液相流程
液相使用的流程
液相使用的流程1. 液相概述液相是指物质在液体介质中进行化学反应或分离的过程。
液相分析技术在化学、生物、环境等领域中广泛应用。
本文将介绍液相使用的一般流程,包括样品准备、色谱条件设定、样品进样、柱选、洗脱和检测等步骤。
2. 液相使用的流程液相使用的流程一般包括以下几个步骤:2.1 样品准备样品准备是液相分析的第一步,关乎到后续的实验结果。
合适的样品准备方法可以提高分析灵敏度和保证分析结果的准确性。
样品准备的具体步骤包括:•样品采集:根据实验要求,选择合适的采集方法采集样品。
例如,对于水样分析,可以通过水样采集器采集样品。
•样品预处理:根据分析需求,对样品进行必要的预处理,如溶解、稀释、过滤等。
2.2 色谱条件设定色谱条件的设定对于液相分析非常重要。
适当选择和设定色谱条件可以提高分离效果并减少干扰。
主要包括:•色谱柱选择:根据待分离的目标物性质和分析目的,选择合适的色谱柱。
•流动相选择:根据样品特性和分析要求,选择合适的流动相,并进行优化。
•色谱条件优化:通过调整温度、流速等参数,优化色谱条件,使得分析结果最佳化。
2.3 样品进样样品进样是液相分析的关键步骤之一。
正确的样品进样方式和进样量可以确保分析结果的准确性和重现性。
常用的样品进样方式包括:•自动进样器:利用自动进样器对样品进行定量进样。
•手持式注射器:通过手动操作,用适量的样品进行进样。
2.4 柱选柱选是液相分析中实现物质分离的重要步骤。
适当选择合适的柱型可以实现对目标物的有效分离。
柱选步骤包括:•移液:将样品进样后,将柱装入进样器,并进行柱的预冲洗。
•柱装载:将样品通过柱进行装载,使待分离的目标物质通过柱。
•洗脱:通过调整洗脱溶剂的组成和流速,实现对不同组分的分离。
2.5 洗脱洗脱是液相分析中将目标物与柱上其他物质从柱上洗出的步骤。
洗脱方法应根据目标物质性质和分析需求进行选择。
常见的洗脱方式包括:•梯度洗脱:利用两种或多种洗脱溶剂,在不同比例下进行洗脱,实现对混合物的分离。
高效液相色谱法操作步骤
高效液相色谱法操作步骤
高效液相色谱法的操作步骤如下:
1. 过滤流动相并根据需要选择不同的滤膜。
溶剂必须为色谱纯,且溶剂及样品必须过膜(0.45μm)。
超声脱气30分钟以上。
2. 用流动相冲洗金属过滤器,然后将过滤器浸入储液罐的流动相中。
有一段时间没用或者换了新的流动相,需要先冲洗泵和进样阀。
3. 将储液罐放置在一定的高度,以避免由于搬运和其他操作人员的移动而造成不必要的跌落。
4. 然后按以下顺序依次启动高效液相色谱仪:泵→检测器→高效液相色谱软件→设置软件参数,如分析时间、检测波长、流速等。
5. 启动泵,运行5分钟,主要是为了排除系统中的气泡,结束后关闭所有排气阀。
6. 然后按照预先计划的速度,以固定的速率,如1mL/min左右,运行流动相,走基线,直到基线平稳。
7. 基线平稳后,在软件中设置样品的运行参数,如流速和分析时间等。
分析时间会因样品、流速、柱长等因素变化。
8. 设计走样方法。
9. 在进样和进样后操作的过程中,需要及时调整和监控各项参数。
使用液相的流程
使用液相的流程液相介绍液相是一种常用的分离和纯化方法,广泛应用于化学、生物化学、药学等领域。
液相技术基于物质在不同溶剂中的相溶性和亲疏水性差异,通过调节溶剂配比和pH值,将目标物质从混合物中分离出来。
液相流程的基本原理液相流程的基本原理是通过不同物质在溶剂中的溶解度差异进行分离。
液相流程包括样品制备、装柱、洗脱等步骤。
1.样品制备:–准备样品:将待分离的混合物进行预处理,如固体样品需粉碎、溶液样品需要进行过滤等。
–溶解样品:将样品溶解于适当的溶剂中,以获得一个均匀的样品溶液。
2.装柱:–选择固定相:根据目标物质的性质和分离要求,选择合适的固定相填充柱子。
–预处理柱子:将柱子放入流动相中使其充分湿润,以消除柱中的空隙,保证分离效果。
–装柱:将样品溶液缓慢地注入柱子中,使其与固定相充分接触。
3.洗脱:–流动相的选择:根据固定相选择合适的流动相,通常使用不同极性和pH值的溶剂进行洗脱。
–洗脱柱子:将流动相缓慢地通过柱子,使目标物质从固定相上溶解并带走,达到分离的目的。
4.分析:–分离后的溶液可用于后续的分析或纯化,如色谱法、质谱法、核磁共振等。
液相流程的优势和应用液相流程具有以下优势:•分离效果好:液相流程可对复杂混合物进行精确分离和纯化,得到高纯度的目标物质。
•操作简便:液相流程相对于其他分离方法,操作简便、快速,适用于大规模操作和连续生产。
•高效率:液相流程通过优化固定相和流动相的选择,可实现高效分离,提高工作效率。
•广泛应用:液相流程在化学、生物化学、药学等领域广泛应用于物质分离、纯化和分析等工作。
液相流程的应用领域包括但不限于:•药物研发:用于药物分离纯化和制备。
•环境检测:用于水质、大气和土壤中污染物的分离和监测。
•食品检测:用于食品中有害物质的检测和分离。
•生物化学研究:用于分离和纯化生物大分子,如蛋白质、核酸等。
•化学分析:用于分离和鉴定化学样品中的成分。
液相流程的应用非常广泛,随着技术的不断改进和创新,液相分离和纯化方法在各个领域的应用也越来越多。
高效液相色谱仪的操作流程和注意事项
高效液相色谱仪的操作流程和注意事项引言:高效液相色谱仪(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)是一种重要的分析仪器,广泛应用于化学、生物、医药等领域。
掌握正确的操作流程和注意事项,对保证分析的准确性和结果的可靠性至关重要。
下面将详细介绍高效液相色谱仪的操作流程和注意事项。
一、仪器准备在开始操作高效液相色谱仪之前,需要进行一些准备工作。
首先,检查仪器是否正常工作,例如电源是否正常接通,各个模块是否连接牢固等。
其次,确保色谱柱处于良好的工作状态,即没有泄漏和堵塞等问题。
最后,根据需要,选择合适的检测器,并校准相应的参数。
二、样品准备和进样样品的准备是操作高效液相色谱仪的关键一步。
首先,根据样品的性质选择合适的溶剂体系,并将样品完全溶解。
其次,为了提高分析的准确性,通常需要对样品进行预处理,例如磷酸酯酶的样品需要经过脱磷酸处理。
最后,将样品装入进样瓶中,根据仪器的要求设定进样量。
三、流动相的选择和准备流动相是高效液相色谱仪中的关键因素之一。
在选择流动相时,需要考虑样品的性质以及分析的目的。
常见的流动相包括有机溶剂、水以及它们的混合溶液。
在选择后,需要准备流动相,并进行除气处理以去除气泡。
此外,还要注意流动相的质量,例如pH值、浓度等。
四、色谱条件的设置色谱条件是操作高效液相色谱仪的关键之一。
根据分析的目的和样品的性质,需要设置合适的参数,例如流速、温度、梯度等。
在设置前,需要根据样品性质选择合适的色谱柱,并设定相应的温度以优化分离效果。
此外,还需要根据检测器的要求设定相应的参数。
五、数据采集和结果分析在操作高效液相色谱仪时,需要进行数据采集和结果分析。
首先,确保数据采集系统正常工作,并根据仪器的要求进行设定。
其次,启动数据采集并进行监控,及时记录实验过程中的各项指标。
最后,对采集的数据进行处理和分析,例如峰面积的计算、峰形的分析等。
注意事项:1. 严格按照操作流程进行操作,避免任意更改设置。
液相色谱仪基本操作流程
液相色谱仪基本操作流程本高效液相色谱仪由液相色谱仪和Chromstation色谱工作站组成。
液相色谱仪组件包括SPD-10A检测器、LC-9A输液泵、六通阀进样器和色谱柱。
一、操作流程:流动相;色谱柱;对照品溶液;样品溶液,1、流动相:所需溶剂均为色谱纯;用小于0.45μm滤膜过滤后;再超声脱气20min 后备用;冲洗色谱柱的流动性:10%甲醇或乙腈水溶液,按照流动相处理方法处理备用;2、色谱柱:按照质量标准要求准备所需的色谱柱;3、对照品溶液:按照质量标准要求配置对照品溶液(如不稳定溶液需临时配置);4、样品溶液:按照质量标准要求配置,用小于0.45μm滤膜过滤后备用(如不稳定溶液需临时配置);二、仪器准备:接通电源,打开稳压电源(电压要求为110V),开启泵、检测器及色谱工作站,用10%甲醇或乙腈溶液冲洗色谱柱,约30min,再用样品测定流动相进行冲洗色谱柱,同时打开色谱工作站,待基线基本平衡时即可进样。
三、色谱工作站的操作:1打开色谱工作站,输入用户名为“Gate”,点击“OK”→“采集1”进入操作界面;2、按setup图标,出现设置采集参数对话框,根据需要设置不同采集参数;运行时间根据样品出峰时间来调整,其他参数保持为缺省值,保存方法;3、点击Run Single图标,出现以下对话框:在标有“数据文件名的”框中输入你需保存的文件名及路径;如果方法名一栏为空请不要输入方法名,系统将用当前方法进行数据采集;其他参数保持缺省值,点击“启动”;窗口下面的状态条会闪现“Waitting for Trigger”信息,直到由键盘输入“ENTER”;点击“Preview”键,观察基线情况,待基线平稳后,按下STOP图标。
四、方法参数设定:1、波长设定:检测器显示初始屏幕,在波长处于闪烁状态下,输入所需波长值,按 [Enter]键确认。
2、灵敏度设定:按[func]键,灵敏度设定处于闪烁状态,用数字输入所需灵敏度值,按[Enter]键确认。
液相的使用流程
液相的使用流程1. 液相简介液相是一种实验室常用的分析技术,通过溶液中化学物质的分离和测定,实现对样品的分析和鉴定。
液相相比于气相,具有分析速度快、灵敏度高、选择性强等优点,广泛应用于生物化学、环境监测、食品安全等领域。
2. 液相实验室准备在进行液相实验前,需要做好实验室准备工作,包括:•清洁试剂瓶和仪器设备,确保无杂质污染干净;•校正仪器参数,如pH计等;•准备好所需的溶剂、试剂、标准品等。
3. 样品处理液相实验的第一步是样品处理,包括样品的前处理、提取和净化。
具体步骤如下:1.样品前处理:根据不同的样品类型,选择合适的前处理方法,比如样品的研磨、过筛等;2.提取:将样品中的目标物提取出来,可以使用固相萃取、液液萃取等方法;3.净化:目标物提取后,可能还存在其他干扰物,需要进行净化处理,如柱层析等。
4. 试剂配置液相实验过程中需要使用各种试剂溶液,根据实验需要做好试剂配置工作,确保试剂浓度准确。
具体步骤如下:1.准备好所需试剂的原液;2.根据实验方案和需要浓度,按比例取用原液和去离子水进行稀释;3.使用电子天平或容量瓶等工具准确称量或取用试剂。
5. 仪器设备设置在进行液相分析之前,需要设置好仪器设备,确保仪器运行正常。
具体步骤如下:1.打开液相色谱仪或其他分析设备的电源,保证仪器处于正常工作状态;2.进行仪器的参数设置,如流速、柱温等;3.检查仪器前后连接管路和阀门是否紧密,确保没有漏气或泄漏现象。
6. 样品进样和分析样品处理和仪器设备设置完毕后,可以进行样品的进样和分析工作。
具体步骤如下:1.将经过前处理、提取和净化的样品按照实验方案要求定量进样;2.设置好进样器的参数,如进样体积、进样方式等;3.开始分析,记录实验过程中的数据和观察现象。
7. 数据处理和结果分析液相实验完成后,需要进行实验数据的处理和结果分析,以得出结论。
具体步骤如下:1.对实验数据进行整理和整合,消除干扰和误差;2.使用统计学方法对数据进行分析,如均值、方差、相关性等;3.根据实验结果做出结论。
简述高效液相色谱一般操作流程
简述高效液相色谱一般操作流程
高效液相色谱(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)是一种常用的分离和分析技术,广泛应用于化学、生物、医药等领域。
其一般操作流程如下:
1. 样品制备:将待分离的混合物或化合物溶解在适当的溶剂中,通常需要进行前处理,如过滤、离心、稀释等。
2. 色谱柱选择:根据样品的性质和分离要求选择合适的色谱柱,如反相色谱柱、离子交换色谱柱、凝胶过滤色谱柱等。
3. 流动相选择:根据色谱柱的性质和样品的特点选择合适的流动相,如水、有机溶剂、缓冲液等,通常需要进行优化。
4. 色谱条件设置:根据样品的性质和分离要求设置合适的色谱条件,如流速、温度、检测波长等。
5. 样品注入:将样品注入色谱柱,通常采用自动进样器或手动进样器。
6. 色谱分离:样品在色谱柱中进行分离,不同成分在色谱柱中的停留时间不同,从而实现分离。
7. 检测:通过检测器检测样品分离后的成分,如紫外检测器、荧光检测器、质谱检测器等。
8. 数据分析:对检测到的数据进行分析和处理,如峰面积计算、质量浓度计算等。
以上就是高效液相色谱的一般操作流程,不同的样品和分离要求可能需要进行不同的优化和调整。
液相冲洗流程
液相冲洗流程液相色谱是一种常用的分析化学技术,在实验室中广泛应用。
而液相冲洗流程则是确保液相色谱系统正常运行、获得准确可靠结果的重要环节。
液相冲洗的目的主要有两个方面。
其一,去除系统中可能残留的杂质和污染物,以防止它们对后续的分析产生干扰;其二,保持系统的良好性能和稳定性,延长仪器的使用寿命。
在进行液相冲洗之前,需要做好一系列的准备工作。
首先,要确保实验室环境整洁、通风良好,并具备稳定的电源和适宜的温度、湿度条件。
然后,检查液相色谱仪的各个部件是否正常,包括泵、进样器、色谱柱、检测器等。
同时,准备好所需的冲洗溶剂,通常为高纯度的有机溶剂和水,并确保其处于有效期内且无污染。
接下来,让我们详细了解一下液相冲洗的具体流程。
第一步是冲洗输液泵。
先将泵的流速设置在较低水平,然后依次用纯有机溶剂(如甲醇、乙腈)和去离子水冲洗。
冲洗时间一般为 15 30 分钟,以充分去除泵内部的残留物质。
在冲洗过程中,要注意观察泵的压力是否稳定,如果压力异常升高,可能表示有堵塞现象,需要及时排查和处理。
第二步是冲洗进样器。
进样器的冲洗通常采用与输液泵相同的溶剂顺序。
对于手动进样器,需要将进样针反复抽取和推出冲洗溶剂;对于自动进样器,则通过设置相应的程序来完成冲洗操作。
这一步的目的是去除进样器中可能残留的样品和杂质,避免交叉污染。
第三步是冲洗色谱柱。
对于新的色谱柱,在使用前需要先用低流速的有机溶剂进行活化,然后再逐渐升高流速冲洗一段时间。
对于已经使用过的色谱柱,如果需要更换流动相体系,则需要先用与原流动相兼容的溶剂进行过渡冲洗,再用新的流动相进行冲洗平衡。
在冲洗色谱柱时,要特别注意不能超过其最大耐压值,以免损坏柱子。
第四步是冲洗检测器。
不同类型的检测器冲洗方法可能会有所不同。
例如,紫外检测器可以用甲醇或乙腈冲洗流通池;示差折光检测器则需要用去离子水冲洗。
冲洗时间一般为 10 20 分钟,以确保检测器内部清洁。
在整个液相冲洗过程中,还需要注意一些事项。
液相色谱使用步骤流程图
液相色谱使用步骤流程图下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成,希望大家下载以后,能够帮助大家解决实际的问题。
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一、仪器准备。
1. 开启电源,检查仪器各部件是否正常工作。
液相色谱质谱联用仪操作流程
液相色谱质谱联用仪操作流程液相色谱质谱联用仪(Liquid Chromatography-Mass Spectrometry,LC-MS)是一种结合了液相色谱分离技术和质谱检测技术的分析仪器。
它具有高分离能力和高灵敏度的特点,被广泛应用于药物分析、环境监测、食品安全等领域。
下面将介绍液相色谱质谱联用仪的操作流程。
1. 样品准备a. 确定分析对象和样品类型,确定所需的前处理方法(例如提取、稀释、纯化等)。
b. 根据实际需要,适当调整分析方法的参数,如流速、柱温等。
c. 准备好所需要的仪器和耗材,包括注射器、采样瓶、进样器、柱子等。
2. 仪器准备a. 打开液相色谱质谱联用仪,确保其正常启动。
b. 根据分析需要选择合适的离子源和检测模式,例如正电离或负电离,电喷雾离子源或者大气压化学电离源。
c. 对仪器进行系统检漏和漂移校准,确保仪器的性能和稳定性。
3. 样品进样a. 将待分析样品按照预处理方法制备好,确保样品稳定性。
b. 使用自动进样器或手动进样器将样品注入进样口,控制进样量和进样速度。
c. 检查进样系统是否完好,防止样品污染或采样误差。
4. 柱温控制与分离a. 设置柱温,根据样品特性和分析方法选择合适的柱温。
b. 将预处理好的样品进入色谱柱中,进行样品分离。
c. 控制流速和梯度条件,以实现最佳的分离效果。
5. 质谱检测a. 确保离子源温度和电压稳定,以保证质谱的准确性和灵敏度。
b. 设置质谱仪器的扫描范围和扫描速度,根据分析需要选择合适的检测模式。
c. 监测检测信号,记录质谱图谱和峰图。
6. 数据分析与处理a. 使用专业的数据处理软件,导入质谱数据和色谱数据。
b. 对数据进行峰识别、定量分析和质谱解析。
c. 生成结果报告和数据图表,并进行数据的解释和评估。
7. 仪器维护与清洗a. 使用完毕后,关闭液相色谱质谱联用仪,进行仪器的常规维护。
b. 清洗进样口、柱子和离子源,以防止样品残留和交叉污染。
c. 对仪器进行定期的校准和保养,以保证仪器的稳定性和准确性。
液相实验使用流程
液相使用流程总介:液相色谱仪,就是将样品物质溶解后,通过流动相,在高压泵的作用下,通过固定相----色谱柱,将样品物质分离开,依次通过检测器,再输出到显示界面,得到色谱分析的结果。
1.实验开始前(1)首先拿到方案(可能方法开发或者日常检测拿到手的是方法)后,先要核对方案或方法是否有明显的错误,如配样方法有无和已知的存在出入等;(2)其次是看液相色谱方法:1)色谱柱:确认色谱柱型号,然后找到色谱柱,如果没找到该型号色谱柱,去液相外电脑室中,office001目录下D盘中,找到色谱柱的台账(具体文件夹目录忘记了我),在台账中查看是否有此色谱柱,如果没有或者台账显示有但实际未找到,向上级报告,及时购买等;如果找到该型号色谱柱,先观察包装盒上是否标识有损坏或者反接字样(由于色谱柱接装有制定的前后顺序,如提示反接就按照相反方向接装色谱柱),打开后先查看包装盒中的色谱柱使用记录,查看上一次使用时间距离现在有多久,如果能找到上一次使用的人员,就询问下此色谱柱是否有异常等;2)确认该色谱方法,是否需要控制样品温度,由于只有部分仪器装有样品室控温模块,如果检测样品在待测过程中,需要保持低温状态的,则需要协调仪器拿到拥有控温模块的仪器;3)确认该色谱方法,是否需要DAD检测器。
实验室目前的仪器只有两三台是拥有DAD检测器,其余均为VWD检测器。
所谓DAD检测器和VWD检测器之间的区别,简单理解就是DAD拥有所有紫外波长同时检测的功能,而VWD 每次只能检测一个波长,DAD通常是用来进行方法开发确定在紫外吸收波段中,待测物质在哪个紫外波长的吸收最大,就和理化做紫外检测全波段扫面一样,同时也可以用来确定结果色谱峰的纯度。
4)在确认色谱方法后,也要注意洗脱程序类别;洗脱程序有等度洗脱和梯度洗脱,等度洗脱指的是,整个色谱分析过程中,流动相按照初始比例和流速保持不变的洗脱程序;梯度洗脱程序指的是在分析过程中,流动相比例和(或)流速随着时间的改变发生变化的洗脱程序;(3)然后是看所需的标准品和样品,标准品需要去查看台账剩余量,和方法中所需要的量要核对,同时核对标准品是否过期,同时也要注意标准品的含量有多少(像我们验证,在称量时,如果标准品含量太低,会通过适当增加称样量的方法,来补偿含量偏低带来的有效成分损失)样品由于验证和方法开发、日常检测不一样,所以按照后两者的所需要求来处理和保存等。
液相色谱法的基本操作流程
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液相色谱流程及主要部件
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液相色谱流程及主要部件
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液相色谱(HPLC)是一种分离和分析化合物的技术,其流程主要包括以下步骤:1. 进样。
高效液相色谱仪的工作流程
高效液相色谱仪的工作流程
首先是样品制备。
样品制备是为了将需要分离的化合物从复杂的样品基质中提取出来或纯化处理。
这个步骤根据不同的需求和样品类型可以使用溶剂提取、柱层析、固相萃取等方法。
接下来是进样。
进样是将样品注入到色谱柱中的过程。
进样可以采用自动进样器或手动进样器进行。
自动进样器可以根据设定的参数实现自动给定样品体积,并确保样品的稳定进入分离柱。
然后是分离。
分离是HPLC的核心步骤,通过使用不同的色谱柱、流动相和色谱条件,实现需要分离的化合物的有效分离。
在分离过程中,样品溶液通过高压泵被推送到流动相中,流经色谱柱中充满填料的管柱,并根据化合物间相互作用的差异进行分离。
接下来是检测。
分离后的化合物通过检测器进行检测。
常见的检测器包括紫外-可见光检测器、荧光检测器、质谱检测器等。
这些检测器对不同化合物具有不同的响应,可以根据需要选择适合的检测器进行定量或定性分析。
最后是数据处理。
在检测到化合物信号后,数据会传送到数据处理系统进行信号处理和分析。
数据处理系统能输出化合物的峰面积、保留时间和峰形等信息,并进行定性和定量分析。
常用的数据处理软件可以进行峰的识别、分离和结果的统计等。
高相液相色谱仪操作流程
高相液相色谱仪操作流程
高相液相色谱仪的操作流程通常包括以下步骤:
1、准备流动相
将已经过滤并脱气的流动相注入储液罐。
2、冲洗金属过滤器
用流动相冲洗金属过滤器,然后将过滤器浸入储液罐的流动相中。
3、仪器启动
打开高效液相色谱仪的电源,依次启动泵、检测器和电脑软件,按预先计划的方法设置软件参数,如分析时间、检测波长、流速等。
4、泵启动
启动泵,运行5分钟,主要是为了排除系统中的气泡,结束后关闭所有排气阀。
5、基线稳定
按照预先设定的流速和温度,运行流动相,直到基线平稳。
6、样品准备
将固定体积的样品溶液注入进样阀。
7、样品分析
在软件中设置样品运行参数,启动注入命令,样品溶液随流动相进入色谱柱,通过软件监视各项读数,当检测器检测到样品所有峰值后,停止运行并设置新的进样。
8、分析结束
分析结束后,先关闭检测器,然后关闭泵,最后关闭软件。
9、仪器清洗
分析结束后,先关闭检测器,然后关闭泵,最后关闭软件,先关闭检测器,然后关闭泵,最后关闭软件,先关闭检测器,然后关闭泵,最后关闭软件,重要的事情说三遍,以清洗之前样品的残留物。
液相色谱仪的使用步骤
液相色谱仪的使用步骤
在使用液相色谱仪进行实验之前,需要先了解仪器的使用步骤,以
确保实验的准确性和可靠性。
下面是液相色谱仪的使用步骤:
操作准备:
1. 打开仪器电源,并等待系统初始化完成。
2. 开启冷却水和空气压缩机,确保设备处于正常工作状态。
3. 预先准备好操作所需的所有试剂和备件。
实验步骤:
1. 固定柱装置:在柱室中将固相柱和流量计等设备安装好。
2. 均质准备:将待测样品放进均质机中进行均质处理,以保证取样准确。
3. 取样进样:将适量的样品取出,放入进样器进行前处理,如注射器
进行溶解、过滤等。
4. 开始进样:将样品注入进样装置,通过进样手柄进行操作,确保进
样器内部已满。
5. 开始实验:打开色谱仪的软件系统,进行实验设置,设定所需参数,并开始实验。
6. 结果检测:实验结束后,将样品检测结果显示在屏幕上,并将实验
数据保存在计算机中供后续分析使用。
7. 洗涤冲洗:在实验结束后,将固相柱接上洗涤仪,进行冲洗操作,
确保固相柱的清洁和稳定性。
8. 关机操作:实验结束后,按照液相色谱仪的关闭流程进行关机操作。
注意事项:
1. 在进行操作前,需要先进行仪器的预热操作,以确保实验结果的准确性。
2. 实验室内应保持干燥、通风良好的环境。
3. 操作人员需要穿着实验服和手套,并佩戴护目镜等安全装备。
4. 在实验前,需仔细理解样品性质及分离条件,确定实验参数。
5. 在实验过程中,应注意观察仪器状态,及时处理异常情况,并记录实验数据和操作记录以备查验。
液相色谱法的操作流程
液相色谱法的操作流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成,希望大家下载以后,能够帮助大家解决实际的问题。
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液相操作流程
液相操作1.进实验室后,门不要关死,将靠窗的强力排风扇开启,此时窗户应该关闭,以便排出空气中的残留溶剂。
2.排气约15min后,关闭排气扇,稍微打开旁边的窗户,关上门,把门旁边的排气扇打开。
3.开启高压泵、柱温箱以及检测器(检测器可能需要开关两次)、电脑(密码:307),检查瓶中的溶剂是否充足,不够的补足至瓶颈处,实验过程中随时关注瓶中溶剂,不能少于1/3。
柱温箱的温度按照文献值设置,一般为28-32℃,最高不超过35℃。
4.如有必要,开启空调,室温置于26℃。
5.分别拧开两个高压泵上的“purge”阀,摁输液泵右上角的“local/remote”键将其切换至“local”模式,此时可通过控制面板操作高压泵,摁“mode”将其切换至“iso”等度洗脱模式,按各自操作面板上的“purge”键,冲洗3min。
按“stop”键关闭输液泵,拧紧“purge”阀,再摁“mode”将其切换至“gra”梯度洗脱模式;摁“local/remote”键将其切换至“remote”模式,此时可通过电脑远程操作高压输液泵。
6.紫外检测器自检通过后,摁面板右上角的“local/remote”键将其切换至“remote”模式,通过电脑远程操作紫外检测器。
在波长设置一栏输入参考文献波长(或通过测紫外吸收,填入最大吸收波长),点“set”;积分时间一般输入0.1s,点“set”。
其余不用设置,点左边的”start”,则出现色谱工作站界面。
7.在梯度程序下面选择一行,点修改,可以输入需要的流动相比例,以及流速。
一般正己烷:异丙醇=90:10,保存柱子,调整在其附近调整。
或者按照文献比例设置。
先进样外消旋体确定每一个组分的保留时间,再进样进行对比。
8.流动相要求:所有流动相必须经0.22um微孔滤膜过滤。
9.样品处理:用异丙醇溶解,经微孔滤膜过滤,再进行稀释后进样,尝试阶段应该进样稀释后的样品,防止浓度过大,在柱子上残留。
进样量一般控制在15-20ul。
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一、1200/化学工作站开机顺序(LAN卡联接)
1 打开计算机,进入Bootp;
2 打开主机各模块电源(不分先后),等待Bootp接收,显示七行数字后,再双击
INSTRUMENT 1 ONLINE 图标,进入化学工作站;
3 调出一个分析方法,检查各参数的设置;
4 旋开泵上的排气阀,将工作站中的泵流量设到5ml/min,溶剂A设到100%;
5 在工作站中打开泵,排出管线中的气体数分钟;
6 依此切换到B、C、D溶剂分别排气;
7 将工作站中的泵流量设到1ml/min,多元泵则再设定溶剂配比,如A=80%,B=20%;
8 关闭排气阀,检查柱前压力;
9 待柱前压力基本稳定后,打开检测器灯,观察基线情况;
二、数据采集方法编辑
1 由运行控制进入样品信息…设定操作者姓名,样品数据文件名等。
2 泵参数设定:(以二元泵为例)
1)在流量处输入流量,如1ml/min,在溶剂B处输入70.0,(A=100-B) ,也可插入一行时间列表,编辑梯度。
在最大压力极限处输入柱子的最大耐高压,以保护柱子。
2)单击确定进入下一画面。
3 柱温箱参数设定:
1)在柱温下面的方框内输入所需温度,并选中它,点击更多>>键,选中与左侧一致,使柱温箱的温度左右一致。
2)点击确定进入下一画面。
4 VWD检测器参数设定:
3)点击确定进入下一画面。
三、数据处理操作步骤
1 由主菜单上的视图进入数据分析,到数据处理界面;
2 由主菜单上的文件进入调用信号,调出要分析的数据文件色谱图;
3 由主菜单上的图形进入信号选项,调整谱图坐标:
4 由主菜单上的积分进入积分事件,设置、修改积分参数;
5 由主菜单上的报告进入设定报告,设置报告参数:
6 由主菜单上的报告进入打印报告,打印报告;
四、关机
1 关机前,用95%水冲洗柱子和系统0.5-1小时,流量0.5—1ml/min,再用100%有机溶剂冲0.5小时,然后关泵,(适于反相色谱柱)。
[正相色谱柱用适当的溶剂冲洗]
2 退出化学工作站,及其它窗口,关闭计算机(用shut down关)。
3 关掉Agilent 1200电源开关。
五、保养维护
1 氘灯是易耗品,应最后开灯,不分析样品即关灯;
2 开机时,打开排气阀,100%水,泵流量5ml/min,若此时显示压力>10bar,则应更换排气阀内玻璃料。
3流动相使用前必须过滤,不要使用多日存放的蒸馏水(易长菌)。
4流动相使用前必须进行脱气处理,可用超声波振荡10- 15min。
5配制90%水+10%异丙醇,以每分2—3滴的速度虹吸排出,进行seal-wash,溶剂不能干涸。
6当使用缓冲溶液时,要用水冲洗手动进样器进样口,同时搬动进样阀数次,每次数毫升。