B群链球菌显色培养基性能评价

B群链球菌显色培养基性能评价
王晓娜，丛桂敏，曹作伟
（沈阳市妇婴医院检验科，辽宁沈阳110011）
摘要：目的评价B群链球菌（group B Streptococcus，GBS）显色培养基在孕产妇围产期GBS筛查中的敏感性、特异性和选择性能。

方法选取2019年1月至2019年6月在本院产科门诊就诊的35～37周孕妇阴道拭子标本1500例，已知GBS菌株10例，采用三区划线直接接种于血琼脂培养基（bood agar plate，BAP）和GBS显色培养基（chromogenic medium chromID Strepto B agar，STRB），记录鉴定结果。

比较直接接种血琼脂培养基和显色培养基筛查GBS的敏感性、特异性及选择性能。

结果在BAP和STRB上接种的已知10例GBS菌株全部检出，检出率为100.0%。

孕产妇标本共筛查出125例GBS，阳性率为8.3%（125/1500）。

其中培养24h后，BAP与STRB阳性率分别为6.2%（94/1500）和8.1%（122/1500）；培养48h后，BAP与STRB阳性率均为8.3%（125/1500），高于24h阳性率。

STRB筛查GBS敏感性为97.60%，特异性为99.35%。

STRB与BAP筛查GBS阳性率比较差异有统计学意义（c2=3.911，P＜0.05）。

BAP上接种24h及48h后，分别有32.3%及31.8%的非目标菌群被完全抑制。

STRB上接种24h及48h后，分别有72.6%及70.9%的非目标菌群被完全抑制。

孵育24h后，BAP与STRB非目标菌群生长密度比较差异有统计学意义（c2=32.684，P＜0.05）。

结论B群链球菌显色培养基对于临床GBS筛查有良好的敏感性和特异性，可较好的抑制非目标菌群，选择性能良好，结果易于判断，与直接使用普通血琼脂培养基相比可降低漏检率，值得临床推广运用。

关键词：B群链球菌；显色培养基；性能评价
Performance evaluation of colour medium for group B
Streptococcus
WANG Xiaona,CONG Guimin,CAO Zuowei
(Department of Clinical Laboratory,Shenyang Women and Children Hospital,Shenyang,Liaoning,110011,China) Abstract:Objective To evaluate the sensitivity,specificity and selectivity of group B Streptococcus(GBS)colour medium for screening GBS during perinatal period.Methods1500vaginal swab specimens were collected from late pregnant women and10GBS strains were selected.The three zoning lines were directly inoculated into blood agar plate(BAP)and GBS chromogenic medium chromID Strepto B agar(STRB)to record the identification results.To compare the sensitivity,specificity and selectivity of GBS screening by direct inoculation of blood agar medium and chromo-genic medium.Results All the10cases known GBS strains inoculated on BAP and STRB were detected,and the detection rate was100.0%.125 cases of GBS were screened out from maternal specimens,the positive rate was8.3%(125/1500).After24h of culture,the positive rates of BAP and STRB were6.2%(94/1500)and8.1%(122/1500),respectively.The positive rates of BAP and STRB were8.3%(125/1500)after48h of culture, which was higher than that of24h.The sensitivity and specificity of STRB screening for GBS were97.60%and99.35%.There was significant differ-ence in GBS positive rate between STRB and BAP screening(c2=3.911,P＜0.05).After24hours and48hours of inoculation,32.3%and31.8%of non-target bacteria were completely inhibited,respectively.After24hours and48hours of STRB inoculation,72.6%and70.9%of non-target bacte-ria were completely inhibited,respectively.After24hours of incubation,the growth densities of BAP and STRB non-target flora were significantly difference(c2=32.684,P＜0.05).Conclusion The colour medium of group B Streptococcus has good sensitivity and specificity for clinical GBS screening.It can inhibit non-target bacteria better and has good selectivity.The results are easy to pared with the normal blood agar medi-um,it can reduce the rate of missed detection and it is worthly of application and promotion in the work.
Key words:Group B Streptococcus;Chromogenic Medium;Performance Evaluation
B群链球菌（group B streptococcus，GBS）又称无乳链球菌，可引起新生儿败血症、脑膜炎，甚至导致新生儿死亡[1]。

因此，及时准确的筛查围产期孕妇生殖道中定植的GBS至关重要。

传统使用普通血琼脂培养基（bood agar plate，BAP）进行筛查，但仍存在一定程度的漏检率。

GBS筛查的新型选择性显色培养基（chromogenic medium chromID Strepto B agar，STRB）原理为通过生化反应使培养基上的菌落呈现粉紫色，不通过鉴定即可直接筛查出GBS。

本研究比较STRB与BAP鉴定GBS的敏感性、特异性及选择性能，旨在为实验室快速准确鉴定GBS提供参考依据。

1材料与方法
1.1样本制备选取2019年1月至2019年6月在本院产科门诊就诊的35～37周孕妇阴道拭子标本1500例，已知GBS
资助项目：辽宁省自然科学基金（20170540837）
通信作者：王晓娜，E-mail：
doi:10.3969/j.issn.1009-4393.2021.14.004--论著--
菌株10例。

1.2仪器与试剂成品BAP购自郑州安图生物技术有限公司，STRB购自郑州安图生物技术有限公司，CO2孵育箱购自赛默飞世尔科技（中国）有限公司，DL-96Ⅱ细菌测定系统购自珠海迪尔生物工程有限公司。

1.3质控菌株金黄色葡萄球菌ATCC25923、大肠埃希菌标准菌株ATCC25922、白念珠菌ATCC6258均购自杭州天和微生物试剂有限公司。

1.4检测方法采用3区划线方法将标本接种于BAP和STRB，置（35±2）℃、CO2孵育箱孵育18～24h。

对BAP上乳白色、湿润、ß溶血的疑似GBS菌落进行触酶试验、CAMP试验，同时，采用DL-96Ⅱ细菌测定系统进行鉴定。

对STRB上粉紫色、湿润的典型菌落，用DL-96Ⅱ细菌测定系统测定，同时，使用CAMP试验辅助判定。

采用阴性培养基继续孵育至48h，疑似GBS菌落采用上述方法再进行鉴定。

1.5观察指标比较直接接种血琼脂培养基和显色培养基筛查GBS的敏感性、特异性及选择性能。

1.6统计学方法采用SPSS20.0统计软件进行数据分析，计数资料采用率（%）表示，组间比较采用c2检验，以P＜0.05为差异具有统计学意义。

2结果
2.1BAP与STRB阳性率、敏感性、特异性比较在BAP和STRB 上接种的已知10例GBS菌株均检出，检出率为100.0%。

孕产妇标本共筛查出125例GBS，阳性率为8.3%（125/1500）。

其中培养24h后，BAP与STRB阳性率分别为6.2%（94/1500）和8.1%（122/1500）；培养48h后，BAP与STRB阳性率均为8.3%（125/1500），高于24h阳性率。

STRB与BAP筛查GBS阳性率比较差异具有统计学意义（c2=
3.911，P＜0.05）。

STRB筛查GBS 敏感性为97.60%、特异性为99.35%，见表1。

表1BAP与STRB阳性率、敏感性、特异性比较
Table1Comparison of the positive rate,sensitivity and specificity between BAP and STRB
培养基
BAP STRB
样本例数
真阳性
94
122
假阳性
15
9
真阴性
1384
1366
假阴性
7
3
敏感性（%）
93.07
97.60
特异性（%）
98.93
99.35
阳性预测值（%）
86.23
93.13
阴性预测值（%）
99.50
99.78
2.3BAP与STRB性能比较BAP上接种24h及48h后，分别有32.3%及31.8%的非目标菌群被完全抑制。

STRB上接种24h及48h后，分别有72.6%及70.9%的非目标菌群被完全抑制。

孵育24h后，BAP与STRB非目标菌群生长密度比较差异有统计学意义（c2=32.684，P＜0.05），见表2。

表2BAP与STRB非目标菌生长密度比较
Table2Comparison of growth density of non-target bacteria between
BAP and STRB
培养基BAP STRB 接种时间（h）
24
48
24
48
非目标菌生长密度（%）
未生长
32.3
31.8
72.6
70.9
1区生长
47.2
45.3
18.9
19.6
2区生长
20.5
22.7
8.5
9.5
3区生长
0.0
0.2
0.0
0.0
注：未生长，0个菌落；1区生长，1～9个菌落；2区生长，10～99个菌落；3区生长，100～999个菌落
3讨论
GBS是一种有荚膜的革兰阳性链球菌，主要寄居在女性直肠和阴道，妊娠晚期感染GBS可导致新生儿感染、脑膜炎、甚至死亡[1]。

因此，妊娠晚期及时筛查出携带GBS对降低围产期GBS感染具有重要意义，而合采用适的筛查方法尤为重要。

3.1不同地区GBS定植率相关数据表明[2]，不同种族、不同地区妊娠晚期孕妇GBS带菌率也存在差异，且呈现上升趋势。

如非洲为22.4%，欧洲为19.0%[3]，东南亚地区略低，如日本为8.2%、韩国为8.0%[4]。

而国内近几年才对GBS感染引起的母儿危害才有所了解，仅2011年《孕前及孕期保健指南》[5]、2015年《胎膜早破的诊断与处理指南》[6]中提到GBS筛查。

因此，国内关于GBS感染以及对孕产妇及胎儿影响的相关研究较少。

各地区GBS阳性率差异较大，如澳门地区为17.1%[7]、银川地区为5.09%[8]、北京地区为8.1%[9]。

本研究阳性率为8.3%，低于澳门地区的数据，但高于银川地区数据，与北京地区相当。

分析原因可能与地域分布、人群构成比例、生活方式、经济发展程度等因素有关。

而检出率则与多种因素有关，首先是临床对GBS的重视程度。

目前，我国很多地区即使是经济发达城市均未开展妊娠晚期GBS筛查。

其次为实验室检测水平，包括高水平的质控水平、专业的检验人员等，均在GBS筛查中起到至关重要的作用。

此外，取材部位、筛查时间、检测方法等均会影响检出率。

3.2不同GBS培养方法比较目前，临床上应用最普遍的GBS的检测方法为细菌培养法，也是目前检测的金标准。

主要通过形态学观察、CAMP试验做出初步的判断，然后上机鉴定，但该方法需纯培养菌落3～5d，耗时较长，此外，操作复杂，且在血琼脂培养基上易受到其他菌群如大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌等细菌的抑制，易受到检测环境、送检时间、储存条件等多种因素影响。

而原位杂交、PCR等方法虽然灵敏度较高，但特异性较低，且均需专业的仪器和技术人员，成本高、耗时长，较难在基层医疗机构推广[10]；凝胶电泳法特异性较高，但由于GBS具有多种血清型，易造成漏检。

本研究应用的STRB是一种新型的选择性显色培养基，基本原理为在培养基中加入抗生素来抑制其他细菌的生长，再加入相应的反应底物使GBS菌落显颜色，典型GBS菌落为粉紫色，其他细菌则可被抗生素抑制或少量生长而不产生典型菌落。

本研究结果显示，培养24h后，STRB上阳性率为8.1%（122/1 500），高于BAP的6.2%（94/1500），且增加培养时间后，检出
率均有所提高。

同时，STRB上接种24h及48h后，非目标菌群完全抑制率（72.6%、70.9%）也高于BAP（32.3%、31.8%）。

STRB对70%以上的样本均可完全抑制非目标菌群的生长，选择性能较好，结果易于判断。

与传统方法相比，无需检测仪器，肉眼即可观察，省去GBS鉴定步骤，操作简便，降低培养时间。

综上所述，B群链球菌显色培养基对于临床GBS筛查有良好的敏感性和特异性，可较好的抑制非目标菌群，选择性能良好，结果易于判断。

与直接使用普通血琼脂培养基相比可降低漏检率，值得临床推广运用。

参考文献
[1]伍丹,甘茜茜,尹保民.妊娠晚期女性B族链球菌携菌状况观
察及对分娩结局影响研究[J].当代医学,2019,25(21):5-8. [2]Hamedi A,Akhlaghi F,Seyedi SJ,et al.Evaluation of
group B Streptococci colonization rate in pregnant wom-
en and their newborn[J].Acta Medica Iranica,2012,50
(12):805.
[3]Kwatra G,Cunnington MC,Merrall E,et al.Prevalence of
maternal colonisation with group B streptococcus:a sys-tematic review and meta-analysis[J].Lancet Infect Dis, 2016,16(9):1076-1084.
[4]Ippolito DL,James WA,Tinnemore D,et al.Group B strep-
tococcus serotype prevalence in reproductive-age women at
a tertiary care military medical center relative to global
serotype distribution[J].BMC Infect Dis,2010,10:336.
[5]中华医学会妇产科学分会产科学组.孕前和孕期保健指南
(2018)[J].中华妇产科杂志,2018,53(1):7-12.
[6]中华医学会妇产科学分会产科学组.胎膜早破的诊断与处理
指南(2015)[J].中国实用乡村医生杂志,2016,23(6):33-37.
[7]李之珩,陈文诗,官建泳.澳门地区孕妇B群链球菌筛查和新生
儿早发型感染分析[J].临床检验杂志,2019,37(4):314-316.
[8]袁静,陈道静,任莉.银川市1001例育龄妇女B群链球菌检
测及耐药性分析[J].宁夏医科大学学报,2019,41(3):280-282.
[9]郭琦,杨启文,胡静,等.孕晚期阴道B族链球菌定植的两种筛
查方法比较[J].协和医学杂志,2018,9(3):242-245.
[10]李金丽,宋晓光.B群链球菌两种检测方法的比较[J].临床输
血与检验,2018,20(1):89-91.
尼妥珠单抗联合替吉奥治疗复发鼻咽癌的临床疗效
钟琼
（江西省赣州市人民医院肿瘤科，江西赣州341000）
摘要：目的探讨尼妥珠单抗注射液联合替吉奥治疗复发鼻咽癌患者的临床疗效。

方法回顾性分析本院2018年2月至2019年6月收治的85例复发鼻咽癌患者的临床资料，根据不同药物治疗方案分为对照组（基础治疗+替吉奥，n=42）与观察组（基础治疗+尼妥珠单抗+替吉奥，n=43）。

比较两组近期疗效、生存质量及不良反应情况。

结果观察组总缓解率为55.81%，明显高于对照组的30.95%，差异有统计学意义（P＜0.05）；治疗后，两组鼻咽癌患者生存质量量表（QOL-NPC）评分均高于治疗前，且观察组高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；两组不良反应发生率比较差异无统计学意义。

结论尼妥珠单抗联合替吉奥治疗复发鼻咽癌患者，可提高近期疗效和患者生存质量，且不增加不良反应。

关键词：复发鼻咽癌；尼妥珠单抗；替吉奥
Clinical efficacy of nituzumab combined with ticgio in the treatment of recurrent nasopharyngeal carcinoma
ZHONG Qiong
(Department of Oncology,Ganzhou People's Hospital of Jiangxi Province,Ganzhou,Jiangxi,341000,China) Abstract:Objective To investigate the clinical efficacy of nituzumab injection combined with ticgio in the treatment of patients with recurrent nasopharyngeal carcinoma.Methods The clinical data of85patients with recurrent nasopharyngeal carcinoma treated in our hospital from February 2018to June2019were retrospectively analyzed,and they were divided into control group(basic treatment+ticgio,n=42)and observation group(ba-sic treatment+nituzumab+ticgio,n=43)according to different drug treatment regiments.The short-term efficacy,quality of life and adverse reactions were compared between the two groups.Results The total remission rate of observation group was55.81%,which was significantly higher than that of control group(30.95%),the difference was statistically significant(P＜0.05).After treatment,the quality of life scale(QOL-NPC)scores of NPC
资助项目：赣州市科技局计划项目（GZ2018ZSF304）
doi:10.3969/j.issn.1009-4393.2021.14.005--论著--。