高含量IgG牛初乳胶囊的安全性研究

高含量IgG牛初乳胶囊的安全性研究
金洪伟;陈映新
【摘要】针对一款高含量IgG的牛初乳胶囊产品进行安全性毒理学评价,其IgG含量高达30％.结果表明,牛初乳胶囊大、小鼠经口急性毒性最大耐受剂量均>20
g/kg·bw,相对于人体推荐量的606倍,属实际无毒级;鼠伤寒沙门氏菌/哺乳动物肝微粒体酶试验(Ames试验)、小鼠骨髓细胞微核试验、小鼠精子畸形试验三项遗传毒性试验结果均为阴性;30 d喂养试验亦未见其对受试动物有明显毒性损害作用.【期刊名称】《中国乳业》
【年(卷),期】2018(000)011
【总页数】6页(P59-64)
【关键词】牛初乳胶囊;高含量IgG;急性毒性;遗传毒性;安全性
【作者】金洪伟;陈映新
【作者单位】深圳市光明新区疾病预防控制中心;深圳市光明新区疾病预防控制中心
【正文语种】中文
牛初乳中富含多种免疫因子和生长因子等生理功能性成分，具有常乳无法比拟的特点[1]。

在各种免疫因子中，免疫球蛋白是最引人注目的[2]。

IgG是免疫球蛋白的一种，是人和动物血液中含量最高的免疫球蛋白[3]。

关于牛初乳及IgG保健功能性的研究和报道很多，但安全性毒理学方面的研究鲜有文献报道，本文依据《保健
食品检验与评价技术规范》（2003版）的要求，开展高含量IgG的牛初乳胶囊产品安全性毒理学评价试验，包括急性毒性试验，遗传毒性试验［鼠伤寒沙门氏菌/
哺乳动物肝微粒体酶试验（Ames试验）、小鼠骨髓细胞微核试验、小鼠精子畸形试验）］和30 d喂养试验，通过试验验证其安全性。

1 材料与方法
1.1 样品
牛初乳胶囊为市售产品，其IgG含量为30%，样品为乳黄色粉末状，感官检查未
见异常。

该样品推荐用量为每日2 次、每次5 粒，每粒0.2 g，因此每人每日2 g （含IgG 0.6 g），如成人体重以60 kg计，则相当于0.033 g/kg·bw。

1.2 试验动物
SPF级ICR小白鼠和SPF级Wistar品系大白鼠，均购自北京维通利华实验动物技术有限公司。

在SPF级动物实验中心（屏障环境）饲养，温度为21～23 ℃，湿
度为55%～58%RH。

试验动物所用的清洁级饲料购自北京科澳协力饲料有限公司。

1.3 试验方法
依据《保健食品检验与评价技术规范》（2003版）进行急性毒性试验、遗传毒性试验和30 d喂养试验，遗传毒性试验包括鼠伤寒沙门氏菌/哺乳动物肝微粒体酶
试验（Ames试验）、小鼠骨髓细胞微核试验、小鼠精子畸形试验3 项。

1.4 结果统计
采用SPSS软件对所有试验数据进行统计学分析。

2 结果
2.1 急性毒性试验
牛初乳胶囊大鼠和小鼠的急性毒性试验结果见表1。

在14 d的观察期间内，两性
别大、小鼠一般状态良好，未出现任何中毒症状，无动物死亡。

根据试验所设计的剂量，观察到的结果及大、小鼠急性毒性判定标准，可以认为牛初乳胶囊经口最大
耐受量＞20.0 g/kg·bw（相对于人体推荐量的606 倍），属实际无毒物质。

2.2 Ames试验
牛初乳胶囊2 次Ames 试验结果分别见表2和表3。

结果表明，在加与不加活化
系统条件下，受检样品各试验菌株的回变菌落数均未超过阴性对照组的2 倍以上，故认为牛初乳胶囊对Ames试验菌株无致突变性。

表1 牛初乳胶囊大、小鼠急性毒性试验结果?
表2 牛初乳胶囊第一次Ames试验结果?
表3 牛初乳胶囊第二次Ames试验结果?
表4 牛初乳胶囊对小鼠骨髓细胞微核发生率的影响注：**与阴性对照组相比，差
异极显著（p＜0.01）?
表5 牛初乳胶囊对雄性小鼠精子畸形的影响注：**与阴性对照组比较差异极显著（p＜0.01）；每组小鼠各5 只，每只小鼠观察精子1 000 个?
表6 牛初乳胶囊对大鼠体重的影响?
2.3 小鼠骨髓细胞微核试验
牛初乳胶囊小鼠骨髓细胞微核试验的结果见表4。

经卡方检验统计分析，各试验组与阴性对照比较，差异无统计学意义（p＞0.05），阳性对照组（给予0.04
g/kg·bw的环磷酰胺）的微核率高于阴性对照组，且差异有统计学意义（p＜
0.01）。

本试验表明，牛初乳胶囊对小鼠骨髓嗜多染红细胞微核发生率无影响。

2.4 小鼠精子畸形试验结果
牛初乳胶囊小鼠精子畸形试验的结果见表5。

结果显示，各组动物均可见到一定数量的畸形精子，经秩和检验统计方法，给予环磷酰胺（0.04 g/kg·bw）的阳性对
照组精子畸形率与阴性对照组相比差异有统计学意义（p＜0.01）；而各试验组动物的精子畸形率与阴性对照组相比差异无统计学意义（p＞0.05），表明牛初乳胶囊对小鼠精子畸形发生率无影响。

2.5 30 d喂养试验
2.5.1 一般状态观察
在整个试验过程中，各组动物一般状况良好，行为正常，未见任何中毒表现，亦无动物死亡。

2.5.2 对大鼠体重的影响
在30 d喂养过程中，牛初乳胶囊对大鼠体重增长的影响见表6。

对大鼠每周体重
进行方差分析处理，结果均无显著性差异（p＞0.05），说明牛初乳胶囊对大鼠体重的增长无显著影响。

表7 牛初乳胶囊对大鼠总食物利用率的影响?
表8 牛初乳胶囊对血液学指标的影响物数红细胞计数血红蛋白白细胞计
表9 牛初乳胶囊对大鼠白细胞分类的影响?
2.5.3 对大鼠总食物利用率的影响
在30 d喂养过程中，牛初乳胶囊对大鼠体重增重、进食量、食物利用率的影响见表7。

结果显示，对各剂量组动物的体重增重、进食量和食物利用率进行方差分析，各组间均无显著性差异（p＞0.05），表明牛初乳胶囊对大鼠的总食物利用率无显著影响。

2.5.4 对大鼠血液学指标的影响
大鼠红细胞、血红蛋白和白细胞的检测结果见表8。

结果显示，红细胞计数、血红蛋白含量和白细胞计数均在正常值范围内，各试验组与阴性对照组相比均无显著性差异（p＞0.05），说明牛初乳胶囊对红细胞总数、血红蛋白含量和白细胞总数无显著影响。

2.5.5 对大鼠白细胞分类的影响
牛初乳胶囊对大鼠白细胞分类的影响检测结果见表9。

结果表明，雄性、雌性大鼠的嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜碱性粒细胞均在正常值范
围之内，且各试验组与阴性对照组相比无显著性差异（p＞0.05），说明牛初乳胶囊对各型白细胞均无显著影响。

2.5.6 对末期血液生化指标的影响
试验结束后处死动物，分离大鼠血清，检测血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、血清尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）、血糖（GLu）、白蛋白（ALb）、总蛋白（TP）、总胆固醇（TCH）、甘油三酯（TG）等指标（表10）。

结果表明，剂量受试物组的各项指标与阴性对照组相比无显著性差异，说明牛初乳胶囊对大鼠血生化指标无显著影响。

2.5.7 病理检查结果
（1）大体解剖
用牛初乳胶囊对大鼠经口灌胃30 d后，对大体进行解剖检查，各组动物重要脏器未见明显病理改变和异常。

表10 牛初乳胶囊对末期血液生化指标的影响雄雌剂量（g/kg·bw） 3.30 1.65
0.83 阴性对照组 3.30 1.65 0.83 阴性对照组动物数（只） 10 10 10 10 10 10 10 10 ALT（IU/L）42.5±5.44 41.0±5.23 41.7±6.86 42.4±5.56 41.5±4.77
42.0±6.58 42.8±5.18 43.4±5.04 AST（IU/L）127.1±18.41 124.6±18.21 128.3±18.77 126.8±15.77115.6±16.93 116.3±22.65 119.9±12.40
121.2±22.02 BUN（mmol/L）5.03±1.54 5.22±1.06 5.08±1.89 5.19±1.03
5.64±1.09 5.83±1.78
6.72±1.70 6.43±1.03 Cr（μmol/L）55.5±
7.23
53.5±6.29 54.7±7.04 55.3±9.50 50.3±4.64 51.6±6.02 53.8±5.77 52.8±5.33 GLu（mmol/L）6.77±0.88 6.08±1.14 6.30±1.66 6.77±1.02 6.48±2.32
6.32±2.10 5.51±1.18 5.43±0.77 Alb（g/L）34.2±3.16 35.5±4.17 34.9±4.38 35.1±3.48 32.8±2.70 31.6±1.58 32.2±2.25 30.7±3.13 TP（g/L）63.5±4.22 63.2±3.46 66.9±4.75 65.3±4.14 64.6±3.84 65.3±5.83 64.0±3.86 66.3±4.30
TCH（mmol/L）1.52±0.54 1.46±0.55 1.51±0.50 1.48±0.47 1.70±0.34
1.66±0.22 1.62±0.40 1.57±0.41 TG（mmol/L）0.59±0.23 0.64±0.36
0.65±0.28 0.58±.0.14 0.48±0.29 0.51±0.46 0.47±0.34 0.45±0.36
表11 牛初乳胶囊对大鼠脏器重量及脏器/体重值的影响雄雌剂量（g/kg·bw）
3.30 1.65 0.83 阴性对照组 3.30 1.65 0.83 阴性对照组动物数（只） 10 10 10 10 10 10 10 10实验末禁食后体重（g）290.3±33.07 295.3±25.11 283.1±27.47 283.4±17.93 200.6±12.70 215.6±28.21 209.2±30.59 202.9±16.88肝重（g）11.79±1.28 11.88±1.25 11.53±1.14 11.51±1.35 7.03±0.74 7.05±0.75
7.14±0.96 6.95±0.87脾重（g）0.93±0.13 0.90±0.11 0.91±0.19 0.88±0.09 0.55±0.05 0.58±0.09 0.57±0.08 0.53±0.05肾重（g）2.40±0.18 2.35±0.31 2.31±0.20 2.27±0.24 1.55±0.15 1.66±0.12 1.56±0.12 1.56±0.15睾丸（卵巢）重（g）3.097±0.260 3.119±0.286 2.957±0.352 2.987±0.280 0.147±0.032 0.156±0.019 0.144±0.017 0.143±0.022肝脏/体重值（%） 4.10±0.55
4.04±0.46 4.12±0.68 4.06±0.38 3.51±0.35 3.31±0.49 3.45±0.54 3.43±0.39
脾脏/体重值（%）0.32±0.03 0.31±0.04 0.32±0.05 0.31±0.04 0.28±0.02
0.27±0.06 0.28±0.05 0.26±0.02肾脏/体重值（%）0.83±0.08 0.80±0.14
0.82±0.11 0.80±0.09 0.78±0.07 0.78±0.11 0.76±0.09 0.77±0.08睾丸（卵巢）/体重值（%）1.074±0.094 1.064±0.140 1.050±0.131 1.055±0.085
0.074±0.017 0.074±0.014 0.071±0.015 0.071±0.011
（2）脏器重量及脏器/体重值
牛初乳胶囊对大鼠脏器重量及脏器/体重值的影响见表11。

经方差分析，各试验组与阴性对照组主要脏器重量和脏器／体重值均无明显的差异（p＞0.05）。

2.5.8 病理组织学检查结果
（1）组织检查
对牛初乳胶囊30 d喂养试验中的对照组和高剂量组大鼠进行病理组织学检查，剖检后肉眼观察，心、肺、肝、脾、肾、胃、肠、睾丸（卵巢）等主要脏器的颜色、形状、大小等均未见明显异常。

（2）镜下检查
病理检查结果表明，高剂量组与对照组大鼠的肝、脾、肾、胃、肠、睾丸（卵巢）均未见与试验因素有关的病理组织学变化。

3 小结
经试验分析，牛初乳胶囊的大、小鼠经口急性毒性最大耐受剂量均＞20 g/kg·bw （相对于人体推荐量的606 倍），属实际无毒级；鼠伤寒沙门氏菌/哺乳动物肝微粒体酶试验、小鼠骨髓细胞微核试验、小鼠精子畸形试验3 项遗传毒性试验结果均为阴性；30 d喂养试验亦未见其对受试动物有明显毒性损害作用。

C
参考文献
【相关文献】
[1] 宫春波，张永翠. 牛初乳中的营养成分及其保健功能[J]. 中国乳业，2003（4）：27-29.
[2] 陈明，张勇，冯炜，等. 功能性食品原料牛初乳[J]. 食品工业，2004（3）：39-41.
[3] 胡晓艳. 免疫球蛋白的制备及对小白鼠免疫功能的影响：[硕士论文][D]. 武汉：武汉工业学院，2008.。