单核细胞增生李斯特氏菌检验技术

合集下载
  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
1mL
•小的圆形灰绿色菌落,周围有棕黑色水解圈,有些菌落有黑色凹陷
10mLLB2
TSA-YE
鼠李糖
TSA-YE
阳性
选择木糖阴性、鼠李糖阳性的纯培养物继续进行鉴定
革兰氏染色
单增李斯特氏菌和斯氏李斯特氏菌在刺种点周围产生狭小的透明溶血环;在靠近金黄色葡萄球菌的接种端溶血增强
革兰氏阳性短杆菌
动力试验
MR试验
一、单核增生李斯特氏菌概况
生物学特性
该菌对理化因素抵抗力较强,在土壤、粪便、青储饲料和食品中能长期存活;对碱和盐抵抗力强,60-70℃经5-20min可杀死,70%酒精5min、2.5%石炭酸、2.5%氢氧化钠、2.5%福尔马林20min 可杀死此菌;湿热灭菌(121℃,至少15min)和干热灭菌(160-170℃,至少1hr)可杀灭该菌,对紫外线和γ射线敏感;对青霉素、氨苄青霉素、氨基糖苷类、氯霉素均敏感。
食品中单核增生李斯特氏菌检验
食品微生物检验技术
李斯特氏菌属(Listeria )普遍存在于环境中,最新的分类学研究表明,其分为六个 种:单核增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes)、绵羊(伊氏)李斯特氏菌、 英诺克(无害)李斯特氏菌、斯氏李斯特氏菌、威氏李斯特氏菌、格氏李斯特氏菌在李斯特氏菌属只有两种致病菌:单核增生李斯特氏菌和伊氏李斯特氏菌可以引起老鼠和其他动物发病。但是,其中通常只有单核增生李斯特氏菌和人类的李斯特氏菌症(listeriosis)相关。因此,李斯特氏菌中最有检测意义是单核增生李斯特氏菌。
一、单核增生李斯特氏菌概况
李斯特氏菌属
革兰氏阳性,老龄培养物多转为革兰阴性;兼性厌氧,无芽孢、无荚膜;生长温度范围为2-42℃(也有报道在0℃能缓慢生长),pH范围pH4.4-pH9.6;LM的幼龄菌(16~24h的培养物),为革兰阳性小杆菌,常呈V字形,成对排列。在22~25℃环境中形成4根鞭毛,故在25℃肉汤培养液中出现轻微旋转或翻滚样的运动。而在32℃时仅形成一根鞭毛,动力缓慢。
一、单核增生李斯特氏菌概况
生物学特性
相关食品:鲜奶、巴氏消毒奶、奶酪、冰激凌、生的蔬菜、发酵过的生肉制作的香肠、生的和加工过的禽肉、各种生的肉类、生的和烟熏的鱼肉。约有85-90%的病例是由被污染的食品引起的。 该病的临床表现,健康成人个体出现轻微类似流感症状,由该菌造成的脑膜炎的致死率可高达70%,败血症的死亡率达50%,围产期或新生儿感染的死亡率超过80%,怀孕期妇女的感染,母亲通常能存活下来。抗生素治疗,用青霉素或氨苄青霉素注射给药,或与氨基糖苷类抗生素一起用药。
菌种
溶血反应
葡萄糖
麦芽糖
MR-VP
甘露糖
鼠李糖
木糖
七叶苷
单核细胞增生李斯特氏菌
+
+
+
+/+
-
+
-
+
格式李斯特氏菌
-
+
+
+/+
+
-
-
+
斯氏李斯特氏菌
+
+
+
+/+
-
-
+
+
威氏李斯特氏菌
-
+
+
+/+
-
V
+
+
伊氏李斯特氏菌
+
+
+
+/+
-
-
+
+
英诺克李斯特氏菌
-
+
+
+/+
-
V
-
+
注:+阳性;-阴性;V反应不定
有动力,呈伞状生长或月牙生长
VP试验
过氧化氢酶试验
溶血试验
七叶苷试验
协同溶血试验
阳性
二、单核增生李斯特氏菌检测
操作规程





结果鉴定
综合以上生化试验和溶血试验结果,报告25g(mL)样品中检出或未检出单核细胞增生李斯特氏菌。
二、单核增生李斯特氏菌检测
单核细胞增生李斯特氏菌生化特性与其他李斯特氏菌的区别
谢谢观看!
食品微生物检验技术
一、单核增生李斯特氏菌概况
生物学特性
菌落初始很小,透明,边缘整齐,呈露滴状,但随着菌落的增大,变得不透明。在5-7%的血平板上,菌落通常也不大,灰白色,刺种血平板培养后可产生窄小的β-溶血环。在0.6%酵母浸膏胰酪大豆琼脂(TSAYE)琼脂上,用45°角入射光照射菌落,通过解剖镜垂直观察,菌落呈兰色、灰色或兰灰色。氧化酶阴性。40%胆汁不溶解,吲哚、硫化氢、尿素、明胶液化、硝酸盐还原、赖氨酸、鸟氨酸均阴性,VP、甲基红试验和精氨酸水解阳性。能发酵多种糖类,产酸不产气,不利用枸橼酸盐,
30 ±1 ℃,18~24h
36 ±1 ℃,24h~48h
二、单核增生李斯特氏菌检测
GB 4789.30-2016
检测流程
选择性增菌
36±1℃
8~18h
鉴别培养基找可疑典型菌落•典 Nhomakorabea菌落在显色培养基上的特征按照产品说明进行判定
操作规程
TPALCAM琼脂
科玛嘉李斯特显色琼脂
木糖
初筛
二、单核增生李斯特氏菌检测
一、单核增生李斯特氏菌概况
流行病学
检样25g(或25mL)样品+LB1增菌液225mL,均质
0.1mL+10mL LB2增菌液
李斯特氏菌显色培养基
PALCAM琼脂
接种木糖、鼠李糖,36±1 ℃,24h;同时于TSA-YE平板划线纯化,30 ±1 ℃,24h~48h
木糖-,鼠李糖+
鉴定
结果报告
30 ±1 ℃,24h
相关文档
最新文档