蜡状芽孢杆菌产聚羟基烷酸的提取与鉴定
蜡样芽孢杆菌检测国标
蜡样芽孢杆菌检测国标蜡样芽孢杆菌是一种常见的致病微生物，它会引起食物中毒的发生。
针对蜡样芽孢杆菌的检测方法，我国制定了相关国家标准，本文将从以下三个方面进行介绍。
一、蜡样芽孢杆菌简介
蜡样芽孢杆菌又称为蜡样芽孢菌（Bacillus cereus），是一种革兰氏阳性菌。
其孢子分布广泛，可以在空气、土壤、水、食品等各种环境中存活，甚至在高温加工食品中也可以存活。
蜡样芽孢杆菌是一种致病微生物，能够引起急性食物中毒，这是因为它产生的毒素能够影响肠胃道，引起呕吐、腹泻等症状。
二、蜡样芽孢杆菌检测国标
为了保障人们的食品安全，我国对食品中的蜡样芽孢杆菌进行了规范化的检测方法，主要是通过标准的培养及鉴定步骤进行。
1.样品采集：首先需要确定样品的种类，其次选择适当的采集方法，例如在市场上购买的食品需要在废弃部位进行采集，以保障采样的准确性。
2.样品处理：将采集到的食品样品进行前处理，包括样品的清洁去除外部污染等步骤。
3.菌液制备：将采样到的食品样品用合适的培养基进行培养，培养出的菌落进行鉴定，得到蜡样芽孢杆菌后进行菌液制备。
4.检测方法：采用PCR法、生物分子方法、蛋白质检测法等方式对菌液进行检测，以确认菌液中是否有蜡样芽孢杆菌存在。
5.结果判定：判定样品中是否存在蜡样芽孢杆菌，并进行定性和定量分析。
三、总结
蜡样芽孢杆菌检测国标对食品安全有着重要的意义，它通过科学、规范的检测方法保障了人们的食品安全。
在实际操作中，应加强样品采集及前处理，保证样品的准确性。
同时，为了提高检测的灵敏度和准确性，应选择合适的检测方法。
最后，需要将检测结果进行有效记录，以便后续参考。
产聚羟基烷酸的菌株分离及初步鉴定
７ ２ ⑤０ ０ １ 的溶菌 酶 培养基 ： 肉膏蛋 白胨培 ． ； ． ０ 牛 养基 ９ ９ｍＬ中加入 ｌｍＩ 已过滤 灭菌 的溶 菌酶 母
液 （ ． ０ １ｇ溶 菌酶溶 于 １ ０ｍＬ水 ） ⑥ 卯黄 琼脂 培 ０ ；
养基 （ 有修 改 ） ：先 配 制 基 础 培 养 基 ： 肉膏 ０ ５ 牛 ． ｇ 蛋 白胨 １ ５ｇ Ｎａ １ ． ， １ ０ｍＩ 琼 脂 １ ５ ． ． ， Ｃ ５ｇ 水 ０ ０ ， ．
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第 ３ ０卷第 ５期
２０ ０ ７年 ｌ ０月 Ｊ ．
Ｖｏｌ３０。 ．５ Ｉ ＮＯ
Ｏｃ ．２ Ｏ ｔ ０ ７
产 聚 羟基 烷 酸 的菌株 分 离及 初 步鉴 定
李 凌凌 ， 吕早 生 ， 慧 莉 ， 沈 张 博 ， 张 敏
（ 汉 科 技 大 学 化 学 工 程 与 技 术学 院 ， 北 武 汉 ， ３ ０ １ 武 湖 ４０８ ）
培 养 基 ： ０ １ 硝 酸 钾 的 牛 肉 膏 蛋 白胨 培 养 基 ； 含 ．
酸的生 产和利 用 。而 宋水 山等 构 建的重 组大 肠
杆 菌能 以葡萄 糖 为惟一 碳 源 合 成 聚 ４羟基 丁酸 ， 一 大 大降低 了生 产成本 。 本研 究 旨在从石 油 长期 污染 （ 烃类含 量较 高 ） 的土 壤 中筛选 出 可 合成 Ｐ ＨＡ 的菌 株 ， 下 一 步 为
关键词 ： 菌种 鉴 定 ； 聚羟 基 烷 酸 ； 生理 生化 特 征
中 图 分 类 号 ： ３３ ｌ Ｑ９ ３
文 献标 志 码 ： Ａ
文 章 编 号 ： ６ ２３ ９ （ ０ ７ ０ — ５ ２０ ｌ ７—０ ０ ２０ ）５００ —４
聚 羟 基 烷 酸 （ 。ｙ ｙ ｒ ｘ ａｋ ｎ ａｅ 简 称 Ｐ ｌｈ ｄｏ ｙ ｌａ 。 ｔ ，
一株高产PHB蜡状芽孢杆菌的分离筛选与鉴定
． １材 料 聚 Ｂ 一羟 基 丁 酸 酯 （ ｐ ｏ ｌ ｙ ｈ ｙ ｄ ｒ ｏ ｘ ｙ ｂ ｕ ｔ ｙ ｒ ａ ｔ ｅ ， １
． １ ． １土样 取 自黄瓜 地 、 玉米 地 、 西红柿 地 的土 Ｐ Ｈ Ｂ ） ） 是一 种 聚 酯 类 化 合 物 ， 它是 微 生 物 在 营 １
行初 筛 ， 从土 壤 中分 离 筛 选 出 能 够 生 产 和 积 累 ９ ０ ５ ０ ＭＢ Ｅ隔水式 恒 温 培养 箱 苏 州 江 东 精 密 仪 Ｐ Ｈ Ｂ的菌株 ， 为今 后菌 株 改造 及 Ｐ Ｈ Ｂ进一 步 提 器 有 限公 司 ； Ｓ Ｗ —Ｃ Ｊ —Ｉ Ｆ Ｄ超 净工 作 台 苏 州安
邓加 聪 ， 徐 慧诠 ， 詹 兴代 ， 苏泉 培
（ 福建师范大学福清分校海洋与生化工程 学院 ， 福建福 清 ３ ５ ０ ３ ０ ０ ）
摘
要： 通过尼 罗蓝平板 筛选、 苏丹黑染 色法及摇瓶 复 筛， 从 土壤 中分 离筛选 到一株 高产 Ｐ Ｈ Ｂ的茵株
Ｆ Ｑ Ｂ ６． 经 形 态观 察 、 生理生化 实验及 １ ６ Ｓ ｒ Ｄ Ｎ Ａ遗传 分析 ， 鉴 定该 茵株 为蜡 状 芽孢杆 茵（ Ｂ ａ ｃ ｉ ｌ ｌ ｕ ｓ ｃ ｅ Ｙ ｅ ｕ ｓ ） 。 进 一 步 研 究 菌株 的 生 长 规律 ， 发 现 茵株 的 延 迟 期 为 ０—３ ６ ｈ ， 对数 生 长 期 为 ３ ６ ｈ一６ ０ ｈ ， 稳定期 为 ６ ０ ｈ一 ９ ６ ｈ ，
７． ０。
广泛应用的一个主要瓶颈 ， 所 以选育利用低廉
化生 产 和应 用 的关 键 问题 。本 文 采 用尼 罗 蓝 平
． １ ． ３主要 仪器 与试 剂 原材料、 高产 Ｐ Ｈ Ｂ的优 良菌株 是加 快 Ｐ ＨＢ工业 １
变质鸡蛋中蜡样芽孢杆菌的分离与鉴定
鸡蛋 在保 存 １ 后 出现 变质 ， 致 大量 鸡 蛋被 处 ４ｄ之 导 理 。变 质特 征 为 ： 蛋 煮 熟 后 ， 白呈 褐 色 ， 鸡 蛋 蛋黄 颜 色变 浅 ， 蛋黄 切 面 整齐 不碎 裂 。食 用 时 蛋 黄 和蛋 清 发粘 ， 称“ 俗 橡皮 蛋 ” 见 图 １ 。本 试 验 对 山东 聊 城 （ ） 送检 的 ４ Ｏ枚 “ 橡皮 蛋 ” 行 细 菌 的分 离 ， 中 ２ 进 其 ５枚 检测 出含 有 蜡 样 芽 孢 杆 菌 ， 出率 为 ６ ． ， 过 检 ２５ 经
×１ 。 Ｆ ｇ ｒ ｍ ｏ ａｅｙｖｅ ｆ ｏｎ ，ｗ ｈ ｕｄｐ ｙａｔｎｉｎｔ ｃｌ ｓ ｅｅ ｓｃ ｎａ ｎ ｔ ｎｉ ０ Ｃ Ｕ／ ．Ｆ ｏ ｆ ｄｓｆｔ ｉｗ ｏ ｉｔ ｅｓ ｏ ｌ ａ ｔ ｔ Ｂａ ｉ ｕ ｒｕ ｏ ｔｍｉａｉ ｏ ｐ ｅ ｏ ｏ ｌ ｃ ｏ ｎ
鸡蛋 是 大众喜 爱 的食 品 ， 鸡 蛋所 含 营养 丰 富 鲜
而全 面 ， 营养 学家 称之 为“ 完全 蛋 白质模 式 ” 被人 们 ， 誉 为“ 理想 的营养 库 ” 是人 类 最好 的营 养来 源之 一 。 ， 因此 ， 天保 证摄 取 新 鲜 鸡 蛋 成 为 我们 蛋 白质 供 应 每
生 理生 化 和 １ Ｓ ｒ ＮＡ 鉴定 ， ６ Ｄ 探讨 蛋 黄 中过 多 的 蜡
ｔ ｔ ｒｏ ａ ｅ ｇｇ ． ｈｅ ｄｅ ｅ ｉ ｒ ｔ ｄ ｅ ｓ Ｋｅ ｒ ｓ： ｅ ｅ ｉ ａ ｅ ｇ ；Ｂａｃ ｌｕｓｃ ｒ ｕｓ；ｉｏｌ ｔｏｎ ａ ｄ ｉ ｎｔｆｃ ｔｏ ｙ ｗｏ ｄ ｄ ｔ ｒｏｒ ｔ ｄ ｅ ｇｓ ｉｌ ｅ ｅ ｓ ａ ｉ ｎ ｄｅ ｉｉａ ｉ ｎ；ｂ ｃ ｅ ｉ ｌｃ ｌ ｙ ｃ ｕｎ ａ ｔ ｒａ ｏ ｏｎ ｏ ｔ Ｃｏ ｒ ｓ ｏ ｉ ｕ ｈ ｒ： Ｅ ｒ ｅ ｐ ｎｄ ｎｇ ａ ｔ ｏ Ｈ Ｃｈｅ ｇ ｎ
蜡样芽孢杆菌检测方法研究进展
多 重 ＰＣＲ（ｍＰＣＲ）、实 时荧 光 定 量 ＰＣＲ（Ｒｅａｌ—ｔｉｍｅ ＰＣＲ）、叠 氮 溴 化 丙 锭一 定 量 ＰＣＲ（ＰＭＡ－ｑＰＣＲ）、微 滴 数 字 ＰＣＲ
技 术 （ｄｄＰＣＲ）、环 介 导 等 温 扩 增 （ＬＡＭＰ）及 酶 联 免 疫 吸 附 测 定 （ＥＬＩｓＡ）。从 传 统 方 法 到 新 兴 技 术 ，涉 及 传 统 检 测
中 国 畜 牧 兽 医 ２０１８，４５（３）：６３５—６４２ Ｃｈｉｎａ Ａｎｉｍａｌ Ｈ ｕｓｂａｎｄｒｙ ＆ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｍ ｅｄｉｃｉｎｅ
蜡 样 芽 孢 杆 菌 检 测 方 法 研 究 进 展
黄 晶菁 。，罗 静 ，何 宏轩
（１．中 国 科 学 院 动 物 研 究 所 ，动 物 生 态 与 保 护 生 物 学 重 点 实 验 室 ，北 京 １００１０１； ２．中 国科 学 院大 学 生 命 科 学 学 院 ，北 京 １００１０１）
技 术 、分 子 生 物 学 检 测 和免 疫 学 检 测 技 术 ，作 者 主要 总 结 了各 方 法 的 原 理 、检 测 范 围 ，并 对 各 方 法 的 优 缺 点 进 行 了
比较 。 这些 检测 方 法 的 灵 敏 度 、精 确 度 、样 本 要 求 等 有 所 不 同 ，可 根 据 检 测 需 要 和 条 件 限 制 进 行 选 择 。 将 分 子 生 物
病 原 及 其 致 病 力 。 总 的来 说 ，蜡 样 芽 孢 杆 菌 对 人 畜 的健 康 安 全 均 构 成 了 威 胁 ，快 速 准 确 地 检 测 能 有 效 辅 助 治 疗 和
提 前 预 防 ，作 者 将 主 要 检 测 方 法 进 行 了 总结 ，希 望 能 有 助 于 全 面 准 确 地 评 估 蜡 样 芽 孢 杆 菌 的风 险 ，为 主 动 监 测 和 预
微生物制PHA(聚羟基烷酸酯制备)
提高微生物合成PHA能力，改
变PHA单体组分，消除解聚组 织
碳源
占成本的一半，影响产物的性能与产率
实验测量：使用多种有机酸利用工业废弃物，尤其是从废水中提取的活性污泥
2、利用食品加工废弃物，如乳清，同时也有利用食品 垃圾，榨油废弃物作为底物的想法
微生物聚羟基烷酸酯制 备技术进展
聚羟基烷酸酯
细胞内含物 可完全生物降解 石油基塑料的理想代替品 医药领域 减少白色污染 减少石油消耗 废物再利用 产量少 价格贵 机械性能 亲水性
合成方法
细菌合成法—原核微生物在
受到某种基本营养成分的供 给限制时,将过量碳源以碳 源和能源形式储存而,积累 量可占到细胞干重的 30%~80%。
效率最高，丁酸次之，乙酸丙酸利用滞后。也有利用植物油、糖浆、 乳清来生产的做法
细胞浓度和产物 PHAs 的含量都 相对较低，同时也存在着发酵周期 长、产物分离纯化难度相对大难点
发酵
发酵使得原料转化为易被吸收的有机酸，为生产提供良好环
境。
高密度发酵法：提高细胞密度、增加胞内产物含量、缩短发
酵周期可以有效地提高生产强度。（控制有机酸浓度不能过 高。）
转基因植物—将合成路径引
入植物 ,利用 CO2 为碳源 , 太阳能为能源合成 ,降低生 产成本 。大部分累积的 PHAs 含量都很低
化学合成法—成本高 基因合成法—难实现
菌种
光能与化能、自养与异养（65
个属300多种）
自养合成量低（10%以下）、
异养合成量高（可达80%）
获得新的菌种：野生菌种、基
丙酮法、蛋白酶+错流超滤法
食品中蜡样芽孢杆菌检测方法的分析及建立改进方法的研究
食品中蜡样芽孢杆菌检测方法的分析及建立改进方法的研究摘要蜡样芽孢杆菌是一种常见的食品中毒原因之一，对人类健康产生严重影响。
为了有效检测食品中的蜡样芽孢杆菌，本文首先对现有的检测方法进行了分析，并发现它们存在一定的局限性。
随后，通过实验的方法研究了一种新的蜡样芽孢杆菌检测方法，并对其进行了改进，以提高检测的准确性和灵敏度。
本研究为食品安全提供了一种可靠的蜡样芽孢杆菌检测方法。
关键词：蜡样芽孢杆菌；食品安全；检测方法；准确性；灵敏度1. 引言食品中的微生物污染是食品安全的重要问题之一，而蜡样芽孢杆菌是其中常见的致病菌之一。
蜡样芽孢杆菌感染会引起食物中毒症状，严重时可能导致肠道炎症、腹泻和脱水等严重问题。
因此，开发一种高效的蜡样芽孢杆菌检测方法对于食品安全至关重要。
2. 现有方法的分析目前，常用的蜡样芽孢杆菌检测方法主要包括传统的培养方法和分子生物学方法。
传统的培养方法需要进行预培养、落订、筛选等步骤，耗时且操作繁琐。
虽然分子生物学方法如PCR技术在蜡样芽孢杆菌检测中具有高度灵敏度和特异性，但其也存在一些问题，例如样本处理过程中的核酸提取，特异性引物的选择，以及结果的解读等。
3. 新方法的研究本研究采用了一种新的蜡样芽孢杆菌检测方法，并对其进行了改进。
改进的方法主要包括样本前处理、特异性引物的设计以及结果的快速解读等方面。
首先，在样本前处理中，使用了一种有效的细菌提取方法，将样本中的蜡样芽孢杆菌快速提取出来，避免了其他微生物的干扰。
其次，在引物的设计中，根据蜡样芽孢杆菌的特定基因序列，设计了一对高度特异性的引物，以提高检测的准确性。
最后，在结果解读方面，采用了一种快速的荧光定量PCR技术，通过检测荧光信号的强度，可以快速确认样本中蜡样芽孢杆菌的存在。
4. 结果与讨论通过对一系列不同食品样本的检测，发现本研究中建立的蜡样芽孢杆菌检测方法在准确性和灵敏度方面均有显著提高。
样本前处理方面，高效的提取方法可以从复杂的食品样本中快速提取蜡样芽孢杆菌。
牛奶中蜡样芽孢杆菌的分离和鉴定
牛奶中蜡样芽孢杆菌的分离和鉴定作者：孙大庆孙慧叶魏玉龙来源：《安徽农学通报》2017年第07期摘要：蜡样芽孢杆菌是乳制品中容易污染的一种致病菌。
为了鉴定市售牛奶中是否含有蜡样芽孢杆菌，该研究通过生化和分子生物学鉴定方法对牛奶中蜡样芽孢杆菌进行了分离和鉴定。
结果表明，市售牛乳中分离、鉴定了一株蜡样芽胞杆菌，这表明蜡样芽胞杆菌对牛奶产品具有较大的食品安全风险。
关键词：牛奶；蜡样芽孢杆菌；安全风险中图分类号 TS252.1 文献标识码 A 文章编号 1007-7731（2017）07-0039-02Abstract：Bacillus cereus is a pathogen that is easily contaminated in dairy products.In order to identify whether the commercially available milk contains Bacillus cereus，this study isolated and identified Bacillus cereus in milk by biochemical and molecular biology identification methods. The results show that a strain of Bacillus cereus was isolated and identified in the separation of the commercially available milk，indicating that Bacillus cereus has a greater safety risk for milk products.Key words：Milk；Bacillus cereus；Safety risk蜡样芽孢杆菌是一种好氧、产芽孢的革兰氏阳性杆菌，可产生致吐和致腹泻肠毒素，前者耐热，是引起食物中毒的主要成分[1]。
蜡样芽胞杆菌溶血性肠毒素的提取及诊断方法的建立
蜡样芽胞杆菌溶血性肠毒素的提取及诊断方法的建立蜡样芽胞杆菌是引起食物中毒的细菌之一〔1〕。
蜡样芽胞杆菌的溶血素具有肠毒素的性质〔2〕，提取其溶血素可作为实验室诊断蜡样芽胞杆菌食物中毒和分析食品中残留毒素的诊断试剂。
材料和方法蜡样芽胞杆菌溶血素的制备：试验用的菌株接种肠毒素产毒培养液，经37℃、16h静置培养后，振荡培养10h。
培养液基本按Beecher等〔3〕的方法提取成粗制溶血素。
进一步提纯则采用制备性SDS-PAGE的方法，切下含有3种溶血素成分的凝胶，利用蛋白质沉淀或冷冻干燥的方法浓缩后得到分析测定用的溶血素。
溶血素的测定1.用紫外吸收法测定蛋白质含量来确定溶血素的浓度；用SDS-PAGE方法测定其相对分子质量。
2.兔皮肤血管通透性因子(PF)的测定：在兔脱毛区的皮内注射0.1ml溶血素，24h后耳静脉注射1%伊文思蓝1ml，6h后观察水肿及蓝带反应。
3.兔小肠肠段结扎试验：术后20h，处死试验兔，取出肠管，吸出结扎肠段的积液，测出该肠段的长度，计量比值。
4.Vero细胞的毒性试验：Vero细胞单层，用含有溶血素(300μg)的细胞培养液作更换培养液，经36℃培养24h后，观察细胞形态。
5.溶血素抗体制备：溶血素加完全佐剂免疫家兔，得到溶血素抗体。
6.酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测溶血素抗体：采用溶血素3种成份或混合物分别作为抗原包被塑料板，作用后，再加入羊抗兔酶标记IgG，经底物显色反应，观察试验结果。
7.用溶血素抗体致敏SPA，在玻片上作协同凝集试验检测溶血素抗原。
8.将待测的溶血素滴在硝酸纤维膜固相载体上，与已知的溶血素抗体结合，然后加上酶标记的第二抗体，经底物显色反应检测溶血素抗原。
结果和讨论提纯的溶血素有3种成份，B、L1和L2(相对分子质量分别为35×103、36×103和45×103)，3种成份混合后在血琼脂上呈现特别的靶形溶血。
即在加样孔周围并不出现溶血，而在不溶血圈以外，出现一个溶血环，而单一成份仅有微弱的溶血现象，无靶形溶血环。
产聚羟基烷酸的菌株分离及初步鉴定
产聚羟基烷酸的菌株分离及初步鉴定
李凌凌;吕早生;沈慧莉;张博;张敏
【期刊名称】《武汉科技大学学报（自然科学版）》
【年(卷),期】2007(030)005
【摘要】为给今后构建产PHA的重组大肠杆菌提供PHA合成基因,从中国石化集团公司武汉石油化工厂的气浮池附近长期被石油污染的土壤中,经细菌的富集及分离纯化,筛选出两个产PHA的菌株.通过菌株的个体形态观察,发现这两株菌是可以在细胞中间产生不膨胀的椭圆形芽孢的革兰氏阳性杆菌,且相互成链,这与伯杰氏手册中对蜡状芽孢杆菌的描述相似,另外对这两株菌的培养特征、生理生化特征的研究,也表明这两株菌符合蜡状芽孢杆菌的特性,故初步鉴定这两株菌为蜡状芽孢杆菌.【总页数】4页(P502-505)
【作者】李凌凌;吕早生;沈慧莉;张博;张敏
【作者单位】武汉科技大学化学工程与技术学院,湖北,武汉,430081;武汉科技大学化学工程与技术学院,湖北,武汉,430081;武汉科技大学化学工程与技术学院,湖北,武汉,430081;武汉科技大学化学工程与技术学院,湖北,武汉,430081;武汉科技大学化学工程与技术学院,湖北,武汉,430081
【正文语种】中文
【中图分类】Q93-331
【相关文献】
1.一种快速筛选产聚羟基烷酸细菌方法的建立 [J], 孙燕飞;王翀;程模香;雷勇辉;熊杰
2.嗜麦芽寡养单胞菌发酵产聚羟基烷酸酯的研究 [J], 李雪云;付时雨;李辉;詹怀宇
3.蜡状芽孢杆菌产聚羟基烷酸的提取与鉴定 [J], 吕早生;张敏;李凌凌;李征
4.真氧产碱杆菌利用混合有机酸生物合成聚羟基烷酸酯 [J], 严群;堵国成;陈坚
5.真氧产碱杆菌利用短链有机酸合成聚羟基烷酸酯 [J], 严群;堵国成;陈坚
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食源抑菌性蜡样芽孢杆菌的筛选与生化鉴定
食源抑菌性蜡样芽孢杆菌的筛选与生化鉴定发表时间：2015-10-09T14:10:57.267Z 来源：《健康世界》2015年2期作者：张美英何珊蔡琳石继飞（通讯作者）[导读] 包头医学院医学技术学院内蒙古包头 014030 从食源中分离得到六株具有抑菌活性的蜡样芽孢杆菌，可进一步分子鉴定并研究其抑菌谱和抑菌物质的特性等。
包头医学院医学技术学院内蒙古包头 014030摘要：【目的】从食源中筛选具有抑菌活性的蜡样芽孢杆菌，为新抗菌肽的发现及其开发利用提供基础资料；【方法】先用甘露醇卵黄多粘菌素琼脂培养基（MYP）和蜡样芽孢杆菌杆菌显色培养基（HKM）相继初筛蜡样芽孢杆菌，再测定抑菌活性，之后对筛选菌株进行系统生化鉴定及生化分型；【结果】从食源中筛选出六株具有抑菌活性（对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌生长具有抑制作用）、革兰阳性芽孢杆菌，应用系统生化鉴定为蜡样芽孢杆菌，生化分型为11型。
【结论】从食源中分离得到六株具有抑菌活性的蜡样芽孢杆菌，可进一步分子鉴定并研究其抑菌谱和抑菌物质的特性等。
关键词：食源；抑菌活性；蜡样芽孢杆菌；分离；生化鉴定Abstract：【Objective】 screening of Bacillus cereus with antibacterial activity from food source，for new antimicrobial peptides found and its exploitation and utilization to provide basic information；【method】 first with mannitol yolk polymyxin agar（MYP）and Bacillus cereus Bacillus chromogenic medium（HKM）have been the beginning of screening of Bacillus cereus，determination of antibacterial activity，after the screening of strains for system of biochemical identification and biochemical typing；【results】 screened six strains with antimicrobial activity（has inhibitory effect on Escherichia coli、Staphylococcus aureus growth）from food source，gram positive bacillus，biochemical identification application system for Bacillus cereus，biochemical typing for type eleven.【Conclusion】 six strains of antagonistic activity of Bacillus cereus isolated from food borne，further molecular identification and study of its antibacterial spectrum and antibacterial properties of a material etc.. Keywords：food source antifungal activity Bacillus cereus isolation biochemical identification蜡样芽孢杆菌（Bacillus cereus，Bc）分布广泛，灰尘、污水、植物性食品和许多生熟食品中常见；是一种好氧性、但在厌氧情况下也可很好生长的革兰阳性芽孢杆菌[1]。
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ｔｒ ｔ ｙ ａ ｅ，ＰＨＢ）。
种子 培养基 ： 肉膏蛋 白胨 培养基 Ｌ 。 牛 ｇ ］
发酵 培 养 基 （ 正 的 Ｍ９培 养 基 ） Ｎ 。 ０ 修 ： ａ ＨＰ ・
７ Ｏ ． ８ ｇ， Ｈ２ Ｏ４ ０ ３ ｇ， Ｃ１０ ０ Ｈ２ １ ２ Ｋ Ｐ ． Ｎａ ． ５ ｇ，ＮＨ４ ｌ Ｃ
大， 其提 取 率 最 高 可达 ５ ． ％ ； 用红 外检 测 法 和 气 相 色谱 法 对 Ｐ １２ 采 ＨＡ 样 品 进 行 鉴 定 分 析 ， 果表 明 ， 中 均含 有 聚 羟 基 结 其
丁酸 。
关 键 词 ： 羟 基 烷 酸 ； 状 芽孢 杆 茵 ； 生物 合 成 聚 蜡 微
中图 分 类 号 ： ３３ １ Ｑ ９－３
肉膏蛋 白胨液体 培养 基 中 ， ３ ％培 养 ２ｄ 再 分 别取 于 ７ ，
１ｍＬ菌液接 种 于 １ ０ｍＬ已灭 菌 的液 体 发 酵 培 养基 ０
（ 已分别 添加 丁酸 、 酸 、 酸 、 酸 、 生 油 作 为辅 助 戊 辛 癸 花
碳源 ） ， ３ ℃培 养 ５ｄ 中 于 ７ 。 取摇瓶 培 养获得 的菌体 发 酵 液 ， ３０ ０ｒ・ｒｉ叫 １ ０ ａ ｎ 离心 １ ｉ， 上清 ， 馏 水洗 涤 菌体 ２次 ，Ｏ ５ｒ ｎ 弃 ａ 蒸 ８ ℃下 烘
文 献标 识 码 ： Ａ
文 章 编 号 ：６ ２ ５２ （Ｏ ８ Ｏ 一Ｏ ５ 一 Ｏ １ ７ — ４ ５ ２Ｏ ）８ Ｏ ２ ３
聚 羟基 烷 酸 （ ｏｙ ｙ ｒ ｘ ａ ａ ｏ ｔ ，Ｐ Ｐ ｌｈ ｄｏ ｙ ｌ ｎ ａｅ ＨＡ） 由 ｋ 是
生产 奠定 理论 基础 。
微 生物在 不平衡 生 长条 件 （ 源 过 量 ， 氮 源 、 、 、 碳 而 磷 镁 硫 等相对 缺乏 ） 下在 胞 内合 成 的 一类 碳 源 和能 量 贮 藏 物， 具有优 良的生 物 降解 性 及 生 物相 容 性Ｌ ］ 是 无 污 １ ，
干 至恒重 ， 重 。 称
作者 在 此 以蜡 状 芽 孢杆 菌 （ ａ ｉ ｕ ｄｄＳ Ｐ Ｂ ｃｌ ｓ ＴＵ ） Ｈ１ ｌ Ｃ＇
为菌种 ， 以不 同长 度 的脂肪 酸和油 脂作 为辅助底 物 ， 对 聚羟基 烷 酸的积 累情 况进 行 研 究 ， 为 聚 羟基 烷 酸 的 拟
基金 项 目 ： 北 省 科技 厅 自然 科研 基 金 项 目（０ ３ Ａ０ ６ ，湖 北省 教 育厅 大 学企 业合 作 基 金 项 目（ ０ ３ Ｃ ） 湖 ２ ０ ＡＢ ７ ） ２ ０ Ｂ ４
将 冻存 的蜡状芽 孢杆 菌 Ｐ 菌株 ， Ｈ１ 接种 于 牛 肉膏 蛋 白胨 固体平 板上 ， ３ ℃培养 ２ｄ 于 ７ 。
１ ３ ２ 摇 瓶 培养 。。 接种 上述 活化 的 Ｐ Ｈ１菌 株 于 ５ｍＬ 已 灭 菌 的 牛
ｐ ＨＡｓ如假 单胞 杆菌 以 甲醇 为底 物 、 ， 固氮 菌 和芽 孢 杆 菌则 以葡 萄糖 为底 物 ［ ］ ５ 。另 外 ， 些 微 生物 能 利 用 有
摘
要 ： 用 ｓ ｓＮａ ｌ 细 胞 破 壁 预 处 理和 氯仿 抽 提 法对 聚 羟 基 烷 酸 （ ＨＡ） 行提 取 ， 察 了蜡 状 芽 孢 杆 菌 以 丁 采 Ｄ ． ｃ０ Ｐ 进 考
酸 、 酸 、 酸 、 酸 、 生 油作 为辅 助 碳 源 时 生成 Ｐ 戊 辛 癸 花 ＨＡ． 情 况 。结 果表 明 ， 癸 酸 为 辅 助 碳 源 时 ， 取 出 的 Ｐ 的 以 提 ＨＡ 量 最
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ｅ ｓ ｒ ＆ Ｂｉｅ ｇｉｅ ｒ ｇ ｍｉｔｙ ｏ ｎ ｎ ｅｉ ｎ
蜡 状芽 孢 杆 菌产 聚 羟 基 烷 酸 的提 取 与鉴 定
吕早 生 ， 张 敏， 凌凌， 李 李 征 （ 汉科技 大 学化 学工程 与技 术 学院 ，湖 北 武汉 ４ ０ ８ ） 武 ３ ０ １
１ １ ｔ ｏｌ・Ｌ＿。Ｍ ｇ ．８ ｇ， ｏ ＳＯ４０． ２ ｍＬ， ｏ １ ｔ ｌ・Ｌ＿。Ｃａ ２ ｏ Ｃ１
１ Ｌ， 萄 糖 ０ ５ｇ 不 同长 度 的 脂 肪 酸 或 油 脂 ０ ５ Ｏ 葡 ． ， 。 ｍＬ， 加水补 至 １ ０ｍＬ ０ 。 １ ３ 培 养方 法 ． １ ３ １ 蜡状 芽孢杆 菌 的活化 ．。
合 成 聚羟基烷 酸 的微 生 物 分布 极 广 ， 括光 能 和 包 化能 自养 及异 氧菌 ， 目前研 究较 多 的有 产碱 杆菌属 、 假 单胞菌 属 、 甲基 营 养菌 、 固氮菌 属和红 螺菌属 等Ｌ 。这 ２ ］ 些 微生 物 能 分 别 利 用 不 同 的碳 源 合 成 不 同 种 类 的
染、 无毒 、 多用途 的热 塑 材料 ， 已成 为 微 生物 工 程 学研
究 的热点 。
１ 实 验
１ １ 菌 株 与 试 剂 ．
蜡状 芽孢 杆菌 Ｐ ， Ｈ１ 自行 筛选 鉴定Ｌ 。 ８ ］ 聚羟基 丁 酸标准 品 ， Ｌ Ｆ ＵＫＡ公 司 。
１ ２ 培 养基 ．
大多数 聚羟基 烷 酸 的单 体 由 ３羟基 脂 肪 酸组 成 ， 一 由于其 侧 链 长 度 和 组 成 不 同而 产 生 不 同 的 Ｐ ＨＡ 种 类 ； 生物 合成 的 Ｐ 微 ＨＡ有 均 聚物 、 混 物 和无 规共 共 聚物 ， 其性 能可 在 塑 料 和橡 胶 间 变化Ｈ 。在 聚 羟基 烷 ］ 酸 中 ， 具 代 表 性 的是 聚 羟 基 丁 酸 （ ｏｙ ｙ ｒ ｘ ｂ — 最 Ｐ ｌｈ ｄｏ ｙ ｕ