不同诱导剂和诱导方法对西瓜单倍体染色体加倍效果的比较研究

不同诱导剂和诱导方法对西瓜单倍体染色体加倍效果的比较研究
作者：李海伦高宁宁李晓慧康利允常高正王琰王慧颖赵卫星
来源：《中国瓜菜》2024年第01期
摘要：为探究不同诱导剂和诱导方法对西瓜单倍体染色体加倍的效果，以西瓜花药离体培养获得的单倍体植株为材料，利用不同质量浓度的秋水仙素和氟乐灵进行培养基加倍、浸芽加倍、滴生长点加倍3种方法研究单倍体植株诱导二倍体植株的效果。

结果表明，不同加倍方法对单倍体加倍的诱导率存在很大差异。

秋水仙素诱导加倍，植株的存活率均达到100%，氟乐灵诱导加倍，加倍植株的致死率最高达到100%。

组培法诱导加倍时，秋水仙素和氟乐灵均在质量浓度为60 mg·L-1时，加倍诱导率最高，分别是50.00%和41.67%。

浸芽法诱导加倍时，600 mg·L-1秋水仙素浸芽4 h加倍诱导率最高为75.00%；300 mg·L-1氟乐灵浸芽2 h加倍诱导率最高为50.00%。

滴生长点诱导加倍时，600 mg·L-1秋水仙素诱导的加倍率最高为
50.00%；500 mg·L-1氟乐灵诱导加倍率最高为27.78%。

因此，秋水仙素诱导西瓜单倍体植株加倍效果优于氟乐灵，且浸芽法诱导加倍效果最佳。

关键词：西瓜；单倍体；秋水仙素；氟乐灵；染色体加倍
中图分类号：S651 文献标志码：A 文章编号：1673-2871（2024）01-025-07
Comparative study on chromosome doubling effect of watermelon haploid with different inducers and induction methods
LI Hailun， GAO Ningning， LI Xiaohui， KANG Liyun， CHANG Gaozheng， WANG Yan， WANG Huiying， ZHAO Weixing
（Institute of Horticulture， Henan Academy of Agricultural Sciences， Zhengzhou 450002，Henan， China）
Asbtract： In order to investigate the effect of different inducers and induction methods on chromosome doubling of watermelon haploid， the haploid plants obtained from watermelon anther culture in vitro were used as materials. Different concentrations of colchicine and fluralin were used to study the effect of inducing diploid plants from haploid plants by three methods： medium doubling method， germination doubling method and droplet growing point doubling method. The results showed that the induction rate of haploid doubling by different doubling methods varied. The survival rate of plants induced by colchicine doubling reached 100%， and the mortality rate of plants induced by fluralin doubling reached 100%. When induced by tissue culture， the doubling induction rates of colchicine and trifluralin were the highest at a mass concentration of 60 mg·L-1， with 50.00% and 41.67%， respectively. When inducing doubling by soaking the buds with 600 mg·L-1 colchicine for 4 hours， the highest doubling induction rate was 75.00%; the highest doubling induction rate of 300 mg·L-1 fluralin soaking buds for 2 hours was 50.00%. When inducing doubling at the droplet growth point， the highest doubling rate induced by 600 mg·L-1 colchicine was 50.00%; the highest induction doubling rate of 500 mg·L-1 trifluralin was 27.78%. Therefore， the effect of inducing haploid watermelon plants to double with colchicine is better than that with trifluralin， and the soaking method has the best effect on inducing doubling.
Key words： Watermelon; Haploid; Colchicine; Fluralin; Chromosome doubling
西瓜是世界十大水果之一，具有甘甜多汁、清爽解渴的特點，夏季广受消费者的喜爱，使其市场需求量大大增加。

西瓜栽培周期短、上市快且经济效益高，已经成为广大农民致富的重要产业[1]。

目前优异西瓜品种更新滞后，加上西瓜遗传基础狭窄，常规育种周期长，现有品种已不能满足市场需求，所以扩宽西瓜遗传基础，发掘优异种质，提高西瓜品种改良效率是西瓜育种的首要任务。

单倍体育种是一条缩短育种年限、加快育种进程的有效途径。

花粉辐射[2]、花药培养[3-4]、大孢子培养[5-6]等都是较为常用的单倍体诱导技术。

从20世纪80年代初期起，薛光荣等[7-8]、袁万良等[9]、魏瑛[10]、李娟等[11]、缑艳霞等[12]、朱迎春等[13]研究者就不断地探究西瓜花药离体培养技术，且获得了单倍体植株。

单倍体植株需要通过加倍才能用于育种材料和新种质的创制，常用的诱导单倍体加倍的方法有浸芽、浸种、浸根、浸苗、滴生长点和组培法等[14-18]，常采用的诱导剂有秋水仙素、氟乐灵、炔苯酰草胺和氨磺灵等，及辅助添加剂二甲基亚砜（DMSO）、吐温等，有助于提高加倍效率。

高宁宁等[14]研究表明，辅助添加剂DMSO可以提高甜瓜单倍体的加倍率。

适量的诱导剂配合适宜的加倍方法，将有效地提高加倍率。

玉米[19]、黄瓜[20]、萝卜[21]、南瓜[22]等作物在不同诱导剂和不同方法的诱导下，均得到很好的加倍效果。

目前对西瓜单倍体加倍技术的研究较少，还未见成熟的西瓜单倍体加倍技术的报道。

笔者总结了前人研究成功的经验，利用秋水仙素和氟乐灵诱导剂，采用组培法、浸芽法、滴生长点法3种方法对利用西瓜花药离体培养获得的单倍体植株进行加倍，以期建立高效的西瓜单倍体加倍体系，以便快速、高效地获得纯合的自交系优异种质材料，缩短育种年限，加快西瓜优异新品种的选育进程。

1 材料与方法
1.1 材料
试验材料为小果型西瓜斯维特。

试验于2022年5—9月在河南省农业科学院园艺研究所组培分子实验室进行，利用西瓜花药离体培养获得的单倍体植株进行扩繁，然后挑选长势一致的扩繁苗来研究不同诱导剂对西瓜单倍体植株加倍的效果。

试验材料由河南省农业科学院园艺研究所西甜瓜研究室提供。

1.2 方法
1.2.1 西瓜单倍体植株扩繁把西瓜花药离体培养获得的单倍体植株接入芽增殖培养基
MS+0.15 mg·L-1KT+10%椰汁+30 g·L-1蔗糖+6 g·L-1琼脂（pH 5.80～5.85）中，放入每天光照时间16 h、光照度3000～4000 lx、温度在（25±2）℃的培养间中进行增殖扩繁培养，用于快速获得大量的单倍体植株，为研究不同诱导剂对西瓜单倍体加倍的效果提供充足的试验材料。

1.2.2 培养基添加法诱导以培养基MS+0.15 mg·L-1 KT +10%椰汁为基础培养基，在基础培养基中分别添加不同质量浓度的秋水仙素（0、40、60、80、100 mg·L-1）和不同质量浓度的
氟乐灵（0、40、60、80、100 mg·L-1）配制成加倍培養基，然后将扩繁的单倍体植株接入加倍培养基中，再在上述培养条件下培养21 d，之后转接到基础培养基中做植株的倍性鉴定。

试验共9个处理，每个处理接入4株西瓜单倍体植株，每个处理3次重复，并统计加倍植株存活率。

加倍植株存活率/%=成活植株数/处理植株数×100。

1.2.3 浸芽法诱导先配制不同质量浓度的秋水仙素（0、200、400、600、800 mg·L-1）和不同质量浓度的氟乐灵（0、100、300、500、700 mg·L-1），均以1.5%的DMSO（二甲基亚砜）作为助溶剂，然后过滤灭菌，再将单倍体植株分别在不同质量浓度的秋水仙素中浸泡2、4、6 h和在不同质量浓度的氟乐灵中浸泡2、3、4 h，以1.5%的DMSO浸芽6 h和4 h分别作为秋水仙素和氟乐灵浸芽的对照，浸芽结束后，用无菌水冲洗3遍，每遍1 min，最后控干水分，接入基础培养基中（MS+0.15 mg·L-1 KT +10%椰汁），在上述培养条件中培养21 d。

试验共30个处理，每个处理接入4株西瓜单倍体植株，每个处理3次重复，并统计加倍植株存活率。

1.2.4 滴生长点法诱导用1.5%的DMSO（二甲基亚砜）配制无菌的不同质量浓度的秋水仙素（200、400、600、800 mg·L-1）和不同质量浓度的氟乐灵（100、300、500、700 mg·L-1），然后分别滴加2滴到西瓜单倍体植株的生长点，在1、3、5 d各滴加1次，以滴加1.5%的DMSO作为对照，在上述培养条件中培养28 d。

试验共9个处理，每个处理4株植株，每个处理3次重复，并统计加倍植株的存活率。

1.3 植株倍性鉴定
取待测植株最新长出的嫩叶约0.2 g，用细胞裂解液与细胞染色液以体积比1∶4制作细胞悬浮液，用德国PARTEC公司的CyFlowRCube8流式细胞仪上机检测植株的倍性，以斯维特种子苗为参照。

统计植株的加倍率，加倍率/%=加倍植株数/处理存活植株数×100。

1.4 数据处理
采用Excel 2016进行数据统计分析，采用SPSS 21进行方差分析，采用Duncan检验法进行多重比较，采用FCS Express V3对流式细胞仪数据进行作图。

2 结果与分析
2.1 植株倍性鉴定
西瓜花药离体培养获得的单倍体植株通过秋水仙素和氟乐灵诱导加倍，将获得加倍的存活植株进行流式细胞仪倍性鉴定分析，鉴定结果如图1所示，以单倍体植株首个呈正态分布的最高峰的荧光强度100为对照，对诱导加倍存活的植株进行鉴定，共得到二倍体和混倍体2种倍性植株。

2.2 培养基添加法对染色体加倍效果的影响
将西瓜花药离体培养诱导的单倍体植株进行增殖培养，把获得的单倍体植株接种到含有不同质量浓度的秋水仙素或氟乐灵的培养基中诱导加倍，鉴定的加倍效果如表1所示。

利用秋水仙素作为诱导剂时，植株的存活率达到100%，生长良好（图2-A），随着秋水仙素质量浓度的增加，二倍体的加倍率呈倒“V”形，先增后降，混倍体的加倍率呈线性增加。

当秋水仙素质量浓度为60 mg·L-1时，二倍体加倍率达到最大值50.00%；当质量浓度为100 mg·L-1时，混倍体加倍率最高达到58.33%。

利用氟乐灵作为诱导剂时，植株的存活率随着氟乐灵质量浓度的增加而降低，长势较弱（图2-B），当氟乐灵质量浓度为100 mg·L-1时，植株存活率降至75.00%，二倍体和混倍体加倍率的变化趋势与秋水仙素加倍效果一致，二倍体和混倍体最高加倍率的质量浓度与秋水仙素一样，其最高加倍率分别为41.67%和44.44%。

试验结果表明，秋水仙素的加倍效果优于氟乐灵，加倍植株的致死率为0，而氟乐灵加倍植株的致死率最高达到25.00%，而且二倍体最高加倍率高出氟乐灵8.33个百分点，所以质量浓度为60 mg·L-1的秋水仙素作为最佳诱导加倍浓度，同时还发现在不添加诱导剂时，二倍体的加倍率也能达到8.33%。

2.3 浸芽法对染色体加倍效果的影响
利用不同质量浓度的秋水仙素或氟乐灵对获得的西瓜单倍体芽进行浸芽处理，经流式细胞仪鉴定植株倍性的结果如表2和表3所示，植株的长势如图3所示。

秋水仙素诱导二倍体的最高比例（75.00%）高于氟乐灵诱导的最高比例（50.00%）。

利用秋水仙素诱导加倍，植株的存活率均达到100.00%，而氟乐灵诱导加倍时植株的致死率最高达100.00%，表明氟乐灵对植株有一定的毒害作用。

由表2可知，当秋水仙素浸芽2 h时，二倍体的加倍率随着秋水仙素质量浓度的增加呈先降低后升高的变化趋势，最高加倍率为58.33%，其中400 mg·L-1秋水仙素浸芽处理未得到二倍体，其混倍体比例高达75.00%；浸芽4 h时，600 mg·L-1秋水仙素浸芽处理二倍体加倍率最高为75.00%；浸芽6 h时，二倍体加倍率与秋水仙素质量浓度的增加呈反比，200～800 mg·L-1秋水仙素浸芽处理使二倍体加倍率由50.00%降至33.34%。

1 材料与方法
1.1 材料
试验材料为小果型西瓜斯维特。

试验于2022年5—9月在河南省农业科学院园艺研究所组培分子实验室进行，利用西瓜花药离体培养获得的单倍体植株进行扩繁，然后挑选长势一致的扩繁苗来研究不同诱导剂对西瓜单倍体植株加倍的效果。

试验材料由河南省农业科学院园艺研究所西甜瓜研究室提供。

1.2 方法
1.2.1 西瓜单倍体植株扩繁把西瓜花药离体培养获得的单倍体植株接入芽增殖培养基
MS+0.15 mg·L-1KT+10%椰汁+30 g·L-1蔗糖+6 g·L-1琼脂（pH 5.80～5.85）中，放入每天光照时间16 h、光照度3000～4000 lx、温度在（25±2）℃的培养间中进行增殖扩繁培养，用于快速获得大量的单倍体植株，为研究不同诱导剂对西瓜单倍体加倍的效果提供充足的试验材料。

1.2.2 培养基添加法诱导以培养基MS+0.15 mg·L-1 KT +10%椰汁为基础培养基，在基础培养基中分别添加不同质量浓度的秋水仙素（0、40、60、80、100 mg·L-1）和不同质量浓度的氟乐灵（0、40、60、80、100 mg·L-1）配制成加倍培养基，然后将扩繁的单倍体植株接入加倍培养基中，再在上述培养条件下培养21 d，之后转接到基础培养基中做植株的倍性鉴定。

试验共9个处理，每个处理接入4株西瓜单倍体植株，每个处理3次重复，并统计加倍植株存活率。

加倍植株存活率/%=成活植株数/处理植株数×100。

1.2.3 浸芽法诱导先配制不同质量浓度的秋水仙素（0、200、400、600、800 mg·L-1）和不同质量浓度的氟乐灵（0、100、300、500、700 mg·L-1），均以1.5%的DMSO（二甲基亚砜）作为助溶剂，然后过滤灭菌，再将单倍体植株分别在不同质量浓度的秋水仙素中浸泡2、4、6 h和在不同质量浓度的氟乐灵中浸泡2、3、4 h，以1.5%的DMSO浸芽6 h和4 h分别作为秋水仙素和氟乐灵浸芽的对照，浸芽结束后，用无菌水冲洗3遍，每遍1 min，最后控干水分，接入基础培养基中（MS+0.15 mg·L-1 KT +10%椰汁），在上述培养条件中培养21 d。

试验共30个处理，每个处理接入4株西瓜单倍体植株，每个处理3次重复，并统计加倍植株存活率。

1.2.4 滴生长点法诱导用1.5%的DMSO（二甲基亚砜）配制无菌的不同质量浓度的秋水仙素（200、400、600、800 mg·L-1）和不同质量浓度的氟乐灵（100、300、500、700 mg·L-1），然后分别滴加2滴到西瓜单倍体植株的生长点，在1、3、5 d各滴加1次，以滴加1.5%的DMSO作为对照，在上述培养条件中培养28 d。

试验共9个处理，每个处理4株植株，每个处理3次重复，并统计加倍植株的存活率。

1.3 植株倍性鉴定
取待测植株最新长出的嫩叶约0.2 g，用细胞裂解液与细胞染色液以体积比1∶4制作细胞悬浮液，用德国PARTEC公司的CyFlowRCube8流式細胞仪上机检测植株的倍性，以斯维特种子苗为参照。

统计植株的加倍率，加倍率/%=加倍植株数/处理存活植株数×100。

1.4 数据处理
采用Excel 2016进行数据统计分析，采用SPSS 21进行方差分析，采用Duncan检验法进行多重比较，采用FCS Express V3对流式细胞仪数据进行作图。

2.1 植株倍性鉴定
西瓜花药离体培养获得的单倍体植株通过秋水仙素和氟乐灵诱导加倍，将获得加倍的存活植株进行流式细胞仪倍性鉴定分析，鉴定结果如图1所示，以单倍体植株首个呈正态分布的最高峰的荧光强度100为对照，对诱导加倍存活的植株进行鉴定，共得到二倍体和混倍体2种倍性植株。

2.2 培养基添加法对染色体加倍效果的影响
将西瓜花药离体培养诱导的单倍体植株进行增殖培养，把获得的单倍体植株接种到含有不同质量浓度的秋水仙素或氟乐灵的培养基中诱导加倍，鉴定的加倍效果如表1所示。

利用秋水仙素作为诱导剂时，植株的存活率达到100%，生长良好（图2-A），随着秋水仙素质量浓度的增加，二倍体的加倍率呈倒“V”形，先增后降，混倍体的加倍率呈线性增加。

当秋水仙素质量浓度为60 mg·L-1时，二倍体加倍率达到最大值50.00%；当质量浓度为100 mg·L-1时，混倍体加倍率最高达到58.33%。

利用氟乐灵作为诱导剂时，植株的存活率随着氟乐灵质量浓度的增加而降低，长势较弱（图2-B），当氟乐灵质量浓度为100 mg·L-1时，植株存活率降至75.00%，二倍体和混倍体加倍率的变化趋势与秋水仙素加倍效果一致，二倍体和混倍体最高加倍率的质量浓度与秋水仙素一样，其最高加倍率分别为41.67%和44.44%。

试验结果表明，秋水仙素的加倍效果优于氟乐灵，加倍植株的致死率为0，而氟乐灵加倍植株的致死率最高达到25.00%，而且二倍体最高加倍率高出氟乐灵8.33个百分点，所以质量浓度为60 mg·L-1的秋水仙素作为最佳诱导加倍浓度，同时还发现在不添加诱导剂时，二倍体的加倍率也能达到8.33%。

2.3 浸芽法对染色体加倍效果的影响
利用不同质量浓度的秋水仙素或氟乐灵对获得的西瓜单倍体芽进行浸芽处理，经流式细胞仪鉴定植株倍性的结果如表2和表3所示，植株的长势如图3所示。

秋水仙素诱导二倍体的最高比例（75.00%）高于氟乐灵诱导的最高比例（50.00%）。

利用秋水仙素诱导加倍，植株的存活率均达到100.00%，而氟乐灵诱导加倍时植株的致死率最高达100.00%，表明氟乐灵对植株有一定的毒害作用。

由表2可知，当秋水仙素浸芽2 h时，二倍体的加倍率随着秋水仙素质量浓度的增加呈先降低后升高的变化趋势，最高加倍率为58.33%，其中400 mg·L-1秋水仙素浸芽处理未得到二倍体，其混倍体比例高达75.00%；浸芽4 h时，600 mg·L-1秋水仙素浸芽处理二倍体加倍率最高为75.00%；浸芽6 h时，二倍体加倍率与秋水仙素质量浓度的增加呈反比，200～800 mg·L-1秋水仙素浸芽处理使二倍体加倍率由50.00%降至33.34%。

1.1 材料
试验材料为小果型西瓜斯维特。

试验于2022年5—9月在河南省农业科学院园艺研究所组培分子实验室进行，利用西瓜花药离体培养获得的单倍体植株进行扩繁，然后挑选长势一致的扩繁苗来研究不同诱导剂对西瓜单倍体植株加倍的效果。

试验材料由河南省农业科学院园艺研究所西甜瓜研究室提供。

1.2 方法
1.2.1 西瓜单倍体植株扩繁把西瓜花药离体培养获得的单倍体植株接入芽增殖培养基
MS+0.15 mg·L-1KT+10%椰汁+30 g·L-1蔗糖+6 g·L-1琼脂（pH 5.80～5.85）中，放入每天光照时间16 h、光照度3000～4000 lx、温度在（25±2）℃的培养间中进行增殖扩繁培养，用于快速获得大量的单倍体植株，为研究不同诱导剂对西瓜单倍体加倍的效果提供充足的试验材料。

1.2.2 培养基添加法诱导以培养基MS+0.15 mg·L-1 KT +10%椰汁为基础培养基，在基础培养基中分别添加不同质量浓度的秋水仙素（0、40、60、80、100 mg·L-1）和不同质量浓度的氟乐灵（0、40、60、80、100 mg·L-1）配制成加倍培养基，然后将扩繁的单倍体植株接入加倍培养基中，再在上述培养条件下培养21 d，之后转接到基础培养基中做植株的倍性鉴定。

试验共9个处理，每个处理接入4株西瓜单倍体植株，每个处理3次重复，并统计加倍植株存活率。

加倍植株存活率/%=成活植株数/处理植株数×100。

1.2.3 浸芽法诱导先配制不同质量浓度的秋水仙素（0、200、400、600、800 mg·L-1）和不同质量浓度的氟乐灵（0、100、300、500、700 mg·L-1），均以1.5%的DMSO（二甲基亞砜）作为助溶剂，然后过滤灭菌，再将单倍体植株分别在不同质量浓度的秋水仙素中浸泡2、4、6 h和在不同质量浓度的氟乐灵中浸泡2、3、4 h，以1.5%的DMSO浸芽6 h和4 h分别作为秋水仙素和氟乐灵浸芽的对照，浸芽结束后，用无菌水冲洗3遍，每遍1 min，最后控干水分，接入基础培养基中（MS+0.15 mg·L-1 KT +10%椰汁），在上述培养条件中培养21 d。

试验共30个处理，每个处理接入4株西瓜单倍体植株，每个处理3次重复，并统计加倍植株存活率。

1.2.4 滴生长点法诱导用1.5%的DMSO（二甲基亚砜）配制无菌的不同质量浓度的秋水仙素（200、400、600、800 mg·L-1）和不同质量浓度的氟乐灵（100、300、500、700 mg·L-1），然后分别滴加2滴到西瓜单倍体植株的生长点，在1、3、5 d各滴加1次，以滴加1.5%的DMSO作为对照，在上述培养条件中培养28 d。

试验共9个处理，每个处理4株植株，每个处理3次重复，并统计加倍植株的存活率。

1.3 植株倍性鉴定
取待测植株最新长出的嫩叶约0.2 g，用细胞裂解液与细胞染色液以体积比1∶4制作细胞悬浮液，用德国PARTEC公司的CyFlowRCube8流式细胞仪上机检测植株的倍性，以斯维特种子苗为参照。

统计植株的加倍率，加倍率/%=加倍植株数/处理存活植株数×100。

1.4 数据处理
采用Excel 2016进行数据统计分析，采用SPSS 21进行方差分析，采用Duncan检验法进行多重比较，采用FCS Express V3对流式细胞仪数据进行作图。

2 结果与分析
2.1 植株倍性鉴定
西瓜花药离体培养获得的单倍体植株通过秋水仙素和氟乐灵诱导加倍，将获得加倍的存活植株进行流式细胞仪倍性鉴定分析，鉴定结果如图1所示，以单倍体植株首个呈正态分布的最高峰的荧光强度100为对照，对诱导加倍存活的植株进行鉴定，共得到二倍体和混倍体2种倍性植株。

2.2 培养基添加法对染色体加倍效果的影响
将西瓜花药离体培养诱导的单倍体植株进行增殖培养，把获得的单倍体植株接种到含有不同质量浓度的秋水仙素或氟乐灵的培养基中诱导加倍，鉴定的加倍效果如表1所示。

利用秋水仙素作为诱导剂时，植株的存活率达到100%，生长良好（图2-A），随着秋水仙素质量浓度的增加，二倍体的加倍率呈倒“V”形，先增后降，混倍体的加倍率呈线性增加。

当秋水仙素质量浓度为60 mg·L-1时，二倍体加倍率达到最大值50.00%；当质量浓度为100 mg·L-1时，混倍体加倍率最高达到58.33%。

利用氟乐灵作为诱导剂时，植株的存活率随着氟乐灵质量浓度的增加而降低，长势较弱（图2-B），当氟乐灵质量浓度为100 mg·L-1时，植株存活率降至75.00%，二倍体和混倍体加倍率的变化趋势与秋水仙素加倍效果一致，二倍体和混倍体最高加倍率的质量浓度与秋水仙素一样，其最高加倍率分别为41.67%和44.44%。

试验结果表明，秋水仙素的加倍效果优于氟乐灵，加倍植株的致死率为0，而氟乐灵加倍植株的致死率最高达到25.00%，而且二倍体最高加倍率高出氟乐灵8.33个百分点，所以质量浓度为60 mg·L-1的秋水仙素作为最佳诱导加倍浓度，同时还发现在不添加诱导剂时，二倍体的加倍率也能达到8.33%。

2.3 浸芽法对染色体加倍效果的影响
利用不同质量浓度的秋水仙素或氟乐灵对获得的西瓜单倍体芽进行浸芽处理，经流式细胞仪鉴定植株倍性的结果如表2和表3所示，植株的长势如图3所示。

秋水仙素诱导二倍体的最
高比例（75.00%）高于氟乐灵诱导的最高比例（50.00%）。

利用秋水仙素诱导加倍，植株的存活率均达到100.00%，而氟乐灵诱导加倍时植株的致死率最高达100.00%，表明氟乐灵对植株有一定的毒害作用。

由表2可知，当秋水仙素浸芽2 h时，二倍体的加倍率随着秋水仙素质量浓度的增加呈先降低后升高的变化趋势，最高加倍率为58.33%，其中400 mg·L-1秋水仙素浸芽处理未得到二倍体，其混倍体比例高达75.00%；浸芽4 h时，600 mg·L-1秋水仙素浸芽处理二倍体加倍率最高为75.00%；浸芽6 h时，二倍体加倍率与秋水仙素质量浓度的增加呈反比，200～800 mg·L-1秋水仙素浸芽处理使二倍体加倍率由50.00%降至33.34%。