过氧化氢诱导人卵巢颗粒细胞氧化应激模型的建立

合集下载

1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。

刘建，聂广宁，杨洪艳
广东省中医院妇科（广东广州５１０１２０）
【摘要】目的探讨构建过氧化氢（Ｈ：０：）诱导人卵巢颗粒细胞氧化应激模型的方法。方法不同浓度
０，处理人卵巢颗粒细胞ＣＯＶ４３４，采用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测Ｃａｓｐａｓｅ一３表达，流式细胞仪和ＤＡＰＩ／ＴＵＮＥＬ双染色
ｐｒｅｓｓｉｏｎｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙＷｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ．ＣｅｌｌａｐｏｐｔｏｓｉｓｗａｓｍｅａｓｕｒｅｄｂｙｌｏｆｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙａｎａｌｙｓｉｓａｎｄＤＡＰＩ／ＴＵＮＥＬｄｏｕｂｌｅ
法检测细胞凋亡情况，Ｈ２ＤＣＦ—ＤＡ检测细胞内活性氧族（ＲＯＳ）水平，通过量效关系和时效关系来确定Ｈ０的最
佳作用条件。结果
１～１．５ｍｍｏｌ／Ｌ浓度Ｈ，０，处理ＣＯＶ４３４细胞２～４ｈ后Ｃａｓｐａｓｅ一３表达量升高最明显。随着
・
９８６・
广东医学
２０１７年４月第３８卷第７期
ＧｕａｎｇｄｏｎｇＭｅｄｉｃａｌＪｏｕｒｎａｌＡｐｒ．２０１７，Ｖｏ１．３８，Ｎｏ．７
过氧化氢诱导人卵巢颗粒细胞氧化应激模型的建 — Ｌ冰
Ｈ，０，浓度增加及作用时间的延长细胞凋亡率不断升高。细胞内ＲＯＳ水平随着Ｈ０浓度的增加而增加。１．５
ｍｍｏｌ／Ｌ浓度Ｈ０处理１ｈ后细胞内ＲＯＳ水平上升最明显。结论Ｈ：Ｏ：诱导人卵巢颗粒细胞氧化应激模型的
ｓｔａｉｎｉｎｇｍｅｔｈｏｄ．ＲＯＳｌｅｖｅｌｉｎｏｖａｒｉａｇｒａｎｕｌｏｓａｃｅｉｌｓｗｅｒｅｍｅａｓｕｒｅｄｂｙｌｆｏｗｅｙｔｏｍｅｔｒｙａｆｔｅｒＨ２ＤＣＦ —ＤＡｐｒｏｂｅｗａｓｌｏａｄｅｄ．ＴｈｅｏｐｔｉｍａｌａｃｔｉｏｎｃｏｎｄｉｔｉｏｎｏｆＨ２Ｏ２ｗａｓｃｏｎｉｆｒｍｅｄｂｙｄｏｓｅ—ｅｆｆｅｃｔａｎｄｔｉｍｅ—ｅｆｆｅｃｔｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ．ＲｅｓｕｌｔｓＣａｓｐａｓｅ一３ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎｃｒｅａｓｅｄｍｏｓｔｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔｌｙａｆｔｅｒＣＯＶ４３４ｃｅｌｌｓｗｅｒｅｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈＨ２Ｏ２ａｔ１—１．５ｍｍｏｌ／Ｌｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｆｏｒ
最适宜浓度为１～１．５ｍｍｏｌ／Ｌ，采用细胞凋亡情况评价作用时间是２～４ｈ，采用ＲＯＳ评价作用时间为ｌｈ。
【关键词】过氧化氢；人卵巢颗粒细胞ＣＯＶ４３４；氧化应激模型
Ｈｙｄｒｏｇｅｎｐｅｒｏｘｉｄｅ—ｉｎｄｕｃｅｄｏｘｉｄａｔｉｖｅｓｔｒｅｓｓｍｏｄｅｌｏｆｈｕｍａｎｏｖａｒｉａｎｇｒａｎｕｌｏｓｅｃｅｌｌｓ．Ｌ／ＵＪｉａｎ，ＮＩＥＧｕａｎｇ—
ｎｉｎｇ，ＹＡＮＧＨｏｎｇ—ｙａｈ．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＧｙｎａｅｃｏｌｏｇｙ，ＧｕａｎｇｄｏｎｇＰｒｏｖｉｎｃｅＨｏｓｐｉｔａｌｆｏＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｃａｎ —
ＭｅｔｈｏｄｓＨｕｍａｎｏｖａｒｉａｇｒａｎｕｌｏｓａｃｅｌｌｓ（ＣＯＶ４３４）ｗｅｒｅｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈＨ２０２ａｔｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ．Ｃａｓｐａｓｅ一３ｅｘ —
ｇｚｈｏｕ５１ｎｄｉｎｇａｕｔｈｏｒ：ＹＡＮＧＨｏｎｇ—ｙａｎ，Ｅ —ｍａｉｌ：ｄｒｙａｎｇｈｏｎｇｙａｎ＠１６３．ｃｏｍ
【Ａｂｓｔｒａｃｔ】０ｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｅｓｔａｂｌｉｓｈｔｈｅＨ２Ｏ２一ｉｎｄｕｃｅｄｏｘｉｄａｔｉｖｅｓｔｒｅｓｓｍｏｄｅｌｉｎｈｕｍａｎｏｖａｉｒａｎｇｒａｎｕｌｏｓｅｃｅｌｌｓ．