苯甲酸电离常数三种测定方法的比较
食品中防腐剂-------苯甲酸含量的测定
4. 检测系统
? 作用：连续监测被色谱系统分离后的柱流出物组 成和含量变化的装置。其作用是将柱流出物中样 品组成和含量的变化转化为可供检测的信号，完 成定性定量分析的任务。
（二）.液液分配色谱法（ LLC）
1.分离原理：利用组分在两相中溶解度的差异 2.固定相：载体+固定液（物理或机械涂渍法）
缺点：系统内部压力大，易流失，不实用 固定液——极性→NLLC 固定液——非极性→RLLC 3.正相色谱——固定液极性 > 流动相极性（NLLC）
极性小的组分先出柱，极性大的组分后出柱，适于分离极性组分 4. 反相色谱——固定液极性 < 流动相极性（RLLC）
正相——流动相与溶质排斥力强，作用时间↑ ， k↑，组 分tR↑
反相——流动相与溶质排斥力弱，作用时间↓， k↓，组 分tR↓
② 固定相：极性小的烷基键合相 C8柱，C18柱（ODS柱——HPLC约80%问题）
③ 流动相：极性大的甲醇-水或乙腈-水 流动相极性 > 固定相极性
底剂 + 有机调节剂（极性调节剂） 例：水 + 甲醇，乙腈，THF ④ 流动相极性与k的关系：
（4）梯度洗脱装置
? 梯度洗脱：通过改变流动相的组成来调整组分的k值，改 变分离因子α值，以达到最短时间内得到最佳分离的目的。
? 梯度洗脱的特点：改善分离, 加快分析速度；改善峰形, 减 少拖尾;可能引起基线漂移
? 类型：高压梯度与低压梯度
2.进样系统
? 进样器是将样品溶液准确送入色谱柱的装置，要求密封性 好，死体积小，重复性好，进样引起色谱分离系统的压力 和流量波动要很小。
药物分子设计
疏水性参数(lgP) 疏水性参数(lgP)
• 定义： 定义： • 公式：KOW = CO / CW lg P = lg KOW 公式： • 测定方法：摇瓶法、HPLC法和预测法（基团加和法和分 测定方法：摇瓶法、HPLC法和预测法 法和预测法（
子整体性质描述法） 子整体性质描述法）
• 5.3.4 用于计算参数的常用软件 • 5.4 3D-QSAR 3D-
CHARMm
Unix/Linux http://www. /
CHARMm（ CHARMm（Chemistry at HARvard Macromolecular Mechanics） Mechanics） 是一个被广泛承认并应用的分子动力学模拟程序，用于生物大分子 的模拟，包括能量最小化、分子动力学和蒙特卡罗模拟等。 CHARMm包含具有专家特点的标准最小化和分子动力学方法， CHARMm包含具有专家特点的标准最小化和分子动力学方法， 包括正则模式计算、相关性分析、量子力学与分子力学相结合的方 法等。 程序可为用户提供处理各种小分子、大分子（包括蛋白质、核 酸和糖）的经验化能量计算，包括：相互作用能及构象能量、局域 最小化、旋转势垒、与时间相关的动力学行为、振动频率等。 模拟过程提供了有关分子结构、相互作用、能量等信息。
7.1 分子三维结构数据库和药物研发软件简介
• DOCK软件 DOCK软件
DOCK是Kuntz研究小组发展的分子对接程序 DOCK是Kuntz研究小组发展的分子对接程序， 研究小组发展的分子对接程序， 可能是目前应用最为广泛的分子对接程序之一. 可能是目前应用最为广泛的分子对接程序之一.它 能自动地模拟配体分子在受体活性位点的作用情 并把理论猜测最佳的方式记录下来。 况，并把理论猜测最佳的方式记录下来。而且该 方法能够对配体的三维结构数据库进行自动搜索， 方法能够对配体的三维结构数据库进行自动搜索， 因此被广泛应用于基于受体结构的数据库搜索的 药物设计中，并取得了巨大的成功。 药物设计中，并取得了巨大的成功。
高效液相色谱法测定饮料中苯甲酸
4、液相色谱的结构
• 一 流路系统： 流动相、管路、泵、混 合器、脱气机等组成
• 在225nm下测其峰面积：
体积/mL 2.00 含量/mg 0.010 峰面积 280594
3.00 0.015 415433
4.00 0.020 555024
5.00 0.025 687406
6.00 0.030 831821
峰面积
1000000 800000 600000 400000 200000
3、为什么要选择液相色谱方 法？
• 高速：HPLC采用高压输液设备，流速大大增加，分析速度极快， 只需数分钟；而经典方法靠重力加料，完成一次分析需时数小时。
• 高效：填充物颗粒极细且规则，固定相涂渍均匀、传质阻力小， 因而柱效很高。可以在数分钟内完成数百种物质的分离。
• 高灵敏度：检测器灵敏度极高：UV——10-9g, 荧光检测器—— 10-11g
50 100 150 200 250 300 350 波长/nm
三、实验阶段
• 2.仪器参数设置
• 流动相: 甲醇：乙酸铵溶液（0.02mol/L） (5:95)
• 流速:1mL/min • 进样量：10uL • 检测器波长：225nm
三、实验阶段
• 3.标准曲线绘制
• 分别移取苯甲酸标液2mL、3mL、4mL、5mL 、6mL于 50mL容量瓶中，定容至刻度，摇匀。
6、如何定性，如何定量
• 1、定性分析：在确定的色谱分离条件下，苯甲酸有一定的保留时间， 在相同的实验条件下，分别测定苯甲酸纯物质和饮料样品中各组分的保 留值，将两者进行对比，就可确定饮料中何种组分为苯甲酸，对其进行 定性。
气相色谱法测定苯甲酸含量
汽 化室 温度 ： ５ ℃ ； ２５ 检 测器 ： Ｉ Ｆ Ｄ； 载 气 （ ） 流 速 ４ ｍｉ ｍｉ ； Ｎ２ ： ５ ｎ ／
燃 气 （ ）流 速 ３ｍｉ ｍｉ； Ｈ２ ： ５ ｎ ／
从 以上三 种柱 子所 做 苯 甲酸 的出峰 情况 可 以看 助 燃气 （ 空气 ） 流速 ３ Ｏ Ｌ ｍｉ； ： ２ ｒ ￣ ｎ ａ
四Ｊ － 】￣ｘ ｌ － ４ 进 样量 ：． ｕ ０６ Ｌ。
１ ５ 内标 物的选 择 ． 甲苯 氧化 制苯 甲酸要 用醋 酸做 溶剂 。由于溶 剂
第ｌ ３卷
２ １ 第 ２期 ００年
为 ２２ １ ； ．８ 标样 ２中苯甲酸含量为 ４ ５５ ， ． ２ 内标
含量 为 ３ ５ ７ ／ 标 样 ３中苯 甲酸 含 量 为 ３ ３ ６ ， ．８￣； ／ ． ３ 内标 含量为 ２ ７ ２ ； 析结果 见表 ３ ．６％ 分 。
由于 苯 甲酸 的极 性 较 强 ， 了保 证 在 短 时 间 内 为
化 室温 度为 ２ ５ ５ ＂ 为 合 适 。当柱 温 较 低 时 ， 甲 Ｃ较 苯 酸 的峰 宽很 宽 ， 拖尾 现象 。温 度太 高 ， 甲醛 与苯 有 苯 甲酸又 不能 完 全 分 开 。所 以选 择 １０Ｃ作 为 柱 温 。 ４￣ 具 体操 作条 件如 下 ： 色 谱柱 ： １ｍ×３ｍｍ 的不锈 钢柱 ；
第 ２期
气相 色谱 法测 定苯 甲酸含 量
３ ３
分 析 与 测 试
ｔ ｔ ７ｔ ｔ ｔ ｔ７ｌ
■
气 相 色谱 法 测 定 苯 甲酸 含 量
侯 治 会
（ 兖矿 国泰 化 工有 限公 司 ， 东滕 州 ，７ ５ ７ 山 ２７ ２ ）
摘
关 键词 ： 气相 色谱 测定 苯 甲酸含 量
苯甲酸的电离常数
苯甲酸的电离常数一、引言苯甲酸是一种有机酸，其化学式为C7H6O2。
它是一种白色结晶固体，可溶于水和乙醇等极性溶剂。
苯甲酸是一种弱酸，它的电离常数可以用来描述其在水中的电离程度。
二、什么是电离常数？电离常数是描述一个物质在水中电离程度的量。
当一个物质在水中部分或全部电离时，会产生带正或带负电荷的粒子，称为离子。
其中带正电荷的叫做阳离子，带负电荷的叫做阴离子。
在水中存在大量的氢氧根离子（OH-）和氢离子（H+），这些离子会与其他物质发生反应。
当一个物质在水中部分或全部电离时，它会产生相应数量的阳离子和阴离子。
这个过程可以用下面的化学方程式表示：HA + H2O ⇌ H3O+ + A-其中HA代表弱酸分子，H2O代表水分子，H3O+代表氢氧化合物（也称为游离氢），A-代表阴离子。
电离常数（Ka）是一个弱酸在水中部分电离的程度，它是酸解离常数（K）和水的自离子化常数（Kw）之比。
Ka越大，表示弱酸在水中电离的程度越高，它的酸性也就越强。
三、苯甲酸的电离常数苯甲酸是一种弱酸，其电离常数为6.46×10^-5。
这个值可以用下面的计算公式来求得：Ka = [H3O+][A-]/[HA]其中[H3O+]代表氢氧化合物浓度，[A-]代表阴离子浓度，[HA]代表弱酸浓度。
苯甲酸在水中部分电离成苯甲酸根离子（C7H5O2-）和氢氧化合物（H3O+）。
这个过程可以用下面的化学方程式表示：C7H6O2 + H2O ⇌ C7H5O2- + H3O+根据上面的计算公式和化学方程式，可以得到以下数据：[H3O+] = [C7H5O2-] = x[HA] = c - x其中c为苯甲酸初始浓度。
将上面的数据带入计算公式中，可以得到下面的方程式：Ka = x^2/(c - x)将Ka的值代入上面的方程式，可以解出x的值。
然后，用x的值代入化学方程式中，就可以求出[H3O+]和[C7H5O2-]的浓度。
四、影响苯甲酸电离常数的因素苯甲酸电离常数受以下几个因素的影响：1. pH值：苯甲酸在不同pH值下电离程度不同。
苯甲酸国标测定方法
苯甲酸国标测定方法1、主题内容与适用范围本标准规定了酱油、水果汁、果酱等食品中山梨酸、苯甲酸含量的测定方法。
本标准适用于酱油、水果汁、果酱等食品中山梨酸、苯甲酸含量的测定。
最低检出浓度：气相色谱法最低检出量为1μg，用于色谱分析的样品为1g时，最低检出浓度为1mg/kg。
第一篇气相色谱法(第一法)2、原理样品酸化后，用乙醚提取山梨酸、苯甲酸，用附氢火焰离子化检测器的气相色谱仪进行分离测定，与标准系列比较定量。
3、试剂3.1 乙醚：不含过氧化物。
3.2 石油醚：沸程30～60℃。
3.3 盐酸。
3.4 无水硫酸钠。
3.5 盐酸(1＋1)：取100mL盐酸，加水稀释至200mL。
3.6 氯化钠酸性溶液(40g/L)：于氯化钠溶液(40g/L)中加少量盐酸(1＋1)酸化。
3.7 山梨酸、苯甲酸标准溶液：准确称取山梨酸、苯甲酸各0.2000g，置于100mL容量瓶中，用石油醚—乙醚(3＋1)混合溶剂溶解后并稀释至刻度。
此溶液每毫升相当于2.0mg山梨酸或苯甲酸。
3.8 山梨酸、苯甲酸标准使用液：吸取适量的山梨酸、苯甲酸标准溶液，以石油醚－乙醚(3＋1)混合溶剂稀释至每毫升相当于50，100，150，200，250mg山梨酸或苯甲酸。
4、仪器气相色谱仪：具有氢火焰离子化检测器。
5、分析步骤5.1 样品提取称取2.50g事先混合均匀的样品，置于25mL带塞量筒中，加0.5mL 盐酸(1＋1)酸化，用15，10mL乙醚提取两次，每次振摇1min，将上层乙醚提取液吸入另一个25mL带塞量筒中。
合并乙醚提取液。
用3mL氯化钠酸性溶液(40g/L)洗涤两次，静止15min，用滴管将乙醚层通过无水硫酸钠滤入25mL容量瓶中。
加乙醚至刻度，混匀。
准确吸取5mL乙醚提取液于5mL带塞刻度试管中，置40℃水浴上挥干，加入2mL石油醚－乙醚(3＋1)混合溶剂溶解残渣，备用。
5.2 色谱参考条件5.2.1 色谱柱：玻璃柱，内径3mm，长2m，内装涂以5%(m/m)DEGS ＋1%(m/m)H3PO4固定液的60～80目Chromosorb W AW。
苯甲酸电离常数三种测定方法的比较
储备液2份，分别置50 mL容量瓶，用0．01 mol ／L NaOH和0．01 mol ／L HCI 稀释至刻度，在分光光度计上记
录吸收光谱．结果见图2，ABS为吸光度．根 吸收光谱的变化形式，选择235nm为分析波长．
-- ——4 6．．—．
表2电导 法测定苯甲 酸的电离常 数数据处理 A： ：=Q：Q箜!墨 S·m2·mol ～ ，测 定时 温度 垫℃
( I ．Anhui Hua ngs ha n Un i ve r si t y，Hua ngs han 245 021，Chi na； 2．De pt ．of Ch emi s t r y ，Na nj i n g Xi aozhuang Uni v er si t y， Nanj i ng 21 1 17 1，Ch i na ) Abs t ra c t ： Ioni z at i on c ons t ant of benzoi c a ci d wa s de t e r mi ne d by pot e nt i ome t r y，conduc t ome t ry and UVsp ect r op ho— t ome t r y．The de t e r mi ne d pKa of benzoi c ac i d by t h r e e met hods ar e 4．03，4．08 and 4．2 0，r e spe ct i ve l y．I t has been f ound t hat t h e r es ul t of UV s pe c t rophot ome t ry i s t h e mos t a cc ur a t e ．but t h e t hr e e met hods have di f f er e nt f e at u r e s
高效液相色谱法测定汽水中的苯甲酸
苯甲酸简介及其在汽水中的作用
苯甲酸简介
苯甲酸是一种有机化合物，化学式为C6H5COOH，具有苯甲酸的特殊气味。它微溶于水，易溶于乙醇、乙醚等 有机溶剂。
苯甲酸在汽水中的作用
苯甲酸在汽水中主要作为防腐剂使用，可以抑制微生物的生长和繁殖，延长汽水的保质期。同时，苯甲酸还可以 赋予汽水清爽的口感和特有的风味。但是，过量摄入苯甲酸可能会对人体健康产生不良影响，因此需要严格控制 其在汽水等食品中的含量。
不足
在实验过程中，发现样品处理过程中存在一些操作不规范的情况，如样品称量不准确、溶 解不完全等，对实验结果产生了一定影响。此外，在色谱条件优化方面还有待进一步提高 。
反思
针对实验中的不足之处，需要进一步加强样品处理操作的规范性和准确性，优化色谱条件 以提高分离效果和检测灵敏度。同时，还需要加强实验过程中的质量控制和数据分析能力 ，确保实验结果的准确性和可靠性。
高效液相色谱法测定汽水中的苯甲 酸
目录
• 实验目的与意义 • 实验原理及设备介绍 • 实验步骤与操作注意事项 • 实验结果展示与讨论 • 实验中的常见问题及解决方案 • 实验总结与展望
01 实验目的与意义
实验目的
测定汽水中苯甲酸的含量
通过高效液相色谱法准确测定汽水中苯甲酸的含量，为汽水质量控制提供依据。
包括输液泵、进样器、色谱柱、检测 器等部分，用于实现样品的分离、检 测和数据处理。
超声波清洗器
用于清洗色谱柱和其他实验器具，保 证实验结果的准确性。
电子天平
用于准确称量样品和标准品，保证实 验的精确性。
容量瓶、移液管等玻璃仪器
用于配制溶液和定容等操作。
试剂与材料准备
01
02
03
04
水质全分析实验指导书高效液相色谱法测定水样中的苯甲酸
实验一高效液相色谱法测定水样中的苯甲酸一、实验目的1.通过对高效液相色谱法测定样品中的苯甲酸2.掌握采用高效液相色谱法进行定性及定量分析的基本方法3. 掌握外标法的步骤和计算方法二、实验原理苯甲酸和苯甲酸钠是食品行业通用的防腐剂，是我国目前最常用的食品防腐剂，其主要作用是防止由微生物的活动而引起的食品变质。
据科学报道，目前影响我们食品安全的最大问题是食品腐败和微生物的繁殖，正是由于食品中使用了防腐剂，而使我们避免了更多食品中的不安全因素。
面粉中添加了增白剂最终转化成的苯甲酸不超过60 ppm，我国GB2760－1996《食品添加剂卫生使用标准》中规定，苯甲酸及苯甲酸钠在酱油、醋中的最大使用量为1000 ppm，葡萄酒中为800 ppm，碳酸饮料中为200 ppm。
苯甲酸分子式为：苯甲酸具有紫外吸收特性，可用紫外检测器进行检测。
标准品或待测样品进入液相色谱之后，经反相色谱柱分离，紫外检测器检测，可获得以保留时间为横坐标，紫外信号（电压或电流）为纵坐标的色谱图，不同物质保留时间不同，并且物质浓度与色谱峰面积成正比。
本实验通过高效液相色谱采用外标法对常见饮料（如雪碧）中苯甲酸进行测定（实际样品测定之前必须进行过滤），根据保留时间和峰面积进行定性和定量。
外标法常用于测定主要成分含量，是以待测组分的纯品作为对照品，以对照品和待测组分的保留时间和峰面积相比较进行定性和定量分析，外标法包括工作曲线法和外标一点法，本实验采取工作曲线法。
配置5个不同浓度的纯品，分别进行色谱分析，得到峰面积和浓度的线性关系表达式。
将待测组分峰面积代入公式，得到待测组分浓度。
三、仪器与试剂仪器：高效液相色谱仪；C18色谱柱；容量瓶（50mL）、10ml比色管、10ml 移液管、胶头滴管、洗耳球、小烧杯、针筒过滤器、2ml进样瓶。
试剂：苯甲酸（分析纯）；乙腈（色谱纯）；重蒸馏水。
四、实验步骤1.按仪器操作规程开机，设定流动相为乙腈/水=60/40，平衡色谱柱。
液相色谱法检测苯甲酸、山梨酸、糖精钠的疑难详解-不能不看的精华
液相色谱法检测苯甲酸、山梨酸、糖精钠的疑难详解苯甲酸、山梨酸、糖精钠是衡量食品卫生质量的重要指标，苯甲酸、山梨酸的检测参照GB/，糖精钠的检测参照GB/T ，即可开展实验。
苯甲酸、山梨酸、糖精钠虽是较常见的检测项目，但是要得到一个准确可靠的结果，也存在一定的难度，许多新手常出现因对方法理解发生偏差而检测出错的事故。
笔者根据自己多年该方面工作的实际经验出发，以苯甲酸、山梨酸为着重点，从样品前处理、检测仪器的选择、超标时的判断等几个易出问题的方面，进行了详细的阐述。
2 样品前处理的注意事项GB/和GB/ 在文字结构上有缺陷，在涉及用仪器法测定苯甲酸、山梨酸、糖精钠时，只讲述了液体样品的前处理方法，没有涉及对固体样品的前处理。
食品样品往往含有大量的油脂、蛋白质，对提取极为不利；如处理不干净也会污染色谱柱，影响检测工作。
这类样品处理的关键在于如何找到一种较理想的沉淀剂，尽量排除待测样品中的油脂、蛋白质，且不影响待测物组分的回收率。
GB/使用5％硫酸铜溶液沉淀蛋白，对于蛋白质含量较低的食品尚可，对于豆粉、奶粉、月饼等高油脂、高蛋白样品则沉淀效果不理想。
如用10％钨酸钠溶液作为沉淀剂，效果好些；如用10％亚铁氰化钾溶液和20％醋酸锌溶液则效果更理想（这是笔者目前用过最理想的沉淀剂）。
具体操作步骤如下：取一定量样品，捣碎，利用四分法原理称取样品克于50ml比色管中，加水20ml，浸泡、振荡均匀，加入氢氧化钠溶液(1mol/L) ml，加入%亚铁氰化钾溶液， 20%乙酸锌溶液，定容，振荡使其充分混匀后,用滤纸初滤除去沉淀物, 初滤液过μm微孔滤膜,收集滤液于样品瓶中，样品处理液和标准有溶液各进样5uL测定。
用这种方法简单易行，接触有机试剂少，重复性和回收率都令人满意；缺点是一定要用液相色谱法检测，有一定局限。
3 检测仪器的选择虽然液相色谱仪操作起来比气相色谱仪要复杂，但笔者建议如条件许可仍尽量用液相色谱法检测。
高效液相色谱测定食品中的苯甲酸盐
(三)薄层色谱法原理 样品 酸化 后,用乙醚提取
苯甲酸, 和糖精) 苯甲酸,山梨酸 (和糖精).
(四)紫外分分光度法测定苯甲酸原理 性溶液中可以随水蒸气蒸馏出来, 样品中苯甲酸在 酸 性溶液中可以随水蒸气蒸馏出来,与样 成分分离, 吸收苯甲酸, 品中 非挥发性 成分分离,用 碱液 吸收苯甲酸,然后 溶液在加热的条件下进行激烈氧化, 用 重铬酸钾 和 硫酸 溶液在加热的条件下进行激烈氧化, 使除苯甲酸以外的其它有机物氧化分解, 使除苯甲酸以外的其它有机物氧化分解,将此氧化后的溶液再次蒸 吸收苯甲酸, 馏,用 碱液 吸收苯甲酸,第二次所得的蒸馏液中基本不含 除苯甲酸以外的其它杂质.根据苯甲酸钠在225nm有最大吸收,故 有最大吸收, 除苯甲酸以外的其它杂质.根据苯甲酸钠在 有最大吸收 测定吸光度可计算出苯甲酸含量. 测定吸光度可Байду номын сангаас算出苯甲酸含量. (P220:适用于牛奶等有机物含量高 :
(一)高效液相色谱法 3,仪器试剂
(一)高效液相色谱法 4,测定
准确称取酱油5g,用氨水(1:1)调pH至7,加 水定容至50mL,混匀,用滤膜(0.45um)过滤.滤 液备用.
(一)高效液相色谱法 5,结果计算 6,讨论 比较高效液相色谱法与其他方法的原理; 讨论高效液相色谱法测定苯甲酸的注意事项.
(二)气相色谱法
请比较( 请比较(二)
原理 样品酸化后,用乙醚提取苯甲酸,山梨酸,用带氢火焰离子化检测 样品酸化后,用乙醚提取苯甲酸,山梨酸, 器的气相色谱仪进行分离测定,与标准系列比较定量.测出苯甲酸, 器的气相色谱仪进行分离测定,与标准系列比较定量.测出苯甲酸, 山梨酸量后,再分别乘以适当的相对分子质量比,求出苯甲酸钠, 山梨酸量后,再分别乘以适当的相对分子质量比,求出苯甲酸钠, 山梨酸钾量. 山梨酸钾量. 说明 本法为国家标准方法,可同时测定食品中苯甲酸和山梨酸的含量, 本法为国家标准方法,可同时测定食品中苯甲酸和山梨酸的含量, 山梨酸保留时间为173 173秒 苯甲酸保留时间为368 368秒 适用于酱油, 山梨酸保留时间为173秒,苯甲酸保留时间为368秒.适用于酱油, 科学的,但单位有误!), !),用于 果汁,果酱.最低检出限为1 果汁,果酱.最低检出限为1ug(科学的,但单位有误!),用于 色谱分析的样品为1g 1g时 最低检出浓度为1mg/kg 色谱分析的样品为1g时,最低检出浓度为1mg/kg (采用相同的提 取方法). 取方法).
工业分析技术专业《案例 苯甲酸的含量测定》
案例苯甲酸的含量测定一、目的要求1掌握用中和法测定药物含量的根本步骤和方法。
2掌握碱式滴定管的使用，掌握酚酞指示剂的滴定终点的判断。
二、方法原理苯甲酸M C7H6O2 = 属芳香羧酸类药物，电离常数Ka=×10-3, 可用标准碱溶液直接滴定。
计量点时，生成物是强碱弱酸盐，溶液呈微碱性，应选用碱性区域变色的指示剂，选用酚酞作指示剂。
三、操作步骤取本品约，精密称定，加中性稀乙醇〔对酚酞指示液显中性〕25mL溶解后，加酚酞指示液3滴，用氢氧化钠滴定液〔L〕滴定。
每1ml的氢氧化钠滴定液〔L〕相当于的C7H6O2。
附：一、中性稀乙醇的配制取95%的乙醇53mL,加水至100mL,加酚酞指示剂3滴, 用氢氧化钠滴定液〔L〕滴定至淡红色,即得二、氢氧化钠滴定液〔L〕：取氢氧化钠适量，加水振摇使溶解成饱和溶液，冷却后，置聚乙烯塑料瓶中，静置数日，澄清后备用。
取澄清的氢氧化钠饱和溶液，加新沸过的冷水使成1000mL，摇匀。
：取在105℃枯燥至恒重的基准邻苯二甲酸氢钾约，精密称定，加新沸过的冷水50mL，振摇，使其尽量溶解；加酚酞指示液2滴，用本液滴定；在接近终点时，应使邻苯二甲酸氢钾完全溶解，滴定至溶液显粉红色。
每1mL氢氧化钠滴定液〔L〕相当于的邻苯二甲酸氢钾。
贮藏：置聚乙烯塑料瓶中，密封保存；塞中有2孔，孔内各插入玻璃管1支，1管与钠石灰相连，1管供吸出本液使用。
考前须知：1配制本滴定液，采用量取澄清的氢氧化钠饱和溶液和新沸过的冷水制成，其目的在于排除碳酸钠和二氧化碳的干扰。
2取用澄清的氢氧化钠饱和溶液时，宜用刻度吸管插入溶液的澄清局部吸取，防止吸入液面上的碳酸钠膜状物。
3标定过程中所用的水均应为新沸过的冷水，以防止二氧化碳的干扰。
4滴定近终点时需缓缓滴加，防止滴过，溶液呈粉红色后，可能由于吸收空气中的二氧化碳而使之褪色。
粉红色能维持一分钟以上不变即为终点。
5本滴定液易吸收空气中的二氧化碳，贮藏时应按药典规定执行，否那么常需重新标定。
高效液相色谱法测定合剂中苯甲酸的含量
高效液相色谱法测定合剂中苯甲酸的含量陈媛;丘增萍;吴楣;蓝红梅;宋增炫;陈文露【摘要】目的：采用高效液相色谱法(HPLC法)测定合剂(前胡桑菊合剂、五柑合剂、胃肠合剂、佛耳合剂)中苯甲酸的含量。
方法用乙酸乙酯提取合剂中的苯甲酸,提取液浓缩后采用HPLC法进行测定。
选择Thermo Syncronis C18(250mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-磷酸二氢钾(0.05 mol/L)(45：55)为流动相,流速为1.0 ml/min,柱温为30℃,检测波长为226 nm。
结果苯甲酸回归方程Y=5835283.5514 X-23440.3860(R=0.9999),在0.020~0.1018 mg/ml范围内线性关系良好；前胡桑菊合剂、五柑合剂、胃肠合剂、佛耳合剂平均回收率分别为99.79%、99.37%、99.34%、99.92%；RSD分别为0.35%、0.10%、0.76%、0.36%(n=3)。
结论测定方法简便、准确、专属性强、重现性良好。
%Objective To establish a high performance liquid chromatography(HPLC) method for the determination of(Qianhu Sangju mixture, Wugan mixture, Weichang mixture, Foer mixture) benzoic acid. Methods The extraction mixture of benzoic acid with ethyl acetate, the concentrated extract was determined by HPLC method. Select the thermo syncronis C-18(250 mm×4.6 mm, 5 μm), with methanol and potassium dihydrogen phosphate(0.05 mol/L) (45:55) as mobile phase, flow rate of 1.0 ml/min, column temperature was 30℃ , the detection wavelength was 226 nm. Results Benzoic acid regression equation was Y=5835283.5514 X-23440.3860(R=0.9999), in 0.020~0.1018 mg/ml the linear relationship was good; Qinhu Sangju mixture, Wugan mixture, Weichang mixture, Foer mixture the average recovery rate was 99.79%, 99.37%, 99.34%, 99.92%;RSD=0.35%, 0.10%,0.76%, 0.36%(n=3). Conclusion This method is simple and accurate, with a strong specificity, so it can be used as preparation for the quality control.【期刊名称】《中国现代药物应用》【年(卷),期】2014(000)011【总页数】3页(P1-2,3)【关键词】高效液相色谱;合剂;苯甲酸;含量测定【作者】陈媛;丘增萍;吴楣;蓝红梅;宋增炫;陈文露【作者单位】514071 梅州市食品药品监督检验所;514071 梅州市食品药品监督检验所;514071 梅州市食品药品监督检验所;514071 梅州市食品药品监督检验所;514071 梅州市食品药品监督检验所;嘉应学院医学院【正文语种】中文由于生产工艺方面的因素以及患者服药时可能造成的污染, 大多数合剂都添加了防腐剂以防药物变质。
食品中山梨酸、苯甲酸的测定
3 分析步骤
• 结果计算： • 试样中山梨酸或苯甲酸(X)以毫克每千克表示，按式(3-1)计算：
• • • • • • • • •
式中： X——试样中山梨酸或苯甲酸的含量，mg/kg； A——测定用试样液中山梨酸或苯甲酸的质量，μg； V1——加入石油醚-乙醚（3+1)混合溶剂的体积，mL； V2——测定时进样的体积，μL； m——试样的质量，g； 5——测定时吸取乙醚提取液的体积，mL； 25——试样乙醚提取液的总体积，mL。
1
2015-3-23
（1）苯甲酸
• 近年来由于它的毒性，有用山梨酸代替的倾向。 我国《食品添加剂使用卫生标准》（GB27602011）规定：最大使用量根据不同食品要求不 同，其范围是0.2～2.0g/kg。其中碳酸饮料和 配制酒为0.2g/kg；腌制的蔬菜、酱及酱制品、 蜜饯（凉果）类为0.5g/kg；复合调味料为 0.6g/kg；葡萄酒、果酒、乳脂糖果、凝胶糖果 为0.8g/kg；酱油、醋、果酱（不包括罐头）、 果汁（味）冰、果蔬汁（肉）饮料、风味饮料 为1.0g/kg；食品工业用浓缩果蔬汁为2.0g/kg。
（2）山梨酸
• 山梨酸结构式为 • 别名花楸酸，分子量为112.13，是具有特殊 气味的白色单斜结晶。熔点132～135℃， 室温时，在100g水中能溶解0.16g山梨酸 （20℃），在100g无水乙醇或100g冰乙酸 中能溶解13g山梨酸，在100g油中能溶解 0.5～1.0g山梨酸
（2）山梨酸
• 山梨酸的急性毒性，大鼠经口LD50为 10.5±1.96g/kg体重，山梨酸和其他防腐剂同时使 用时不改变其急性毒性。用含10％山梨酸的饲料喂 养大鼠42天，没有发现有害影响。用此剂量的山梨 酸喂养大鼠120天，引起体重增加及肝增重，但动 物的繁殖能力仍正常。用5%山梨酸的饲料喂养大鼠 和狗90天，未发现有害影响。重量增加可能是由于 山梨酸的热能的利用。其ADI为0～ 25mg/kg(bw)(FAO/WHO,1994)。 • FAO/WHO联合食品添加剂委员会将其列为A类，可 以安全使用的食品添加剂。FDA评定为GRAS，是 目前较为安全的防腐剂。
实验三 苯甲酸离解常数的测定
实验三 苯甲酸离解常数的测定一、实验目的1．测定苯甲酸在不同pH 条件下的吸光度，求出苯甲酸的离解常数。
2．掌握紫外吸收光谱法测定弱酸离解常数的方法及在研究离子平衡中的应用。
3．学习并掌握紫外可见分光光度计的使用。
二、实验原理利用分光光度法可以精确地测定弱酸或弱碱的离解常数。
如果一个化合物其紫外吸收光谱随其溶液的pH 值，即溶液中氢离子浓度不同而不同，则可以利用紫外吸收光谱测定其离解常数。
设弱酸HB 按下式离解：23HB H O H O B +-++它的离解常数3H O B a HBa a K a +-⨯=（3-1）式中HB a 、3H O a +、B a -分别表示平衡时HB ，H 3O +和B -的活度，在稀溶液中可以用浓度c 代替活度，因此3H O B a HBc c K c +-⨯=（3-2）等式两边取负对数，则上式可写成lg HB a B c pK pH c -⎛⎫=+ ⎪ ⎪⎝⎭（3-3）为了测定离解常数K a ，需要测出溶液的pH 值及c HB 与c B -的比值。
pH 值可以用加入缓冲液的方法加以控制或用pH 计进行测量。
平衡体系中c HB 和c B -可以用分光光度法测定，但是HB 和B -必须在紫外光区或可见光区有吸收，而且它们的吸收带应有明显的差别。
为了通过测量溶液的吸光度求出 c HB 和c B -，需要配制3个不同pH 的HB 溶液，即足够强的酸性溶液、足够强的碱性溶液和pH 接近HB 的pK a 值的溶液，在一定波长下分别测量3个溶液的吸光度，在酸性溶液中由于同离子效应的影响，HB 离解极少，测得的吸光度A 可以看成是HB 的吸光度A HB ；在碱性溶液中HB 几乎全部离解，测得的吸光度A 可以看成是B -的吸光度A B -；而当溶液的pH 在pK a 附近时，HB 与B -共存，平衡时其吸光度为（吸收液层厚度都为1 cm ）：HB HB B B A c c εε--=+ （3-4）式中HB B εε-、分别为HB 、B -的摩尔吸光系数；HB B c c -、分别为平衡时HB 、B -浓度。
四种苯甲酸检测方法比较研究_帅放文
可满足不同检测需要。
关键词：苯甲酸；检测；分析方法；含量
中图分类号：TS202.3/TS207.3
文献标识码：A
文章编号：1006 - 2513（2016）04 - 0161 - 05
Comparative study on four kinds of detection methods of benzoic acid
Abstract：Three methods including high performance liquid chromatography，gas chromatography and differential scanning calorimeter were adopted for the determination of benzoic acid content. The linear range，quantitative reproducibility，detection limit and stability were comparatively studied. The HPLC method has a good stability of solution；the correlation was 1.0000 with repeatability of 0.04%. The detect limit was 2.5ng/mL. The GC method has a good stability of solution；the correlation was 0.9990 with repeatability of 0.9%. The detect limit was 16ng/mL. The DSC method has a good linearity with correlation of 0.9990；the repeatability was 0.43%.This methods were suitable for detecting benzoic acid with advantages of high precise and high sensitivity. The detection result of these methods is similar to that of capacity method. Each method had their own characteristics；it is suitable for different testing. Key words：benzoic acid；detection；analysis method；content
多糖含量测定的几种不同方法比较
多糖含量测定的几种不同方法比较系别:信息学院专业:生物工程学号:姓名:指导教师:指导教师职称: 讲师多糖含量测定的几种不同方法比较摘要：本文综述了多糖含量测定的几种常用方法，主要有苯酚-硫酸法、3, 5-二硝基水杨酸法(简称DNS法)、蒽酮-硫酸法、色谱法、红外光谱定量分析多糖法等。
并对这些方法的优缺点进行了分析和比较。
这些方法可为多糖含量测定提供一定的参考，并为多糖含量测定的更深入研究提供一定的理论基础。
关键词：多糖；含量；测定；方法A review of different methodsto the determination of polysaccharidesAbstract: Paper reviewed some different methods to the determination of polysaccharides, in it phenol-vitriol method, 3, 5-two nitro salicylic acid (DNS) method, anthrone-vitriol method, chromatography, infrared spectrum quantitative analysis and etc had been dealed with. And the advantages and disadvantages of these methods are analyzed and compared. It provided some related information and based theories to the determination of polysaccharides content.Key words：polysaccharides; content; determination; methods目录中文摘要 (I)英文摘要 (II)1前言 (1)2化学法测定多糖含量 (1)2.1苯酚-硫酸法 (1)2.2 3, 5-二硝基水杨酸法(简称DNS法) (2)2.3蒽酮-硫酸法 (2)3色谱法测定多糖含量的研究 (3)3.1气相色谱法(GC) (3)3.2 液相色谱法(HPLC) (3)3.3薄层色谱法(TLC) (4)4其他方法 (4)4.1红外光谱定量分析多糖法 (4)4.2生物传感器法 (5)5结论 (5)6展望 (6)参考文献 (6)致谢 (9)1前言多糖(polysaccharides，PS)是由10个以上的单糖聚合而成的生物高分子[1]。
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2．3．2苯甲酸pKa 值的预测定
3·O
在( 25±O．5) ℃，将苯甲酸和NaOH按摩
尔数比1：1混合，在水溶液中 进行反应． 由于
2．5
反应完全后[ HA] 一[ A一] ，则pKa一- pH，此时
2·0
用pH计测其反应液的pH，即得粗测的pKa．
测得的苯 甲酸反应液的pH=4．16． 2．3．3苯甲酸pKa 值的精确测定 移取储备液1．00 mL 5份置 于50 mL
摘要：本文采用电位法、电导法、紫外分光光度法测定了苯甲酸的电离常数．用三种方法测得 的 pKa分 别为 ：4 ．03 ，4． 08 和4． 20． 结果 表明 ： 用紫 外分 光光 度法 测得 的苯 甲酸 电离 常数 值最 为准 确，但三种方法各有特点，可根据具体的实验要求和实验目的选择合适的测定方法．
2结果与讨 论
2．1 电位法测定苯甲酸的电离常数 把稀释的苯甲 酸溶液和原苯甲酸溶液共6种不同浓度溶 液，分别放入6个干燥的50 mL烧杯中( 烧杯编 成l 一6) ，按由稀到浓分别用pH计测定它们的pH值，实验记录和计算结 果见表1．从表1．可以看出用电位 法测定的苯甲酸的pKa 值为4．03，而苯甲酸的pKa理论值为4．21，相对标准偏差( RSD) 为7．47％．这个实 验结果误差比较大，主要原因由于仪器本身的误差，在实验的过程中发现玻璃电极在长时间使用后( 一般两 个小时以后) 会出现钝化现象，其主要原因是玻璃电极的水化层在长时间浸泡在溶液中，造成H+交换受阻． 这时候应将电极在KCl 溶液中浸泡一夜．使其水化层恢复．
收稿日期：2008一12—3l
修改日期：2009—03—16
作者 简介：徐 雯( 1979一) ，女 ，安徽安 庆人， 安徽黄山 学院化学 系讲师 ，主要从 事物理 化学的教 学与研究 ．
·- - ——45·- - ——
1．6 紫外分光光度法测定苯甲酸的电离常数 分别用 0．01 mol ／L NaOH溶液、0．01 mol ／L HCI 溶液、用无水 乙酸钠和冰乙酸 配制不同pH值的 标准缓 冲液和苯甲酸配成溶液，以空白溶液为对照，测定吸收度( A) ，记录数据．
关键词：苯甲酸；电离常数；紫外分光光度法；电导法；电位法 中图分类号：0625．511 文献标识 码：A 文章编号：1009—7902(2009) 03—0045—04
弱电解质电离常数的测定是大学化学中的基础实验，在无机化学和物理化学实验中分别采用电位法‘1’2 1和 电导法‘3’4．5 3测定了弱电解质电离常数．除此之外，文献中还报道了用毛细管电泳法‘6，7 3和紫外分光光度法‘8’9’101 进行 测定 ．本文 以苯 甲酸为 研究 对象 ，充分 利用 了仪器 分析 中常用 的几 种实验 仪器 ，采 用电位 法、 电导法 和紫 外 分光 光度法 测定了 苯甲 酸的电 离平衡 常数， 并对三 种方法 进行 了比较 和讨论 ．
储备液2份，分别置50 mL容量瓶，用0．01 mol ／L NaOH和0．01 mol ／L HCI 稀释至刻度，在分光光度计上记
录吸收光谱．结果见图2，ABS为吸光度．根 吸收光谱的变化形式，选择235nm为分析波长．
-- ——4 6．．—．
表2电导 法测定苯甲 酸的电离常 数数据处理 A： ：=Q：Q箜!墨 S·m2·mol ～ ，测 定时 温度 垫℃
20 09年5月 第3期
南京晓庄学院学报 J OURNAL OF NANJ I NG XI AOZHUANC UNI VERSI TY
Ma y．20 09 No．3
苯 甲酸 电 离 常 数三 种 测定 方 法 的 比较
徐 雯1，何风云2，朱子丰2
( 1．安徽黄山学院化学系，安徽黄山245041；2．南京晓庄学院化学系，江苏南京211171)
参考文献： [ 1] 北京师范大学无机化学教研组等．无机化学实验( 第三版) [M]．北京：高等教育出版社，2001． [ 2] 朱永春，张辉．弱酸电离常数和电离度测定方法的改进[ J] ．大学化学，1994，9( 2) ：39—40． [ 3] 罗士平，袁爱华．基础 化学实验(下) [ M] ．北京：化学工业出版 社，2005． [ 4] 吕桂英．电 导法测定醋酸电 离度和电离常 数的研究[ J] ．黄石教 育学院学报， 1997，( 1) ：71—76． [ 5] 周钢，兰叶青．电导法测定醋酸 电离平衡常数实验的改进[ J] ．大学化学，2004，19(6)．35—37． [ 6] 刘海兴，杨更亮，王德显等．毛细管电泳法测定电离 平衡常数[J ]．分析科学学报 ，2002，30(1)：54—58． [ 7] 张兰， 陈国南， 方禹之 ．毛细管 电泳一电 化学检测 法用于 生物碱电 离常数线 性模型的 研究[ J ]．化 学学报， 2004， 62(10)： 975
( I ．Anhui Hua ngs ha n Un i ve r si t y，Hua ngs han 245 021，Chi na； 2．De pt ．of Ch emi s t r y ，Na nj i n g Xi aozhuang Uni v er si t y， Nanj i ng 21 1 17 1，Ch i na ) Abs t ra c t ： Ioni z at i on c ons t ant of benzoi c a ci d wa s de t e r mi ne d by pot e nt i ome t r y，conduc t ome t ry and UVsp ect r op ho— t ome t r y．The de t e r mi ne d pKa of benzoi c ac i d by t h r e e met hods ar e 4．03，4．08 and 4．2 0，r e spe ct i ve l y．I t has been f ound t hat t h e r es ul t of UV s pe c t rophot ome t ry i s t h e mos t a cc ur a t e ．but t h e t hr e e met hods have di f f er e nt f e at u r e s
( 责任编辑：陈昌云)
A Compar i s on Bet ween Thr ee Met hods t o Det er mi ne
I oni zat i on Cons t a nt of Be nz oi c Ac i d XU We nl ，HE Feng- yun2，ZHU Zi —f engz
1 80
200
220
240 九( nm)
260
280
300
图2苯甲酸在0 ．01moi ／L NaOI - I 溶液( 曲线a) 和 0．01 mo VL HC! 溶 液( 曲线b) 中 的紫外吸收 光谱
确，误差 很小．
表3紫外分 光光度法测定苯甲酸 的电离常数数据处理
l
电位 法
2
电导 法
3
紫外分光光度法
表1 电位法测定苯甲酸的电离常数数据处理
表中ot 为苯甲酸的电离度
2．2 电导率法测定苯甲酸电离平衡常数
把稀释的苯甲酸溶液 和原苯甲酸溶液共
6种不同浓度溶液，分别放入6个干燥的50
mL烧杯中( 烧杯编成1—6) ，按由稀到浓分
别用电导率仪测量苯甲 酸的电导率，按照数
据处理原理，以1／A。对矾。作图得图1，该 g
图1 1／A。一 cA。
要是由于温度对实验结 果的影响较明显．这
个实验结果误差产生的主要原因是温度上的误差，由于实验时的温度比理论温度低，所以测得的数值比理
论低 ．Biblioteka 2．3 紫外分光光度法测定苯甲酸的电离常数
2．3．1分析波长的选择
分别用 0．01 mol ／L Na OH溶液、O．01 mol ／L HCI 溶液以空白溶液为对照，测定吸收度( A) ．取1．00 mL
1实验部分
1．1仪器 与药 品 pHS- 3C精密pH计( 上海精密科学仪器有限公司) ，UV- 2450紫外分光光度计( 日本岛津) ，DDSJ 0308A 电导率仪( 上海精密科学仪器有限公司) ，电子分析天平( 日本岛津) ． 苯甲酸( 分析 纯，国药集团化学试剂 有限公司) ，氢氧化钠 ( 分析纯，汕头市西陇 化工厂) ，无水乙酸钠 ( 分析纯， 南京市化学药剂一厂) ，冰乙酸( 分析纯，国药集 团化学试剂有限公司) ，其他试剂均为分析纯． 1．2苯 甲酸溶 液浓度的测 定 在500 mL烧杯中配制500 mL 0．01 mol ／L的苯甲酸 溶液，其精确浓度按下面方法用 标准Na OH溶液进 行标定． 用移液管吸取25．00 mL所配制的苯甲酸溶液，置于250 mL锥形瓶中，加入2滴酚酞指示剂，用标准NaOH 溶液滴定至溶液呈微红色，半分钟内不褪色即到达终点，记下消耗NaOH溶液的体积．平行滴定3次，要求每次 所用的NaOH溶液体积之差不超过±0．05毫升，得到苯甲酸的浓度为0．009157 moL／L． 1．3配制 不同浓度的苯甲 酸溶液 用移液管分别取25．00 mL、10．00 mL、5．00 mL、1．00 mL和0．50 mL已标定过的苯甲 酸溶液，放人五个 洁净的50毫升容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，即得到五种不同浓度的苯甲酸溶液． 1．4测定苯甲酸溶液的pH值 把以上稀释的苯 甲酸溶液和原苯甲酸溶液共 6种不同浓度溶 液，分别放入6个干燥的50 mL烧杯中( 烧 杯编成1～6) ，按由稀到浓分别用pH计测定它们的pH值，记录数据． 1．5 测定苯甲酸溶液的电导率 把以上稀释的苯 甲酸溶液和原苯甲酸溶液共 6种不同浓度溶 液，分别放人6个干燥的50 mL烧杯中( 烧 杯编成1～6) ，按由稀到浓分别用电导率仪测量苯甲酸的电导率，记录数据．
直线的斜率为1／K( AZ) 2，截距为1／A7, ，由
此可求得K和A：：．A：：：为弱电解质的无限稀