安捷伦1100系列恒温自动进样器补充参考手册
Agilent 1100高效液相色谱仪操作指导书
1 操作规程1.1开机1.1.1 启动计算机,完成后系统自动运行Bootp Server程序。
打开色谱仪各组件电源,待Bootp Server里显示已联上各组件的信息及各模块自检完成后,双击【Instrument Online】图标启动化学工作站,工作站自动与仪器建立通讯。
1.1.2 打开10%异丙醇溶液控制阀,用针筒抽吸至管路中有液体流出。
调节控制阀松紧,控制流量至流出量约为每分钟5~15滴。
1.1.3 将流动相放入溶剂瓶中,打开Purge 阀,单击【Pump】→【control】,选中on,单击【OK】,启动泵。
再单击【Pump】→【Set up Pump】,设Flow为5ml/min,流动相A调节为100%,其它流路关闭,单击【OK】,则系统开始Purge流动相A。
3min后依次切换管路至B、C、D,确保所需管路均无气泡。
1.1.4 建立新方法时执行“1.2方法的编辑”的操作。
仪器配置无更改,运行已建立的方法则直接进入“1.3方法运行”操作。
1.2 编辑分析方法1.2.1 点击【Method】→【Edit entire method】或【New method】选项,进入方法编缉界面。
在Method Comments 中加入方法的信息如色谱条件、方法的用途等点击【OK】进入下一界面。
1.2.2 泵参数设定:设定流速、流动相比例、梯度/运行时间表、平衡时间等参数。
点击Ok进入下一界面。
1.2.3 柱温箱参数设定:在Temperature下面的方框内输入所需温度,并选中它,点击【more>>】键,选中Same as left使柱温箱的温度左右一致。
点击【OK】进入下一界面。
1.2.4 UV检测器参数设定:在Wavelength下方的空白处输入所需的检测波长,如254nm, 在Peakwidth (Response time)下方点击下拉式三角框,选择合适的响应时间, 如>0.1min(2s),在Timetable 中可以Insert 一行输入随时间切换的波长。
安捷伦1100培训手册
No.24
第二章 HPLC 仪器工作原理
本章内容:
•往复活塞泵的结构及工作原理 •手动进样器(六通阀)结构及工作原理 •常见检测器检测原理
No.25
溶剂传输系统
往复活塞泵(单向阀)
Gold Seal Sapphire Insert Ruby Ball Spring Insert
60℃
0
5 Time in Minutes
10
No.14
柱效
Detector Response Inject
低柱效
高柱效
Time
No.15
计算柱效
tR
Inject
W 1/2
W Time
B
N = 16
t R WB L N
2 = 5.54
t R W 1/2
2
HETP =
No.16
扩散
范德姆特方程 The Van Deemter Equation
150 4.0
100 3.0 2.0
50
1.0
10
No.6
高效液相色谱 (HPLC)
进样口 混合器 泵 色谱图 色谱柱
检测器
溶剂
No.7
液相色谱类型
Types of Compounds Separated Neutrals Weak Acids Weak Bases
Mode
Stationary Phase
No.31
Necessity for More than One Detector
Selectivity
Flecainide in Serum
Agilent 1100 LC 现场培训教材
Agilent 1100 LC现场培训教材安捷伦科技有限公司生命科学与化学分析仪器部一、培训目的:● 基本了解1100LC硬件操作。
● 掌握化学工作站的开机,关机,参数设定,学会数据采集,数据分析的基本操作。
二、 培训准备:1、仪器设备: Agilent 1100LC●G1310A :(单元泵);G1312A(二元泵);G1311A(四元泵)。
● G1313A(自动进样器)。
● G1316A(柱温箱)。
● G1314A(VWD检测器)。
● G1362A(示差检测器)。
● G1315A/B (DAD检测器)。
● G1321A (FLD检测器)。
● 色谱柱: Zorbax eclipse XDB C8,150mm×4.6mm i.d。
2、溶剂准备:● 色谱级纯或优级纯乙腈(ACN)或甲醇。
●二次蒸馏水基本操作步骤:(一)、开机:1、打开计算机,进入Windows NT (或Windows 2000)画面,并运行Bootp Server程序。
2、打开 1100 LC 各模块电源。
3、待各模块自检完成后,双击Instrument 1 Online图标,化学工作站自动与1100LC通讯,进入的工作站画面如下所示。
4、从“View”菜单中选择“Method and Run control”画面, 单击”View”菜单中的“Show Top Toolbar”,“Show status toolbar”,“System diagram”,”Sampling diagram”,使其命令前有“√”标志,来调用所需的界面。
5、把流动相放入溶剂瓶中。
6、打开Purge阀。
7、单击Pump图标,出现参数设定菜单,单击Setup pump选项,进入泵编辑画面。
8 、设Flow:5ml/min,单击OK。
9、单击Pump图标,出现参数设定菜单,单击Pump control选项,选中On,单击OK,则系统开始Purge,直到管线内(由溶剂瓶到泵入口)无气泡为止,切换通道继续Purge,直到所有要用通道无气泡为止。
Agilent 1100series安捷伦高效液相色谱仪操作规程
Agilent1100高效液相色谱仪操作规程1.仪器组成及开机1.1仪器组成:Agilent1100高效液相色谱系统主要由工作站、在线脱气机、柱温箱、输液泵、自动进样器、检测器等部件组成。
1.2开机:1.2.1接通电源,打开计算机及工作站其它各部件开关,约30秒钟后,各部件进入待机状态,指示灯为黄色或无色。
1.2.2打开HP ChemStations,进入Instrument 1 online状态,约30秒钟后,计算机进入工作站的操作页面。
该页面主要由以下几部分组成:最上方为命令栏,依次为File,Run Control,Instrument等;命令栏下方为快捷操作图标,由多个样品连续进行分析、单个样品进样分析、调用文件、保存文件等;左边为样品信息栏;中部为工作站各部件的工作流程示意图,依次为进样器→输液泵→柱温箱→检测器→数据处理→报告;中下部为动态监测信号;右下部为色谱工作参数:进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等。
2.色谱条件的设定(色谱条件的设定可以通过下列几种方法实现2.1直接设定在操作页面的右下部一色谱工作参数中设定。
将鼠标移移至要设定的参数如进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等,单击一下,即可显示该参数的设置页面,键入设定值后,单击“OK”,即完成。
2.2 调用已设置好的文件在命令栏“Method”下,选择“Load Method”,或直接单击快捷键操作的“Load Method”图标,选定文件名,单击“OK”,此时,工作站即调用所选用文件中设定的参数。
如欲进行修改,则可同2.1项下,在色谱工作参数中作修改;亦可在命令栏“Method”下,选择“Edit Entire Method”,在每个页面中键入设定值,单击“OK”。
即完成。
2.3 编辑新文件先在命令栏“Method”下,选择“New Method”, 之后再在命令栏“Method”下,选择“Edit Entire Method”,在每个页面中键入设定值,完成后,Save Method”, 先在命令栏“Method”下选择“Save Method”,给新文件命名,单击“OK”。
安捷伦1100液相色谱仪的使用说明书
(五) Agilent 1100 LC维护保养
1 色谱柱长时间不用 存放时 柱内应充满溶剂 两端封死 如ACN适于反相色谱柱 正相 色谱柱用相应的有机相
2 对于手动进样器 当使用缓冲溶液时 要用水冲洗进样口 同时搬动进样阀数次 每次数 毫升
点击Ok进入下一画面
5 柱温箱参数设定: 在”Temperature”下面的方框内输入所需温度,并选中它,点击”more>>” 键,如图所示,选中”Same as left”---使柱温箱的温度左右一致 点击ok进入下一画面
6 VWD检测器参数设定: 在”Wavelength”下方的空白处输入所需的检测波长,如254nm, 在”Peak width (Response time)”下方点击下拉式三角框,选择合适的响应时间, 如>0.1min (2s) 在Timeta ble 中可以 Insert 一行 输入随时间切换的波长 如1min
在 Flow 处输入流量,如1ml/min 在 Solvent B 处输入70.0,(A=100-B) ,也可Insert 一行”Timetable” ,编辑梯度 在 Pressure Limits Max 处输入柱子的最大耐高压 以保护柱子 单击Ok进入下一画面
4 自动进样器参数设定: 选择合适的进样方式, 如图所示 进样体积 1.0ul ,洗瓶位置为6号 “Standard Injection”---- 只能输入进样体积 此方式无洗针功能 Injection with Needle Wash ---- 可以输入进样体积和洗瓶位置 此方式针从样品瓶抽完样品后 会在洗瓶中洗针 U se injector program ---可以点击Edit 键进行进样程序编辑
agilent安捷伦液相色谱仪 1100技术参数
Agilent 1100 液相色谱仪是一款高效、可靠的色谱分析仪器,广泛应用于化学、制药、生物医学等领域。
以下是 Agilent 1100 液相色谱仪的技术参数:
1. 输液系统:采用高压输液泵,最大压力可达 15000 psi,流量范围为0.001-10.0 mL/min,可实现梯度洗脱。
2. 自动进样器:具有样品盘、样品针和进样针等部件,可实现自动进样、清洗和重置等功能。
3. 色谱柱:采用高性能色谱柱,具有高分辨率、高灵敏度和低噪音等特点,可实现高效分离。
4. 检测器:采用二极管阵列检测器(DAD),可同时检测色谱峰的紫外-可见光谱,实现多组分分析。
5. 数据处理系统:采用安捷伦自研的数据处理软件,可实现色谱峰识别、定量分析、定性分析和报告生成等功能。
6. 柱温箱:采用恒温柱温箱,可控制色谱柱的温度,提高分离效果和灵敏度。
7. 系统控制器:采用触摸屏或电脑控制,可实现仪器远程控制和数据采集等功能。
8. 安全特性:具有仪器过热保护、输液泵过压保护和样品污染预警等功能,确保操作安全可靠。
9. 环境特性:采用低噪音设计,减少对周围环境的影响。
同时具有仪器状态提示和故障诊断等功能,方便用户维护和管理。
10. 认证与标准:Agilent 1100 液相色谱仪符合 cGMP、GLP 和 FDA 等相关法规要求,确保仪器性能和质量达到国际标准。
总之,Agilent 1100 液相色谱仪具有高效、可靠、自动化和智能化等特点,可满足不同领域用户的分析需求。
其卓越的性能和广泛的应用范围使其成为实验室分析的理想选择。
1100操作指南
Agilent 1100型高效液相色谱仪操作规程1. 开机1.1 开机前准备:流动相使用前必须过0.45μm的滤膜(有机相的流动相必须为色谱纯;水相必须用新鲜注射用水,不能使用超过3天的注射用水,以防止长菌或长藻类);把流动相放入溶剂瓶中。
A瓶[棕色瓶]:为水相;B瓶:为有机相。
超声去除瓶内液体中气泡。
1.2 打开电脑,进入Windows XP界面。
1.3 从上到下打开液相各部件电源开关。
1.4 在打开液相主机电源5分钟内双击桌面“联机”图标,仪器自检,进入工作站。
该页面主要由以下几部分组成:——最上方为命令栏,依次为“文件、运行控制、仪器……”等;——命令栏下方为快捷操作图标,如多个样品连续进行分析、单个样品进样分析、调用文件保存文件……等;——中部为工作站各部件的工作流程示意图;依次为进样器-输液泵-柱温箱-检测器-数据处理-报告;——中下部为动态监测信号;——右下部为色谱工作参数:进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等。
1.5 从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面。
2. 编辑参数及方法2.1 开始编辑完整方法:从“方法”菜单中选择DEF-LC.M,再从“方法”菜单中选择“编辑完整方法”,选择方法信息、仪器参数及收集参数、数据分析参数和运行时间表等各项,单击OK,进入下一画面。
2.2 方法信息:在“方法注释”中加入方法的信息,如方法的用途等。
单击OK,进入下一画面。
2.3 泵参数设定:进入“泵参数”画面,在“流量” 处输入流量,如1.0mL/min;在“溶剂B”处输入有机相的比例如70.0,(A=100-B),也可在“插入”一行“时间表”,编辑梯度;输入保留时间;在“最大压力限”处输入柱子的最大耐高压,以保护柱子。
单击OK,进入下一画面。
2.4 DAD检测器参数设定:进入“DAD 信号”画面,输入样品波长及其带宽、参比波长及其带宽(参比波长带宽默认值为100nm);选择“停止时间”输入相应的停止分析时间;在“光谱范围”中输入采集光谱方式“store”:选All;如只进行正常检测,则可选None;“范围”:可选范围为190~950nm;“步长”可选2.0nm;阀值:选择需要的灯;“峰宽”(响应时间)即响应值应尽可能接近要测的窄峰峰宽,可选“2s”或4s;Slit-:狭窄缝,光谱分辨率高;宽时,噪音低。
安捷伦1100
一、培训目的:●基本了解1100LC硬件操作。
●掌握化学工作站的开机,关机,参数设定,学会数据采集,数据分析的基本操作。
二、培训准备:1、仪器设备:Agilent 1100LC●G1310A :(单元泵);G1312A(二元泵);G1311A(四元泵)。
● G1313A(自动进样器)。
● G1316A(柱温箱)。
● G1314A(VWD检测器)。
● G1362A(示差检测器)。
● G1315A/B (DAD检测器)。
● G1321A (FLD检测器)。
●色谱柱: Zorbax eclipse XDB C8,150mm×4.6mm i.d。
2、溶剂准备:●色谱级纯或优级纯乙腈(ACN)或甲醇。
●二次蒸馏水基本操作步骤:(一)、开机:1、打开计算机,进入Windows NT (或Windows 2000)画面,并运行Bootp Server程序。
2、打开 1100 LC 各模块电源。
3、待各模块自检完成后,双击Instrument 1 Online图标,化学工作站自动与1100LC通讯,进入的工作站画面如下所示。
4、从“View”菜单中选择“Method and Run control”画面, 单击”View”菜单中的“Show Top Toolbar”,“Show status toolbar”,“System diagram”,”Sampling diagram”,使其命令前有“√”标志,来调用所需的界面。
5、把流动相放入溶剂瓶中。
6、打开Purge阀。
7、单击Pump图标,出现参数设定菜单,单击Setup pump选项,进入泵编辑画面。
8 、设Flow:5ml/min,单击OK。
9、单击Pump图标,出现参数设定菜单,单击Pump control选项,选中On,单击OK,则系统开始Purge,直到管线内(由溶剂瓶到泵入口)无气泡为止,切换通道继续Purge,直到所有要用通道无气泡为止。
Agilent1100series安捷伦高效液相色谱仪操作规程
Agilent1100 高效液相色谱仪操作规程1. 仪器组成及开机1.1仪器组成:Agilent1100 高效液相色谱系统主要由工作站、在线脱气机、柱温箱、输液泵、自动进样器、检测器等部件组成。
1.2开机:1.2.1接通电源,打开计算机及工作站其它各部件开关,约30秒钟后,各部件进入待机状态,指示灯为黄色或无色。
1.2.2打开HP ChemStations进入Instrument 1 online状态,约30秒钟后,计算机进入工作站的操作页面。
该页面主要由以下几部分组成:最上方为命令栏,依次为File,Run Con trol,I nstrume nt等;命令栏下方为快捷操作图标,由多个样品连续进行分析、单个样品进样分析、调用文件、保存文件等;左边为样品信息栏;中部为工作站各部件的工作流程示意图,依次为进样器一输液泵一柱温箱一检测器一数据处理一报告;中下部为动态监测信号;右下部为色谱工作参数:进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等。
2. 色谱条件的设定(色谱条件的设定可以通过下列几种方法实现2.1直接设定在操作页面的右下部一色谱工作参数中设定。
将鼠标移移至要设定的参数如进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等,单击一下,即可显示该参数的设置页面,键入设定值后,单击“0K,即完成。
2.2调用已设置好的文件在命令栏“ Method下,选择“LoadMethod ”或直接单击快捷键操作的“LoadMethod ”图标,选定文件名,单击“0K,此时,工作站即调用所选用文件中设定的参数。
如欲进行修改,则可同2.1项下,在色谱工作参数中作修改;亦可在命令栏“Method T,选择“Edit Entire Method ”,在每个页面中键入设定值,单击“OK。
即完成。
2.3编辑新文件先在命令栏“ Method下,选择“ NewMethod”之后再在命令栏“ Method下,选择“Edit Entire Method,在每个页面中键入设定值,完成后,Save Method ”先在命令栏“Method下选择“Save Metho*给新文件命名,单击“OK。
Agilent 1100 系列微盘自动进样器与微量微盘自动进样器参考手册说明书
场地要求
适合的工作环境对保证自动进样器达到最佳使用性能至关重要
对电源的要求
自动进样器电源允许有较大的电压范围 参见第 16 页的表 1 因此在自动 进样器后面板上没有电压选择器 而且在电源内部装备了自动电子熔断器 没有外接保险管
恒温自动进样器包括两个部件 自动进样器 G1367A 或 G1377 和恒温器 G1330A 这两个部件都有各自的电源和插头 以备插到电源插座上 这
7
目录
蠕动泵 124 接口板 125
更换内部零件 126
装配主机盖 127 上盖板和泡沫塑料 128 传动部件 129 进样器单元 131 分析头 133 蠕动泵电机 134 进样阀部件 136 计量装置驱动电机和传动带
进样针锁定电机和传动带 主风扇 141 排气风扇 143 MTP 主板 145
如果自动进样器有损伤的迹象 请不要安装自动进样器
发货清单
请确认所有零部件都已经随自动进样器运抵 核对各个仪器箱中的货物是否 和清单相符 如有缺损的零部件 请通知安捷伦科技公司的销售和维修部
辅助工具箱
在每个货物箱中都带有一个辅助工具箱 装有安装和操作该系统必要的工 具
• 表 2 是随微盘自动进样器 G 1367A 和恒温微盘自动进样器 G 1368A 的辅助工具箱 G 1367-68705
如何优化微盘进样器和微量微盘进样器使其得到最佳的结 果 43
性能优化 44 优化最低携留体积 45 缩短进样周期和降低延迟体积 49 进样量精确 51 转子密封垫的选择 53 针座毛细管的选择 54
5
目录
3 故障检修与测试功能 内置式故障检修与测试功能 55
状态指示灯 58 电源指示灯 59 仪器状态指示灯 59
安捷伦1100工作站详细图文操作手册
3/28/2019
5
Author:Tianyou Yue
在工作站上开启仪器
每个模块右下方都有开关键,点击 后出现开泵、开灯等提示,选择 “Yes”即将泵、灯等打开。
点击“on”将打开所有模块,点 击“off”将关闭所有模块。
3/28/2019
6
Author:Tianyou Yue
改变仪器运行参数
3/28/2019
1
Author:Tianyou Yue
熟悉化学工作站
快捷工具条 状态工具条
仪器控制区
自动进样控制
Macro命令行
在线信号显示
仪器参数显示区
3/28/2019
2
Author:Tianyou Yue
通过View切换不同的任务界面
1,方法与运行控制-信号采集; 2,数据处理; 3,报告设计; 4,OQ/PV认证; 5,诊断功能;
3/28/2019
8
Author:Tianyou Yue
调用/储存方法
方法信息 编辑完整方法 调方法 存方法/覆盖保存
另存方法
右图为方法存/取对话框,方 法文件后缀名为.m
3/28/2019
9
Author:Tianyou Yue
其它功能菜单
文件处理
运行控制
仪器控制
序列
放弃任务
在线帮助运行序列Fra bibliotek运行方法
tianyouyue4162019输入流动相的量对着瓶子击左键然后左键单击solventbottlesfilling对着瓶子击左键然后左键单击solventbottlesfilling显示右面对话框在totalvolume下输入溶剂瓶容量一下输入溶剂实际加入的量比如在totalvolume下输入溶剂瓶容量一般为100literactualvolume下输入溶剂实际加入的量比如05liter选中下面两个选项后在溶剂低于01liter时停止样品分析溶剂用完后泵自动关闭
安捷伦1100示差检测器参考手册-4
219
Agilent 1100
Esc F3 Records
Views F5 RID. F4 Maint log
System
F7 Add
220
Agilent 1100
Esc F3
3
Tests
Views RID
Schematics
F5 RID
Agilent 1100 RID m
System
221
Agilent 1100
35 ° C,
4s
35 ° C, Agilent 1100
1.0 mL/min LC ,
228
10 10
30
31
60 61
CPU CPU
1 2 3 4
230
5 6
1 2 3 4 5
231
32
32
*
**
Agilent 1100
1
GC LC UV-
LAS
90
***
90
30
****
90
Agilent Agilent
Filter
Polarity Zero
Calibration
nRIU Calculation
Diode 1 Signal Diode 2 Signal Temperature Signal
Selected Signals
Raw Data Digital Interface
Analog Outputs
RIM
RIM
CAN GPIB RS-232 Æ
ASIC —
304 GPIB CAN
LED 8 32 1100 Win
APG
ASIC RS-232C
Agilent 1100方法和序列设置中的小技巧
Agilent 1100方法和序列设置中的小技巧供参考做液相色谱断断续续有8年的历史了,自从买了Agilent 1100,感觉做实验方便得多。
无需手动进样,摸好条件后只要设好方法和序列,一点击start,仪器就开始工作了。
不只是做样品,还可以包括最后的冲柱子,它都能一次性完成。
但是方法或序列设置不当的话,会导致做无用功,全部白做都有可能。
下面我来谈谈自己的工作经验和技巧。
1. 摸条件(以C18柱为例)可以选单针进样模式,将sample info设置好文件名,比如我做肌苷氯化钠注射液的有关物质,可以在前缀上设jglhn,后面自动生成000,第一针一定要走足够长的时间,我是做化学药的,通常走到主峰保留时间的2倍,看看后面是否有杂质峰出现,要保证针与针之间的数据平行必须做到一针出峰干净后再走第二针。
在method里设置必要的参数,比如进样量(20μl)、流动相配比(D泵0.5%的冰醋酸水溶液)、流速(1.0ml/min)、柱温(35℃)、检测波长(248nm)、保留时间(45min)等,将摸索好的方法用save as method保存到jg1.m。
需要说明一点,走单针时文件名自动累加,第一针是000,第二针就自动生成001。
2. 设置序列参数选择序列进样模式,在sequence parameters中设置好第一针的文件名,还是以肌苷氯化钠注射液为例,在前缀上设jglhn,后面自动生成000,把它改为100与单针区别开,免得覆盖!在sequence table中有几个参数是必须设置的,如方法名和进样次数。
而瓶号和样品名称是可以不设置的,也就是说可以让仪器只运行方法而不进样,主要用来冲洗或平衡柱子。
一个序列中可以包括多种方法,比如做有关物质自身对照法时,低浓度的样品保留时间可以设得短些,假如21分钟出主峰,我就设到24分钟,方法另存为jg2.m。
假如我做两个批号的样品,进样和冲洗的设置如下:瓶号样品名方法进样次数1 ref1 jg2 32 sample1 jg1 33 ref2 jg2 34 sample2 jg1 3wash1 1wash2 1我们可以看到序列中一共包含14个文件,它们的文件名是jglhn100——113。
安捷伦HPLC1100培训资源3_Runcontrol
输入(shūrù)发射波
长 输入激发波长
波长编程表
18
共二十七页
Author:Tianyou Yue
输入控制温度
柱温箱
画面(huàmiàn)6:恒
温柱箱参数设置
温度编程表
控温范围:低于室温10℃~80℃
两个(liǎnɡ ɡè)单独的加热区。
安装切换阀可以进行柱切换。
可以容纳30 cm长色谱柱。
柱子的内径(5um填料) 4.6 3.0 2.1 1.0
流速(ml/min) 1-2
0.4-0.8 0.2-0.4 0.05-0.09
设置柱子流速时,要注意观察系统压力,一般来 说在满足分析的前提下使系统维持比较低的压力 对仪器(yíqì)是非常有好处的。
10
共二十七页
Author:Tianyou Yue
2
共二十七页
Author:Tianyou Yue
面对(miàn duì)工作站,我该怎么办 ?
What should I do?
3
共二十七页
Author:Tianyou Yue
如何运行(yùnxíng)样品
4
共二十七页
Author:Tianyou Yue
调用(diàoyòng)方法
在Method中点击(diǎn jī)Load
选择所要编辑(biānjí)的内容
画面1:方法(fāngfǎ)组成
方法信息
仪器控制与数据采集
数据分析 运行时间表
共二十七页
在你想要的部分前选中,否则方法里将不 包括该部分的内容。比如本方法不包括 数据分析的内容。
7
Author:Tianyou Yue
方法(fāngfǎ)信息 (Method Information)
Agilent 1100方法和序列设置中的小技巧
Agilent 1100方法和序列设置中的小技巧供参考做液相色谱断断续续有8年的历史了,自从买了Agilent 1100,感觉做实验方便得多。
无需手动进样,摸好条件后只要设好方法和序列,一点击start,仪器就开始工作了。
不只是做样品,还可以包括最后的冲柱子,它都能一次性完成。
但是方法或序列设置不当的话,会导致做无用功,全部白做都有可能。
下面我来谈谈自己的工作经验和技巧。
1. 摸条件(以C18柱为例)可以选单针进样模式,将sample info设置好文件名,比如我做肌苷氯化钠注射液的有关物质,可以在前缀上设jglhn,后面自动生成000,第一针一定要走足够长的时间,我是做化学药的,通常走到主峰保留时间的2倍,看看后面是否有杂质峰出现,要保证针与针之间的数据平行必须做到一针出峰干净后再走第二针。
在method里设置必要的参数,比如进样量(20μl)、流动相配比(D泵0.5%的冰醋酸水溶液)、流速(1.0ml/min)、柱温(35℃)、检测波长(248nm)、保留时间(45min)等,将摸索好的方法用save as method保存到jg1.m。
需要说明一点,走单针时文件名自动累加,第一针是000,第二针就自动生成001。
2. 设置序列参数选择序列进样模式,在sequence parameters中设置好第一针的文件名,还是以肌苷氯化钠注射液为例,在前缀上设jglhn,后面自动生成000,把它改为100与单针区别开,免得覆盖!在sequence table中有几个参数是必须设置的,如方法名和进样次数。
而瓶号和样品名称是可以不设置的,也就是说可以让仪器只运行方法而不进样,主要用来冲洗或平衡柱子。
一个序列中可以包括多种方法,比如做有关物质自身对照法时,低浓度的样品保留时间可以设得短些,假如21分钟出主峰,我就设到24分钟,方法另存为jg2.m。
假如我做两个批号的样品,进样和冲洗的设置如下:瓶号样品名方法进样次数1 ref1 jg2 32 sample1 jg1 33 ref2 jg2 34 sample2 jg1 3wash1 1wash2 1我们可以看到序列中一共包含14个文件,它们的文件名是jglhn100——113。
安捷伦1100高效液相色谱仪标准操作规程
Agilent1100高效液相色谱仪操作目的:规范Agilent1100高效液相色谱仪操作程序范围:适用于实验中心Agilent1100高效液相色谱仪的使用责任:实验中心相关人员对此程序负责内容:1.仪器组成及开机1.1仪器组成:Agilent1100高效液相色谱系统主要由工作站、在线脱气机、柱温箱、输液泵、自动进样器、检测器等部件组成。
1.2开机:1.2.1接通电源,打开计算机及工作站其它各部件开关,约30秒钟后,各部件进入待机状态,指示灯为黄色或无色。
1.2.2打开HP ChemStations,进入Instrument 1 online状态,约30秒钟后,计算机进入工作站的操作页面。
该页面主要由以下几部分组成:最上方为命令栏,依次为File,Run Control,Instrument等;命令栏下方为快捷操作图标,由多个样品连续进行分析、单个样品进样分析、调用文件、保存文件等;左边为样品信息栏;中部为工作站各部件的工作流程示意图,依次为进样器→输液泵→柱温箱→检测器→数据处理→报告;中下部为动态监测信号;右下部为色谱工作参数:进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等。
2.色谱条件的设定(色谱条件的设定可以通过下列几种方法实现)2.1直接设定在操作页面的右下部一色谱工作参数中设定。
将鼠标移移至要设定的参数如进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等,单击一下,即可显示该参数的设置页面,键入设定值后,单击“OK”,即完成。
2.2 调用已设置好的文件在命令栏“Method”下,选择“Load Method”,或直接单击快捷键操作的“Load Method”图标,选定文件名,单击“OK”,此时,工作站即调用所选用文件中设定的参数。
如欲进行修改,则可同2.1项下,在色谱工作参数中作修改;亦可在命令栏“Method”下,选择“Edit Entire Method”,在每个页面中键入设定值,单击“OK”。
安捷伦液相1100操作
•参比峰谱带宽度要大于或等于样品谱带宽度。
注意:增加样品谱带宽度,会降低样品的吸收强度,但会降低噪音。
选择合适的参比吸收波长可以减小梯度洗脱过程中的基线漂移。
Peak Supression(峰抑制):
DAD检测器一个非常有趣的功能是进行峰抑制。例如有两个样品没有分开,共同洗 脱出来,可以设置某一个样品的等吸收波长为参比波长,则被设为参比峰的样品被 抑制,而另一个样品峰被分离。不过,此样品峰的吸收强度要损失10%~30%。
2005-3-212021/12/17
Slide 25
VWD检测器参数设置
2005-3-212021/12/17
Slide 26
运行时间表(Run Time Checklist)
选择在方法中要执行的项目 可以选择保存GLP数据 可以将方法和数据保存在一起
2005-3-212021/12/17
Slide 27
方法信息 (Method Information)
2005-3-212021/12/17
Slide 16
泵的操作参数
包括:流量(Flow),流动相组成(Solvents),停止采集时间(Stop Time),后运 行时间(Post Time),梯度编程(Timetable),压力限制设定(Pressure Limits)等
2005-3-212021/12/17
Slide 22
DAD检测器参数设置
可以选择存储 5 个信号 信号波长范围 191 - 949 nm 可变狭缝: 1, 2, 4, 8, 16 nm 可以时间编程
可以保存数张或所有光谱
2005-3-212021/12/17
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
❐
$JLOHQW
$/6 3HOWLHU
3HOWLHU
❐
3HOWLHU $JLOHQW
3HOWLHU
$/6 3HOWLHU
$/6
❐
$JLOHQW
$/6
$/6
❐ ❐ ❐ ❐
$JLOHQW
$/6 $/6 $/6 $/6 $/6 $60
*$
PO
PO
± ± ± ±
$ $
3& 3& ³6\VWHP´ /&6\VWHP ) ³5HFRUGV´ ) $%,1 ([HFXWH <HV )
$/6
+]
± ± :DWWV 9ROW$PSV $/6 $/6
%&'
$/6
*$
21
2))
$/6
$/6 $/6
$/6
$/6
P î
P
$/6
$/6
7&$
* &$1 $JLOHQW *
î PO î PO î PO
* * * *
7$9 &6$ 8/ 7$9 &6$ 8/
$/6
*
$/6 *
*
*
P
* *
*
(6' LG P î
PP PP PP PP LG *
$/6
$/6
2)) $/6
$/6
&$1
$JLOHQW
/&
$JLOHQW *3,% ³
&$1
&$1
$JLOHQW
$JLOHQW
$JLOHQW
´
$JLOHQW
&$1
$/6
56& &$1 *3,% &$1
$JLOHQW
17
:LQ 3&
$ 3& :LQ 17 3HQWLXP 3& *3,% $JLOHQW&
&&nnn%Z_\d%X^`c\ek%Zfd&ZX^&c`k\iXkli\&Xg^c`k%_kdc
&' 520 &' 520
$
$ $ 3')
$GREH $FUREDW UHDGHU UHDGHU
$
0$18/6?,167$//?/&
3RUWDEOH
GRFXPHQW )RUPDW ,167 $//6 ?5($'(5?$5H(;(
6WDUW!5XQ '26
'ULYHU XSGDWH 'LVN
&RPPDQG
$%HWD '26
]
± S & ± S ) ± S & ± S ) P IW P IW ,(& &6$ 8/ (1
S &
S )
$/6 $JLOHQW
[PO &$1
NJ OEV î î PP î î NJ OEV î î PP î î ± RU ± 9$& +] ] 9$ $/6 9$ ± S & ± S )
$
+383'$7(
&'520
$JLOHQW
&
+3&+(0
'?+3&+(0
+383'$7( '?+3&+(0
$ 6(783 $ &' 520 ([SORUHU < HV
6WDUW!5XQ '26
'ULYHU XSGDWH 'LVN
&RPPDQG
$
*
*
*
*
(6' P* * * %&' * $/6 *
*$ P
$ %HWD $JLOHQW
*$
* * * * *$
$ &' $ $ &' ,4 2439
&
+3&+(0
+383'$7(
+383'$7( '?+3&+(0
'?+3&+(0
$/6
.J
OEV
❐ ❐ ❐
*$
$JLOHQW $JLOHQW /& +3 $JLOHQW $JLOHQW /& /&
î PO ;= ± O O O ± O
)URQWIP 3DJH :HGQHVGD\ 2FWREHU 30
$JLOHQW
>(**'#0.''(
/-#('#-,-+,,''
$JLOHQW
$JLOHQW *$
*$
'26 +3&+(0
$
$JLOHQW
&
+383'$7(
+383'$7( '?+3&+(0
$
'?+3&+(0
$ %HWD
'26 $JLOHQW
'ULYHU XSGDWH 'LVN
&RPPDQG
$%HWD '26
$
6WDUW!5XQ
&'
9
VÂ
$60
!#
$JLOHQW
(0&
&$1
$/6
56& &$1 *3,% &$1
$/6
*3,% *$
*3,%
*3,%
&$1 $JLOHQW $JLOHQW 56& *3,%
&$1 5(027( 56&
³):8SGDWH´
³6\VWHP´
)
³5HFRUGV´
) 3&
$ $JLOHQW $
$
$
&' 520
*$
$ $ $ $ 0% ( ,QWHUQHW _kkg1
P
$/6
$/6
*$
*
$/6
*
*
$JLOHQW
$/6
&$1
*3,%
/&
$JLOHQW
*$
*
$/6
*
$/6
*$ $/6 *$ $/6 7KHUP
$/6
$/6
FP FP
$JLOHQW
FP
8CJ
8CJ
$/6
+
$/6 $/6
7&$
$/6 $/6 $/6 $/6
$/6 $/6
$/6
$/6
$/6
$/6
9
$/6 $/6 $/6 $JLOHQW
❐ ❐ ❐
3HOWLHU
3HOWLHU
& & $/6 $/6 & &
❐ ❐ ❐
PLQ 3HOWLHU $/6
$/6