不溶性硫酸盐的金属离子的测定，不宜采有此法。

§2 样品的处理
样品的分离纯化

消化法——测定中药制剂中的无机元素
干法消化
灼烧灰化 供试品 (+NaCO /MgO)灰分 3
※ 超声波可能引起供试品成分的改变 保济丸（厚扑等）中厚扑酚测定
+石油醚（30-60℃），超声处理（功率500W，频率33kHz） 2次，每次30min
§2 样品的处理
样品的提取

超临界流体提取法（Supercritical-fluid extraction， SFE）
超临界流体——特殊的物质状态