ADRB3基因Trp64Arg多态性与日本民族原发性高血压无关_丁裕斌

第 4 期 丁裕斌 , 等 : ADRB3 基因 T rp64A rg 多态性与日本民族原发性高血压无关
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研究对象纳入及排除标准 : 无年龄下限和血缘关系 , 年龄在 45 ～ 80 岁间 的体检人群 . 排除 过量饮 酒 、 服用避孕药史 ; 经临床生化检查排除糖尿病 、 肝病 、 肾疾病史 、 冠心病史和继发性高血压的人群 . 根 据世界卫生组织( WH O) 高血压诊断标准 : H T 组包括血压 SBP/DBP ≥140/ 90 mm H g 的人群 , 或既往确 诊为 EH 者或服用降压药物的人群 ; NT 组无 EH 史 、 无服用降压药史和高血压家族史 , 血压 SBP/ DBP < 140/ 90 mm Hg 的人群 . 1 . 2 临床指标流行病学调查 调查内容包括年龄 、 性别 、 吸烟史 、 饮酒史 、 高血压史和用药史等 . 采集相应的血液标本 , 进行一般生 化检查 , 包括血常规 、 血脂 、 肝 、 肾功能等检查 . 并进行身高和体质量的检查 . 经过反复筛选核对 , 符合标 准并有足够的血液学标本的对象有 2 714 人 , 其中 H T 组 1 328 例 , N T 组 1 386 例 . 1 . 3 DNA 提取及 ADRB3 基因 Trp64Arg 多态性检测 采用 QIAamp Blood Kit( Qiagen K. K., T o ky o , Japan) 试剂盒 , 从外周全血的淋巴细胞中提取基因组 [ 6] DNA . T aqman-PCR 法检 测 ADRB3 基 因 T rp64A rg 多态 性[ 7-8 ] . P CR 反应 正义 引 物是 : 5 GGAGGCAACCT GCT GGT CAT-3 ; 反义引物是 : 5 -CACGAACACGT TGG T CA T GG T-3 ; C-等位基因特殊探针 序列为 : 5 -VIC-T C T CGGAGT CCAGGCGA T GGCCA-MBG-3 ; T-等位基因的特殊探针序列为 : 5 -F AMC T CGGAGT CCGGGCGA T GGCC-M GB-3 . PCR 反应采用 Gene Am p 9700( Applied Bio sy st em s , Inc) 经 过 95 ℃, 变性 10 mi n , 95 ℃, 15 s ; 65. 5 ℃, 60 s , 40 个循环 . ABI 7900 H T T aqm an 自动分析仪器对 ADRB3 T rp64A rg 基因的多态性分型检测 , 并从 2 714 个样本中随机抽取 800 个样本 , 用 PCR-RF LP 方法扩 增( 正义引物 : 5 -CAATACCGCCAACACCAGTGGG -3 ; 反义引物 5 -GGTCATGGTCTGGAGT CTCG -3 ) , 普 通 3 U M spI 消化 , 验证 Taqman PCR 法对 ADRB3 Trp64Arg 多态性检测结果的一致性[ 9] . 1 . 4 数据的分析统计 采用 SPSS11 . 5 统计软件分析数据 , 计算 N T 组基因型频率是否符合 H ardy-Weinbe rg 平衡 ; 方差分析 比较不同组连续变量的平均值的差异和各组之间均衡性检验 ; 卡方检验分析 ADRB3 T rp64Arg 基因多态 性与分类血压之间的关联 ; Log ist ic reg ressio n M odel s 分析 ADRB3 T rp64Arg 基因多态性与血压之间是否 有统计学差异 . 在分析过程中调整了性别 、 年龄 、 肥胖指数和甘油三酯等混杂因素的影响 , 并对实验中甘 油三酯检测数据进行了常用对数转换 , 显著性水平为 p < 0. 05 .
2 结 果
2 . 1 临床指标流行病学调查结果分析 研究对象按基因表型 T rp/ T rp 、 T rp/ Arg 和 Arg / Arg 进行分类后 , 进行临床检测指标统计学分析 , 除 总胆固醇外 , 其余指标如年龄 、 性别 、 肥胖指数 、 舒张期血压 、 收缩期血压 、 H DL-脂蛋白和甘油三酯等 , 在 这 3 类基因型携带者中均无显著性差异( 表 1) ( 统计学标准按 p <0 . 05) , 表明 3 类基因型携带者各项临床 检测指标均衡可比 .
注 : 表中数值( X ±S) 表示 3 种基因型在 不同状况下的平均值 ±标准差 ; 性别( 男% ) 表示 3 种基因型中男性所占的比例 .
2 . 2 ADRB3 Trp64Arg 基因与等位基因频率在高血压 、 非高血压组之间的分布比较 ADRB3 的 T rp64Arg 位点 T rp/ T rp , T rp/A rg , Arg / Arg 基因型频率 在 H T 组为 64. 8 %, 30. 7 %,
[ 3]
1 研究对象和方法
1 . 1 研究对象 以日本爱媛地区 2003 年 12 月 2004 年 12 月间一般健康体检的居民为研究对象 .
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收稿日期 :2008-09 -03 基金项目 :重庆市自然科学基金资助项目( CSTC , 2007BB0321 ; 2006BB5044) . 作者简介 :丁裕斌( 1979 -) , 男 , 江苏泗洪人 , 讲师 , 硕士 , 主要从事医学遗传研究 .
p值 0 .997 0 .117 0 .405 0 .684 0 .786 0 .62 0 .028 0 .742 0 .821
23 .44( 3 .16) 138 .31( 22 .35) 81 .20( 11 .90) 57 .11( 15 .43) 199 .77( 34 .96) 61 .15( 15 .42) 4 .6( 0 .50)
高血压病是全球范围内严重危害人类健康的常见病 、 多发病 , 近年来呈上升趋势 , 其病因目前尚未完 全明确 . 遗传流行病学研究表明 , EH 是一种遗传因素与环境因素相互作用导致的多基因遗传性疾病 . 利 用分子生物学手段筛选与血压调控有关的易感基因 , 是探讨 EH 发病机制的有效研究方法 . 目前很多学者 认为 ADRB3 基因是 EH 候选基因之一 , ADRB3 基因 T rp64Arg 等位基因与肥胖的高血压病人有关 , 可使 一般人和肥胖的人血压升高 , 即该基因变异与脂肪代谢有关而间接影响血压升高[ 1-2] . 然而 , 亦有众多学者 的研究结果不支持这一推论 . Nagano 等 研究显示 , ADRB3 基因的 T rp64Arg 多态性与伴有精神分裂症 的高血压和代谢综合症没有关联 ; T ho mas 等[ 4] 认为 ADRB3 T rp64Arg 多态性与高血压 、 糖尿病可能没有 [ 5] 关系 , 但与肥胖有关 . Buet tner 等 则认为 ADRB3 基因 T rp64Arg 的 A rg 64 等位基因多态性与高血压 、 肥胖没有关系 . 由于诸多研究结果显示 ADRB3 基因的 T rp64A rg 等位基因多态性与高血压病相关性存在 不一致性 , 因此我们拟采用日本同质大人群的一般居民为研究对象 , 分析 ADRB3 基因的 T rp64Arg 位点 多态性与 EH 的关系 , 为确认 ADRB3 T rp64Arg 多态性是否可引起高血压提供更为充足的实验依据 .
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3 种基因型( X ±S ) T r p/ T r p( 1 764) 56 .7( 1 001) 61 .96( 13 .07) T r p/ A rg( 841) 56 .6( 476) 62 .27( 13 .19) 23 .46( 3 .40) 138 .23( 21 .77) 81 .42( 11 .50) 56 .80( 14 .97) 203 .46( 34 .49) 61 .28( 15 .55) 4 .61( 0 .50) A rg/ A rg( 109) 56. 9( 62) 64 .60( 10. 76) 23 .87( 3. 02) 140 .17( 22. 74) 81 .88( 11. 71) 58 .28( 14. 92) 203 .83( 32. 44) 62 .33( 18. 21) 4 .61( 0. 53)
文章编号 :1673 -9868( 2009) 04-0064-05
ADRB3 基因 Trp64Arg 多态性与 日本民族原发性高血压无关
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丁裕斌1 , 綦 岩2 , 窦贵旺1 , 吴志红1
1 . 重庆医科大学 公共卫生学院 , 重庆 400016 ; 2 . 内蒙古呼和浩特炼油厂生活 区职工医院 , 呼和浩特 010070 摘要 :目的 : 研究高血压候选基因 β 3 肾上腺素能受体 基因 β 3-A drene rgic recepto r( A DRB3) 在日本 人群的分 布 , 并 探讨 A DRB3 基因 T rp64A r g 多态性与 原发性高血压病( essential hy pertension , EH) 的关系 . 方法 : 采用流 行病学调 查方法分析肥胖指数 、 血浆胆固醇和甘 油三酯等临床指标 , 同时调查 受检者吸 烟和饮酒等 生活习惯 ;T aqman -P CR 法分析 A DRB3 基因 T rp64A rg 多态性在大样本 日本 人群( 样 本总 数 2 714 人 , 其 中 H T 组 1 328 例 , 非高 血压 组 ( N T) 1 386 例) 的分布及其与临床指标间 的相关性 . 结果 :除总胆固醇外 , 其余指标如年龄 、 性别 、 肥胖指数 、 舒张 期血压 、 收缩期血压 、 HD L -脂蛋白和甘油三酯等 在 T r p/ T r p 、 T r p/ A rg 和 A rg/ A rg 这 3 类 基因型携带 者中均无 显 著性差异 ; 卡方检验结果显示 AD RB3 的 T rp64A rg 基因型(p =0. 425) 与等位基因频率( p =0. 501) 在 HT 与 N T 之 间没有显著统计学意义 ;A DRB3 的 T r p64A rg 基因 多态 性与 高血 压病 L og istic 回归 模 型分 析结 果 显示 , 卡 方 值 ( W ald) 为 0. 356 ; 比值比为 0. 884 ; 95 %的可信区间为 0 .589 ～ 1 . 326 , p 值为 0 .551 .结论 : 按照 p <0. 05 统计学标 准 , A DRB3 的 T r p64A rg 多态性可能与日本人群 EH 无关 . 关 键 词 :原发性高血压 ; β 3 肾上腺素能受体 ;基因多态性 中图分类号 : Q812 文献标识码 :A
第 31 卷第 4 期 西 南 大 学 学 报( 自然科学版) 2009 年 4 月 Vol. 31 No. 4 Journal of Southw est Unive rsity ( N atural Science Edi tion) Apr. 2009
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西南大学学报( 自然科学版) 投稿网址 htt p : // x bg jx t. sw u . cn 第 31 卷
4 . 5 %; NT 组为 65 . 2 %, 31. 2 %, 3 . 5 %. NT 组等位基因 T rp 占 80 . 84 %, A rg 占 19 . 16 %; H T 组 T rp 为 80 . 12 %, Arg 为 19 . 88 %. 经卡方检验 ADRB3 基因 T rp64Arg 的基因型( p= 0. 425) 与等位基因频率( p= 0 . 501) 在 H T 与 N T 之间没有显著统计学意义( 表 2) , 即在日本人群中 ADRB3 的 T rp64Arg 多态性可能与 高血压无关联 . 上述检验结果与 H andy-weinberg 遗传平衡规律相符 , 具有普通人群的代表性 .
表 1 受检者按基因型分类的临床特征 临床指标流行病学调查项目 性别/ ( 男 %)＊ 年龄/ 岁 体质量指数/ ( kg · m ) 舒张期血压/ ( mm Hg) 收缩期血压/ ( mm Hg) 脉压/ ( mmH g) 总胆固醇/ ( mg/ dL) 高密度脂蛋白/ ( mg/ dL) 甘油三脂/ ( mg/ dL)