药物分析：第十一章 吩噻嗪类抗精神病药物的分析

副产物
贮藏产生的有关物质：
CH2CH2CH2N(CH3)2
N
Cl
S O 3-(2-氯-10H-吩噻嗪-10-基)-N,N-二甲基-1-丙胺S-氧化物（Ⅴ）
O
O ↑
CH2CH2CH2N(CH3)2
N
Cl
S 3-(2-氯-10H-吩噻嗪-10-基)-N,N-二甲基-1-丙胺N-氧化物（Ⅵ）
复习：HPLC检测杂质的方法有哪些？
盐酸异丙嗪的含量测定：取本品约0.25g，精密 称定，加0.01mol/L盐酸溶液5ml与乙醇50ml使 溶解。照电位滴定法，用氢氧化钠滴定液 （0.1mol/L）滴定，出现第一个突越点时记下 消耗的毫升数V1，继续滴定至第二个突越点时 记下消耗的毫升数V2，V2与V1之差即为本品消 耗滴定液的体积。
第四节 含量测定
碱性：酸碱滴定法 紫外吸收：紫外分光光度法 高效液相色谱法
一、酸碱滴定法
（一）非水溶液滴定法
反应摩尔比1:1
ChP2010盐酸氯丙嗪的含量测定：取本品约
0.2g，精密称定，加冰醋酸10ml与醋酐30ml溶解
后，照电位滴定法，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴
定，并将滴定的结果用空白试验校正。
X：被测组分 Y：干扰组分
λ1=254nm λ2=269nm, λ’2=277nm 254 269 277
（五）钯离子比色法
基本原理
吩噻嗪类药物在pH 2±0.1的溶液中可与 钯离子形成红色的络合物。
S
S
PdCl2
Pd2+ 2Cl-
pH2
N
R'
S
R
该方法选择性用于未被氧化的吩噻嗪类药
物的测定。
盐酸异丙嗪片的含量测定（ USP32-NF27）
氟化物＋
酸性茜素锆试液 氟化锆 配位离子，茜素 磺酸钠游离，使溶液由红色变为黄色。
5.氯化物的鉴别反应（盐酸盐）
与硝酸银的沉淀反应 与二氧化锰、硫酸产生氯气。
示例11-11 JP15盐酸氯丙嗪鉴别法： 取本品0.5g，加水5ml溶解后，加氨试液 2ml，水浴加热5分钟，冷却，滤过；滤液 用稀硝酸酸化，溶液显氯化物的鉴别反应。 ➢ 稀硝酸能使吩噻嗪类药物氧化显色
2.红外分光光度法—了解
ChP2010收载的吩噻嗪类原料药均采用红外分光光度 法(IR)鉴别。制剂可采用提取后IR鉴别。
峰位 (cm-1) 1600~1450 1250 1100 95-C (芳氨基) N-C (脂氨基) OOPC-H (苯环)
图11-1A 盐酸氯丙嗪的红外光吸收图谱
（2）S原子为二价，具有还原性，易被氧化呈色，
（3）S原子有两对孤对电子，易与金属离子络合呈色
典型药物
S
N
HCl
CH2CHN(CH3)2
CH3
盐酸异丙嗪
S
N
Cl
HCl
CH2CH2CH2N(CH3)2
盐酸氯丙嗪
S
N
Cl
CH2CH2CH2N
N CH2CH2OH
奋乃静
S
N
CF3
CH2CH2CH2N
N CH2CH2OCO(CH2)8CH3
二、光谱法
1.紫外分光光度法
由母核三环的π系统产生，一般具有三个峰值。 205 nm附近、254 nm附近和300 nm附近。
最强峰多在 250～265nm
A
255
305 氯丙嗪的紫外吸收图谱
λ nm
【示例11-16 】 盐酸氯丙嗪鉴别 （ChP2010）
取本品，加盐酸溶液(9→1000)制成每1ml中 含5g的溶液，在254nm与306nm的波长处有最 大吸收，在254nm的波长处吸光度约为0.46。
三、色谱法 ---了解
1.TLC 供试品溶液主斑点与对照品溶液主斑点的Rf值应一致。 2.HPLC 以药物对照品制备对照品溶液的外标法。tR
四、其他方法---了解 吩噻嗪类药物还可以通过熔点测定进行鉴别。
第三节 有关物质检查
有关物质
残留的原料及中间产物 副产物
药物的氧化产物
检查方法
高效液相色谱法（HPLC） 薄层色谱法（TLC）
避光保存。
亚砜
OO
砜
S
3.紫外和红外吸收光谱
氧化后的砜和亚砜与硫氮杂蒽母核的紫外吸 收光谱不同。
氯丙嗪
4.与金属离子络合呈色
硫氮杂蒽母核结构中未被氧化的S原子，可 与金属离子(如钯Pd2＋) 形成有色络合物， 其氧化产物砜和亚砜则无此反应。
可用于鉴别和含量测定，并具有专属性， 可排除氧化产物的干扰。
第二节 鉴别试验
一、化学法
6 7 8
9
与Pd2＋络合
氧化显色
5
S
4
3
氯化物的鉴别
10N
2 R' ·HCl
1
R
卤素的反应
碱性基团—与生物碱沉淀剂反应
1. 与生物碱沉淀剂反应---N
【示例11-1 】盐酸氯丙嗪鉴别 （JP15 ） 取本品约0.1g，加水20ml溶解后，加
稀盐酸3滴与三硝基苯酚试液10ml，静置5小 时，生成沉淀，滤过；沉淀用水洗涤后，以 少量丙酮重结晶，于105℃干燥1小时，熔点 为175~179℃。
（三）萃取－双波长分光光度法 盐酸氯丙嗪注射液(USP收载的方法) 用于校正样品中氧化产物对测定的影响
原理： 氯丙嗪的最大吸收波长为254nm，其氧
化产物在此波长也有吸收，同时在277nm处 其吸收度与在254nm处吸收度相等。 可由两波长处测得△A计算氯丙嗪含量。
选择λ1和λ2 的原则是： a.干扰组分在两波长处吸光度相等。 b.待测组分在两波长处有较大的吸光度差值。
单个杂质峰面积不得大于对照溶液 主峰面积(0.5%)。
说 明：①采用过滤法排除片剂辅料的干扰； ②取消了对杂质总量的控制，在一 定程度上减弱了控制。
3.盐酸氯丙嗪注射液的有关物质检查
ChP2010 ：HPLC 主成分自身对照；允许 有一个杂质大于0.5%，但应小于5%。
USP32： 氯丙嗪亚砜的限量检查（TLC，对 照品法）
醋酐：解离生成醋酐合乙酰离子 [CH3CO+·(CH3CO)2O]，比醋酸解离生成的醋酸 合质子[H+·CH3COOH]酸性更强，更利于增强氯 丙嗪的碱性。
（二）乙醇-水溶液中的氢氧化钠滴定法 原理：
第一个等当点：H++Cl-+NaOH→H2O+NaCl 第二个等当点：BH++Cl-+NaOH→B+ H2O+NaCl
第十一章 吩噻嗪类抗精神病 药物的分析
第一节 基本结构与主要性质
一、基本结构
苯并噻嗪的衍生物，含有硫氮杂蒽母核
5
6
S
7
4 3
8 9
10N
2 R'
1
R
R：脂烃胺基、哌嗪基，碱性比10-N强
R：卤素
6
S
4
7
5
3
硫氮杂蒽母核
8 9
10
N
1 2 R'
R
（1）含S、N的三环共轭的大体系，S、N与苯环形成 p-共轭——UV、IR
2.氧化剂显色反应—S
硫酸
硝酸
过氧化氢
其它：三氯化铁、硫酸铈铵（JP15）
3.与钯离子络合显色 未被氧化的二价S能与金属钯离子络合形成
有色络合物。
如与癸氟奋乃静形成红色的络合物。
4.含卤素取代基的反应
氯 ：奋乃静--焰色反应，绿色 氟 ：炽灼后与茜素锆显色
ChP2010 氟奋乃静
碳酸钠、碳酸钾 600℃炽灼
杂质对照品法 主成份自身对照法 面积归一化法
（二）有关物质检查方法
1、 盐酸氯丙嗪的有关物质检查 ChP2010
检查方法：HPLC主成分自身对照法
色谱条件
色谱柱：C8 流动相：乙腈-0.5%三氟乙酸(pH5.3)(50∶50) 检测波长：254nm
判断标准：
供试品溶液的色谱图中如有杂质峰，单个杂质峰 面积不得大于对照溶液主峰面积(0.5%)，各杂质峰面 积的和不得大于对照溶液主峰面积的2倍(1.0%)。
取3支试管，分别精密加入对照品溶液、供试 品溶液与0.1mol/L盐酸溶液(空白溶液)各2ml，再分 别加入氯化钯缓冲溶液各3.0ml，摇匀。取对照品 管溶液和供试品管溶液，以空白管溶液为参比，照 紫外-可见分光光度法，分别在最大吸收波长470 nm 处测定吸光度。
三、高效液相色谱法
（一）RP-HPLC 固定相：ODS 流动相：缓冲液－甲醇或乙腈系统 含氮碱性药物常加入扫尾剂（常用三乙胺）
改善色谱行为 保留时间延长
重点内容
基本 结构
基本 性质
鉴别
含量 测定
硫氮杂蒽母核 碱性;
生物碱沉淀剂 酸碱滴定法
10-碱性侧链 易氧化; 氧化
UV
2-卤素
与金属离子与鈀离子络合 鈀离子比色
络合；
卤素取代基 HPLC
紫外吸收 氯化物
6 7
8 9
5
S
10N R
4 3
2 R'
1
练习题
吩噻嗪类药物的理化性质有 A．多个吸收峰的紫外光谱特征 B．可以与金属离子络合 C．侧链上的氮原子碱性较强 D．易被氧化 E．杂环上的氮原子碱性极弱
N
Cl
3-氯二苯胺 (I)
H
N
Cl
S 2-氯-10H-吩噻嗪 (II)
中间产物
S 3-(2-氯-10H-吩噻嗪-10-基)-N-甲基-1-丙胺 (Ⅲ)
CH2CH2CH2N(CH3)2
CH2CH2CH2NCH3
N
Cl
S N-[3-(2-氯-10H-吩噻嗪-10-基)丙基]-N,N′,N′-三甲基-1,3-丙二胺 (Ⅳ)
各国药典方法的比较
EP：用各杂质对照品配置对照溶液；单个 杂质的限量更低。
USP：薄层色谱法；未控制杂质总量。 JP：无有关物质检查
思考：何为相对保留时间？ 某组分的校正保留时间与相应标样的校正保
留时间之比
2.盐酸氯丙嗪(糖衣)片的有关物质检查
ChP2010
检查方法： HPLC 主成分自身对照法 判断标准：供试品溶液的色谱图中如有杂质峰，
N
Cl
HN
Cl
S
3-氯二苯胺（Ⅰ） S
2-氯-10H-吩噻嗪（Ⅱ）
[缩合] ClCH2CH2CH2N(CH3)2, NaOH
CH2CH2CH2N(CH3)2
N
Cl [成盐]
S
HCl, C2H5OH
CH2CH2CH2N(CH3)2
N
Cl HCl
S
2、有关物质
残留的中间产物和副产物：
H
N
Cl
CH2CH2CH2NHCH3
答案：[D]
A．直接分光光度法 B．提取后分光光度法 C．差示分光光度法 D．提取后双波长分光 光度法
E．正交函数分光光度法 1.盐酸异丙嗪口服液的含量测定，可采用 B 2.盐酸氯丙嗪糖衣片的含量测定，可采用 A 3.盐酸氯丙嗪注射液的含量测定中，为消除
样品中氧化物对测定的干扰，可采用 D
癸氟奋乃静
S
N
CF3
CH2CH2CH2N
2HCl N CH2CH2OH
盐酸氟奋乃静
S
N
CF3
CH2CH2CH2N
2HCl N CH3
盐酸三氟拉嗪
二、主要理化性质
1.弱碱性
母核的氮原子：碱性极弱
取代基上的脂烃氨基、哌嗪、哌啶：碱性 较强。
2.易氧化呈色
易被氧化剂氧化成砜和亚砜等不同产物， 呈不同的颜色。
答案：[ ABCDE]
能够与盐酸氯丙嗪反应生成沉淀的试剂是
A.三硝基苯酚
B.三氯化铁
C.茜素锆
D.碱性酒石酸铜
E.氯化钡
答案：[A]
下列药品中置于铜网上燃烧，火焰显绿色的是
A．奋乃静
B．氟奋乃静
C．癸氟奋乃静
D．异丙嗪
答案：[A]
有氧化产物存在时，吩噻嗪类药物含量测定 的方法是 A．非水溶液滴定法 B．亚硝酸钠滴定法 C．薄层色谱法 D．钯离子比色法 E．直接紫外分光光度法
二、分光光度法
（一）直接分光光度法 应用：ChP2010盐酸氯丙嗪片、注射液 方法：盐酸溶液，254nm，吸收系数法
（二）萃取后分光光度法
盐酸异丙嗪口服液（USP32）
盐酸异丙嗪 氨水 异丙嗪 萃取氯仿层 少量稀盐酸洗涤酸性洗液 氯仿洗涤 合并氯仿提取液 挥干氯仿 稀硫酸溶解（硫酸异丙 嗪） 测定A
但注意，流动相的pH值不能太高（2-8），否 则会造成固定相水解。
（二）离子对高效液相色谱法 将待测组分的反离子加入到流动相中，
使与呈解离状态的药物作用，生成可逆的 离子化合物。
吩噻嗪类碱性药物：烷基磺酸盐阴离子对 试剂，如戊烷磺酸钠、庚烷磺酸钠等。浓 度3-10mmol/L。
流动相呈弱酸性，有利于生物碱的质子化
一、盐酸氯丙嗪及其制剂的有关物质检查
（一）合成路线与有关物质
1.合成路线
COOH NH2 [重氮化]
COOH N2Cl Cu2Cl2
COOH Cl
[缩合]
COOH
NH
Cl
NaNO2, HCl
[脱羧] Fe
NH
Cl [环合]
S, I2
H2N
H N
Cl Cu
[分离异构体] S
H Cl
C6H5Cl, C