几种_淀粉酶校准品和质控品的互换性研究

几种α-淀粉酶校准品和质控品的互换性研究
李民，王延伟，陈阵，胡瑛（解放军第210医院检验科，辽宁大连116021）
摘要：目的探讨几种α-淀粉酶校准品和质控品是否具有互换性。

方法采用临床实验室标准化委员会推荐的方法，测定20份血清和欲评测的校准品和质控品中的α-淀粉酶活性。

结果德赛校准品、和光校准品、朗道正常值校准品、朗道高值校准品、朗道正常值质控品、朗道高值质控品、和光正常值质控品、和光高值质控品以及2个批号的卫生部质控品具有互换性；其他3个批号的卫生部质控品不具有互换性。

结论使用德赛校准品和朗道质控品，和光校准品和和光质控品可以保证测定结果的准确性；3个批号的卫生部质控品因不具有互换性，因此它们作为室间质量评价的物质是不合适的。

关键词：α-淀粉酶；互换性
中图分类号：R446文献标志码：A doi：10．3969/j．issn．1671-3826．2012．04．070文章编号：1671-3826（2012）04-0942-02
Evaluation of the commutability of several calibrators and quality control ma-terials of theα-amylase
Li Min，Wang Yang-wei，Chen Zhen，Hu Ying（Department of Clinical Laboratory，PLA No．210Hospital，Dalian Liaoning 116021，China）
Abstract：Objective To evaluate the commutability of several calibrators and quality control materials of theα-amylase．Methods Activity ofα-amylase in20serum samples，calibrator and controls were determined by CLSI recommended method．Results The DiaSys calibrator，Heguang calibrator，Randox CAL2，Randox CAL3，Randox HUM ASY CONTROL2，Randox HUM ASY CONTROL3，Heguang101Ⅰ，Heguang101Ⅱand two lot controls of the health ministry are commutable，whereas the other three lot controls of the health ministry are not commutable．Conclusion Use the DiaSys calibrator and the Randox controls，the Hegung calibrator and101Ⅰand101Ⅱcan assure the trueness of the measurement results，the three lot controls of the health ministry are not commutable，so they should not be used of the external quality assessment（EQA）controls．
Key words：α-amylase；commutability
校准品和质控品的互换性是指它们在不同测定系统和不同样本（健康人、患者）之间的表现是一致的［1］。

本研究探讨了几种α-淀粉酶校准品和质控品的互换性，现将结果报告如下。

1材料与方法
1．1仪器奥林巴斯AU640全自动生化分析仪（OLYM-PUS OPTITAL CO，LTD），日立LABSPECT008全自动生化分析仪（Hitachi High-Technologies Corporation）。

1．2试剂德赛α-淀粉酶试剂（批号60070106/2，DiaSys），和光α-淀粉酶试剂（批号212629，和光纯药工业株式会社）。

1．3样本选择20份有较宽α-淀粉酶活性范围的新鲜血清样本，脂血、溶血、黄疸样本除外，测试后分装，－20ħ
作者简介：李民（1973-），男，辽宁人，主管技师，医学硕士
通信作者：陈阵副主任技师，E-mail：Zhenchen6@126．com 保存以备复查。

1．4校准品和质控品德赛α-淀粉酶校准品（批号12000，DiaSys），和光α-淀粉酶校准品（批号DG777，和光纯药工业株式会社），和光正常值和高值质控品（批号1002087、1002088，和光纯药工业株式会社），朗道正常值和高值校准品（批号683UN、427UE，Randox Laboratories LTD），朗道正常值和高值质控品（批号736UN、506UE，Randox Laboratories LTD）以及5个批号的卫生部质控品（201211-201215）。

1．5方法采用临床实验室标准化委员会（CLSI）推荐的方法［2］进行测定。

（1）用2种方法分别测定20份新鲜血清样本和欲评测的校准品和质控品中的α-淀粉酶活性，每份样本测定3次，取平均值。

（2）用SPSS16．0做线性回归分析，确定2种方法之间是否具有直线关系。

（3）如果2种方法之间直线关系成立，以德赛测定结果为横坐标，和光测定结果为纵坐标绘制散点图，在散点图上绘制回归线
和95%可预测区间线。

观察欲评测的校准品和质控品在散点图上的位置，如落在95%可预测区间线内，则说明具有互换性；否则不具有互换性。

2结果
2．120份新鲜血清样本和被评测的校准品、质控品中的α-淀粉酶活性测定结果见表1。

表1α-淀粉酶活性（U/L）
样本和光德赛
血清
120．619．2
272．666．6
3120．7104．1
4170．5163．6
5250．8183．9
6278．0225．4
7304．8234．8
8351．0276．5
9372．7292．2
10441．8346．4
11488．1398．4
12630．0520．4
13781．7642．7
14845．0697．0
15919．0716．0
161007．4824．7
171204．81019．2
181367．71135．0
191455．51190．0
201517．01266．0
卫生部质控品
11061．2727．8
21395．6945．1
373．865．9
4411．3290．3
5736．3509．4
朗道正常值质控品108．581．7
朗道高值质控品390．8267．5
和光正常值质控品123．094．2
和光高值质控品308．6222．9
朗道正常值校准品122．991．1
朗道高值校准品359．4250．4
德赛校准品264．8207．0
和光校准品310．1269．3
2．2线性回归分析结果（1）相关系数R2=0．998，两种方法显著相关。

（2）方差分析F=11570，P＜0．01，两种方法之间直线关系成立。

（3）回归方程Y（和光）=1．204ˑ（德赛）+8．41。

2．3以德赛测定结果为横坐标，和光测定结果为纵坐标绘制散点图，绘制回归线及95%可预测区间线，见封四图8。

3个批号的卫生部质控品测定结果在散点图上的位置落在95%可预测区间线外，因此它们不具有互换性，其余校准品和质控品则具有互换性。

3讨论
国际临床化学和实验室联合会（IFCC）于2006年提出了测定α-淀粉酶催化活性的参考方法［3］，其水解底物为4，6-亚乙基（G1）-4-硝基苯基（G7）-α-（1→4）-D-麦芽七糖苷（EPS）。

目前，大多数α-淀粉酶试剂均采用EPS作为水解底物，但仍有一些试剂生产厂商选择麦芽五糖苷，还有使用三糖的，这就导致同一样本在不同测定系统之间的测定结果有较大差异。

本次研究使用的试剂中德赛采用的水解底物是EPS，和光采用的是麦芽五糖苷，从回归方程中可以看出，和光的测定结果约为德赛的1．2倍左右。

这样的现状就要求临床实验室应为每种方法设立不同的参考范围。

互换性是校准品和质控品的重要特性之一。

从CLSI 推荐的评价互换性的方法中可以看出，是否具有互换性即是否具有基质效应，即校准品和质控品应与待测标本的表现是一致的。

对校准品而言，即使对它的赋值是准确的，如果不具有互换性，仍然会导致测定结果的准确性出现偏差；对质控品而言，尤其是室间质量评价的质控品，如果不具有互换性，这样的评价是没有意义的。

我们在实际工作中使用的是德赛校准品+朗道正常值质控品、和光校准品+和光质控品组合，在生产厂商保证溯源性和赋值准确的前提下，可以很好地保证测定结果的准确性。

本次研究评测的5个批号的卫生部质控品中3个批号不具有互换性，其中2个偏离95%可预测区间线较大，它们作为室间质评物质是不合适的，原因有待于进一步探讨。

基质效应是非常复杂的，尤其是成分复杂的样本（如血清等）。

我们注意到，和光校准品并非是血清基质的，但它与血清样本的表现是相同的，联想到反应体系的pH值对酶耦联反应最终产生的呈色物质4-硝基苯酚影响非常大，进而影响到测定的α-淀粉酶催化活性（pH值每增加0．1，即可导致催化活性增加10%［4］），我们似乎可以猜测对于α-淀粉酶的校准品而言，pH值的调校是尤为重要的。

参考文献：
［1］Vesper HW，Miller WG，Myers GL．Reference materials and commutability［J］．Clin Biochem Rev，2007，28（4）：139－
147．
［2］CLSI document EP14-A2-Evaluation of matrix effects，approved guideline［J］．2nd ed．Wayne，PA USA：CLSI，2005．
［3］Schumannl G，Aoki R，Ferrero CA，et al．IFCC primary refer-ence procedures for the measurement of catalytic activity concen-
trations of enzymes at37ħ．Part8．Reference procedure for the
measurement of catalytic concentration of a-amylase［J］．Clin
Chem Lab Med，2006，44（9）：1146－1155．
［4］Lorentz K．Routine a-Amylase assay using protected4-Nitrophe-nyl-1，4-a-D-maltoheptaoside and a novel a-Glucosidase［J］．Cli-
ni Chem，2000，46（5）：644－649．
（收稿日期：2012-06-13）。