蝴蝶兰的组织培养概述

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2017，34（24）
蝴蝶兰的组织培养概述
卢　舒，林浩群
（揭阳市农业科学研究所，广东 揭阳 522000）
作者简介：卢舒（1988.7-），女，广东省揭阳人，初级农艺师，主要从事农艺工作，研究方向：农作物新品种技术研究。

［摘要］本文从蝴蝶兰外植体选择、培养基、激素和添加物的选择、原球茎的增殖与生根壮苗等几方面概述了蝴蝶兰的组织培养技术的研究进展，为其组培技术研究提供参考。

［关键词］蝴蝶兰；农业；组织培养；快速繁殖
蝴蝶兰(Phalaenopsis aphrodite Rchb. F.)为兰科蝴蝶兰属，由于它的花形较为优美、色彩多样且鲜丽、花期较长而享有“兰花皇后”的美誉，观赏价值和经济价值都很高，是世界上四大最具商业价值观赏热带兰的其中一个。

蝴蝶兰为单茎性气生兰，较少侧芽生成，再生能力不高，不利于一般的分株繁殖；且无胚乳的种子在自然环境中难以萌发，难以满足市场的大量需求。

农业科研工作者一直在探索蝴蝶兰优质种苗快速繁殖的方法，其中应用植物组织培养技术进行快速繁殖已经成为蝴蝶兰种苗繁殖最好的方法。

组织培养方法可以缩短繁育周期，获得大量成株，还可以保持种质优良性状。

本文从外植体选择、培养基、激素和添加物的选择、原球茎的增殖与生根壮苗等几方面概述了蝴蝶兰的组织培养的研究进展，以期为蝴蝶兰的生产发展提供有益的信息。

１外植体的选择　
对外植体培养成功与否的其中一个主要影响因素就是外植体的来源，花梗芽、叶片、茎尖和根等都是蝴蝶兰组织培养中经常利用的诱导原球茎的外植体。

由于组织培养的分化能力和分化程度与品种、选取的器官有关，所以要成功地进行蝴蝶兰组织培养就要选择合适的外植体进行无菌操作。

1.1花梗芽
蝴蝶兰花梗芽是最佳的组培培养外植体，具有易取材、易消毒、对母株损伤小、诱导率高等优点。

从蝴蝶兰产生花梗到花谢期间，绿色的花梗都可以取材，一般越嫩的花梗诱导出的原球茎生长状况越好。

不同幼嫩程度花梗的原球茎诱导率差别较大，如花梗生长10天的诱导率高达30%，而30天以后的只有4%[1]。

1.2叶片
以叶片为外植体诱导原球茎可减少对母株的伤害，易取材容、诱导率高且不受季节影响。

关于蝴蝶叶片接种的研究表明：叶片的切割方法、叶片大小以及放置方式都会类原球茎诱导，且将叶片切割成1.0cm×0.7cm，叶面朝上接种处理效果最好，诱导率可达60%[2]；叶片越幼嫩越容易形成类原球茎；叶片叶顶端的诱导率远不如叶基部。

1.3茎尖和根
茎尖是最早用于兰花快速繁殖的外植体，成功率比较高，也比较容易诱导培养。

但因为蝴蝶兰是单茎性植物，茎尖的摘取会造成母株的损伤。

所以在现实生产中较少运用蝴蝶兰茎尖诱导原球茎。

此外，以根作为蝴蝶兰外植体诱诱导率低，相关报道较少，很少应用于生产。

２培养基、激素和添加剂的选择
培养基对蝴蝶兰诱导原球茎有着重要的影响，常用的培养基包括MS、B5、KC、1/2MS、花宝及其改良型等，这当中又数MS 基本培养基最常用。

蝴蝶兰品种和采用外植体不同对应的最适宜培养基也有所差异。

周俊辉等[3]以红花品种蝴蝶兰
作为研究试材，对比了改良KC、1/2MS 和MS 三种基本培养基对类圆球茎的增殖的作用，结果表明改良KC 具有最佳效果，1/2MS 其次，最差的是MS。

对最适培养基组分及其浓度选择应根据不同品种、不同外植体、培养阶段以及培养过程中原球茎生长情况及时调整。

通常原球茎在基本培养基上即可实现增殖和分化，不过在基本培养基中添加适量激素及添加物可明显增进原球茎的增殖、分化。

现阶段常用于蝴蝶兰组织培养中的激素主要有6-BA、NAA、GA 3、和IAA 等。

有研究指出，低浓度6-BA (3~5mg/L)可以促进原球茎的分化，而浓度较高(6mg/L) 6-BA 容易使原球茎发生褐变。

同一品种蝴蝶兰的诱导、增殖阶段的基本培养基和激素配比可大体上一样，而在壮苗生根阶段则可少用甚至不加激素。

另外，把椰子汁、香蕉汁、蛋白胨、番茄汁等天然提取物适量地添加在培养基对原球茎增殖也有显著的促进作用[4]；蔗糖、白糖和片糖可以作为培养基的能源物质，为蝴蝶兰初代增殖、生根壮苗和继代培养提高碳源；为防止细菌、真菌等有害微生物污染培养基，还常在培养基中加入一些抑菌物质。

３增殖与生根壮苗
蝴蝶兰的原球茎诱导、增殖是保持种苗优良性状、实现工厂化育苗的重要环节。

影响蝴蝶兰原球茎诱导、形成的主要因素有外植体种类、培养基类型、外源激素的组成和浓度、有机物的添加等方面，其中外源激素的种类和浓度对原球茎的形成作用最为关键。

蝴蝶兰原球茎的诱导需要较高浓度的细胞分裂素和生长素，但过高的外源激素会导致外植体的褐化死亡而不利于原球茎的诱导与增殖。

壮苗培养是提高移栽成活率的主要因素，生根效果也对实际生产和收益有着重要影响。

该阶段要求对激素的种类和浓度有着准确的把握，降低培养基的激素含量可以有效地促进壮苗形成。

IBA(0.3~1.5mg/L)、NAA(0.1~0.8mg/L)等生长素是较常使用的。

总之，蝴蝶兰的组织培养技术已较为成熟，并已经实现了大规模生产上和取得了巨大的经济效益，但仍存在继代周期长、增殖难等问题。

【参考文献】
[1]陈 玲，徐 信，李苇洁，等.蝴蝶兰组织培养技术研究进展[J].安徽农业科学，2010，39(5): 2565-2566.[2]张秀清，王志武，刘玉敬，等.蝴蝶兰实生苗不同器官的离体培养[J].植物学通报，1996， 13(1): 50.
[3]周俊辉，叶超红，陈旭高.蝴蝶兰原球茎增殖培养的研究[J].仲凯农业技术学院学报，2002，15(3):13-17.
[4]李娜.蝴蝶兰组培快繁技术的研究进展[J].广东农业科学，2007(11)：44-46.
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