应用抑制消减杂交技术克隆人大肠癌转移相关新基因

应用抑制消减杂交技术克隆人大肠癌转移相关新基因
梁莉;丁彦青;李欣;杨玉芳;肖军;张进华;赵培冉
【期刊名称】《南方医科大学学报》
【年(卷),期】2004(024)007
【摘要】目的克隆新的大肠癌转移相关基因,为进一步阐述大肠癌转移的分子机制提供线索.方法利用抑制消减杂交技术,以1对来自同一亲本、转移能力不同的大肠癌细胞株SW620和SW480为研究对象,构建2种大肠癌转移促进基因和转移抑制基因的cDNA消减文库.随机挑取文库克隆进行差异筛选,对所得的差异片段进行测序和同源性分析,利用NorthemBlot对新基因的表达情况进行验证.结果两种消减文库分别含有235和232个白色克隆,90%以上的白色克隆含有插入片段.随机挑取约200个阳性克隆进行差异筛选,共获得29个差异片段.测序及同源分析发现15个为未知基因,GenBank登陆号为CD485499-CD485513.其中与5号染色体序列同源的基因有6个.结论抑制消减杂交技术是筛选、克隆大肠癌转移相关新基因的有效手段;5号染色体上可能存在多个与大肠癌转移相关的新基因位点:筛选到的新基因片段为进一步克隆其全长、研究基因功能提供了实验基础.
【总页数】4页(P742-745)
【作者】梁莉;丁彦青;李欣;杨玉芳;肖军;张进华;赵培冉
【作者单位】第一军医大学病理学教研室,广东,广州,510515;第一军医大学病理学教研室,广东,广州,510515;第一军医大学病理学教研室,广东,广州,510515;第一军医大学病理学教研室,广东,广州,510515;第一军医大学病理学教研室,广东,广
州,510515;第一军医大学病理学教研室,广东,广州,510515;第一军医大学病理学教研室,广东,广州,510515
【正文语种】中文
【中图分类】R735.3
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