RNAi沉默STAT3基因对人宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响

RNAi沉默STAT3基因对人宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的
影响
吴维光;陈亚琼;曹秀琴
【期刊名称】《武警医学院学报》
【年(卷),期】2009(18)3
【摘要】【目的】探讨信号转导与激活因子3(signal transducers and activators of transcription 3,STAT3)短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)真核表达载体对宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的作用。

【方法】根据siRNA(small inter-ference RNA,siRNA)设计原则,结合pSilencer2.1-U6-neo质粒特点,针对STAT3基因设计并合成两条寡聚DNA片段,退火后克隆入pSilencer2.1-U6-neo 质粒,脂质体法将重组质粒转染人宫颈癌HeLa细胞。

RT-PCR和Western blotting检测HeLa细胞STAT3基因mRNA和蛋白表达水平;MTT法和流式细胞仪检测细胞的增殖和凋亡。

【结果】成功构建了STAT3基因shRNA真核表达载体,转染人宫颈癌HeLa细胞。

非特异siRNA组细胞STAT3蛋白、mRNA、细胞增殖率及凋亡率分别为0.55±0.08、0.49±0.05、(4.12±0.45)%和(11.31±1.69)%,而目的siRNA组细胞STAT3蛋白、mRNA、细胞增殖率及凋亡率分别为
0.36±0.06、0.32±0.05、(2.51±0.48)%和(17.39±1.58)%。

与非特异siRNA组细胞相比,目的siRNA组细胞STAT3蛋白及mRNA表达下降;同时HeLa细胞增殖能力下降,细胞凋亡率增加。

【结论】构建的STAT3基因shRNA真核表达载体能够通过下调STAT3基因表达,抑制宫颈癌细胞的增殖能力,诱导细胞凋亡。

【总页数】5页(P184-187)
【关键词】宫颈癌;STAT3;RNA干扰;增殖;凋亡
【作者】吴维光;陈亚琼;曹秀琴
【作者单位】武警医学院附属医院妇产科
【正文语种】中文
【中图分类】R284.1;R730.2
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