稀有人参皂苷对实验性白癜风模型的影响
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模型成功标准：肉眼可观察到豚鼠黑色皮肤 变苍白，随着用药时间的延长，有的出现白斑，甚 至原有黑毛处长出白毛［１１］。
第 ５ 期 吴苑琪等：稀有人参皂苷对实验性白癜风模型的影响
·６８３·
疗效判定标准：以豚鼠用药部位中心３ｃｍ２ 为 一观察单位，以空白对照组皮肤颜色为参照，优为 受试区皮肤呈黑色；良为受试区皮肤呈棕黑色或 棕色；中为受试区皮肤呈棕黄色；差为受试区皮肤 呈黄色或白色；总有效率以优加良计算［１２－ 。］１３ １． ５． ３ 生化测定 将豚鼠于末次给药后 １ ｈ，以 ２０％ 乌拉坦腹注射麻醉（０． ５ ｍＬ／ １００ ｇ），于腹部 主动脉取血，按照各试剂盒的说明书加入到抗凝 管中，离心得到血浆，用于单胺氧化酶（ＭＡＯ）、胆 碱酯酶（ＣＨＥ）、血清酪氨酸酶（ＴＹＲ）等指标的检 测。
ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅｓ． Ｒａｒｅ ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅｓ ｈａｓ ａ ｎｉｃｅ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｅｆｆｅｃｔ ｏｎ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ ａlａｎｉｍａl ｍｏｄｅlｓ ｏｆ ｖｉｔｉlｉｇｏ ｐｒｏｖｉｄｉｎｇ ａｎ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａl ｂａｓｉｓ ｆｏｒ ｃlｉｎｉｃａl ｕｓｅ．
１ 材料和方法
１． １ 药物与试剂 人参皂苷 Ｒｈ２ 和人参皂苷 Ｒｇ３：本实验室自
制（纯度 ９０％ ）；ＲＰＭＩ-１６４０ 细胞培养基：Ｇｉｂｃｏ 公 司；ＭＴＴ：北京索来宝公司； ： ＤＭＳＯ Ｓｉｇｍａ 公司；氢 醌：天津市天力化学试剂有限公司；过氧化氢：西 安化学试剂厂；硫化钠：天津市天力化学试剂有限 公司；血 清 酪 氨 酸 酶 （ＴＹＲ ）试 剂 盒、胆 碱 酯 酶 （ＣＨＥ）试剂盒、单胺氧化酶（ＭＡＯ）试剂盒：上海 圻明生物科技有限公司。 １． ２ 细胞与动物
Ｒｈ２ 和人参皂苷 Ｒｇ３ 组合物对鼠黑素瘤细胞增殖活性的影响。采用两种化学脱色法（分
别使用氢醌和过氧化氢）制备实验性白癜风动物模型，经不同剂量（１． ０ ｇ／ · ， ｋｇ ｄ ２． ０ ｇ／
ｋｇ·ｄ）的人参皂苷干预后，肉眼观察药物治疗实验性白癜风动物模型的疗效，并拍照记
录。考察人参皂苷 Ｒｈ２ 和人参皂苷 Ｒｇ３ 组合物对白癜风动物模型血浆中单胺氧化酶
生长期的黑素瘤 Ｂ１６-Ｆ１０ 细胞，经计数板计数、 １ 培 ６４０ 养液稀释，将其制备成密度为 １． ０ × １０５ 个／ ｍＬ 的细胞悬液，将其接种于 ９６ 孔板中，每孔 １００ μＬ（细胞密度约为每孔 １． ０ × １０４ 个）。培养 ２４ｈ 后，吸出原培养液，加入终浓度为 ６２． ５， １２５， ， ２５０ ５００μｇ／ ｍＬ 的人参皂苷组合物（人参皂 苷 Ｒｈ２ 和人参皂苷 Ｒｇ３ 组合物质量比分别为 （ ） （ ） ； （ ） （ ） ； ｍ Ｒｈ２ ∶ ｍ Ｒｇ３ ＝ ２∶ ８ ｍ Ｒｈ２ ∶ ｍ Ｒｇ３ ＝ ５∶ ５ ｍ （ ） （ Ｒｈ２ ∶ ｍ Ｒｇ３）＝ ８∶ ２）。每一浓度设 ６ 个复孔， 以含 ０． ５％ ＤＭＳＯ 的 １ ６４０ 培养液作为阴性对 照［７－９］。待 ４８ｈ 后，用微量加样枪吸出药液。然 后每孔加入浓度为 ５ｍｇ／ ｍＬ 的 ＭＴＴ 溶液 ２０ ， μＬ 继续培养 ４ ｈ，吸出原培养液，每孔加 入 １５０ μＬＤＭＳＯ，在室温下振荡 １０ ｍｉｎ 后，用酶标检测仪 １在． ４波． ２长 为评Ａ价５７０方下法进 行按测以定下其公吸式光计度值算（人Ｏ参Ｄ）皂。苷组 合物对黑素瘤细胞增殖抑制率。
（ＭＡＯ）、胆碱酯酶（ＣＨＥ）和血清酪氨酸酶（ＴＹＲ）含量的影响。ＭＴＴ 实验结果表明该组
合物对黑素瘤细胞的增殖具有显著的抑制作用。经稀有人参皂苷干预后的白癜风动物模
型血浆中 ＭＡＯ 值降低，ＣＨＥ 活力降低，ＴＹＲ 含量增加。通过肉眼观察能明显地看到动物
模型白癜风症状减轻甚至消失。稀有人参皂苷对实验性白癜风动物模型具有良好的治疗
·化学与化影响
吴苑琪１，２，刘魏征１，范丽华１，朱晨辉１，段志广１，范代娣１
（西北大学 化工学院，陕西 西安 ； ７１００６９ ２． 同济大学 生命科学与技术学院，上海 ） ２０００９２
摘要：探究稀有人参皂苷对实验性白癜风动物模型的治疗作用。ＭＴＴ 法检测人参皂苷
（ ｍｅlａｎｏｍａ ｃｅllｓ． Ｔｈｅ ａｎｉｍａl ｍｏｄｅlｓ ｏｆ ｖｉｔｉlｉｇｏ ｗｅｒｅ ｐｒｅｐａｒｅｄ ｂｙ ｔｗｏ ｃｈｅｍｉｃａl ｄｅｃｏlｏｒｉｎｇ ｍｅｔｈｏｄｓ ｈｙｄｒｏｑｕｉ）， （ · ｎｏｎｅ ａｎｄ ｈｙｄｒｏｇｅｎ ｐｅｒｏｘｉｄｅ ｔｈｅｎ ｗｅｒｅ ｓｅｐａｒａｔｅlｙ ｔｒｅａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｄｏｓｅｓ ｏｆ ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅｓ １． ０ ｇ ／ ｋｇ ｄ · ） ， ２． ０ ｇ ／ ｋｇ ｄ ． Ｔｏ ｏｂｓｅｒｖｅ ｔｈｅ ｃｕｒａｔｉｖｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｍｅｄｉｃｉｎａl ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ ｉｎ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｖｉｔｉlｉｇｏ ｐｉｃｔｕｒｅｓ ａ， ， ｂｏｕｔ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａl ａｎｉｍａl ｍｏｄｅlｓ ｗｅｒｅ ｒｅｃｏｒｄｅｄ． Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ＭＡＯ ＣＨＥ ＴＹＲ ｉｎ ｐlａｓｍａ ｏｆ
待建模成功后，剂量组给予含 １． ０ｇ／ ｋｇ 和 ２． ０ｇ／ ｋｇ 的人参皂苷组合物（人参皂苷 Ｒｈ２ 和人 参皂苷 Ｒｇ３ 按照体积比 ５∶ ５ 混合）的鼠粮，空白 对照组和模型对照组给予等量不加药的鼠粮，持 续 ４０ 天。 １． ５． ２ 肉眼观察 每天按时观察豚鼠的活动、进 食、精神状态和建模情况。每隔 ５ｄ 称重 １ 次，定 期对动物试验区皮肤进行观察、拍照。建模成功 后，肉眼观察人参皂苷组合物对白癜风豚鼠模型 的治疗效果，并记录其色素脱失情况。
黑素瘤细胞 Ｂ１６-Ｆ１０，购买于中国科学院细 胞库；花黑色豚鼠６０ 只，体重１８０ｇ ～２００ｇ，购自第 四军医大学动物实验中心。 仪 器 １． ３
８０ｉ 正置显微镜，日本 Ｎｉｋｏｎ 公司；多功能酶 标仪，美国 ＢｉｏＴｅｋ 公司；电热鼓风干燥箱，武汉海 声达仪器设备公司；台式离心机，上海医疗器械 厂；超低温冰箱 ，美国 ＵＬＴ１３８６-３-Ｖ３４ ；真 ＲＥＶＣＯ 空冷冻干燥机 ，美 ＦＲＥＥＺＯＮＥ 国 ；电 ＬＡＢＣＯＮＣＯ 子天平，瑞士 ＭｅｔｔlｅｒＴｏllｅｄｏ 公司。 实验 １． ４ ＭＴＴ １． ４． １ 细万胞方培数养据和细胞增殖活性测定 取对数
ｖｉｔｉlｉｇｏ ａｎｉｍａl ｍｏｄｅlｓ ｗｈｉｃｈ ｅｆｆｅｃｔｅｄ ｂｙ ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅｓ Ｒｈ２ ａｎｄ Ｒｇ３． Ｔｈｅ ＭＴＴ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａl ｒｅｓｕlｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ
， ｔｈｅ ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅｓ Ｒｈ２ ａｎｄ Ｒｇ３ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔlｙ ｉｎｈｉｂｉｔ ｔｈｅ ｐｒｏlｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｅlａｎｏｍａ ｃｅllｓ． Ｇｉｎｓｅｎ-
ｏｓｉｄｅｓ Ｒｈ２ ａｎｄ Ｒｇ３ ｗａｓ ｄｅｆｉｎｉｔｅlｙ ｄｅｃｒｅａｓｉｎｇ ｔｈｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ＭＡＯ ａｎｄ ＣＨＥ ｉｎｃｒｅａｓｉｎｇ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ＴＹＲ．
， Ｗｅ ｃｏｕlｄ ｏｂｖｉｏｕｓlｙ ｏｂｓｅｒｖｅ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｖｉｔｉlｉｇｏ ｓｙｍｐｔｏｍｓ ｒｅlｉｅｖｅｄ ａｎｄ ｄｉｓａｐｐｅａｒｅｄ ａｆｔｅｒ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｒａｒｅ
收稿日期：
２０１７-０４-０６
基金项目：全国大学生创新创业训练计划基金资助项目（２０１６１０６９７００７）；西北大学开放基金资助项目（１６ＮＷ４６）
作者简介：吴苑琪，女，福建泉州人，从事生物工程研究。
通讯作万者方：数范据代娣，女，陕西蒲城人，西北大学教授，博士生导师，从事生物化工研究。
西北大学学报（自然科学版）
年 月，第 卷第 期， ， ， ， ２０１８ １０
４８ ５ Ｏｃｔ． ２０１８ Ｖｏl． ４８ Ｎｏ． ５
（ ） Ｊｏｕｒｎａl ｏｆ Ｎｏｒｔｈｗｅｓｔ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｎａｔｕｒａl Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｅｄｉｔｉｏｎ
★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★
作用，为临床应用提供了实验依据。
关 键 词：稀有人参皂苷；白癜风；动物模型；黑素瘤细胞
中图分类号： 文献标识码： ： Ｒ７５８． ６
Ａ ＤＯＩ １０． １６１５２ ／ ｊ． ｃｎｋｉ． ｘｄｘｂｚｒ． ２０１８-０５-００９
Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｒａｒｅ ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅｓ ｏｎ ｔｈｅ
： Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｔｏ ｅｘｐlｏｒｅ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｒａｒｅ ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅｓ ｏｎ ｔｈｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａl ｖｉｔｉlｉｇｏ ａｎｉｍａl ｍｏｄｅlｓ．
ＭＴＴ ｍｅｔｈｏｄｓ ｗｅｒｅ ｅｍｐlｏｙｅｄ ｔｏ ｍｅａｓｕｒｅ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅｓ Ｒｈ２ ａｎｄ Ｒｇ３ ｏｎ ｐｒｏlｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｕｒｉｎｅ
抑制率（％ ）＝ （对照组平均 ＯＤ 值 － 给药组 平均 ＯＤ 值）／ 对照组平均 ＯＤ 值 × １００％ 。 １． ５ 动物模型实验 １． ５． １ 豚鼠白癜风模型的建立与给药 取黑色 或黑花色豚鼠 ６０ 只，雌雄各半，选择豚鼠背部黑 灰色部位，４ｃｍ × ４ｃｍ 为单位作为试验区。随机 分为空白对照组、模型对照组、高剂量组（２． ０ｇ／ ｋｇ）和低剂量组（１． ０ｇ／ ｋｇ），每组 １０ 只。除空白 对照组外，在剩余 ５０ 只豚鼠中随机挑选 ２５ 只在 皮肤试验区涂抹 ５％ 过氧化氢，另外 ２５ 只涂抹 ７％ 氢醌，每次用量约 １ｍＬ，每天 １ 次，连续 ３０ｄ 进 行建模。空白对照组每天涂抹等量纯化水 。 ［１０］
·６８２·
西北大学学报（自然科学版） 第 ４８ 卷
： ； ； ； Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ ｒａｒｅ ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅｓ ｖｉｔｉlｉｇｏ ａｎｉｍａl ｍｏｄｅlｓ ｍｅlａｎｏｍａ ｃｅllｓ
白癜风是以皮肤黑色素细胞功能缺失为特征 的获得性皮肤病，多表现为局限性或泛发性的皮 肤黏膜色素脱失［１］。该病普遍认为是由于遗传 免疫、神经精神、内分泌代谢、环境及自由基的氧 化损伤等多方面因素引起黑素细胞的破坏，从而 导致色素脱失［２ － 。３］
ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａl ｖｉｔｉlｉｇｏ ｍｏｄｅlｓ
， ， ， ， ＷＵ Ｙｕａｎｑｉ１，２ ＬＩＵ Ｗｅｉｚｈｅｎｇ１ ＦＡＮ Ｌｉｈｕａ１ ＺＨＵ Ｃｈｅｎｈｕｉ１ ， ＤＵＡＮ Ｚｈｉｇｕａｎｇ１ ＦＡＮ Ｄａｉｄｉ１
（ ， ， ， ； １． Ｃｏllｅｇｅ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｃａl Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｎｏｒｔｈｗｅｓｔ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｘｉ′ａｎ ７１００６９ Ｃｈｉｎａ ， ， ， ） ２． Ｓｃｈｏｏl ｏｆ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏlｏｇｙ Ｔｏｎｇｊｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｓｈａｎｇｈａｉ ２０００９２ Ｃｈｉｎａ
人参皂苷 Ｒｈ２ 和人参皂苷 Ｒｇ３ 是从人参中 提取出的一类有效成分，具有抗肿瘤、抗疲劳、增 强免疫力等作用［５］，能在一定程度上增强黑素细 胞的活性。目前，在国内报道过用白蒺藜、补骨脂 等为主的中草药治疗白癜风［６］，但至今尚未见有 关于稀有人参皂苷组合物对白癜风治疗的研究报 告。因此本实验通过 ＭＴＴ 实验研究人参皂苷 Ｒｈ２ 和人参皂苷 Ｒｇ３ 组合物对体外黑素瘤细胞的 抑制作用以及通过对实验性豚鼠进行氢醌及过氧 化氢脱色，对比研究人参皂苷 Ｒｈ２ 和人参皂苷 Ｒｇ３ 组合物对白癜风动物模型的治疗作用。
第 ５ 期 吴苑琪等：稀有人参皂苷对实验性白癜风模型的影响
·６８３·
疗效判定标准：以豚鼠用药部位中心３ｃｍ２ 为 一观察单位，以空白对照组皮肤颜色为参照，优为 受试区皮肤呈黑色；良为受试区皮肤呈棕黑色或 棕色；中为受试区皮肤呈棕黄色；差为受试区皮肤 呈黄色或白色；总有效率以优加良计算［１２－ 。］１３ １． ５． ３ 生化测定 将豚鼠于末次给药后 １ ｈ，以 ２０％ 乌拉坦腹注射麻醉（０． ５ ｍＬ／ １００ ｇ），于腹部 主动脉取血，按照各试剂盒的说明书加入到抗凝 管中，离心得到血浆，用于单胺氧化酶（ＭＡＯ）、胆 碱酯酶（ＣＨＥ）、血清酪氨酸酶（ＴＹＲ）等指标的检 测。
ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅｓ． Ｒａｒｅ ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅｓ ｈａｓ ａ ｎｉｃｅ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｅｆｆｅｃｔ ｏｎ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ ａlａｎｉｍａl ｍｏｄｅlｓ ｏｆ ｖｉｔｉlｉｇｏ ｐｒｏｖｉｄｉｎｇ ａｎ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａl ｂａｓｉｓ ｆｏｒ ｃlｉｎｉｃａl ｕｓｅ．
１ 材料和方法
１． １ 药物与试剂 人参皂苷 Ｒｈ２ 和人参皂苷 Ｒｇ３：本实验室自
制（纯度 ９０％ ）；ＲＰＭＩ-１６４０ 细胞培养基：Ｇｉｂｃｏ 公 司；ＭＴＴ：北京索来宝公司； ： ＤＭＳＯ Ｓｉｇｍａ 公司；氢 醌：天津市天力化学试剂有限公司；过氧化氢：西 安化学试剂厂；硫化钠：天津市天力化学试剂有限 公司；血 清 酪 氨 酸 酶 （ＴＹＲ ）试 剂 盒、胆 碱 酯 酶 （ＣＨＥ）试剂盒、单胺氧化酶（ＭＡＯ）试剂盒：上海 圻明生物科技有限公司。 １． ２ 细胞与动物
Ｒｈ２ 和人参皂苷 Ｒｇ３ 组合物对鼠黑素瘤细胞增殖活性的影响。采用两种化学脱色法（分
别使用氢醌和过氧化氢）制备实验性白癜风动物模型，经不同剂量（１． ０ ｇ／ · ， ｋｇ ｄ ２． ０ ｇ／
ｋｇ·ｄ）的人参皂苷干预后，肉眼观察药物治疗实验性白癜风动物模型的疗效，并拍照记
录。考察人参皂苷 Ｒｈ２ 和人参皂苷 Ｒｇ３ 组合物对白癜风动物模型血浆中单胺氧化酶
生长期的黑素瘤 Ｂ１６-Ｆ１０ 细胞，经计数板计数、 １ 培 ６４０ 养液稀释，将其制备成密度为 １． ０ × １０５ 个／ ｍＬ 的细胞悬液，将其接种于 ９６ 孔板中，每孔 １００ μＬ（细胞密度约为每孔 １． ０ × １０４ 个）。培养 ２４ｈ 后，吸出原培养液，加入终浓度为 ６２． ５， １２５， ， ２５０ ５００μｇ／ ｍＬ 的人参皂苷组合物（人参皂 苷 Ｒｈ２ 和人参皂苷 Ｒｇ３ 组合物质量比分别为 （ ） （ ） ； （ ） （ ） ； ｍ Ｒｈ２ ∶ ｍ Ｒｇ３ ＝ ２∶ ８ ｍ Ｒｈ２ ∶ ｍ Ｒｇ３ ＝ ５∶ ５ ｍ （ ） （ Ｒｈ２ ∶ ｍ Ｒｇ３）＝ ８∶ ２）。每一浓度设 ６ 个复孔， 以含 ０． ５％ ＤＭＳＯ 的 １ ６４０ 培养液作为阴性对 照［７－９］。待 ４８ｈ 后，用微量加样枪吸出药液。然 后每孔加入浓度为 ５ｍｇ／ ｍＬ 的 ＭＴＴ 溶液 ２０ ， μＬ 继续培养 ４ ｈ，吸出原培养液，每孔加 入 １５０ μＬＤＭＳＯ，在室温下振荡 １０ ｍｉｎ 后，用酶标检测仪 １在． ４波． ２长 为评Ａ价５７０方下法进 行按测以定下其公吸式光计度值算（人Ｏ参Ｄ）皂。苷组 合物对黑素瘤细胞增殖抑制率。
（ＭＡＯ）、胆碱酯酶（ＣＨＥ）和血清酪氨酸酶（ＴＹＲ）含量的影响。ＭＴＴ 实验结果表明该组
合物对黑素瘤细胞的增殖具有显著的抑制作用。经稀有人参皂苷干预后的白癜风动物模
型血浆中 ＭＡＯ 值降低，ＣＨＥ 活力降低，ＴＹＲ 含量增加。通过肉眼观察能明显地看到动物
模型白癜风症状减轻甚至消失。稀有人参皂苷对实验性白癜风动物模型具有良好的治疗
·化学与化影响
吴苑琪１，２，刘魏征１，范丽华１，朱晨辉１，段志广１，范代娣１
（西北大学 化工学院，陕西 西安 ； ７１００６９ ２． 同济大学 生命科学与技术学院，上海 ） ２０００９２
摘要：探究稀有人参皂苷对实验性白癜风动物模型的治疗作用。ＭＴＴ 法检测人参皂苷
（ ｍｅlａｎｏｍａ ｃｅllｓ． Ｔｈｅ ａｎｉｍａl ｍｏｄｅlｓ ｏｆ ｖｉｔｉlｉｇｏ ｗｅｒｅ ｐｒｅｐａｒｅｄ ｂｙ ｔｗｏ ｃｈｅｍｉｃａl ｄｅｃｏlｏｒｉｎｇ ｍｅｔｈｏｄｓ ｈｙｄｒｏｑｕｉ）， （ · ｎｏｎｅ ａｎｄ ｈｙｄｒｏｇｅｎ ｐｅｒｏｘｉｄｅ ｔｈｅｎ ｗｅｒｅ ｓｅｐａｒａｔｅlｙ ｔｒｅａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｄｏｓｅｓ ｏｆ ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅｓ １． ０ ｇ ／ ｋｇ ｄ · ） ， ２． ０ ｇ ／ ｋｇ ｄ ． Ｔｏ ｏｂｓｅｒｖｅ ｔｈｅ ｃｕｒａｔｉｖｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｍｅｄｉｃｉｎａl ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ ｉｎ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｖｉｔｉlｉｇｏ ｐｉｃｔｕｒｅｓ ａ， ， ｂｏｕｔ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａl ａｎｉｍａl ｍｏｄｅlｓ ｗｅｒｅ ｒｅｃｏｒｄｅｄ． Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ＭＡＯ ＣＨＥ ＴＹＲ ｉｎ ｐlａｓｍａ ｏｆ
待建模成功后，剂量组给予含 １． ０ｇ／ ｋｇ 和 ２． ０ｇ／ ｋｇ 的人参皂苷组合物（人参皂苷 Ｒｈ２ 和人 参皂苷 Ｒｇ３ 按照体积比 ５∶ ５ 混合）的鼠粮，空白 对照组和模型对照组给予等量不加药的鼠粮，持 续 ４０ 天。 １． ５． ２ 肉眼观察 每天按时观察豚鼠的活动、进 食、精神状态和建模情况。每隔 ５ｄ 称重 １ 次，定 期对动物试验区皮肤进行观察、拍照。建模成功 后，肉眼观察人参皂苷组合物对白癜风豚鼠模型 的治疗效果，并记录其色素脱失情况。
黑素瘤细胞 Ｂ１６-Ｆ１０，购买于中国科学院细 胞库；花黑色豚鼠６０ 只，体重１８０ｇ ～２００ｇ，购自第 四军医大学动物实验中心。 仪 器 １． ３
８０ｉ 正置显微镜，日本 Ｎｉｋｏｎ 公司；多功能酶 标仪，美国 ＢｉｏＴｅｋ 公司；电热鼓风干燥箱，武汉海 声达仪器设备公司；台式离心机，上海医疗器械 厂；超低温冰箱 ，美国 ＵＬＴ１３８６-３-Ｖ３４ ；真 ＲＥＶＣＯ 空冷冻干燥机 ，美 ＦＲＥＥＺＯＮＥ 国 ；电 ＬＡＢＣＯＮＣＯ 子天平，瑞士 ＭｅｔｔlｅｒＴｏllｅｄｏ 公司。 实验 １． ４ ＭＴＴ １． ４． １ 细万胞方培数养据和细胞增殖活性测定 取对数
ｖｉｔｉlｉｇｏ ａｎｉｍａl ｍｏｄｅlｓ ｗｈｉｃｈ ｅｆｆｅｃｔｅｄ ｂｙ ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅｓ Ｒｈ２ ａｎｄ Ｒｇ３． Ｔｈｅ ＭＴＴ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａl ｒｅｓｕlｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ
， ｔｈｅ ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅｓ Ｒｈ２ ａｎｄ Ｒｇ３ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔlｙ ｉｎｈｉｂｉｔ ｔｈｅ ｐｒｏlｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｅlａｎｏｍａ ｃｅllｓ． Ｇｉｎｓｅｎ-
ｏｓｉｄｅｓ Ｒｈ２ ａｎｄ Ｒｇ３ ｗａｓ ｄｅｆｉｎｉｔｅlｙ ｄｅｃｒｅａｓｉｎｇ ｔｈｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ＭＡＯ ａｎｄ ＣＨＥ ｉｎｃｒｅａｓｉｎｇ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ＴＹＲ．
， Ｗｅ ｃｏｕlｄ ｏｂｖｉｏｕｓlｙ ｏｂｓｅｒｖｅ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｖｉｔｉlｉｇｏ ｓｙｍｐｔｏｍｓ ｒｅlｉｅｖｅｄ ａｎｄ ｄｉｓａｐｐｅａｒｅｄ ａｆｔｅｒ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｒａｒｅ
收稿日期：
２０１７-０４-０６
基金项目：全国大学生创新创业训练计划基金资助项目（２０１６１０６９７００７）；西北大学开放基金资助项目（１６ＮＷ４６）
作者简介：吴苑琪，女，福建泉州人，从事生物工程研究。
通讯作万者方：数范据代娣，女，陕西蒲城人，西北大学教授，博士生导师，从事生物化工研究。
西北大学学报（自然科学版）
年 月，第 卷第 期， ， ， ， ２０１８ １０
４８ ５ Ｏｃｔ． ２０１８ Ｖｏl． ４８ Ｎｏ． ５
（ ） Ｊｏｕｒｎａl ｏｆ Ｎｏｒｔｈｗｅｓｔ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｎａｔｕｒａl Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｅｄｉｔｉｏｎ
★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★
作用，为临床应用提供了实验依据。
关 键 词：稀有人参皂苷；白癜风；动物模型；黑素瘤细胞
中图分类号： 文献标识码： ： Ｒ７５８． ６
Ａ ＤＯＩ １０． １６１５２ ／ ｊ． ｃｎｋｉ． ｘｄｘｂｚｒ． ２０１８-０５-００９
Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｒａｒｅ ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅｓ ｏｎ ｔｈｅ
： Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｔｏ ｅｘｐlｏｒｅ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｒａｒｅ ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅｓ ｏｎ ｔｈｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａl ｖｉｔｉlｉｇｏ ａｎｉｍａl ｍｏｄｅlｓ．
ＭＴＴ ｍｅｔｈｏｄｓ ｗｅｒｅ ｅｍｐlｏｙｅｄ ｔｏ ｍｅａｓｕｒｅ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅｓ Ｒｈ２ ａｎｄ Ｒｇ３ ｏｎ ｐｒｏlｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｕｒｉｎｅ
抑制率（％ ）＝ （对照组平均 ＯＤ 值 － 给药组 平均 ＯＤ 值）／ 对照组平均 ＯＤ 值 × １００％ 。 １． ５ 动物模型实验 １． ５． １ 豚鼠白癜风模型的建立与给药 取黑色 或黑花色豚鼠 ６０ 只，雌雄各半，选择豚鼠背部黑 灰色部位，４ｃｍ × ４ｃｍ 为单位作为试验区。随机 分为空白对照组、模型对照组、高剂量组（２． ０ｇ／ ｋｇ）和低剂量组（１． ０ｇ／ ｋｇ），每组 １０ 只。除空白 对照组外，在剩余 ５０ 只豚鼠中随机挑选 ２５ 只在 皮肤试验区涂抹 ５％ 过氧化氢，另外 ２５ 只涂抹 ７％ 氢醌，每次用量约 １ｍＬ，每天 １ 次，连续 ３０ｄ 进 行建模。空白对照组每天涂抹等量纯化水 。 ［１０］
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西北大学学报（自然科学版） 第 ４８ 卷
： ； ； ； Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ ｒａｒｅ ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅｓ ｖｉｔｉlｉｇｏ ａｎｉｍａl ｍｏｄｅlｓ ｍｅlａｎｏｍａ ｃｅllｓ
白癜风是以皮肤黑色素细胞功能缺失为特征 的获得性皮肤病，多表现为局限性或泛发性的皮 肤黏膜色素脱失［１］。该病普遍认为是由于遗传 免疫、神经精神、内分泌代谢、环境及自由基的氧 化损伤等多方面因素引起黑素细胞的破坏，从而 导致色素脱失［２ － 。３］
ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａl ｖｉｔｉlｉｇｏ ｍｏｄｅlｓ
， ， ， ， ＷＵ Ｙｕａｎｑｉ１，２ ＬＩＵ Ｗｅｉｚｈｅｎｇ１ ＦＡＮ Ｌｉｈｕａ１ ＺＨＵ Ｃｈｅｎｈｕｉ１ ， ＤＵＡＮ Ｚｈｉｇｕａｎｇ１ ＦＡＮ Ｄａｉｄｉ１
（ ， ， ， ； １． Ｃｏllｅｇｅ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｃａl Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｎｏｒｔｈｗｅｓｔ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｘｉ′ａｎ ７１００６９ Ｃｈｉｎａ ， ， ， ） ２． Ｓｃｈｏｏl ｏｆ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏlｏｇｙ Ｔｏｎｇｊｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｓｈａｎｇｈａｉ ２０００９２ Ｃｈｉｎａ
人参皂苷 Ｒｈ２ 和人参皂苷 Ｒｇ３ 是从人参中 提取出的一类有效成分，具有抗肿瘤、抗疲劳、增 强免疫力等作用［５］，能在一定程度上增强黑素细 胞的活性。目前，在国内报道过用白蒺藜、补骨脂 等为主的中草药治疗白癜风［６］，但至今尚未见有 关于稀有人参皂苷组合物对白癜风治疗的研究报 告。因此本实验通过 ＭＴＴ 实验研究人参皂苷 Ｒｈ２ 和人参皂苷 Ｒｇ３ 组合物对体外黑素瘤细胞的 抑制作用以及通过对实验性豚鼠进行氢醌及过氧 化氢脱色，对比研究人参皂苷 Ｒｈ２ 和人参皂苷 Ｒｇ３ 组合物对白癜风动物模型的治疗作用。