PEI转染试剂的Protocol【范本模板】
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12孔板
3.5
1。6
100
6孔板
9。6
4
250
6cm平板
21.5
8
500
10cm平板
56.7
16
1000
15cm平板
147
32
2000
4.将B液缓慢加到A液中并混匀,最好使用旋涡振荡器边加边震荡。然后室温放置20min.
5.将DNA-PEI混合液缓慢加入到细胞培养基中,轻轻混匀。
6.转染4h后更换为完全培养基。
培养皿面积(cm2)
转染DNA量(ug)
稀释DNA/PEI的培养基体积(ul)
96孔板
0。32
0。2
25
48孔板
1.1
0。5
PEI转染Protocol
1.转染前一天(24h左右)胰酶消化细胞并计数,细胞铺板,使其在转染时汇合度为70~90%.
2.转染前1h,将细胞培养基更换为Opti—MEM或者DMEM基础培养基(若使用Opti-MEM,PEI转染效果更佳).
3.用一定体积的Opti—MEM稀释质粒,小心混匀,记为A液;用相等体积的Opti-MEM稀释PEI,小心混匀,记为B液(质粒:PEI=1:2,W/W),室温静止5min.
3.5
1。6
100
6孔板
9。6
4
250
6cm平板
21.5
8
500
10cm平板
56.7
16
1000
15cm平板
147
32
2000
4.将B液缓慢加到A液中并混匀,最好使用旋涡振荡器边加边震荡。然后室温放置20min.
5.将DNA-PEI混合液缓慢加入到细胞培养基中,轻轻混匀。
6.转染4h后更换为完全培养基。
培养皿面积(cm2)
转染DNA量(ug)
稀释DNA/PEI的培养基体积(ul)
96孔板
0。32
0。2
25
48孔板
1.1
0。5
PEI转染Protocol
1.转染前一天(24h左右)胰酶消化细胞并计数,细胞铺板,使其在转染时汇合度为70~90%.
2.转染前1h,将细胞培养基更换为Opti—MEM或者DMEM基础培养基(若使用Opti-MEM,PEI转染效果更佳).
3.用一定体积的Opti—MEM稀释质粒,小心混匀,记为A液;用相等体积的Opti-MEM稀释PEI,小心混匀,记为B液(质粒:PEI=1:2,W/W),室温静止5min.