液相色谱法测定蔬菜中的辛硫磷

液相色谱法测定蔬菜中的辛硫磷
摘要采用Agilent 1100 液相色谱仪，紫外可变波长检测器（VWD）液相色谱法测定西红柿中辛硫磷的残留量。

结果表明：其添加回收率在82.0%～97.6%，变异数小于5.62%，符合国家农药残留量测定方法的要求。

将此方法用于测定西红柿中辛硫磷的残留量，检测过程简便、快速。

AbstractA method for determination Phoxim residue in tomato was studied with Agilent 1100 Liquid chromatography with VWD detection .The results showed that the recovery rate of Phoxim was between82.0% and 97.6%，the coefficient of variation was less than 5.62% .The results of this test had met the requirement of national method of pesticide residue analysis .The method is simple，feasible and reliable.
Key wordsliquid chromatography；Phoxim；residues
农药残留污染一直影响人们的生活质量和食品贸易的顺利进行，随着生活水平的日益提高，人们食品安全意识不断增强，蔬菜中农药残留问题也得到了更大的关注[1-2]。

在无光照条件下辛硫磷残效期很长，遇光则分解速度很快，是一种公认的高效、低残留、低毒、广谱有机磷农药。

但该药施入土中，残留期很长，能抑制胆碱酯酶活性。

中毒症状有头痛、头昏、恶心、多汗、瞳孔缩小、腹痛等。

目前，有气相色谱法、薄层—紫外法等辛硫磷检测分析方法，因辛硫磷在常温下很稳定，但在120～130 ℃的高温下容易分解，由此增加了在高温条件下检测辛硫磷的难度[３]。

因为辛硫磷遇热易分解，所以采用液相色谱法测定辛硫磷。

1材料与方法
1.1试验材料
供试试剂：乙腈、二氯甲烷、甲醇（均为色谱柱）、氯化钠（分析纯）；供试仪器与设备：匀浆机、氮吹仪、Agilent 1100液相色谱仪（紫外检测器）、0.22 μm 滤膜、0.5 mg氨基柱；供试蔬菜：西红柿。

1.2试验设计
根据西红柿样品中辛硫磷的添加水平，试验设3个处理，即0.1 mg/kg（A）、0.5 mg/kg（B）、1.0 mg/kg（C），进行回收率试验和精密度试验，5次重复。

1.3试验方法
1.3.1色谱条件。

色谱柱为SB-C8（4.6×250 mm，5 μm）；检测波长为280 nm。

流动相为有机相（甲醇+乙腈=70+30）+水相=90+10；流速：0.5 mL/min。

1.3.2样品处理。

准确称取25 g试样放入匀浆机中，加入50.0 mL乙腈，在匀浆机中高速匀浆2 min后用滤纸过滤，滤液收集到装有5～7 g氯化钠的50 mL 具塞量筒中，收集滤液40～50 mL，盖上塞子，剧烈振荡1 min，在室温下静置30 min，使乙腈相和水相分层。

从100 mL具塞量筒中准确吸取10.00 mL乙腈相溶液，放入150 mL烧杯中、将烧杯放入80 ℃水浴锅上加热，杯内缓缓通入氮气或空气流，将乙腈蒸发近干；加入
2.0 mL甲醇+二氯甲烷（1+99）溶解残渣，盖上铝箔，待净化。

将氨基柱用4.0 mL甲醇+二氯甲烷（1+99）预洗条件化，当溶剂液面到达柱吸附层表面时，立即加入上述待净化溶液，用15 mL离心管收集洗脱液，用2 mL甲醇+二氯甲烷（1+99）洗烧杯后过柱，并重复1次。

将离心管置于氮吹仪上，水浴温度50 ℃，氮吹蒸发至近干，加入甲醇3mL，再用蒸馏水准确定容至5.0 mL。

在混合器上混匀后，用0.22 μm滤膜过滤，放入小瓶中待测[3-6]。

1.3.3测定方法。

准确吸取1 000 μg/mL辛硫磷农药0.5 mL，放入10 mL容量瓶中，并用甲醇定容到10 mL，再从中吸取50 μg/mL辛硫磷农药0.02 mL放入10 mL容量瓶中并用甲醇定容至10 mL，制成浓度为0.1 μg/mL的标准使用液。

辛硫磷出峰时间为6.798 min，样品中某组分的保留时间与标准中辛硫磷的保留时间相差在± 0.5 min内的可认定为该农药（图1）[7-8]。

2结果与分析
由表1可以看出，处理A、B、C的平均回收率都在83.5%～103.2%，变异系数均在4.38%以下。

且该西红柿样品中辛硫磷的含量小于0.05 mg/kg（即辛硫磷的最低检出限）（图2）。

3结论
采用液相色谱法能准确测定蔬菜中的辛硫磷残留，该方法的回收率和精密度均能满足残留分析的要求，重现性好，灵敏度高，比国家规定的气相色谱法快速、准确，适用于蔬菜中辛硫磷残留量的测定。

4参考文献
[1] 罗军，向晓霞，周江，等.蔬菜、水果中12种有机磷农药残留结果与分析[J].中国卫生检疫杂志，2007，17（4）：663-664.
[2] 陈浩，柳训才，李胜清，等.蔬菜中高毒有机磷农药多残留的测方法研究[J].食品科学，2005，26（3）：204.
[3] 周瑶敏，王冬根，戴廷灿，等.用毛细管气相色谱法测定蔬菜中的辛硫磷[J].江西农业学报，2005，17（4）：52-55.
[4] 赵辉，闫实.黄瓜番茄中氨基甲酸酯类农药残留量的高效液相色谱测定[J].农业环境科学学报，2005，24（S1）284-287.
[5] 郝学飞，董小海，钟红舰.氨基甲酸酯类农药残留检测方法对比研究[J].食品科学，2010（2）：13-14.
[6] 张梅凤.高效液相色谱法在生物样品农药残留分析中的应用[J].农化新世纪，2006（2）：21-23，26.
[7] 毛应明，王学松，斯琴高娃，等.高效液相色谱法测定紫菜中辛硫磷残留量[J].化学工程与装备，2010（11）：138-140.
[8] 何书海，唐海武，陈菲，等.高效液相色谱法测定土壤中辛硫磷[J].安徽农业科学，2010（5）：2566-2567，2612.。