6郑晓群-RPT模式在免疫学检验在实验教学中的应用
实验中医学实验报告
实验名称：中药四君子汤对小鼠免疫调节作用的研究实验日期：2023年10月25日一、实验目的1. 观察中药四君子汤对小鼠免疫器官（脾脏、胸腺）的影响。
2. 分析中药四君子汤对小鼠免疫细胞（T细胞、B细胞）功能的影响。
3. 探讨中药四君子汤在免疫调节方面的作用机制。
二、实验原理中药四君子汤是由人参、白术、茯苓、炙甘草组成，具有健脾益气、调和脾胃的功效。
本实验通过观察中药四君子汤对小鼠免疫器官和免疫细胞的影响，探讨其在免疫调节方面的作用。
三、实验材料1. 实验动物：昆明小鼠40只，体重18-22g，雌雄各半。
2. 主要试剂：中药四君子汤提取物、ELISA试剂盒、流式细胞仪检测抗体、细胞培养试剂等。
3. 仪器：显微镜、离心机、酶标仪、流式细胞仪等。
四、实验方法1. 实验分组：将40只小鼠随机分为5组，每组8只，分别为正常对照组、模型组、低剂量组、中剂量组和高剂量组。
2. 模型制备：除正常对照组外，其余各组小鼠均采用环磷酰胺腹腔注射法建立免疫抑制模型。
3. 给药：正常对照组和模型组给予生理盐水，低剂量组给予0.1g/kg中药四君子汤提取物，中剂量组给予0.3g/kg中药四君子汤提取物，高剂量组给予0.5g/kg中药四君子汤提取物，连续给药7天。
4. 取材：实验结束后，各组小鼠脱颈椎处死，取脾脏、胸腺组织，并分离T细胞、B细胞。
5. 免疫器官指数测定：称量脾脏、胸腺重量，计算免疫器官指数（脾脏指数=脾脏重量/体重，胸腺指数=胸腺重量/体重）。
6. T细胞、B细胞功能检测：采用ELISA法检测T细胞、B细胞功能指标，包括T 细胞增殖实验、B细胞抗体生成实验等。
7. 数据统计：采用SPSS 22.0软件进行统计分析，数据以均值±标准差表示，组间比较采用单因素方差分析。
五、实验结果1. 免疫器官指数：与模型组相比，低、中、高剂量组小鼠的脾脏指数和胸腺指数均显著升高（P<0.05）。
2. T细胞功能：与模型组相比，低、中、高剂量组小鼠的T细胞增殖实验结果显示，增殖能力显著提高（P<0.05）。
小肽和受体互作研究方法
小肽和受体互作研究方法小肽是由少于10个氨基酸残基组成的肽链，具有多样的生物活性，如调节细胞生长、抗菌、抗氧化等。
而受体是位于细胞膜上的特定蛋白质，能与小肽结合并传递信号，从而调控细胞的生理功能。
研究小肽和受体之间的互作关系对于揭示细胞信号传导机制、发展药物治疗等具有重要意义。
研究小肽和受体互作的方法有多种，下面将介绍几种常用的方法。
1. 配体-受体结合实验配体-受体结合实验是研究小肽和受体互作的基础方法之一。
该实验通过将标记有荧光染料或放射性同位素的小肽与受体进行反应，然后使用分离技术或放射自显影技术来检测配体-受体结合的程度。
这种方法可以定量地测定小肽和受体之间的结合亲和力和结合位点，进而揭示小肽和受体之间的相互作用机制。
2. 免疫共沉淀实验免疫共沉淀实验是研究小肽和受体互作的常用方法之一。
该实验通过将标记有抗体的小肽与细胞或组织样品共沉淀，然后使用免疫印迹等技术来检测小肽和受体的共沉淀情况。
这种方法可以直接证实小肽和受体之间的物理相互作用，并进一步研究其在细胞内的功能调控机制。
3. 细胞信号转导实验细胞信号转导实验是研究小肽和受体互作的重要手段之一。
该实验通过将小肽和受体共同转染到细胞中，然后观察细胞内信号通路的变化来研究小肽对受体的调节作用。
这种方法可以揭示小肽和受体之间的信号传导机制，包括激活蛋白激酶、调节细胞增殖或凋亡等。
4. 结构生物学方法结构生物学方法是研究小肽和受体互作的重要手段之一。
通过利用X射线晶体学、核磁共振等技术，可以解析小肽和受体的三维结构，进而揭示其在互作过程中的空间构型和结构特征。
这种方法可以为小肽和受体的相互作用机制提供直接的结构证据，为药物设计和优化提供重要参考。
研究小肽和受体的互作关系是深入了解细胞信号传导机制和开发药物的重要途径。
通过配体-受体结合实验、免疫共沉淀实验、细胞信号转导实验和结构生物学方法等多种方法的综合应用，可以揭示小肽和受体之间的相互作用机制，为相关领域的研究和应用提供重要的理论支持和实验依据。
基于IL-17
doi：10.3969/j.issn.1000-484X.2024.01.013·论著/中医中药与免疫·基于IL-17/NF-κB信号通路探讨敦煌医方大补脾汤联合奥沙利铂对胃癌荷瘤小鼠炎症免疫的影响曾元丁苏韫龚红霞牛世伟张晗（甘肃中医药大学基础医学院，甘肃省高校重大疾病分子医学与中医药防治研究省级重点实验室，兰州 730000）中图分类号R285.5 文献标志码 A 文章编号1000-484X（2024）01-0092-05［摘要］目的：研究敦煌医方大补脾汤对胃癌荷瘤小鼠的抑瘤作用以及基于IL-17/NF-κB信号通路探讨大补脾汤联合奥沙利铂对胃癌荷瘤小鼠炎症免疫的影响。
方法：建立MFC胃癌皮下荷瘤小鼠模型，随机分为模型组、奥沙利铂组、大补脾汤高、中、低剂量联合奥沙利铂组［21.58、10.79、5.40 g/（kg·d）］，每组10只，雌雄分笼饲养，接种8 d后开始给药，连续给药14 d；末次给药后次日眼球取血，处死小鼠，摘取肿瘤组织称重，计算抑瘤率；ELISA检测小鼠血清IL-17和IL-6含量，免疫组化（IHC）、RT-qPCR和Western blot分别检测小鼠肿瘤组织IL-17、IL-6、NF-κB和pNF-κB mRNA和蛋白表达。
结果：奥沙利铂组、大补脾汤高、中、低剂量联合奥沙利铂组抑瘤率分别为33.02%、52.92%、46.33%和39.52%，各给药组肿瘤质量均较模型组显著降低（P<0.01），大补脾汤高、中、低剂量联合奥沙利铂组显著高于奥沙利铂组（P<0.01）；与模型组相比，各给药组血清IL-17和IL-6含量、肿瘤组织IL-17、IL-6、NF-κB p65和pNF-κB p65 mRNA和蛋白表达显著降低（P<0.01，P<0.05）；与奥沙利铂组相比，大补脾汤高、中剂量联合奥沙利铂组血清IL-17和IL-6含量、肿瘤组织IL-17、IL-6、NF-κB p65和pNF-κB p65 mRNA和蛋白表达显著降低（P<0.01，P<0.05）。
中英文对照表英文缩写英文全称中文...
分类号：R730.51 密级：公开CD40单克隆抗体联合免疫细胞治疗直肠癌的实验研究Experimental study of CD40 monoclonal antibody combined with immune cells in the treatment of rectal cancer作者姓名：滕达学科专业：外科学（普通外科）导师：杜晓辉教授指导老师：徐迎新研究员答辩委员会主席：论文答辩日期：二〇一三年五月二十七日院校地址：北京市复兴路28号邮政编码：100853解放军医学院研究生学位论文原创性声明秉承我院“忠诚、敬业、和谐、创新”的学风，本人声明：所呈交的论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。
据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不含为获得我院或其他教育机构的学位及证书而使用过的材料，对本文的研究作出贡献的个人或集体，均已在文中做了明确的说明并表示谢意。
申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。
论文作者签名：日期：指导教师签名：日期：解放军医学院研究生学位论文版权使用授权书本人保证毕业离院后，发表论文或使用论文工作成果时署名单位为解放军医学院或解放军总医院。
学院有权保留并向国家有关部门或机构送交论文原件、复印件和电子版本，可以采用影印、缩印、扫描或其它手段保存论文以供被查阅和借阅。
学院可以公布学位论文的全部或部分内容（保密内容除外）。
论文作者签名：日期：指导教师签名：日期：目录中文摘要 (1)ABSTRACT (3)中英文对照表 (5)第一章引言 (6)第二章四株鼠抗人CD40单克隆抗体与不同细胞结合试验 (8)第一节实验材料 (8)第二节实验方法 (9)2.2.1 人外周血单个核细胞（PBMC）及T细胞、B细胞的制备 (9)2.2.2 人巨噬细胞、树突状细胞（DC）的制备 (11)2.2.3 肿瘤细胞及血管内皮细胞（EVC）的制备 (11)2.2.4 流式细胞仪检测四株鼠抗人CD40单克隆抗体与不同细胞的结合率 (12)第一节实验结果 (13)2.3.1 四株鼠抗人CD40单克隆抗体与不同细胞亲和力检测结果 (13)第三章四株鼠抗人CD40单克隆抗体激活DC诱导CTL的体外抗肿瘤作用研究 (16)第一节实验材料 (16)第二节实验方法 (17)3.2.1 DC-CTL的制备 (17)3.2.2 流式细胞仪检测不同条件激活的DC表型 (19)3.2.3 LDH释放法检测四株CD40单抗激活DC诱导CTL的体外细胞毒作用 (20)3.2.4 统计学分析 (22)第三节实验结果 (22)3.3.1 不同株CD40单抗及常规诱导方法激活DC的表型检测结果 (22)3.3.2 常规诱导方法及不同株CD40单抗激活DC培养上清中IL-12及IL-10的含量 (23)3.3.3 不同条件激活的DC所诱导的CTL培养上清中IFN-γ的含量 (24)3.3.4 不同条件激活DC诱导CTL的抗肿瘤体外杀伤活性 (25)第四章鼠抗人CD40单抗E11联合免疫细胞治疗直肠癌的体内实验研究 (27)第一节实验材料 (27)第二节实验方法 (28)4.2.1 人直肠癌裸鼠荷瘤模型的建立 (28)4.2.2 CTL的制备 (30)4.2.3 尾静脉注射法治疗人直肠癌荷瘤裸鼠 (31)4.2.4 组织病理学检查 (32)4.2.5 统计学分析 (32)第三节实验结果 (32)4.3.1 裸鼠皮下瘤治疗结果 (32)4.3.2 组织病理学检查结果 (36)第五章讨论 (38)第六章结论 (43)第七章参考文献 (44)文献综述 (49)CD40-CD40L与肿瘤免疫 (49)攻读学位期间发表文章情况 (58)致谢 (59)CD40单克隆抗体联合免疫细胞治疗直肠癌的实验研究中文摘要研究背景：结直肠癌是消化道常见恶性肿瘤之一，患者经传统治疗5年生存率仍不理想。
219435301_免疫学科研仪器操作技术课程思政研究与实践
免疫学科研仪器操作技术课程思政研究与实践①乔萍岳圆王丽鑫杨巍（吉林大学基础医学院，长春 130021）中图分类号R331 R392.33 G641 文献标志码 A 文章编号1000-484X（2023）06-1152-04［摘要］免疫学作为现代生命科学的前沿学科之一，是基础医学与临床医学硕士、博士培养的重要基础课程。
同时，科研仪器操作技术是衔接免疫学理论与免疫学实验操作的关键纽带。
因此，本教学团队以免疫科研为主线，以讲解相关仪器为教学策略，从明确课程目标、整合学科知识、设计课程考核和评价等方面充分挖掘思政元素，将课程与科研实践密切连接。
结果表明，课程思政元素的融入不仅能实现教学方法的不断优化，还能培养学生精益求精、追求卓越的工匠精神，以及敬佑生命、甘于奉献的医者精神，从而更好地贯彻落实立德树人的根本任务。
［关键词］课程思政；免疫学；科研仪器；教学改革Ideological and political research and practice based on immunology scientific research instrument operation technology courseQIAO Ping， YUE Yuan， WANG Lixin， YANG Wei. College of Basic Medical Sciences， Jilin University， Changchun 130021， China［Abstract］As one of frontier disciplines of modern life science， immunology is an important basic course for training of master and doctor of basic medicine and clinical medicine. Meanwhile，scientific research instrument operation technology is a key link linking immunology theory and immunology experimental operation. Therefore，our teaching team takes immunization research as main line and explains relevant instruments as teaching strategy， by clarifying course objectives， integrating disciplinary knowledge，and designing effective assessments and evaluations， we fully explore the ideological and political elements in the curriculum， scientific research practice. The results show that integration of ideological and political elements in curriculum can not only realize continuous optimization of teaching methods，but also cultivate students' craftsman spirit of excellence and pursuit of excellence，as well as doctors' spirit of respecting life and being willing to contribute， so as to better implement fundamental task of cultivating morality and cultivating people.［Key words］Curriculum ideological and political education；Immunology；Scientific research instrument；Teaching reform2020年5月28日，教育部印发的《高等学校课程思政建设指导纲要》指出：理学类专业课程要注重科学思维方法训练和科学伦理教育，培养学生探索未知、追求真理、勇攀科学高峰的责任感和使命感，医学类专业课程则要在课程教学中注重加强医德医风教育，着力培养学生“敬佑生命、救死扶伤、甘于奉献、大爱无疆”的医者精神［1］。
一步法和两步法RT-PCR对裸大麦β-actin基因的检测
一步法和两步法RT-PCR对裸大麦β-actin基因的检测吴昆仑;邓晓青【期刊名称】《江苏农业科学》【年(卷),期】2012(040)006【摘要】通过一步法RT-PCR和两步法RT- PCR扩增裸大麦内参基因β- actin,都得到500bp的目的片段.结果表明,一步法RT - PCR和两步法RT - PCR都能快速检测出目的基因,一步法比较简便、快速、污染少,但是有明显的引物二聚体形成,对后续的荧光定量试验不利；两步法灵敏度更高而且比较经济,目的条带单一,无引物二聚体,更适合裸大麦后续的分子克隆试验.【总页数】3页(P35-37)【作者】吴昆仑;邓晓青【作者单位】青海省农林科学院/青海大学农林科学院/青海省高原作物种质资源创新与利用国家重点实验室培育基地/青海省青稞遗传育种重点实验室,青海西宁810016;青海省农林科学院/青海大学农林科学院/青海省高原作物种质资源创新与利用国家重点实验室培育基地/青海省青稞遗传育种重点实验室,青海西宁810016【正文语种】中文【中图分类】Q785【相关文献】1.香蕉花叶心腐病检测的两步法及一步法RT-PCR比较研究 [J], 周莉娟;郑伟文2.RT-PCR一步法与RT-PCR两步法的比较 [J], 陈余朋;张声;陈林莺;陈瑜;张真真3.基于E基因的猪乙型脑炎病毒一步法 RT-PCR快速检测方法的建立和应用 [J], 李天芝;于新友;莫玲;沈志强4.基于白纹伊蚊Actin基因参照的登革Ⅱ型病毒一步法实时荧光定量PCR检测方法的建立 [J], 李超杰;赵彤言;姜玉庭;张强辉;高剑;刘源;邢丹;李春晓;张恒端;郭晓霞5.一步法RT-PCR和两步法RT-PCR对马铃薯病毒诊断研究的比较 [J], 陈阳婷;宁红;张敏因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
人脐静脉内皮细胞表达蛋白酶激活受体
人脐静脉内皮细胞表达蛋白酶激活受体牛青霞;陈卓毅;郑坚;林洁莲【期刊名称】《海南医学》【年(卷),期】2011(022)016【摘要】Objective To investigate the constitutive expression ofprotease-activated receptors (PARs) in human umbilical vein endothelial cells (HUVECs). Methods Reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) and immunofiuorescence cell staining were used to analyze the expression of PARs at mRNA and protein levels. Results HUVECs treated without activator expressed mRNA of PAR1, PAR2 and PAR3. Positive percentages of HUVECs expressing PARI, PAR2 and PAR3 were 43.3%, 49.2% and 56.7%, respectively. Their mean fiuorescence intensifies were 42.1, 22.5 and 24.3, respectively. Conclusion This study provides useful information for studles on the roles of endothelial cells in physiological and pathophysiological processes through PARs.%目的研究蛋白酶激活受体(Protease-activated receptors,PARs)在人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein cndothelial cells,HUVECs)上的组成型表达.方法采用逆转录聚合酶链反应(Reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)和流式细胞术,检测PARs的mRNA和蛋白质表达.结果未经任何激活剂处理的HUVECs表达PAR1、PAR2和PAR3 mRNA.PAR1、PAR2和PAR3的阳性细胞率分别为43.3%、49.2%和56.7%,其平均荧光强度分别为42.1、22.5和24.3.结论 HUVECs组成型表达PAR1、PAR2和PAR3,以为PARs的生理和病理生理功能研究提供依据.【总页数】3页(P1-3)【作者】牛青霞;陈卓毅;郑坚;林洁莲【作者单位】汕头大学医学院炎症与免疫性疾病研究所,广东,汕头,515041;汕头大学医学院第二附属医院麻醉科,广东,汕头,515041;汕头大学医学院炎症与免疫性疾病研究所,广东,汕头,515041;汕头市澄海区人民医院检验科,广东,汕头,515080【正文语种】中文【中图分类】R329.2【相关文献】1.内毒素致大鼠急性肺损伤后蛋白酶激活受体-1、肿瘤坏死因子-α和白细胞介素-6的表达 [J], 江伟航;王琳;阮绪广;曹阳;李雪兰;黄雁;彭惠华2.蛋白酶激活受体-2激活剂对人脐静脉内皮细胞释放IL-1α的影响 [J], 牛青霞;林洁莲;郑坚;陈卓毅3.SD大鼠外阴慢性单纯性苔藓模型的构建及蛋白酶激活受体2的表达 [J], 杨欢;付贞花;唐华均;李成志4.维吾尔族宫颈癌组织中蛋白酶激活受体3（Par3）与上皮-间质转化相关蛋白的表达及其临床意义 [J], 杨云;焦娟;徐丽秀;阿仙姑·哈斯木;阿布力孜·阿布杜拉5.疏肝和胃降逆汤对胃食管反流病肝胃不和证患者食管黏膜蛋白酶激活受体-2及环氧合酶-2蛋白表达的影响 [J], 马乾章;刘鹏;白光因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
体外腺垂体细胞培养技术探讨
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内 ( 底部预先涂一层多聚赖氨 酸 ), 置于 37# 、 5% CO2、100% 湿度的二氧化碳培养 箱中培养。每 隔 2 d 换 1 /2 的培养 液 , 换下的培养液在 - 20# 下保存 , 进 行激 素的放 免测 定 ( 见另 文报道 ) 。
2 结果
成年大 鼠腺垂 体细胞 在分散培 养的第 1 、2、 4、 6、8 、11 d
第 7 卷第 4 期 2009 年 10 月
延安大学学报 ( 医学科学版 ) Journa l of Y anan U n iversity ( M ed Sci)
Vo . l 7 No . 4 O ct . 2009
体外腺垂体细胞培养技术探讨
irt在随机化临床试验中的应用
东北师范大学硕士学位论文IRT在随机化临床试验中的应用姓名：***申请学位级别：硕士专业：概率论与数理统计指导教师：***20070501IRT在随机化临床试验中的应用作者：李丽学位授予单位：东北师范大学1.周世科混合题型的IRT等值问题研究[学位论文]20082.蔡宏伟基于网络的最小化随机分组设盲系统[学位论文]20063.曹蕾临床试验中的一种最优设计[学位论文]20064.占淑荣项目反应理论在人格测验中的应用研究[学位论文]20065.陈青.丁树良.朱隆尹.许志勇.CHEN Qing.DING Shu-liang.ZHU Long-yin.XU Zhi-yong3参数等级反应模型及其参数估计[期刊论文]-江西师范大学学报（自然科学版）2010,34(2)6.任品部分线性模型在项目反应理论中的研究和应用[学位论文]2009引用本文格式：李丽IRT在随机化临床试验中的应用[学位论文]硕士 2007会计会计会计从业资格考试《会计基础》全真模拟预测试卷（七）一、单项选择题（本类题共２０题，每小题１分，共２０分。
每小题备选答案中，只有一个符合题意的正确答案，多选、错选、不选均不得分）1. 20 世纪，随着资本主义国家经济的迅速发展，传统的会计逐渐形成的相对独立的两大分支是（）。
A．基础会计和财务会计 B.财务会计和管理会计C. 复式会计和单式会计D．记账算账会计和控制监督会计2．下列对会计核算基本前提的表述中，恰当的是（）。
A．持续经营和会计分期确定了会计核算的空间范围B．一个会计主体必然是一个法律主体C．货币计量为会计核算提供了必要的手段D．会计主体确立了会计核算的时间范围3.下列选项中，符合资产定义的是（）。
Ａ.计划在下月购买的某项设备Ｂ．盘亏的机器设备Ｃ．暂停使用的机器设备Ｄ．已经报废的机器设备4．下列关于借贷记账法的表述中，正确的是（）。
A．漏记一项经济业务通过试算平衡可以发现B．借贷记账法是复式记账法的一种C．在借贷记账法下，负债增加记借方，减少记贷方D．在借贷记账法下，“借”代表增加，“贷”代表减少5．总分类会计科目和明细分类会计科目平行登记，是指（）。
流式细胞仪检测网织血小板方法学改进及临床意义
流式细胞仪检测网织血小板方法学改进及临床意义孙德华;王前;郑磊;裘宇容;易正山【期刊名称】《南方医科大学学报》【年(卷),期】2007(27)6【摘要】目的探讨流式细胞仪常规检测网织血小板(RP)的方法,比较全血和血浆检测RP的差异.方法用CD42b-PE单抗标记血浆及全血中的血小板,再用荧光染料噻唑橙(TO)染色网织血小板内RNA.对不同TO浓度及孵育时间下的网织血小板进行测定,确定网织血小板测定的最佳TO浓度及孵育时间.对18例样本进行全血与血浆的对比分析.结果确定TO浓度为1∶2稀释、染色时间为60 min时网织血小板结果最稳定,并且血浆和全血的检测结果相近.结论该方法重复性良好,在TO1∶2稀释、染色时间为60min的条件下,全血和富血小板血浆均适合流式细胞技术常规检测网织血小板.【总页数】2页(P912-913)【作者】孙德华;王前;郑磊;裘宇容;易正山【作者单位】南方医科大学南方医院,检验科,广东,广州,510515;南方医科大学南方医院,检验科,广东,广州,510515;南方医科大学南方医院,检验科,广东,广州,510515;南方医科大学南方医院,检验科,广东,广州,510515;南方医科大学南方医院,血液科,广东,广州,510515【正文语种】中文【中图分类】R446.11【相关文献】1.流式细胞仪检测结缔组织生长因子的方法学评价 [J], 陈洁;黄山;左丽;;;2.Sysmex XE-2100血液分析仪定量检测成人网织血小板的方法学评价及参考区间建立 [J], 任春云;金明超;包丹妮;郭希超3.流式细胞仪检测网织血小板的临床应用 [J], 金莱;黄坚;胡英萍4.流式细胞仪检测网织血小板的临床意义 [J], 王迎春;丁润生;陆伟;徐瑞容;顾桂兰;陆德炎5.SYSTEM XE-2100全自动血细胞分析仪与流式细胞仪检测网织血小板结果比较[J], 王贤;夏永泉;生媛;张葵;顾光煜因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
安徽医科大学研究生药理学实验方法重点总结
1.白细胞分化抗原群的检测方法P170(1)免疫组化技术：先以酶标记的抗体与组织或细胞作用，然后加入酶的底物，生成的有色的不溶性产物或具有一定电子密度的颗粒，通过光镜或电镜，对细胞或组织内的相应抗原进行定位或定性研究。
(2)免疫荧光技术：根据抗原抗体反应的原理，现将已知的抗原或抗体标记上荧光素制成荧光标记物，再用这种荧光抗体（或抗原）作为分子探针检查细胞或组织内的相应抗原（或抗体）。
(3)流式细胞技术：使悬浮在液体中分散的经荧光标记的细胞或微利捉个通过样品池，同时由荧光探测器捕获荧光信号并转换成分别代表向前散射角、侧向散射角和不同荧光强度的电脉冲信号，经计算机处理形成相应的点图，直方图和加三维结构图像进行分析。
2.分析白细胞分化抗原检测的影响因素流式法检测的影响因素：（1）非特异性结合NSB①Fc受体结合抗体是导致影响检测结果的重要因素，任何细胞上只要存在未结合的Fc受体，都可能有NSB。
采用高浓度的纯化IgG可用于阻断Fc受体的NSB。
（2）免疫球蛋白聚集可增加NSB。
由于冰冻、复溶和冻干处理，抗体均可出现聚集。
对于新购买的抗体，可通过高速离心去除聚集。
3.简述实验动物血压测定的方法。
P140一、直接测定法1．麻醉动物直接测定法：麻醉、固定动物、手术视野剪毛、气管插管、动脉插管、血压记录；2．清醒动物直接测定法：1）简易清醒自由活动大鼠血压测定技术：导管制作、手术操作、连接测压系统、记录血压（生理记录仪记录）：2）计算机化清醒自由活动大鼠血压测定技术：①采样、记录和储存：压力信号经换能器转换为电信号，再经放大器输入计算机。
②数据处理和结果分析：3）清醒自由活动大鼠血压遥控测定技术二、间接测定法1.容积测定法：1）大鼠尾容积测定法大鼠尾根部加压超过收缩压时，血流中断，当压力降低到等于或稍低于收缩压时，血液流入尾部，此时的压力大于静脉压，血液回流受阻，结果尾容积加大，测定该容积突然增加时的瞬间压力，即为收缩压。
T PO对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用
T PO对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用陈美苑;刘青;曾志;周卓妍;蔡岳鞠;宋燕燕;杨默【期刊名称】《暨南大学学报（自然科学与医学版）》【年(卷),期】2014(000)001【摘要】Aim:To observe the brain function improvement of application of exogenous thrombopoietin (TPO)in hypoxic ischemic brain damage (HIBD)rats.Methods:Sprague-Dawley rats (7-day old) were randomly divided into sham operation group (C group),TPO treatment group and HIBD group.The percentage of brain quality damage,pathological changes and the expression of the nestin were detected after birth 1 0 d,1 4 d and 21 d by morphological method and immunohistochemistrymethod.Brainstem auditory evoked potential (BAEP)were recorded after birth 1 4 d,21 d,28 d and 35 d.Results:Com-pared to sham operation group,the mice in HIBD group showed apparent histopathological changes in-cluded neuron necrosis,vacuolization and karyopyknosis etc.,but these were much slighter in TPO treat-ment group.The loss of the percentage of brain quality damage improved significantly in TPO treatment group compared HIBD group (P<0.05 )at every sampling point.The number of nestin positive cells in TPO and HIBD group were more than C group at every sampling point(P<0.05 ).There were no signifi-cant difference of peak latency (PL)of BAEP in TPO treatment group and sham control group expectⅢwave in 21 days,Ⅱ-Ⅲ wave in 28 days and Ⅲ-Ⅳwave in 35days.There were significant longer (P<0.05)of PL in HIBD group compared TPO treatment group after 1 4 days (expect Ⅴ wave in 1 4days). There were significant longer of interpeak latency (IPL)in HIBD group compared with sham operation group (P<0.05 )and TPO treatment group(P<0.05 ).Conclusion:In the early stage of HIBD,the administered immediately with thrombopoietin can play a neuroprotective role,reducing neuronal necrosis and improved the brain dysfunction.%目的：观察外源性促血小板生成素（TPO）对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后脑功能的保护作用．方法：7日龄SD大鼠随机分成对照组（C组）、TPO治疗组、缺氧缺血（HIBD）组．于10、14、21日龄检测脑质量损伤百分比、皮层脑组织HE染色、免疫组化观察皮层神经元巢蛋白（Nestin）的表达；14、21、28、35日龄检测脑干诱发电位（BA-EP）．结果：与对照组相比较，HIBD组大鼠可见损伤侧的脑皮质组织学分层消失、结构紊乱，切片中出现大量条索状空洞，高倍镜下核异常深染、核固缩；TPO治疗组能明显改善大鼠脑组织形态变化；TPO治疗组在各取样时间点的脑质量损伤百分比均分别小于HIBD组（P＜0.05）．HIBD组大鼠造模3 d后可见少量Nestin蛋白阳性表达出现在神经细胞胞浆、轴突和树突内，造模后第7天Nestin的阳性表达达到高峰；在相同时间点TPO治疗组Nestin的阳性表达与HIBD组趋势相似．BAEP检测发现，TPO治疗组各日龄绝大部分的波峰潜伏期（PL）与对照组相比无明显差异（除21日龄的Ⅲ波，28日龄的Ⅱ-Ⅲ波，35日龄的Ⅱ-Ⅳ波外）；从14日龄起TPO治疗组绝大部分的PL与HIBD组相比显著缩短（P＜0.05，除14日龄的Ⅴ波尚未能测出外）；14日龄起，HIBD组大鼠各波峰间潜伏期（IPL）均明显长于对照组（P＜0.05），TPO治疗组大鼠的大部分IPL相比HIBD组明显缩短（P＜0.05，14日龄的各个IPL，28日龄的Ⅲ-Ⅴ除外）．结论：外源性TPO能够在HIBD发生早期起到神经保护的作用，减轻缺氧缺血导致的脑功能损伤．【总页数】8页(P37-44)【作者】陈美苑;刘青;曾志;周卓妍;蔡岳鞠;宋燕燕;杨默【作者单位】暨南大学医学院生理学教研室，广东广州510632;暨南大学医学院生理学教研室，广东广州510632; 成都经济开发区实验高级中学，四川成都610100;广东药学院基础学院生理学教研室，广东广州510006;暨南大学医学院生理学教研室，广东广州510632;广州市妇女儿童医疗中心新生儿科，广东广州510623;广州市妇女儿童医疗中心新生儿科，广东广州510623;南方医科大学南方医院血液科，广东广州510000【正文语种】中文【中图分类】R722.1;R338【相关文献】1.黄芩苷对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤保护作用的实验研究 [J], 薛磊; 沈冰冰; 王丽娜; 姜振锋; 关莉2.去甲斑蝥素介导NOD2/RIP2/NF-κB通路对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用 [J], 黄亚萍; 肖惠玲; 李艳红3.针刺对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠的神经保护作用及对小胶质细胞和炎症反应的影响 [J], 张英英; 单海军; 郭鑫4.左乙拉西坦对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠的神经保护作用及氧化应激反应的影响[J], 王海滨;门庆玲;蔡艳丽;周文龙;郭海志;陈瑞祥5.电针调控TXNIP/NLRP3通路介导的焦亡途径对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用研究 [J], 邓寒冰;李春琴;张粲;金祖敏因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
基于噬菌体展示技术醛固酮特异性抗体的筛选
基于噬菌体展示技术醛固酮特异性抗体的筛选王素娟;田晓平;赵巧辉;王天云【期刊名称】《新乡医学院学报》【年(卷),期】2024(41)3【摘要】目的利用噬菌体展示技术及重组抗体构建技术筛选出特异性醛固酮(ALD)抗体,为ALD诊断试剂盒的研发提供原材料。
方法取5只健康清洁级新西兰大白兔,将抗原ALD-血蓝蛋白(KLH)稀释至2 mg·L^(-1),采用背部多点注射方法对5只新西兰大白兔进行首次免疫,免疫剂量为每只1 mg;每隔2周进行1次免疫,且免疫剂量减少50%;从第3次免疫开始,每次免疫1周后采集大白兔耳缘静脉血,使用包被0.25 mg·L^(-1) ALD-BSA抗原的化学发光板,采用间接法和竞争法测定血清滴度;第5次免疫后选取血清效价高、特异性好的大白兔,取其脾脏和骨髓等组织。
将脾脏组织研磨,采用TRIzol试剂一步法提取RNA,获取轻链可变区(VL)和重链可变区(VH)基因序列。
通过连接肽连接成单链片段(ScFv)并构建至噬菌粒载体Pcomb3xss中;然后,通过电转化方法将其导入大肠杆菌TG1,完成ALD ScFv噬菌体展示库构建。
对文库进行3~5轮富集筛选,并挑取单克隆进行噬菌体上清制备,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)竞争法鉴定后送测,获得高竞争性克隆序列;将筛选得到的克隆序列插入至pCMV3表达载体,提取质粒后使用瞬时转染方法进行HEK293细胞转染;1周后,收取上清,应用亲和层析纯化及十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)电泳鉴定其纯度及表达量。
结果5只大白兔在第5次免疫后,间接法检测其血清效价结果显示,4#、5#大白兔血清在稀释32000倍后,效价仍>10000。
竞争法检测结果显示,5#大白兔血浆样本低值与高值的比值为2GA6FA 1,优于其他大白兔。
选取5#大白兔进行噬菌体文库构建。
使用常规聚合酶链反应扩增出VL及VH基因片段,经搭桥拼接成ScFv(VL+VH)后,琼脂凝胶电泳分析可看到750 bp左右大小条带,与最初设计的片段大小一致。
介绍一种β—内啡肽与胃泌素免疫双重染色法
介绍一种β—内啡肽与胃泌素免疫双重染色法
周济远;郑慧娥;白秀萍;潘秀芳
【期刊名称】《神经药理学报》
【年(卷),期】1989(000)004
【摘要】在观察组织抗原的分布时,常常同时比较和观察两种抗原在形态学上的相互联系,需要在同一张组织切片上,同时或先后显示两种抗原成分,这就需要应用双重染色,这种染色技术,对研究多肽类物质的分布尤为重要。
β—内啡肽（β—Endorphin）是一种内源性阿片物质,主要来源于垂体和脑的β—内啡肽细胞,作为神经介质和调制物。
近年来,应用放射免疫测定和层析法,发现成人胃窦含有β—内啡肽样物。
Feurle 等在成人胃窦观察到β—LPH<sub>1—10</sub>免疫反应细胞,且
【总页数】1页(P56-56)
【作者】周济远;郑慧娥;白秀萍;潘秀芳
【作者单位】张家口医学院组胚教研室;张家口医学院;张家口医学院组胚教研室;八七级学生
【正文语种】中文
【中图分类】G64
【相关文献】
1.介绍一种PAS与免疫组化双重染色技术 [J], 陈水平;郑伟;肖志芸
2.介绍一种冷冻切片快速免疫组化染色法 [J], 范慧;罗静;王万忠
3.肌酸激酶与P53双重免疫组织化学染色法在食管癌中的应用 [J], 吴春莲;赵斌;蔡方;赖旦婷
4.介绍一种观察凋亡细胞形态学特征的染色方法--苏木素-伊红染色法(HE染色法) [J], 魏文科
5.介绍一种简便稳定的双重免疫组化标记方法 [J], 倪灿荣
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不同诱导因子对人外周血单个核细胞P2X7受体表达的作用(英文)
不同诱导因子对人外周血单个核细胞P2X7受体表达的作用(英文)张秀军;郑国光;马小彤;林永敏;宋玉华;吴克复【期刊名称】《生理学报》【年(卷),期】2005(57)2【摘要】ATP激活P2X7受体可产生一系列的白细胞功能反应,因此P2X7受体的表达调控引起我们的兴趣。
然而P2X7受体在正常人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)、单核细胞中的表达调控机制尚未阐明。
本文用半定量RT-PCR方法检测多种细胞因子、细菌抗原、丝裂原对P2X7受体表达的诱导作用,探索P2X7受体的诱导表达模式。
结果表明,单个核细胞和单核细胞可检出P2X7受体的表达;白细胞介素2、4、6(interleukin-2、-4、-6,IL-2、IL-4、IL- 6)、肿瘤坏死因子α(tumour necrosis factor-α,TNF-α)等细胞因子和金黄色葡萄球菌Cowan Ⅰ株(Staphylococcus aureus Cowan strain I,SAC)、脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)能上调PBMC的P2X7受体表达,而γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)、粒-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony-stimulating factor,GM-CSF)、巨噬细胞集落刺激因子(macrophage colony-stimu- lating factor,M-CSF)和植物血凝素(phytohemagglutinin-M,PHA-M)等则没有作用;LPS和M-CSF可以提高单核细胞的P2X7受体表达,IFN-γ、TNF-α、GM-CSF作用较弱,但是这些因子的预处理并不能增强LPS对P2X7受体表达的诱导。
炎症因子促进P2X7受体的表达,提示P2X7受体可能在对抗细菌感染的免疫反应中起一定作用,这有待于进一步研究。
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学时
3 3 6 3 3 3 3 3 3 3 2
实验教学
课前指导 学生自行查阅资料，设计实验方案和内容 课前带教老师对学生准备的材料进行初步
检查并指导 指导、修改学生设计方案和讲稿，并引导
学生以实验重点为中心展开讨论，对课程 中可能出现的问题进行分析
实验教学
教学实施 1. 预实验，规范实验关键技术，并完善设计方案
12
序号
1 2 3 4 5 6 7
队名
Flower Gen_master
渔之乐 抗糖者联盟
新芽 除污小达人 超能保肝队
课题名称
小组成员 指导老师
沈恺
不同来源的细菌对氟苯尼考的耐药 性分析及其floR基因研究
罗盼 於锦琦 蒋海琪 叶浩威
李佩珍
序号 队名
包其郁
赵敏敏
方丽丽
38 郑晓群爱亚麻籽
ABCG2基因rs2231142位点多态性与 浙南地区原发性痛风的相关性研究
2
基本情况
建筑面积 2980㎡
仪器设备 1500多万 专职人员
23个
12个医学检验及医学相关专业 年均24门实验课程 年均9000余学生参与实验 15.6万余人时数/学年
3
目标规划
院训：检以正德、验以求真 理念：以生为本，强化实践，注重素质，促进创新
自学 能力
实践 能力
学生
创新 能力
实验教学理念
实验教学
教学实施 2. 组内试讲，就整个试讲情况做出评价，再次完
善设计方案
实验教学
教学实施 3. 学生作为实验指导教师的角色正式进行教学
包括实验理论讲授、实验内容安排、实验关 键技术示范讲解等全过程 实验带教老师作为“学生”全程跟进指导
实验效果
附表.《临床免疫学检验实验》学生授课情况评估表
评估内容
背景
RPT （reciprocal peer teaching）模式，是 指“以学生为主体，教师为指导”的学生与教 师角色交替互换的教学模式，已经被应用于一 些教学领域且取得不同程度的成功。
教学设计
制定实验教学计划时，选择2～3个后期独立的、 与临床密切结合的综合性免疫学检验实验，运 用RPT模式编入实验安排进度表 HBsAg测定的方法学评价 抗核抗体（ANA）的检测
10
实验教学方法
2）小组讨论式教学
《血液学检验》结合临床实
际工作的流程及需求： 六人为一小组，采用形式： 介绍病史→学生独立看片→ 小组讨论→各小组汇报→ 老师讲解→学生出报告
11
实验教学方法
3）实行导师制，开展创新实验
① 以大学生科研课题、挑战杯和学科竞赛为载体，动员大部分学生早期融入科研团 队，开展创新实验活动 ② 具体流程：学生报名---5人组队---看文献---查找文献---撰写综述---指导实验设计--开始实验---实验过程---整理数据---撰写论文---参加比赛---现场答辩 ③ 参与队伍：2014年组队45支，2015年组队60支
检验医学院
RPT模式在免疫学检验实验 教学中的应用
郑晓群 陶洪群 杜季梅 王慧燕 2015.10.24
一、实验教学基本情况
检验系临床基 础检验实验室
浙江省基础课 教学实验室合 格评估
浙江省高校实 验教学示范中 心建设点
“院系合一”， 临床检验诊断 学实验中心
组建医学检 验诊断学实 验教学中心
通过省级实 验教学示范 中心验收
创伤弧菌溶细胞素对不同类型免疫 细胞作用差异研究
小组成员
张晴妮（组长） 李云丰 徐亦慧 王欣欣 林通
孙烁烁（组长） 周彤
邱雪浩 沈瑞环
董杰 徐洁（组长）
毛志杰 张跃
梁靖琛 沈丽萍 施伊露（组长） 张铮铮
苏炜 陈洁
孙佳薇（组长） 周瑞芳 唐冬苗 周高波 王蓓蕾
蒋佳奇（组长） 林蓉
陈钰洒 徐中元 戚海锋 黄丹妮（组长） 欧振飞 魏凤姣
赵强 王长红 陈柳君 李汪洋 凌宇航 邵莎莉 张为民 陈升平 蒋亦雯
江天 温郑静 王忠盖 何苏青 卢彬彬 许清清 沈京雷 童吉祥 黄益剑
王佳 陈小童 汤文玲 王官平 吴应铮
39
花儿与少年
艾为明
刘芬
40胶头Biblioteka 管肖敏谢克俭41
行路人
楼哲丰
金龙金
42
一路向北
王伍
周怀彬
43
非常战队
林虹
刘彦隆
44
行者无疆
课题名称
54321 54321 54321
准备：目的明确，材料丰富，准备充分，组织严密
54321
知识更新/获得信息：充分收集资料及查阅相关文献， 内容丰富、充实，信息量大
听完讲座你认为自己的临床行为或操作方面会有改变 吗？
54321 会改变 不会改变
你是： 老师
学生
总计分数:
实验效果
实验效果
体会
激发了学生的创新性，提高了他们提出问题、解 决问题并分析问题的能力
14
二、RPT模式在免疫学实验教学中的应用
背景 教学设计 实验教学 实验效果 体会分析
背景
免疫学检验作为医学检验技术中的一门重要专业 课程，是研究免疫学技术及其在医学领域中的应 用，为临床诊断提供依据
实验教学在整个课程设置中占据一半的比例，是 培养学生综合素质和创新能力的重要环节
学生通过PPT授课，锻炼了胆识，从不敢讲、不 会讲转变为主动去讨论交流
让教师发现自己的一些教学不足，此外，学生讲 解讨论过程中，教师听到更多学生学习中遇到的 问题，有助于教师后期更针对性的开展教学
体会
部分同学认为缺乏在同龄人中担任主要组员或老 师角色的信心
尽管来自不同学生的教学质量的不可靠性，但大 多数学生认为RPT应继续实施
周 次
日期
星 期
节次
实 验 （ 见习）内容
5 10月16日 五 6-8 细胞因子测定（IL-2定量测定） 6 10月23日 五 6-8 发光免疫分析仪示教和实验 7 10月31日 六 8:30- 金免疫测定技术 外周血单个核细胞分离和E花环形成试验 8 11月6日 五 6-8 流式细胞仪示教和T细胞亚群测定 9 11月13日 五 6-8 流式细胞仪示教和T细胞亚群测定 10 11月20日 五 6-8 CIC测定 11 11月27日 五 6-8 抗核抗体的检测 12 12月4日 五 6-8 IgG测定方法学评价 13 12月11日 五 6-8 HBSAg检测方法学评价 14 12月18日 五 6-8 放射免疫分析（T3、T4定量测定） 15 12月25日 五 6-7 实验考试
分值 （5 优秀；4 良好；3 一般； 备注
2 差；1 极差）
讲课者：-声音 -眼神交流 -沟通能力: 流畅 - 其他
54321
多媒体：-可读性 -制作美观 -内容 -其他
54321
讨论气氛/主持能力：问题设置合理，调动情绪，气 氛活跃 教学：注意启发思维，给予分析和解决问题、创新的 启迪 讲课条理：条理清晰、重点突出、表达准确、分析论 证充分
实验教学层次
实验教学方式方法
开设自主设计性和 探索性试验
虚拟仿真实验教学 系统
合理应用现代教育 技术
教学模式向启发式、 讨论式和互教式转化
自主式、合 作式、研究 式为主的学
习方式
改革实验教学考核 方式
实验教学方法
1）基本技能训练
① 项目：静脉采血、毛细血管采血、血涂片 的制作、血涂片染色、粗天平的使用、显微 镜的使用、尿葡萄糖定性检查、微生物平板 培养基的制备、粪便涂片检查、尿沉渣镜检、 显微镜白细胞计数、比色法测定血糖、二氧 化碳滴定、试管凝集实验、平板划线接种法、 革兰氏染色、药敏实验。 ② 制定各检验项目评分标准
孙涛 吴兆明
CONNEL RAYMOND 施苏雪 KOBINA
不同来源河水对斑马鱼胚胎生长发 育影响研究
活性AdipoRon对于治疗2型糖尿病的 研究
亚麻子多不饱和脂肪酸对胃癌生长、 侵袭转移抑制作用的研究
一种吸附水中重金属的微生物除污 菌株的研发
红花对环境毒物致小鼠肝损伤的保 护作用研究
姚佳明 张智永
徐畅
郑秋榆
指导老师
金龙金 楼哲丰 金龙金 洪丹 应俊 包其郁 王金丹 王方岩 陈通克 潘亮亮 肖敏 谢克俭 郑易 周怀彬
实验教学方法
4）互教模式教学（ RPT模式）
教师指导，由学生进行教学设计和实施的教学实践 《临床微生物学检验》 《临床免疫学检验》应用 学生6人组成一组，每实验班组成5组。学生自主完成实验研究，包括问题的 背景、发展趋势、基本研究方法和技术路线等；反复演练、指导 实验课中每组由一名学生讲解，老师点评
亚麻子多不饱和脂肪酸联合RNAi下 调BCL9对结肠癌细胞体外增殖、迁
移作用的研究
邻苯二甲酸酯对成年雄性小鼠生殖 毒性研究及其机制的初步探讨
氟化钠对体外培养人BEAS-2B、 HL-7702细胞的损伤作用研究
乙酸钠对胃溃疡的防治作用研究
姜黄素衍生物对乳腺癌的抑制作用 的研究
吡非尼酮对四氯化碳诱导的小鼠肝 纤维化影响的相关研究
从同伴那里得不到充分指导，还需通过老师指导 或者学习其他课程材料
总结
传统实验教学现状 一 以教师为主体 二 根据步骤按部就班操作 三 学生实验兴趣低 四 限制个性空间的发展
教育模式改革 以学生为中心 提高学生学习主动性 激发学习兴趣 提高学生创新性思维
两个结合
三个层次
一 个中心
5
1.一个中心：
以三位一体特色的医学检验卓越人才培养为中心
注重能力
夯实基础
突出创新
实验教 学体系
2.二个结合：
实验教学与临床相结合 实验教学与科研相结合