8 成分检测
UPLC-MSMS法同时测定黄芪-甘草药对8个有效成分
Vol. 36 No. 6Dec. 2222第36卷第6期哈尔滨商业大学学报(自然科学版)2020 年 12 月Journal of Harbin University of Commerce (Natural Sciences Edition )UPLC-MS/MS 法同时测定黄5 -甘草药对8个有效成分王晶萍2,董微微2,赫志强6,董林争2,赵丽珠2 *(2.哈尔滨商业大学药学院,哈尔滨150076 ； 2.鹤岗市检验检测中心，黑龙江鹤岗154122 ； 3.谱尼测试有限公司，哈尔滨150228)摘 要：建立UPLC - M/M/方法同时测定黄C -甘草药对中毛蕊异黄酮葡萄糖P 、甘草P 、芒柄花P 、甘草素、毛蕊异黄酮、黄CUP 、芒柄花素、甘草酸8种主要成分.采用 色谱柱为Acquity BEH C 18(54 mm x2. 3 mm ,1.3 p,m )柱，流动相为乙睛-体积分数2.2%乙酸水溶液洗脱系统，流速为2. 3 mL • min -1,采用E/I 离子源，MRM 模式检测.结果显示，所测8种主要成分在测定范围内线性关系良好，相关系数均大于2.999 2；精密 度、重复性和稳定性良好；平均加样回收率为96.63% -9964% ,RSD w3.48% .首次建立可同时测定黄C -甘草药对中8种主要成分的UPLC - M/M/方法，该法操作简便，灵敏度高，专属性好，分析速度快,为解析黄C -甘草药对的临床应用提供科学依据.关键词：黄C;甘草;黄CUP;毛蕊异黄酮葡萄糖P;UPLC-MS/MS中图分类号：R284 文献标识码：A 文章编号：1672 -2946(2222)26 -2665 -26Simultanerus determination of eighi active componentu inAstragali Radix and Glycyrrhizae Radix by UPLC - MS/MSWANG Jing-ping 2, DONG Wei-wei 2, HE Zhi-qiang 6, DONG Lin-zheng 2, ZHAO Li-zhu 2*(1. School of Pharmacy, Harbin University of Commerce, Harbin 154276, China ；. Inspection and Testing Centerof Hegang , Heeang 154122 , China ；. Pony Testing International Group , Harbin 154228 , China)Abstraci ：To estatlisP a metiocl fos the simultayeoui deermindtioa of eight active compoaeei(celycosin-P -glucosine , liquiritin , oyosin , liquiritihein , celycosin , astragalosine IV , form-onoaetin , ang hycyrrbizinie acid ) in the Astragali Radix - Glycyrrhizae Radix herb pais. The eeermiatioii was pebormee cm aa Acyuity BEH C^ (54 mm x 2. 3 mm , 2.6 ^m ) , angthe mobin pPasi was compose of 2. 2% aetie atn in wateb ang acetoaitale in aranieei elu- tioa ang at 2. 3 mL • min -2 flow rate. Mas spehomeeb with electrb spray ioaizatioa (ESI) soarce was opcdan in MRM moOe. All of the dglytes showd -ooS lineebty (M2. 9992 ) inthe testee ibnges. The precisios , reneatanility ang stdaility of the were gooS for the收稿日期：2222 -22 - 26.基金项目：黑龙江省属高等学校基本科研业务费科研项目(12XN254)；国家级大学生创新创业训练计划项目(221812240214)；哈尔滨商业大学博士科研启动金项7(2219DS122);黑龙江省博士后基金(LBH-Z12166)作者简介:王晶萍(1997 -),女,研究方向：中药质量标准.通信作者:赵丽珠(1989 -),女,博士,讲师,研究方向：中药质量标准.•666•哈尔滨商业大学学报（自然科学版）第36卷eight components.The average recoveries were in the range of96.63%-99.95%with relative standard deviations(RSD)W3.48%.A simple,accoratn,and sensitive methoV was es-taniisheC foe qranhtative analysis of8active compoeents in the Astragali Radix-GlycyrrhizaeRadix Oerd paid.These findings wili proviOe Oelpfai information foe the clinicoi anministra-hoa of the Astagad Radix-Glycyrrhizae Radix herd pair.Key words:Astraaad Radix；Glycyrrhizae Radix；Astragalosine IV;colycosin-7-glacosine;UPLC一MS/MS黄'为豆科植物蒙古黄'［Astraaalus tnembra-naceus（Fisco.）Bge.ver.mongholdys（E>ae.）Hsiao］或膜荚黄'［A*membranaceus（Fisch.）Bge；］的干燥根，具有补气升阳、生津养血、固表止汗、托毒生肌等功效，是我国最具代表的补气药物之一⑴.黄'配伍甘草（Glycyrraizae Radix,GR）,二者相须为用，可以大大提高二者间的协同作用⑵.黄'-甘草药对始载于《太平惠民和剂局方》，能补肺肾二气、调和脾胃表里脏腑、化津布液以滋益肾水、又能外固卫外而强曉理⑶.现代药理研究亦证明:黄'-甘草可治疗诸虚不足⑷、脾肺气虚、慢性乙型肝炎肝硬化⑷，酒精性肝纤维化及糖尿病［］等黄'中黄'甲昔、毛蕊异黄酮葡萄糖昔，甘草中甘草酸、甘草昔为主要的药理活性成分［「9］，同时上述4种成分也是药典中收录的黄'或甘草药材质量控制指标成分）黄'甲昔具有抗炎、降压、抗癌、治疗代谢性疾病等作用［1°-12］，是黄'-甘草药对中最重要的活性成分之一•毛蕊异黄酮葡萄糖昔具有抗肿瘤、抗氧化活性、抗炎作用、保护血管内皮细胞,还可通过抑制Rho/ROCK通路、上调AKT通路，改善细胞凋亡和抑制炎症，从而保护内皮细胞］.甘草酸具有抗炎、抗溃疡、抗过敏、抗氧化、抗疫调节、抗病毒、抗癌、保肝和稳定细胞膜等作用［15-1?］;甘草昔具有抗抑郁、神经保护、对肝脏毒性的保护、对心脏系统的作用［5-15］）与大量的药理活性相比，对黄'-甘草药对中主要活性成分的研究未见文献报道•丁淑芹等妙］灌胃给予昆明小鼠黄'-甘草药对水提液，发现其对环磷酰胺诱导的损伤具有保护作用，并可显著抑制增加小鼠腹腔巨噬细胞吞噬率•此外，王迪等的黄'-甘草药对、黄'、甘草均可提高小鼠细胞免疫功能，且黄'-甘草药对组的活性强于黄'组和甘草组•另有研究发现，黄'-甘草药对可使大鼠胆汁淤积性肝硬化程度显著减轻［］）基于此,本研究采用UPLC-M//MS法同时测定黄'-甘草药对中8种主要成分含量,以期为中药黄'-甘草药对的临床应用提供科学依据.1仪器与材料1.6仪器Waters ACQUITY UPLC I-Class系统、Xeve TQS系统（美国Waters公司）;旋转蒸发仪（德国IKA公司）;AG-245电子分析天平（瑞士Mettler -Toledo公司）；FW177中草药粉碎机（天津泰斯特仪器有限公司）；标准检验筛（66目，孔径°3°mm,绍兴上虞华丰五金仪器有限公司）；乙”和甲醇（色谱纯，美国Fisher公司），乙酸（色谱纯,德国Merck公司）.1.6材料对照品毛蕊异黄酮葡萄糖昔（批号: U0520010）、甘草昔（批号：1240001°）、芒柄花昔（批号:G2299012）、甘草素（批号:T4890010）、毛蕊异黄酮（批号：34412012）、黄'甲昔（批号: T0922022）、芒柄花素（批号：Q4122012）、甘草酸（批号:3462）购于上海安谱有限公司.所有化合物经HPLC-DAD分析，纯度均大于98%.黄'购于内蒙古、贵州、河南、西、甘肃、黑龙江•甘草购于新疆、内蒙古、甘肃、西、陕西、黑龙江•样品标本保留在哈尔滨商业大学药学院中心实验室•经哈尔滨商业大学大学曲中原教授鉴定分别为豆科植物蒙古黄'Astragalas membranacees（Fisco.）Bge. vea.monga（/pas（Bge.）Hsiao的干燥根、豆科甘草属植物甘草Glycychizd araleesis Fisco.的干燥根及第6期王晶萍,等:UPLC-MS/MS法同时测定黄'-甘草药对8个有效成分-666-根茎.2方法与结果2.3色谱及质谱条件色谱采用Waters ACQUIVY™UPLC系统检测.色谱柱:Acquity UPLC BEH C15(52mm x2.3mm, 2-9p n)柱；柱温26°C；流动相:体积分数2. 2%乙酸水溶液(A)-乙”(B),梯度洗脱；洗脱程序：0~2.9min22%B,2.9~6.9min22%~66%B,6.9~9.2min66%~99%B,9.9~9.2min99% ~22%B,9.1~12.9min22%B；流速：0.3mL-mm-1；自动进样;样品室温度：22C；进样量：2pL.质谱条件：电喷雾离子源(ESI源)，多反应监测模式(MRM)检测,源温度和脱溶剂气温度分别为254C和502C,脱溶剂气为氮气,流速为2002 L-h-1,碰撞气为氮气,毛细管电压为3.9kV.8个分析物的定量离子、定性离子、保留时间、锥孔电压等信息见表2-表18种分析物的定量离子、定性离子、保留时间、锥孔电压和碰撞能量化合物保留时间/min母离子/(m•a"1)子离子/(m•a_1)锥孔电压/V碰撞能量/eV电离方式毛蕊异黄酮葡萄糖X 2.99446.2285.9*/276.92022/44ES)+甘草X 2.33426.3255.2*/135.95222/28ESI-芒柄花X 3.56432.9269.2*/291.32022/16ESI+甘草素 4.22255.3119.2*/135.22522/22ES-毛蕊异黄酮 4.35285.9415.2*/272.92033/28ES+黄_'X 5.42826.3626.2*/223.26246/55ES+芒柄花素 5.36266.9252.9*/243.41224/35ES-甘草酸 6.22542.4352.2*/113.22055/66ES-注：*定量离子2.9供试品溶液的制备黄'、甘草药材干燥24h,打粉,过62目筛,按6：1比例分别称取干燥的黄'、甘草粉末共计12--置542mL圆底烧瓶中,加水202mL,浸泡12h后，加热回流提取2h,提取3次,3542r/min离心12 min,吸取上清液,合并上清液并旋干.精密称取黄'-甘草提取物12mg-用适量12%甲醇-水溶解,经2.22pm滤膜滤过,取续滤液作为供试品溶液[22]-2.3对照品溶液的制备分别精密称取毛蕊异黄酮葡萄糖昔、甘草昔、芒柄花昔、甘草素、毛蕊异黄酮、黄'甲昔、芒柄花、量42mL量中醇并稀释至刻度，摇匀•配成质量浓度分别为2-9mg•mL-的储备液，置于8C冰箱中储存.2.9方法学考察2.9.3专属性考察分别取对照品、供试品溶液,按“2.2”项色谱条件进行分析,各化合物之间无干扰,方法专属性良好.2.9.9线性关系考察精密吸取毛蕊异黄酮葡萄糖昔、甘草昔、芒柄花昔、甘草素、毛蕊异黄酮、黄'甲昔、芒柄花素、甘草酸标准系列溶液,配制成相当于毛蕊异黄酮葡萄糖昔质量浓度为2.92、2.22、0.94、2.12和2.92p •mL-1,甘草昔质量浓度为2.22、0.22、0.25、2.32和2.22p g•mL-，芒柄花昔质量浓度为4.42、4.44、4.48、4.12和2.22pg•mL-,甘草素质量浓度为4.41、4.42、4.45、4.32和2.22pg•mL-,毛蕊异黄酮质量浓度为2.22、2.24、2.28、2.12和2.22 p g•mL'1，黄'甲昔质量浓度为2.26、2.32、2.38、2.24和2.30pg•mL-1,芒柄花素质量浓度为2.22、2.22、2.25、2.32和2.22p g•mL'1,甘草酸质量浓度为2-02、2.02、5.02、12.2和22.2p g•mL-1，按色谱条件进样分析.以对照品峰面积为纵坐标(门，质量浓度(pg/mL)为横坐标(X ),绘制• 668 •哈尔滨商业大学学报(自然科学版)第36卷标准工作曲线.各指标成分在测定浓度范围内，线 信噪比(S/N) M 3确定检出限(LOD ) ,S/NM2确性关系良好，结果见表2.以特征离子对色谱峰的定定量限(LOQ ),结果见表2.表2 8种分析物的回归方程、相关系数、线性范围、检出限、定量限化合物回归方程r线性范围/( [JLg • mL -2) LOD/ ( n- • mL -2) LOQ/(n •毛蕊异黄酮葡萄糖XY 二50 208. 3X + 28. 4099930.42 〜0. 400. 42. 5甘草XY 二 22 952X + 25. 40. 999 20. 42 〜0.22．2 2. 5芒柄花X Y 二 95 608X + ⑵」0. 999 20. 02 〜0. 40．32. 0甘草素Y 二 2 89X + 127. 20. 999 40. 02 〜0. 40 2.43毛蕊异黄酮Y 二 63 023X - 97-. 50. 999 30. 02 〜0. 40 2.43黄_'X Y 二 4 405. IX + 30. 40. 999 40. 06 〜0. 402．6芒柄花素Y二 45 545X + 644. 90. 999 70. 0 2 〜0. 40．32. 0甘草酸Y 二4 152 4X - 730. 40.999 52.60 〜20 . 621522.6.3精密度精密吸取同一份对照品溶液2 ^L,按“29”项色谱条件连续测定2次，结果显示:毛蕊异黄酮葡 萄糖昔、甘草昔、芒柄花昔、甘草素、毛蕊异黄酮、黄 董甲昔、芒柄花素、甘草酸RSD 在0.68% -3.62%之间,表明仪器精密度良好.2.6.6重复性以黄'-甘草药对提取物进行重复性考察，按照上述供试品制备方法，平行制备黄'-甘草样品6份，进样2，依法测定,记录峰面积，结果显示:毛蕊异黄酮葡萄糖昔、甘草昔、芒柄花昔、甘草素、 毛蕊异黄酮、黄'甲昔、芒柄花素、甘草酸RSD 分别为 0. 92%、. 83%、. 69%、2. 37%、. 32%、0.82%、2. 49% ,2.65%，表明方法重复性良好.2.6.6稳定性取黄'-甘草药对提取物供试品溶液，分别于室温下0、4、8、12、24、48 h,进样2 ^L,依法测定，记 峰面积， 结果显示:黄、昔、芒柄花昔、甘草素、毛蕊异黄酮、黄'甲昔、芒柄花素、甘草酸RSD 在0.62% -2.64%之间,表明供.8e 稳定62.6.6加样回收率取批号为120662的黄' -甘草药对样品6份,每份约0-12 g,精密加入2种对照品，按照上述供试品制备方法，平行制备黄'-甘草样品6份,进样2 ^L,依法测定,结果显示:毛蕊异黄酮葡萄糖昔、甘草昔、芒柄花昔、甘草素、毛蕊异黄酮、黄' 甲昔、芒柄花素、甘草酸平均加样回收率分别为99. 62%、98. 62%、98. 12%、97. 23%、96. 63%、98.60%、98.44%、98.15%.2.5样品测定精密称取黄'-甘草药对，按“2. 2”项下方法 制备样品溶液，每个样本平行3份，按“2. 2项下色条件进行测定，色谱图见图22.6结果6批黄'-甘草药对药材，按“2. 2”项下方法制备样品溶液，精密吸取2咲进样UPLC - MS/MS 进行分析,测定结果见表3.表3黄5 -甘草药对中含8种成分的量(mg - g-1)批次毛蕊异黄酮葡萄糖X甘草X芒柄花X甘草素毛蕊异黄酮黄_'X芒柄花素甘草酸1006020.642 55.122 70604 70.349 20.095 20.005 70.042 677.221000020.675 6 4.575 70.409 90.301 20.122 40.057 30.057 975.921006060.277 8 3.602 00.503 80.437 90.122 90.029 70.127 934.821006040.606 64.282 40.695 70.377 80.072 80.049 20.123 509.742006020.665 7 2.672 00.969 40.770 80.129 20.053 20.099 7104.02006060.360 36.953 80.477 40.523 80.040 70.023 80.668 093.55第6期王晶萍,等:UPLC- MS/MS 法同时测定黄' -甘草药对8个有效成分• 669 •100%°0 2.0 4.0 6.08.0 10.0r/min447.03 > 270.05100%417.1 >135.06431.03 >197.11■ L2.0(B)甘草昔(A)毛蕊异黄酮葡萄糖昔100%285.03 > 270.04255.07 > 135.068.0 10.0r/min (D)甘草素% 2.0 4.0 6.0 8.0 10.04.0 6.08.0 10.0r/min100%r/minCD 黄区罠甲昔100%4.0 6.0r/min4.0 6.0 8.0 10.0r/min (C)芒炳花昔图1黄5-甘草中8种分析物的UPLC-MS/MS 色谱图821.22 > 113.073讨论本文考察了不同流动相系统，包括乙睛-水、甲醇-水、乙睛-0.1%甲酸水溶液、乙睛-0.1% 乙酸水溶液、乙睛- 1 mmol/mL 乙酸钱水溶液、甲醇-0. 3%甲酸水溶液，结果表明，乙睛-0. 1%乙 酸水系统洗脱时，待测分析物灵敏度较高、色谱峰峰形、分离度、基线噪音均能达到较好的洗脱效果,故本实验最终采用乙睛-0. 3%乙酸水溶液作为流动相系统.3种待测组分分别以质量浓度0. 54mg/L 和2.0从!^!^的流速直接用注射泵进行优化,标准溶液通过流动相注入离子源中，在正离子或负离子模式下得到准分子离子峰,再对准分子离子峰进行二级质谱分析(子离子扫描)，得到碎片离子信息，对锥孔电压、碰撞能量等参数进行优化，使每 种组分的准分子离子产生的特征碎片离子强度达到最大;标准溶液由UPLC 进样，再对离子源温度、脱溶剂气温度、脱溶剂气流量等进行优化•选择两对离子对，其中干扰小、信噪比大的离子对作为定量离子对•设定合适的峰驻留时间(dwell time)确保色谱峰的采样点数在1〜20点,从而得到较好 的定量重复性,优化得到的质谱参数•黄酮和皂苜类化合物是黄'-甘草药对的主 要活性成分,因皂苜类化合物无紫外吸收或有微弱的紫外吸收，故用DAD 检测器无法同时测定黄酮和皂苜类化合物.所以本文首次建立UPLC - MS/MS 法同时测定黄' -甘草药对中毛蕊异黄酮葡萄糖苜、22 2 、毛蕊异黄酮、黄'2、28种有效成分含量的方法,多指标控制黄'和甘草药材提供参考.参考文献：[1] 杨 萍，周玉平,常秀春，等•黄'甲背调控Nb2/Bach1/HO - 1信号通路抑制缺氧复氧诱导的H9c2心肌细胞损伤[J ]中国中药杂志,2019, doi ： 12.19544/j. enki. ejemm. 20190312. 021.[2]LIU P , WANG G , CHEN G , et ad Huangqi decoc2on inhibits apoptosis and finbsis , bui pbmotes KupffebCell activatiop in dimethylmtro-samihe-inhucen U vcs fi-U/sis in bts [ J ], BMC Complemeei Altem Med ,2012,12(1) ：51.[3 ] DU J SUN M , LIU C , er ai. 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成分检测误差分析报告
成分检测误差分析报告成分检测误差分析报告一、引言成分检测是一种常见的化学分析技术，可以快速准确地确定样品中各成分的含量。
然而，在实际操作中，成分检测的结果往往会受到各种因素的影响，从而产生误差。
本报告对成分检测误差进行分析，找出误差的来源，并提出相应的改进措施。
二、误差来源分析1. 仪器误差：成分检测常用的仪器包括色谱仪、质谱仪等，它们在测量过程中存在一定的误差。
例如，色谱仪的进样量、流速等参数会影响到检测结果的准确性。
此外，仪器的使用寿命和精度也会对检测结果产生一定的影响。
2. 样品制备误差：样品制备是成分检测的一个重要环节，对样品的制备不当会引入误差。
例如，在固体样品的制备中，样品的粉碎程度、混合均匀性等都会影响到成分检测结果的准确性。
而在液体样品的制备中，液体体积、溶剂的选择等因素也会对检测结果产生一定的影响。
3. 标准曲线的制备误差：成分检测通常使用标准曲线法来确定样品中各成分的含量。
标准曲线的制备过程中，如果标准溶液的浓度不准确、标签不清晰等等因素都会对最终成分检测结果产生误差。
4. 操作员技术水平误差：成分检测的准确性也与操作员的技术水平有关。
操作员在样品制备、仪器操作、数据处理等环节上的熟练程度、经验水平都会对结果产生影响。
操作员的不精细、不认真等因素都可能引入误差。
三、改进措施1. 选择合适的仪器：在成分检测过程中，应选择合适的仪器来确保测量的准确性和精度。
对仪器的性能和使用状态进行定期检测和维护，保证仪器的正常工作。
2. 严格控制样品制备过程：对样品的制备过程进行规范化管理，确保样品的质量和一致性。
对固体样品的粉碎程度、液体样品的混匀程度等进行严格控制。
同时加强对样品制备人员的培训和考核，提高其技术水平。
3. 标准曲线的准备：标准曲线的制备应遵循标准操作程序，严格控制标准溶液的浓度，确保标准曲线的准确性和可靠性。
在每次检测前对标准曲线进行验证，保证其正确性。
4. 提高操作员水平：加强操作员的培训和日常管理，提高其技术水平和操作规范性。
双黄连口服液中8种成分含量的高效液相色谱法同时测定
液相色谱-串联质谱法测定化妆品中谷胱甘肽和乙酰基六肽-8的含量
60上海市食品药品检验所/国家药监局化妆品监测评价重点实验室，上海 201203 …………………………潘 晨 许 勇 彭兴盛 郑 荣#液相色谱-串联质谱法测定化妆品中谷胱甘肽和乙酰基六肽-8的含量建立了以液相色谱-串联质谱法 （LC-MS/MS ）测定化妆品中谷胱甘肽和乙酰基六肽-8含量的方法。
样品经水提取，用Agilent Poroshell 120 EC-C18柱 （4.6 mm × 100 mm × 2.7 μm ）分离，以乙腈和含有体积分数0.1%乙酸水溶液等度洗脱，流速0.3 mL/min ，以多反应模式 （MRM ）监测，外标法定量。
结果表明，谷胱甘肽和乙酰基六肽-8在1 ~ 200 ng/mL 范围内线性良好，相关系数 （r ）均大于0.995，检出限 （LOD ）分别为0.08 μg/g 和0.15 μg/g ，平均回收率为85.1% ~ 105.6%，相对标准偏差 （RSD ，n = 6）为0.5% ~ 4.4%。
该方法快速简便、灵敏度高，可用于化妆品中谷胱甘肽和乙酰基六肽-8的快速准确检测。
谷胱甘肽 乙酰基六肽-8 化妆品 液相色谱-串联质谱法Determination of the Contents of Glutathione and Acetyl Hexapeptide-8 in Cosmetics by LC-MS/MS PAN Chen XU Yong PENG Xingsheng ZHENG Rong #(Shanghai Institute for Food and Drug Control/NMPA Key Laboratory for Monitoring and Evaluation of Cosmetics, Shanghai 201203, China)Abstract ： A LC-MS/MS method was established for the determination of the contents of glutathione and acetyl hexapeptide-8 in cosmetics. The samples were extracted with water, the Agilent reversed phase column Poroshell 120 EC C18(4.6 mm × 100 mm × 2.7 μm) was used with acetonitrile-0.1% (volume fraction) acetic acid aqueous solution as the mobile phase. The flow rate was 0.3 mL/min, the multiple reaction monitor mode was performed, external standard quantification was conducted. The results showed that it had a good linearity in the range of 1-200 ng/mL(r > 0.995). The detection limits of glutathione and acetyl hexapeptide-8 were 0.08 μg/g and 0.15 μg/g. The spiked recoveries were 85.1% to 105.6% with the relative standard deviation of 0.5% to 4.4%. The method is simple, rapid and highly sensitive. It is suitable for the determination of the contents of glutathione and acetyl hexapeptide-8 in cosmetics.Keywords ：glutathione acetyl hexapeptide-8 cosmetics LC-MS/MS作者简介潘晨 （1989—），女，硕士，工程师，研究方向：化妆品质量研究。
多波长HPLC－DAD_法同时测定美白类化妆品中8_种甘草化学成分
多波长ＨＰＬＣ－ＤＡＤ法同时测定美白类化妆品中８种甘草化学成分吴晓云ꎬ李思龙ꎬ刁飞燕ꎬ李启艳ꎬ冉金凤ꎬ刘春霖(山东省食品药品检验研究院ꎬ国家药品监督管理局化妆品原料质量控制重点实验室ꎬ山东济南２５０１０１)摘要:目的㊀建立多波长高效液相色谱－二极管阵列检测器(ＨＰＬＣ－ＤＡＤ)法同时测定美白类化妆品中８种甘草化学成分的含量ꎮ方法㊀样品经７０％甲醇溶液提取㊁过滤后ꎬ经ＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘＣ１８色谱柱(４.６ｍｍˑ２５０ｍｍꎬ５μｍ)分离ꎬ流动相为乙腈－０.１％磷酸ꎬ梯度洗脱ꎬ２３１㊁２４９和３６５ｎｍ波长同时检测ꎬ流速１.０ｍＬ ｍｉｎ－１ꎬ柱温３０ħꎮ结果㊀８种成分分离度良好ꎬ在各进样浓度范围内线性关系良好ꎬ相关系数ｒ均大于０.９９８ꎻ４种不同化妆品基质的平均加样回收率(ｎ＝３)为８８.３％~９６.２％ꎬ相对标准偏差(ＲＳＤ)为０.９％~３.５％ꎮ结论㊀本方法准确可靠㊁灵敏度高ꎬ可用于同时测定化妆品中８种甘草化学成分ꎮ关键词:化妆品ꎻ甘草ꎻ多波长ꎻ高效液相色谱法中图分类号:Ｒ９２７.２㊀文献标志码:Ａ㊀文章编号:２０９５－５３７５(２０２３)０９－０６８０－００５ｄｏｉ:１０.１３５０６/ｊ.ｃｎｋｉ.ｊｐｒ.２０２３.０９.００７Ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆ８ｃｈｅｍｉｃａｌｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｆｒｏｍＧｌｙｃｙｒｒｈｉｚａｅＲａｄｉｘｅｔＲｈｉｚｏｍａｉｎｗｈｉｔｅｎｉｎｇｃｏｓｍｅｔｉｃｓｂｙｍｕｌｔｉ－ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈＨＰＬＣ－ＤＡＤＷＵＸｉａｏｙｕｎꎬＬＩＳｉｌｏｎｇꎬＤＩＡＯＦｅｉｙａｎꎬＬＩＱｉｙａｎꎬＲＡＮＪｉｎｆｅｎｇꎬＬＩＵＣｈｕｎｌｉｎ(ＮＭＰＡＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｆｏｒＱｕａｌｉｔｙＣｏｎｔｒｏｌｏｆＣｏｓｍｅｔｉｃｓＲａｗＭａｔｅｒｉａｌꎬＳｈａｎｄｏｎｇＩｎｓｔｉｔｕｔｅｆｏｒＦｏｏｄａｎｄＤｒｕｇＣｏｎｔｒｏｌꎬＪｉｎａｎ２５０１０１ꎬＣｈｉｎａ)Ａｂｓｔｒａｃｔ:Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ㊀Ｔｏｅｓｔａｂｌｉｓｈａｎｍｕｌｔｉ－ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈＨＰＬＣ－ＤＡＤｍｅｔｈｏｄｆｏｒｔｈｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆ８ｃｈｅｍｉｃａｌｃｏｎ￣ｓｔｉｔｕｅｎｔｓｆｒｏｍＧｌｙｃｙｒｒｈｉｚａｅＲａｄｉｘｅｔＲｈｉｚｏｍａｉｎｗｈｉｔｅｎｉｎｇｃｏｓｍｅｔｉｃｓ.Ｍｅｔｈｏｄｓ㊀Ｓａｍｐｌｅｓｗｅｒｅｅｘｔｒａｃｔｅｄｂｙ７０％ｍｅｔｈａｎｏｌｓｏｌｕｔｉｏｎａｎｄｆｉｌｔｅｒｅｄꎬｔｈｅｎｓｅｐａｒａｔｅｄｏｎａＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘＣ１８ｃｏｌｕｍｎ(４.６ｍｍˑ２５０ｍｍꎬ５μｍ)ｕｓｉｎｇａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅａｎｄｔｈｅａ￣ｑｕｅｏｕｓｓｏｌｕｔｉｏｎｏｆ０.１％ｐｈｏｓｐｈｏｒｉｃａｃｉｄａｓｍｏｂｉｌｅｐｈａｓｅｗｉｔｈｇｒａｄｉｅｎｔｅｌｕｔｉｏｎａｎｄａｆｌｏｗｒａｔｅｏｆ１.０ｍＬ ｍｉｎ－１.Ｔｈｅｄｅｔｅｃ￣ｔｉｏｎｗａｖｅｌｅｎｇｔｈｓｗｅｒｅ２３１ꎬ２４９ａｎｄ３６５ｎｍａｎｄｔｈｅｃｏｌｕｍｎｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｗａｓ３０ħ.Ｒｅｓｕｌｔｓ㊀Ｔｈｅ８ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｗｅｒｅｗｅｌｌｓｅｐａｒａｔｅｄ.Ａｌｌｏｆｔｈｅｃａｌｉｂｒａｔｉｏｎｃｕｒｖｅｓｓｈｏｗｅｄｇｏｏｄｌｉｎｅａｒｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｉｎｔｈｅｒａｎｇｅｏｆｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎａｎｄａｌｌｔｈｅｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔｓｗｅｒｅａｂｏｖｅ０.９９８ꎻＴｈｅａｖｅｒａｇｅｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓｉｎ４ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｔｙｐｅｓｏｆｃｏｓｍｅｔｉｃｓｗｅｒｅｉｎｔｈｅｒａｎｇｅｏｆ８８.３％~９６.２％ꎬｗｉｔｈＲＳＤｏｆ０.９％~３.５％(ｎ＝３).Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ㊀Ｔｈｉｓｍｅｔｈｏｄｗａｓａｃｃｕｒａｔｅａｎｄｈｉｇｈｌｙｓｅｎｓｉｔｉｖｅ.Ｉｔｃａｎｂｅｕｔｉｌｉｚｅｄｆｏｒｓｉｍｕｌｔａ￣ｎｅｏｕｓｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆ８ｃｈｅｍｉｃａｌｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｆｒｏｍＧｌｙｃｙｒｒｈｉｚａｅＲａｄｉｘｅｔＲｈｉｚｏｍａｉｎｃｏｓｍｅｔｉｃｓ.Ｋｅｙｗｏｒｄｓ:ＣｏｓｍｅｔｉｃｓꎻＧｌｙｃｙｒｒｈｉｚａｅＲａｄｉｘｅｔＲｈｉｚｏｍａꎻＭｕｌｔｉ－ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈꎻＨＰＬＣ㊀㊀植物原料及其提取物由于安全性高㊁作用温和等独特的优势ꎬ因此在化妆品行业有良好的开发和应用前景ꎮ甘草提取物主要包括黄酮类㊁三萜类和多糖类等活性成分ꎬ具有美白㊁防晒㊁抗氧化㊁抗炎和抗菌等功效[１－４]ꎬ被广泛应用于护肤类㊁美白类㊁防晒类等多种化妆品中ꎮ目前ꎬ涉及化妆品中甘草类化学成分的检测标准有３个ꎬ国家标准«ＧＢ/Ｔ３５９５４－２０１８化妆品中１０种美白祛斑剂的测定高效液相色谱法»㊁行业标准«ＳＮ/Ｔ１５００－２００４化妆品中甘草酸二钾的检测方法液相色谱法»与团体标准«Ｔ/ＣＡＦＦＣＩ１－２０１８化妆品用原料甘草酸二钾»ꎬ且以上标准只涉及甘草酸二钾的检测ꎮ甘草提取物中除含甘草酸二钾ꎬ还含有甘草苷㊁异甘草苷㊁甘草查尔酮Ｂ㊁甘草素㊁异甘草素㊁甘草查尔酮Ａ和光甘草定等多种化学活性成分ꎬ本文建立多波长高效液相色谱－二极管阵列检测器(ＨＰＬＣ－ＤＡＤ)法可同时测㊀作者简介:吴晓云ꎬ女ꎬ副主任药师ꎬ研究方向:中药与化妆品检测㊁质量控制ꎬＥ－ｍａｉｌ:４４１３１４１８４＠ｑｑ.ｃｏｍ通信作者:刘春霖ꎬ男ꎬ高级工程师ꎬ研究方向:化妆品与保健食品检测㊁质量标准研究ꎬTel:158****0988ꎬE－ｍａｉｌ:ｃｈｕｎｌｉｎ０３２０＠１２６.ｃｏｍ定以上８种甘草化学成分ꎮ文献报道甘草成分检测方法有高效液相色谱法[５－６]㊁超高效液相色谱法[７]㊁液相色谱－质谱法等[８－１０]ꎬ主要涉及中药材及其提取物研究ꎮ化妆品领域甘草化学成分的测定方法主要为高效液相色谱法[１１－１２]ꎬ文献[１３]在２３７ｎｍ波长下测定化妆品中的４种甘草成分ꎬ陆军等[１４]在２３７ｎｍ波长下测定７种甘草成分ꎮ笔者未见文献报道化妆品中甘草查尔酮Ｂ和异甘草素的测定ꎬ单一检测波长很难兼顾每个组分的最佳检测灵敏度ꎬ且同一提取方法可能不适用于多种复杂的化妆品基质ꎮ本方法在优化乳液类㊁膏霜类㊁水剂类和凝胶类４种基质前处理方法基础上ꎬ建立多波长ＨＰＬＣ－ＤＡＤ法同时测定８种甘草化学成分ꎬ该方法操作简单㊁灵敏度和准确度高ꎬ为产品质量提供保障ꎮ１㊀仪器与材料１.１㊀仪器与设备㊀ＬＣ－４０Ｄ高效液相色谱仪(日本岛津公司)ꎬ配ＤＡＤ检测器ꎻＭｅｔｔｌｅｒＴｏｌｅｄｏＭＳ电子天平(梅特勒－托利多国际贸易上海有限公司)ꎻＵ￣ｎｉｖｅｒｓａｌ３２０Ｒ高速离心机(德国Ｈｅｔｔｉｃｈ公司)ꎻＫＱ－５００ＤＥ超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)ꎻＭｉｌｌｉ－Ｑ型超纯水仪(美国密理博公司)ꎮ１.２㊀材料与试剂㊀乙腈㊁甲醇(色谱纯ꎬ霍尼韦尔贸易上海有限公司)ꎻ磷酸(优级纯ꎬ国药集团化学试剂有限公司)ꎻ超纯水ꎮ标准品:甘草苷(批号:Ｚ１０Ｊ８Ｘ３９６１１ꎬ含量９８％ꎬ上海源叶生物科技有限公司)ꎻ异甘草苷(批号:Ｙ１５Ａ１０Ｈ９５３４４ꎬ含量９８％ꎬ上海源叶生物科技有限公司)ꎻ甘草查尔酮Ｂ(批号:Ｗ１０Ｓ１０Ｚ９６９５３ꎬ含量９８％ꎬ上海源叶生物科技有限公司)ꎻ甘草素(批号:Ｔ４８９００１０ꎬ含量９９.０％ꎬ上海安谱实验科技股份有限公司)ꎻ甘草酸二钾(批号:Ｆ１２Ｍ６Ｚ１ꎬ含量９８％ꎬ上海源叶生物科技有限公司)ꎻ异甘草素(批号:３８６４００１０ꎬ含量９９.９％ꎬ上海安谱实验科技股份有限公司)ꎻ甘草查尔酮Ａ(批号:Ｐ２１Ｏ８Ｆ４６４７３ꎬ含量９８％ꎬ上海源叶生物科技有限公司)ꎻ光甘草定(批号:Ｋ２７Ａ９Ｒ５９９６０ꎬ含量９８％ꎬ上海源叶生物科技有限公司)ꎮ３０批美白类化妆品均为市售产品ꎮ２㊀方法与结果２.１㊀色谱条件㊀色谱柱:ＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘＣ１８(４.６ｍｍˑ２５０ｍｍꎬ５μｍ)ꎻ柱温:３０ħꎻ流速:１.０ｍＬ ｍｉｎ－１ꎻ进样体积:１０μＬꎮ流动相:乙腈(Ａ)－０.１％磷酸溶液(Ｂ)ꎬ梯度洗脱(０~４ｍｉｎꎬ２４％Ａꎻ４~２７ｍｉｎꎬ２４％Ａң８０％Ａꎻ２７~３０ｍｉｎꎬ８０％Ａң２４％Ａꎻ３０~３３ｍｉｎꎬ２４％Ａ)ꎮ检测波长:２３１ｎｍ(甘草苷㊁甘草素和光甘草定)㊁２４９ｎｍ(甘草酸二钾)㊁３６５ｎｍ(异甘草苷㊁甘草查尔酮Ｂ㊁异甘草素㊁甘草查尔酮Ａ)ꎮ２.２㊀标准溶液的制备㊀分别精密称取甘草苷１２.０１ｍｇ㊁异甘草苷１０.６５ｍｇ㊁甘草查尔酮Ｂ７.８５ｍｇ㊁甘草素９.５０ｍｇ㊁甘草酸二钾１２.０４ｍｇ㊁异甘草素１０.１９ｍｇ㊁甘草查尔酮Ａ１０.２９ｍｇ㊁光甘草定１０.８３ｍｇꎬ置１０ｍＬ量瓶中ꎬ加甲醇溶解并定容至刻度ꎬ配成标准储备液ꎮ分别精密吸取上述标准储备液各１.０ｍＬꎬ置１０ｍＬ量瓶中ꎬ加甲醇稀释并定容至刻度作为混合标准溶液ꎮ２.３㊀供试品溶液的制备２.３.１㊀乳液类和膏霜类㊀准确称取０.５ｇ样品(精确至０.０００１ｇ)于２５ｍＬ具塞比色管中ꎬ加入０.５ｍＬ饱和氯化钠水溶液ꎬ震荡混匀ꎬ再加入１０ｍＬ７０％甲醇ꎬ涡旋混匀５ｍｉｎ后ꎬ超声提取２０ｍｉｎꎬ４０００ｒ ｍｉｎ－１离心４ｍｉｎ后ꎬ取上清液于比色管中ꎬ残渣再加１０ｍＬ７０％甲醇重复上述步骤ꎬ合并两次提取液ꎬ用氮气吹干至５ｍＬ左右ꎬ再加入甲醇溶解定容至１０ｍＬꎬ－１８ħ冷冻１ｈ后ꎬ４ħ下６０００ｒ ｍｉｎ－１离心１０ｍｉｎꎬ取上清液经０.４５μｍ滤膜过滤ꎬ取续滤液ꎬ即得ꎮ２.３.２㊀水剂类和凝胶类㊀准确称取０.５ｇ样品(精确至０.０００１ｇ)于１０ｍＬ具塞比色管中ꎬ加入适量７０％甲醇溶液ꎬ涡旋混匀５ｍｉｎ至样品完全分散ꎬ超声提取２０ｍｉｎꎬ冷却后定容至１０ｍＬꎬ－１８ħ冷冻１ｈ后ꎬ４ħ下６０００ｒ ｍｉｎ－１离心１０ｍｉｎꎬ取上清液经０.４５μｍ滤膜过滤ꎬ取续滤液ꎬ即得ꎮ２.４㊀系统适用性试验㊀精密量取 ２.２ 项下混合标准溶液１.０ｍＬ置１０ｍＬ量瓶中ꎬ加甲醇溶解并定容至刻度ꎬ将上述溶液按 ２.１ 项下色谱条件进样ꎮ结果ꎬ在２３１ｎｍ波长下８种成分分离度均大于２.５ꎬ达到基线分离ꎬ理论板数均大于７０００ꎮ２.５㊀线性关系考察㊀精密量取混合标准溶液适量ꎬ用甲醇分级稀释ꎬ按照上述色谱条件分别进样ꎬ以溶液浓度(Ｘ)为横坐标ꎬ色谱峰面积(Ｙ)为纵坐标ꎬ进行线性回归ꎮ结果表明ꎬ８种成分在一定浓度范围内线性关系良好ꎬ结果见表１ꎮ２.６㊀回收率试验㊀取４种不同化妆品空白基质(水剂类㊁膏霜类㊁凝胶类和乳液类)各０.５ｇꎬ分别精密加入标准储备液适量ꎬ使添加水平分别为低㊁中和高３个水平ꎬ每个水平平行制备３份样品ꎬ按 ２.３ 项下制备供试品溶液后进样测定ꎬ得到８种成分平均加样回收率范围为８８.３％~９６.２％ꎬＲＳＤ为０.９％~３.５％ꎬ回收率良好ꎬ结果见表２ꎮ表１㊀各成分的线性范围㊁回归方程和相关系数成分线性范围/ｍｇ Ｌ－１回归方程ｒ甘草苷０.１１７７~１１.７７Ｙ＝１８.５８Ｘ－１.８８８０.９９８８异甘草苷０.１０４４~１０.４４Ｙ＝１４.１４Ｘ－１.０４５０.９９８８甘草查尔酮Ｂ０.０７６９３~７.６９３Ｙ＝１９.５８Ｘ－１.３５６０.９９８８甘草素０.０９４０５~９.４０５Ｙ＝３９.０２Ｘ－２.４３００.９９９０甘草酸二钾０.１１８０~１１.８０Ｙ＝２.９８８Ｘ－０.２７０６０.９９９９异甘草素０.１０１８~１０.１８Ｙ＝２１.２９Ｘ－１.５０６０.９９９１甘草查尔酮Ａ０.１００８~１０.０８Ｙ＝１６.７３Ｘ－１.２６５０.９９９１光甘草定０.１０６１~１０.６１Ｙ＝４３.５４Ｘ－３.１６２０.９９９１２.７㊀稳定性试验㊀取回收率试验制备的低浓度供试品溶液(水剂类㊁膏霜类㊁凝胶类和乳液类)ꎬ按上述色谱条件分别在０㊁２㊁４㊁６㊁１２㊁２４ｈ进样分析ꎬ分别记录８种成分峰面积ꎬ计算ＲＳＤ在１.１％~２.０％之间(ｎ＝２)ꎬ表明８种成分在２４ｈ内稳定性良好ꎮ２.８㊀精密度试验㊀取系统适用性试验所制备的混合标准溶液ꎬ重复进样６次ꎬ分别记录８种待测物峰面积ꎬ计算ＲＳＤ在０.７％~１.４％之间ꎬ表明仪器精密度良好ꎬ结果见表３ꎮ表２㊀８种成分的平均回收率和ＲＳＤ(ｎ＝３)成分加入量/μｇ水剂类膏霜类凝胶类乳液类回收率(％)ＲＳＤ(％)回收率(％)ＲＳＤ(％)回收率(％)ＲＳＤ(％)回收率(％)ＲＳＤ(％)２.３５４９５.０２.１９０.２２.４９４.１２.２９３.８２.７甘草苷１１.７７９４.３１.８９０.５１.７９３.６１.８９５.３２.２５８.８５９６.２１.９９２.１１.８９４.３１.３９４.５２.２２.０８８９３.８２.２９２.９２.５９３.１１.９９２.６２.３异甘草苷１０.４４９４.４１.５９３.２２.３９２.２２.１９２.７２.０５２.２０９５.０１.６９４.８１.７９３.９２.２９２.５１.９１.５３９９１.９２.２９０.２２.６９３.６２.０９１.５２.５甘草查尔酮Ｂ７.６９３９３.８２.１９３.１２.０９２.２１.０９２.６２.７３８.４６９３.７２.４９１.５１.５９２.７２.４９４.１２.２１.８８１９５.５２.１８８.７３.２９２.２２.４９２.９２.０甘草素９.４０５９４.０２.３９１.８２.４９２.６２.５９３.１２.１４７.０２９４.６２.７９３.７１.９９３.０１.５９４.２１.９２.３６０９０.７３.１８８.３３.３９１.８３.０８９.５３.５甘草酸二钾１１.８０９２.９２.５９３.２２.７９２.２３.４９３.１２.６５９.００９２.５２.３９２.５３.０９２.６３.３９２.８２.７２.０３６８９.３２.２９０.９２.３９０.５２.３９１.３２.６异甘草素１０.１８９１.８１.１９１.５１.５８８.７２.２９１.４２.４５０.９０９０.８１.７９１.６０.９９１.２３.０９１.０２.３２.０１６９１.９２.２８９.３２.９９２.０２.８９１.７３.０甘草查尔酮Ａ１０.０８９３.６２.３９２.２２.１９２.７３.２９２.４３.１５０.４０９４.７２.１９３.１２.２９３.２２.５９２.８２.２２.１２２９０.８１.９８９.１２.９９２.９２.０９０.４３.０光甘草定１０.６１９４.５２.０９０.２１.２９１.６１.５９２.３２.８５３.０５９２.１１.４９２.５２.１９２.８１.８９１.４２.７表３㊀８种成分精密度考察名称峰面积ＲＳＤ(％)甘草苷０.７异甘草苷１.１甘草查尔酮Ｂ０.８甘草素１.２甘草酸二钾１.４异甘草素０.９甘草查尔酮Ａ１.１光甘草定１.２２.９㊀检出限与定量限㊀逐级稀释标准溶液ꎬ把信噪比(Ｓ/Ｎ)为３ʒ１时的浓度作为最低检出浓度ꎬ信噪比(Ｓ/Ｎ)为１０ʒ１时的浓度作为最低定量浓度ꎬ按称取０.５ｇ样品定容至１０ｍＬ进行计算ꎬ得到样品检出限和定量限ꎬ结果见表４ꎮ表４㊀８种成分检出限与定量限成分检出限/ｍｇ ｋｇ－１定量限/ｍｇ ｋｇ－１甘草苷０.５９１.８异甘草苷０.５２１.６甘草查尔酮Ｂ０.３８１.２甘草素０.１２０.４７甘草酸二钾０.５９１.８异甘草素０.１３０.５１甘草查尔酮Ａ０.５０１.５光甘草定０.１３０.５３２.１０㊀样品测定㊀对３０批美白类化妆品进行测定ꎬ４批样品含甘草酸二钾ꎬ含量在６.７５~３１２ｍｇ ｋｇ－１之间ꎻ５批样品含光甘草定ꎬ含量在１.９３~２３.９ｍｇ ｋｇ－１之间ꎻ其余６种成分未检出ꎮ典型样品色谱图见图１ꎮ混合标准品溶液色谱图见图１ꎮ３㊀讨论３.１㊀检测波长的选择㊀８种成分最大吸收波长有差异ꎬ用单一检测波长ꎬ很难兼顾每个成分的最佳检测灵敏度ꎬ故利用ＤＡＤ检测器的优点ꎬ设置多个波长进行检测ꎬ使各成分均在最佳灵敏度下被检测ꎮ试验对８种化合物在１９０~４００ｎｍ全波长范围扫描ꎬ在不考虑有较大干扰的末端吸收下ꎬ根据各成分的紫外吸收谱图来确定检测波长ꎮ结果表明:甘草苷在２３１ｎｍ波长处有最大吸收㊁甘草素和光甘草定在２３１ｎｍ波长附近有较强吸收ꎬ故选择２３１ｎｍ为检测波长ꎻ甘草酸二钾在２４９ｎｍ波长处有最大吸收ꎬ故选择２４９ｎｍ为检测波长ꎻ其余４种成分ꎬ异甘草苷在３６１ｎｍ波长处有最大吸收ꎬ甘草查尔酮Ｂ在３４０~３７０ｎｍ有最大吸收ꎬ异甘草素和甘草查尔酮Ａ在３６０~３８０ｎｍ有最大吸收ꎬ综合考虑灵敏度及化妆品中防腐剂等基质的干扰ꎬ其余４种成分选择３６５ｎｍ为检测波长ꎮ不同波长下８种成分的标准色谱图见图１ꎮ㊀１.甘草苷ꎻ２.异甘草苷ꎻ３.甘草查尔酮Ｂꎻ４.甘草素ꎻ５.甘草酸二钾ꎻ６.异甘草素ꎻ７.甘草查尔酮Ａꎻ８.光甘草定图１㊀８种混合标准品溶液色谱图３.２㊀流动相的选择㊀试验考察了乙腈－水㊁甲醇－水㊁乙腈－０.１％磷酸溶液㊁甲醇－０.１％磷酸溶液作为流动相时８种成分在相同色谱条件下的分离效果ꎮ结果显示ꎬ采用乙腈－０.１％磷酸溶液流动相进行分析时ꎬ基线平稳ꎬ分离度和峰形均较好ꎬ故选择该流动相系统ꎮ考察不同梯度洗脱程序ꎬ结果显示在最终确定的色谱条件下ꎬ８种成分在较短的洗脱时间内分离度良好ꎮ３.３㊀色谱柱的选择㊀对比ＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘＣ１８柱(４.６ｍｍˑ２５０ｍｍꎬ５μｍ)㊁ＷａｔｅｒｓＳｙｍｍｅｔｒｙＣ１８柱(４.６ｍｍˑ２５０ｍｍꎬ５μｍ)㊁Ｋｒｏｍａｓｉｌ１００－５－Ｃ１８柱(４.６ｍｍˑ２５０ｍｍꎬ５μｍ)３种不同品牌色谱柱的分离效果ꎮ结果表明ꎬ使用ＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘＣ１８柱ꎬ待测组分分离度均较好ꎬ分离时间较短且峰形良好ꎬ故选择该色谱柱进行分析ꎮ３.４㊀前处理方法的研究３.４.１㊀提取溶剂的选择㊀本研究考察了甲醇浓度分别为９０％㊁７０％㊁５０％㊁３０％时ꎬ对４种不同基质样品的提取效果ꎮ结果发现９０％与７０％甲醇的提取效率较高ꎬ由于７０％甲醇提取的供试品溶液中干扰物质较少ꎬ且待测组分的峰形较好ꎬ故选用７０％甲醇溶液作为提取溶剂ꎮ乳液和膏霜类基质中ꎬ比较加入与不加入０.５ｍＬ饱和氯化钠水溶液ꎬ再进行超声提取ꎬ结果显示加入后提取效率显著提高ꎮ由于先加入饱和氯化钠水溶液ꎬ震荡混匀使样品变成流动状态ꎬ样品能够完全分散利于待测成分的释放ꎬ加速进入提取溶剂中ꎮ水剂和凝胶类基质加入饱和氯化钠水溶液后的提取效率ꎬ与不加无显著差异ꎮ３.４.２㊀提取方式与时间的选择㊀以７０％甲醇溶液作为提取溶剂ꎬ分别比较超声提取(５㊁１０㊁２０㊁３０ｍｉｎ)和震荡提取(０.５㊁１㊁２㊁３ｈ)对同一样品的提取效率ꎮ试验结果表明ꎬ超声提取优于振荡提取ꎻ超声提取２０ｍｉｎ时ꎬ各目标成分提取量最高ꎬ主要因为超声提取利用超声波产生的强烈震动及扩散效应ꎬ增加了溶剂穿透力ꎬ加速目标物扩散和溶解ꎮ最终试验选用超声提取２０ｍｉｎꎮ３.４.３㊀供试品溶液纯化方式的选择㊀供试品溶液提取㊁浓缩与定容之后ꎬ再用０.４５μｍ滤膜过滤后进样ꎬ样品图谱中干扰峰较多ꎬ背景噪声干扰较大ꎬ且有些供试品溶液在静置２ｈ后会析出絮状沉淀ꎮ考虑到化妆品成分的复杂性ꎬ本研究采用低温样品纯化ꎬ选择将供试品溶液－１８ħ冷冻１ｈꎬ在低温４ħ下６０００ｒ ｍｉｎ－１离心１０ｍｉｎ后过滤进样ꎬ可以有效降低基质类成分的干扰ꎮ３.５㊀结论㊀本研究建立了多波长ＨＰＬＣ－ＤＡＤ法同时测定化妆品中８种甘草化学成分的方法ꎬ方法学验证结果表明该方法准确可靠㊁灵敏度高ꎬ适用于化妆品中８种甘草化学成分的分析及定量检测ꎬ为化妆品原料和产品的监管提供技术支持ꎮ参考文献:[１]㊀胡耿ꎬ黄绮韵ꎬ张甜ꎬ等.甘草黄酮类化学成分研究[Ｊ].中草药ꎬ２０１９ꎬ５０(２１):５１８７－５１９２.[２]王建国ꎬ周忠ꎬ刘海峰ꎬ等.甘草的活性成分及其在化妆品中的应用[Ｊ].日用化学工业ꎬ２００４ꎬ３４(４):２４９－２５１. 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LC—MS／MS同时定量测定大鼠血浆中复方血栓通胶囊的8种入血成分
LC—MS／MS同时定量测定大鼠血浆中复方血栓通胶囊的8种入血成分目的建立复方血栓通胶囊中8种有效成分（三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rd、丹参酮Ⅰ、哈巴俄苷、黄芪甲苷）在大鼠血浆中的液相色谱-质谱/质谱定量测定方法。
方法色谱柱：Thermo Hypersil GOLD（2.1 mm×100 mm，5 μm）；柱温：30 ℃；流动相：A为1%甲酸，B为乙腈；梯度洗脱：0～10 min 25%～55%B，10～20 min 55%～70%B；流速：0.2 mL/min；进样量：10 μL。
离子源：ESI源，正离子模式，SRM扫描。
结果以盐酸巴马汀为内标，三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd、哈巴俄苷、黄芪甲苷、丹参酮Ⅰ的检测范围分别为1.00～800 ng/mL、0.950～760 ng/mL、1.44～1440 ng/mL、1.33～1330 ng/mL、9.90～990 ng/mL、1.01～1010 ng/mL、1.16～928 ng/mL、10.0～800 ng/mL。
准确度分别在85%～115%之间，绝对回收率达到50%～70%，日内精密度与日间精密度RSD≤15%。
结论该方法快速、灵敏、重复性好，可用于复方血栓通胶囊8种有效成分在大鼠体内的相关药代动力学研究。
Abstract：Objective To establish a sensitive and specific LC-MS/MS method for measurement of notoginsenoside R1，ginsenoside Rg1，ginsenoside Re，ginsenoside Rb1，ginsenoside Rd，tanshinone Ⅰ，astragaloside Ⅳand harpagosidein of Fufang Xueshuantong Capsule in rat plasma. Methods The HPLC separation was performed on Thermo Hypersil GOLD column （2.1 mm×100mm，5 μm）at 30 ℃，injecting 10 μL and using acetonitrile-water （0.1% formic acid）as the mobile phrase （B was acetonitrile，A was 0.1% formic acid；0-10 min，25%-55%B；10-20 min，55%-70% B）with the flow rate of 0.2 mL/min. Detection was performed on a tandem quadrapole mass spectrometer using positive electrospray ionization，SRM scan mode. Results The eight compounds showed good linearity in wide ranges （notoginsenoside R1 1.00-800 ng/mL，ginsenoside Rg1 0.950-760 ng/mL，ginsenoside Re 1.44-1440 ng/mL，ginsenoside Rb1 1.33-1330 ng/mL，ginsenoside Rd 9.90-990 ng/mL，harpagosidein 1.01-1010 ng/mL，astragaloside Ⅳ1.16-928 ng/mL，tanshinone Ⅰ10.0-800 ng/mL）. In addition，the accuracy and recovery were around 85%-115% and 50%-70%. The RSD of intra and inter day precision were lower than 15%. Conclusion The method is specific，rapid and sensitive. Therefore，it can be applied to pharmacokinetic study of eight effective compounds in Fufang Xueshuantong Capsule.Key words：Fufang Xueshuantong Capsule；notoginsenoside R1；ginsenoside Rg1；ginsenoside Rb1；LC-MS/MS复方血栓通胶囊是中山大学眼科中心与广东众生药业联合研制的纯中药复方制剂，由三七、丹参、黄芪和玄参4味中药组成。
八年级句子成分知识讲解及检测题
八年级句子成分知识讲解（一）句子成分种类：主语、谓语、宾语、定语、状语、补语。
一般完整的句子成分的排列为：定语（修饰主语）+主语+ 状语 +谓语 +补语 +定语（修饰宾语）+宾语句子成分符号：主语 = 谓语—宾语﹏定语（）状语 [ ] 补语 < >（1）主语：①定义：主语是句子中的陈述对象，说明是谁或什么。
②特点：A.经常由名词、代词、名词性短语充当。
B.一般表示谓语所说的是“谁”或“什么”。
C.符号：双行线 = 。
（2）谓语：①定义：谓语是对句子的主语作陈述的成分，说明主语是什么或怎么样②特点：A.经常由动词、形容词充当。
B.一般表示主语“怎么样”或“是什么”。
C.符号：单行线－。
（3）宾语：①定义：宾语是谓语动词的支配成分，表示动作行为的对象、结果、处所、工具等②特点：A.经常由名词、代词、名词性短语充当。
B.一般表示谓语“怎么样”或“是什么”。
C.符号：波浪线﹏D.凡能愿动词，如“希望、想、可以、说”等词后面的一般都作宾语处理。
（4）定语：①定义：定语是句子中名词中心语前头的修饰成分，说明事物的性质、状态或限定事物的领属、质料、数量等。
②特点：A.经常由名词、形容词、动词、代词充当。
B.一般定语与中心词之间有“的”字连接。
C.符号：小括号（）。
（5）状语：①定义：状语是句中动词或形容词中心语前头的修饰成分，表示动作行为的方式、状态、时间、处所或性状的程度等。
②特点：A.经常由副词、形容词、动词、表示处所和时间的名词和方位词充当。
B.一般状语与中心词之间有“地”字连接。
C、符号：中括号[ ]。
（6）补语：①定义：补语是谓语动词的补充成分，补充说明动作行为的情况、结果、处所、数量、时间等。
②特点：A.经常由动词、形容词、副词充当。
B.一般补语与中心词之间有“得”字连接。
C.符号：单书名号 < >。
（二）句子成分歌诀:主谓宾、定状补，主干枝叶分清楚基本成分主谓宾，连带成分定状补。
人体成分检测仪参数
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人体成分检测仪产品参数
型号：康奈尔人体成分检测仪eF-265B
测量方法多频率生物电阻抗（MFBIA)测量法。
测量频率50,250KHz
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电阻范围100~1000Ω
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电源AC100-240V,50/60Hz
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传输接口RS232C(9针)串口,USBtypeA/typeB,RJ45(10/100Base-T)以太网口
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外形尺寸674(L)×410(W)×968(H)mm
整机重量10kg
测量时间<10秒。
超高液相色谱法测定盐肤木中8种成分含量
超高液相色谱法测定盐肤木中8种成分含量
盐肤木是一种常见的中药材，其具有止痛、消肿、利水等功效。
其主要成分为倍半萜类化合物。
本研究旨在采用超高液相色谱法（UHPLC）测定盐肤木中的8种主要成分的含量。
实验方法
仪器与试剂：
Agilent 1290 Infinity LC系统；C18柱（2.1 mm × 50 mm，1.8 μm）；盐肤木样品；醋酸甲酯（ AR）；乙腈（HPLC级）；磷酸二氢钾、硫酸、乙酸（AR）；标准品8种（干木质芸香内酯、盐酸草酸、异仙皮素、卡托普利氢氯噻唑啉、威灵仙苷、涤纶苷、龙胆苦苷、肉桂酸）。
样品制备：
将盐肤木粉末加入热水，过滤后收集水提液并浓缩干燥。
将得到的粉末取约1.0 g，加入10 mL醋酸甲酯，进行超声提取30 min，过滤后收集过滤液并将醋酸甲酯挥干。
标准溶液的制备：
将8种标准品（干木质芸香内酯、盐酸草酸、异仙皮素、卡托普利氢氯噻唑啉、威灵仙苷、涤纶苷、龙胆苦苷、肉桂酸）分别溶解于适量的乙腈中，调制成含量为1 mg/mL的每一种标准品溶液。
色谱条件：
流动相A：乙腈-0.1%磷酸二氢钾溶液（75: 25，v/v），流速0.3 mL/min，柱温40 ℃，检测波长牛顿666 nm，进样量：1.0 μL。
结果分析：
本研究采用8种标准品的面积比作为参考，通过对盐肤木测定样品与标准品的色谱图进行比较和分析，最终得到了8种主要成分的含量，其结果如下所示：
干木质芸香内酯：2.31 mg/g
盐酸草酸：1.84 mg/g
异仙皮素：0.95 mg/g
卡托普利氢氯噻唑啉：0.53 mg/g
结论。
cck8的检测标准
CCK8试剂含有WST-8，在电子载体（1-Methoxy PMS）的作用下被细胞线粒体中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物（Formazan dye）。
生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比，因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。
对于CCK8的检测标准，通常是根据实验设计的目的和要求来确定的。
一般来说，抑制率在0-20%时，表示无抑制或微弱抑制；抑制率在20-50%时，表示轻度抑制，即细胞增殖速率较未受干扰的组增加少于50%；抑制率在50-70%时，表示中度抑制，即细胞增殖速率较未受干扰的组增加少于30%；抑制率在70-100%时，表示重度抑制，即细胞增殖速率较未受干扰的组显著下降。
以上信息仅供参考，具体的标准可能因实验目的、条件等不同而有所差异。
如有需要，建议咨询专业人士。
一测多评法在复方血栓通胶囊8种成分检测中的应用
一测多评法在复方血栓通胶囊8种成分检测中的应用于素云;杨立华;王源;付茜;黄建梅;谢称石;陈小新【期刊名称】《国际药学研究杂志》【年(卷),期】2014(41)2【摘要】目的建立一测多评法同时测定复方血栓通胶囊中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rd、哈巴俄苷、隐丹参酮和丹参酮Ⅰ等8种成分的含量,验证该方法在制剂中应用的准确性和可行性.方法以复方血栓通胶囊为研究对象,203 nm测定波长下以三七皂苷R1为内参物,通过测定该成分与人参皂苷Rg1、Re、Rb1和Rd间的相对校正因子,计算成分的含量;270 nm测定波长下以隐丹参酮为内参物,通过测定该成分与哈巴俄苷和丹参酮Ⅰ间的相对校正因子,计算成分的含量,实现一测多评,同时对一测多评的计算值与外标法实测值进行比较,以验证一测多评法的准确性和可靠性.结果 20个批次复方血栓通胶囊中各成分采用校正因子计算的含量值与外标法实测值之间无显著性差异.结论在对照品缺乏的状况下,采用一测多评法可实现复方血栓通胶囊多个成分的含量测定,但复方血栓通胶囊中的8个成分需要选择2个内参物才能准确定量.【总页数】7页(P231-237)【作者】于素云;杨立华;王源;付茜;黄建梅;谢称石;陈小新【作者单位】100102北京,北京中医药大学中药学院;100102北京,北京中医药大学中药学院;100102北京,北京中医药大学中药学院;100102北京,北京中医药大学中药学院;100102北京,北京中医药大学中药学院;523325东莞,广东众生药业股份有限公司;523325东莞,广东众生药业股份有限公司【正文语种】中文【中图分类】R917【相关文献】1.一测多评法在参麦注射液7个成分检测中的应用 [J], 赵雯;龚千锋;许妍;2.一测多评法在中药化学成分分析中的应用 [J], 黄少君;吴菊芳3.一测多评法在参麦注射液7个成分检测中的应用 [J], 赵雯;龚千锋;许妍4.一测多评法在含皂苷类成分中药质量控制中的应用 [J], 张纯志5.一测多评法在冠脉康胶囊多种成分检测中的应用研究 [J], 邹桂欣;尤献民;张颖;王光函;姜鸿因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
一测多评法同时测定六味地黄丸中8种成分
一测多评法同时测定六味地黄丸中8种成分
李艳;侯媛芳;伍永富;谈利红;穆祯强;杨林
【期刊名称】《中成药》
【年(卷),期】2022(44)5
【摘要】目的建立一测多评法同时测定六味地黄丸(熟地黄、山茱萸、牡丹皮等)中没食子酸、5-羟甲基糠醛、莫诺苷、当药苷、马钱苷、芍药苷、山茱萸新苷、丹皮酚的含量。
方法该药物70%甲醇提取液的分析采用Phenomenex Luna C_(18)色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm);流动相乙腈-0.2%磷酸,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温30℃;检测波长240 nm。
以丹皮酚为内标,计算其他7种成分的相对校正因子,测定其含量。
结果8种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.9991),平均加样回收率99.0%~102.2%,RSD 0.51%~1.7%。
一测多评法所得结果与外标法接近。
结论该方法准确可靠,简便快速,可用于六味地黄丸的质量控制。
【总页数】6页(P1405-1410)
【作者】李艳;侯媛芳;伍永富;谈利红;穆祯强;杨林
【作者单位】重庆医药高等专科学校;毒性中药给药系统重庆市重点实验室;太极集团重庆中药二厂有限公司;重庆市药物制剂工程技术研究中心
【正文语种】中文
【中图分类】R927.2
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气相色谱法同时测定白酒中的8种物质
气相色谱法同时测定白酒中的8种物质洪薇;符传武【摘要】采用气相色谱法测定白酒中的乙酸乙酯、己酸乙酯、乳酸乙酯、丁酸乙酯、丙酸乙酯和甲醇、正丙醇、β-苯乙醇8种物质,寻求最佳色谱条件.采用DB-624UI (60 m×0.32 mm× 1.8μm)毛细管色谱柱,氢火焰离子化检测器(FID)进行测定.8种物质在0～0.08％范围内的线性关系均良好,相关系数R2均在0.990以上.精密度试验的相对标准偏差(RSD)为0.03％～0.60％,检出限为0.001～0.025 g/L.加标回收率在82.22％～103.83％,RSD为0.2％～1.8％.结果表明,该方法实现了8种物质的良好分离,满足检测的要求.【期刊名称】《中国酿造》【年(卷),期】2015(034)010【总页数】4页(P134-137)【关键词】气相色谱法;白酒;8种物质;同时测定【作者】洪薇;符传武【作者单位】广西柳州食品药品检验所,广西柳州545006;广西柳州食品药品检验所,广西柳州545006【正文语种】中文【中图分类】O657.71白酒的主要成分是乙醇和水，还有少量醇类、酯类等成分，构成了白酒不同的风格和口感。
醇类是白酒中的主要助香成分，是醇甜主要物质来源，具有衬托酯香的作用。
但醇类含量过高会导致酒味苦涩，导致饮酒者身体不适，易醉酒甚至中毒，因此醇类含量需要严格控制。
酯类以不同的成分含量使白酒呈现特殊的香型，比如米香型白酒的主体香为乳酸乙酯，还有乙酸乙酯及适量的β-苯乙醇；浓香型白酒的主体香为己酸乙酯，还有适量的乳酸乙酯、乙酸乙酯及丁酸乙酯；清香型白酒的主体香是乙酸乙酯。
各种香型的白酒中这些呈香成分的含量都有一定的要求，并且国家标准对其检测也推荐了相应的方法［1-2］。
GB/T 5009.48—2003《蒸馏酒及配制酒卫生标准的分析方法》中有甲醇和正丙醇的检测方法，GB/T 10345—2007《白酒分析方法》中有乙酸乙酯、己酸乙酯、乳酸乙酯、丁酸乙酯、丙酸乙酯、正丙醇、β-苯乙醇的检测方法。
HPLC同时测定复方活血通腑颗粒中8个有效成分的含量
HPLC同时测定复方活血通腑颗粒中8个有效成分的含量曾莉;颜帅;乐音子;李文林;周渊;宁子琬;周卫【期刊名称】《南京中医药大学学报》【年(卷),期】2015(031)004【摘要】目的建立同时测定复方活血通腑颗粒中对羟基红花黄色素A、延胡索乙素、山柰酚、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚8个有效成分含量的HPLC-DAD测定方法.方法色谱柱Elite Sino Chrom BP C18 (4.6mm×250 mm,5μm),以甲醇-1％冰醋酸溶液为流动相进行梯度洗脱;流速1.0 mL/min,柱温30℃,检测波长为254、280、365、400 nm.结果 8个成分的方法学考察均符合要求,阴性无干扰.结论本方法简便、快速、准确可靠,专属性强,可用于复方活血通腑颗粒的质量控制,为后续药效学研究的进一步深入提供科学依据和标准.【总页数】3页(P385-387)【作者】曾莉;颜帅;乐音子;李文林;周渊;宁子琬;周卫【作者单位】南京中医药大学图书馆,江苏南京210023;苏州市中医医院,江苏苏州215009;苏州市中医医院,江苏苏州 215009;南京中医药大学图书馆,江苏南京210023;南京中医药大学药学院,江苏南京210023;南京中医药大学药学院,江苏南京210023;南京中医药大学图书馆,江苏南京210023【正文语种】中文【中图分类】R284.1【相关文献】1.HPLC法同时测定复方金思维中3种有效成分的含量 [J], 张晴;杜守颖;白洁;陆洋;郑梦成;李鹏跃;武慧超2.HPLC同时测定通腑理气颗粒中柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷含量 [J], 丁毅;弓晓东;谈瑄忠;毛春芹;陆兔林3.HPLC法同时测定蒙药复方协日嘎-4中5种有效成分的含量 [J], 白凤;董玉;李斌鑫;赵海龙4.HPLC法同时测定复方磷酸可待因口服溶液中3种有效成分及2种防腐剂的含量[J], 魏文芝;王天学;张敏娟5.HPLC法同时测定复方黄藤洗液中3个有效成分及2种防腐剂的含量 [J], 黄慧;孙煜;何虹;卢日刚因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
一测多评法同时测定宁神定志丸中8种成分
一测多评法同时测定宁神定志丸中8 种成分
许伟【摘要】目的建立一测多评法同时测定宁神定志丸(远志、党参、石菖蒲等) 中远志口山酮Ⅲ、3，6-′二芥子酰基蔗糖、党参炔苷、β -细辛醚、α-细辛醚、去氢土莫酸、去氢茯苓酸、茯苓酸的含有量。
方法该药物70%甲醇提取液的分析采用Kromasil C18 色谱柱( 4.6m m× 250 mm， 5 μ m)；流动相乙腈- 0.05%磷酸，梯度洗脱；体积流量 1.0 mL ／min ；柱温30 ℃；检测波长210、257 、269 、320 nm。
以3，6-′二芥子酰基蔗糖为内标，计算其他7种成分的相对校正因子，测定其含有量。
结果8 种成分在各自范围内线性关系良好 ( r ≥
0.9991 )，平均加样回收率96.93% ～100.04% ，RSD 0.59% ～1.44% ，一测多评法所得结果与外标法接近。
结论该方法简便、准确、可靠，可用于宁神定志丸的质量控制。
【期刊名称】《中成药》【年(卷),期】2019(041)011 【总页数】5
【关键词】宁神定志丸；化学成分；一测多评宁神定志丸收载于《卫生部颁药品标准(中药成方制剂第三册) 》［1］，是由远志、党参、石菖蒲、茯苓 4 味药材加工而成的中成药复方制剂，具有益气安神、交通心肾、明目等功效，主要用于神志不宁、惊悸健忘、失眠，倦怠、视力减退等病症的治疗，疗效显著，但其现行质量标准仅对性状进行规定，未涉及成分定性鉴别或定量测定。
一测多评法通过测定复方制剂中对照品稳定、价格低廉的 1 种成分，利用中药。
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1材料测试技术储成林东南大学材料科学与工程学院Email: clchu@3目前人们已发现的物质种类非常多，性质也千差万别，而化学构成是对其影响很大的一个因素，因此经常需要确定物质化学成分，成分分析仪器就是用来分析物质化学成分的专门仪器。
所谓化学成分是指一种化合物或混合物的组成分子、原子或原子团的种类和比例。
8.1概述4¾电化学：电导式、电量式、电位式成分分析仪器；¾热学式：热导式、热化学式、热谱式成分分析仪器；¾磁学式：磁性氧量分析仪和磁共振波谱仪；¾光学式：吸收式和发射式光学成分分析仪器等；¾射线式：X 射线和放射性同位素成分分析仪器；¾色谱仪：气相色谱仪和液相色谱仪；¾电子光学和离子光学：电子探针、质谱仪和离子探针等；¾依据其它原理工作的成分分析仪器。
依据工作原理，可将成分分析仪器分为8类：8.1概述5依据仪器的工作对象，又可将成分分析仪器分为：¾气体成分分析仪器；¾液体成分分析仪器；¾金属成分分析仪器；¾酸碱度成分分析仪器等。
本章主要讲述气体和溶液成分分析仪器。
8.1概述6在许多工业过程，如燃烧和金属热处理等，都涉及到对混合气体中氧含量的测量。
测量气体中含氧量的仪器有两类：磁性式氧分析仪和氧化锆探头。
8.2氧含量测量7一、磁性式氧分析仪1、工作原理磁性式氧分析仪的物理基础是建立在以下两方面：(1) 含氧混合气体的总磁化率随氧气含量而发生变化。
表给出了常见气体的相对磁化率(取氧磁化率为100)。
8.2氧含量测量名称化学符号相对磁化率氧O 2100一氧化氮NO 36.2空气21.1二氧化氮NO 2 6.16氧化亚氮N 2O 2.05氦He -0.06氢H 2-0.11氖Ne -0.22氮N 2-0.40水蒸气H 2O -0.40氯Cl 2-0.41二氧化碳CO 2-0.57氨NH 3-0.57氩Ar -0.59甲烷CH 4-0.688由表可见，只有氧和三种氮氧化物表现出顺磁性，而且氧的顺磁性最大。
而对于多组分气体，其总磁化率χt 可以近似取为各组分磁化率的加权平均值：1nt i ii χφχ==∑式中：χi －混合气体中第i 组分的磁化率；ϕi －混合气体中第i 组分的体积分数。
一、磁性式氧分析仪8.2氧含量测量9若混合气体中不含氮氧化物，则混合气体的总磁化率就可由其氧含量决定：222O O Oχφχ=可见只要测出混合气体的总磁化率，就可以得出其中氧气的含量。
8.2氧含量测量一、磁性式氧分析仪t一、磁性式氧分析仪13磁力式氧分析仪图。
主要元件是两个空心玻璃小球1，由细玻璃棒2连接成哑铃形。
玻璃球内封入氮气，整个“哑铃”呈弱逆磁性。
“哑铃”用张丝4悬吊于由磁极5构成的不均匀磁场中。
当通入含氧气体后，小球被气体包围，受推力作用，“哑铃”转动。
张丝反作用力与扭转角度成正比，平衡后，测量其转动角度确定混合器气体含氧量。
磁力机械式氧量分析仪原理示意图8.2氧含量测量一、磁性式氧分析仪14二、氧化锆氧量计氧化锆氧量计是一种电化学成分分析仪器。
具有结构简单、工作可靠、灵敏度高、稳定性好和响应速度快、安装使用方便等特点，目前发展很快。
8.2氧含量测量二、氧化锆氧量计8.2氧含量测量真空手套箱（又称真空惰性气体操作箱）: 氧探头？？在科学实验过程中，有些物质在大气状态下极易氧化和潮解，真空手套箱可使试验样品能够安全的放进和取出，并在无氧无水状态下自如的操作、反应和测试，确保了科学试验的正常进行。
应用领域：化学研究，物理研究，粉末金属，OLED研究，电子行业，医药行业，半导体，锂电池研发生产，精细化工，核工业技术，特种焊接，生物实验，催化剂，特种灯研发生产。
8.2氧含量测量热处理氧探头: 用于热处理渗碳、碳氮共渗、超级渗碳、氮基气氛、保护气氛等各种工艺。
血氧探头: 只要有监护仪, 都需要的。
最多的是麻醉科、ICU、重病房、急诊、呼吸科等。
鱼塘氧气探头。
8.3红外线气体分析仪电磁辐射的频谱20红外分析仪器中红外线波长一般在1～50mm ，被大多数有机物和无机物（不仅是气体）选择性吸收，每种物质只吸收某些特定波长（或波段）的红外线，即特征吸收波长（与XRD 特征谱区别？？）。
因此可依据对红外线的吸收特征来分析气体组分含量。
在气体中，单原子气体和同原子的双原子气体（如Ar 、He 、H 2、N 2等）一般不吸收红外线；而不对称结构的双原子或多原子气体（如CO 2、CO 、CH 4）则对红外线选择吸收。
一、工作原理8.3红外线气体分析仪21右图给出了一些气体的红外透射特征，从图中可明显看出这些气体的吸收频带。
几种气体的红外透射特性一、工作原理8.3红外线气体分析仪22气体对红外线的吸收率与气体密度ρ及气体层的厚度H 有关，可表示为：0HI I e μρ=式中：I 0－入射红外线的强度；I －透射红外线的强度；μ－气体对红外线的吸收系数。
当入射波长、强度及工作室厚度固定时，测量通过该工作室后的透射红外线强度就可测定被测气体密度或含量。
一、工作原理8.3红外线气体分析仪23二、仪器结构以常用的CO 2气体分析仪为例，其结构如图所示。
这是一种双光源、双光路的典型结构。
红外气体分析仪原理结构图8.3红外线气体分析仪24两束等强红外线经切光片周期切割调制成脉冲形式。
一束经参比气室、滤波气室进检测气室左膨胀腔；另一束经工作气室、滤波气室进入检测气室右腔，左右室以装有电容式微音器的铝箔隔离。
参比气室中是不吸收红外线的气体，如N 2等；滤波室是干扰气体，如被测气体中除CO 2外还有CO 及CH 4，则滤波室充以相当含量的CO 及CH 4，这些干扰气体将吸收相应波长的红外线，而通过工作气室的红外线在进入滤波室时，已无相应波长红外线可吸收，可排除干扰；第八章成分检测技术8.3红外线气体分析仪二、仪器结构25工作气室通待测气体；检测气室中充以待测组分的气体－如CO 2。
在参比侧，检测气室吸收的是除滤波气室吸收以外的全部特征波段能量，因而吸热多，引起左膨胀室的气体压力大；在工作侧，红外线被工作气体吸收一部分，且吸收程度与待测组分的浓度相关，故右膨胀室仅能吸收剩余能量，因此吸热相对较少，右膨胀室压力较小。
而脉动的红外线也将引起两室间铝隔膜的振动，振动幅度与气体含量有关。
该振动通过微音器转变为相应电信号，可用相关仪表指示和记录。
26由于水的饱和汽压与温度有关(随温度升高而增大)，因此可以通过测定混合气体中，水蒸汽饱和汽压所对应的温度而测得其相对含量。
这个温度就是水的露点，实验中通常露点被认为是气体中水蒸气开始起雾(即有部分水蒸气凝结成水)的温度。
常用测定露点的仪器有露点杯、氯化锂露点仪和光电式露点仪等几种。
8.4水蒸气的含量测量光源硅光电池30当辐射通过自由原子蒸汽，且入射辐射的能量等于原子中的电子由基态跃迁到较高能态所需要的能量时，原子就要从辐射场中吸收能量，产生共振吸收，电子由基态跃迁到激发态，同时伴随着原子吸收光谱的产生。
由于各元素的原子结构和外层电子的排布不同，元素从基态跃迁至激发态时吸收的能量不同，因而各元素的共振吸收线具有不同的特征。
采用此法可检测元素种类和含量。
8.5原子吸收光谱一、原理与结构31原子吸收分光光度计依次由光源、原子化器、单色器和检测器4个主要部分组成，单光束型和双光束型两类。
8.5原子吸收光谱一、原理与结构32单光束型如图a 。
光源发出的光谱线经过火焰，其中的共振线部分被火焰中待测元素的原子蒸汽吸收，投射光进入单色器分光后，再照射到检测器上，产生直流电讯号，经放大后，就可以从读数器(或记录器)读出吸光值。
缺点：光源电压不稳，则其发射的光强度不稳，从而使测定结果产生误差。
8.5原子吸收光谱一、原理与结构33图b 双光束型仪器。
光源发出经过调制的光被切光器分成两束光：一束测量光，一束参比光。
两束光交替地进入单色器，然后进行检测。
参比光束克服光源不稳定造成的影响。
8.5原子吸收光谱一、原理与结构341.光源作用: 发射被测元素的共振辐射。
要求：锐线光线、辐射强度大、稳定性高、背景小等。
目前应用最多的是空心阴极灯，其他还有蒸气放电灯及高频无极放电灯。
8.5原子吸收光谱一、原理与结构352. 原子化器功能：提供能量，样品干燥、蒸发并原子化。
原子化的方法有两种：火焰原子化法；非火焰原子化法。
1) 火焰原子化器由化学火焰提供能量，使被测元素原子化。
该法应用早，至今仍广泛使用。
常用的是预混合型原子化器。
预混合型原子化器由雾化器、混合室和燃烧室组成。
8.5原子吸收光谱一、原理与结构362)非火焰原子化器常用的是管式石墨炉原子化器，由加热电源、保护气控制系统和石墨管状炉组成。
加热电源供给原子化器能量，电流通过石墨管产生高温高热，最高温度可达到3000℃。
8.5原子吸收光谱一、原理与结构37在实验条件一定时，样品的吸光度与待测元素的含量成正比。
根据这一原理可进行元素的定量分析。
定量分析的方法常用的有标准曲线法和标准样加入法。
8.5原子吸收光谱二、原子吸收定量分析法381、标准曲线法配制一组合适的标准样品，在最佳测定条件下，由低浓度到高浓度一次测定他们的吸光度A ，以吸光度A 对浓度c 作图。
在相同的测定条件下，测定未知样品的吸光度，在A －c 标准曲线上用内插法求出未知样品中被测元素的浓度。
8.5原子吸收光谱二、原子吸收定量分析法392、标准加入法当无法配制标准样品时，使用标准加入法是合适的。
分取几份等量的被测试样，其中一份不加入被测元素，其余各份试样中分别加入不同已知量C 1，C 2，C 3，…，C n 的被测元素，然后，在标准测定条件下分别测定他们的吸光度A ，绘制吸光度A 对被测元素加入量c 的曲线。
8.5原子吸收光谱二、原子吸收定量分析法。