高效液相色谱仪期间核查方法

BSEZ-03-11-2007-D/0—（3）

高效液相色谱期间核查方法

1．外观

(1) 检查贮液器是否清洁；

(2) 检查滤头是否堵塞；

(3) 检查仪器电源线、信号线等插接是否紧密；

(4) 检查各开关、旋钮、按键等功能是否正常，指示灯是否灵敏；

(5) 将仪器各部分连接好，以100%甲醇为流动相，流量为1.0mL/min ，启动仪器，待压力平稳后保持10min ，用滤纸检查各管路接口应无湿迹。

2．泵流量设定值误差S S 、流量稳定性误差的检定S R

分别设定流量为0.5 mL/min 、1.0 mL/min 、2.0 mL/min ，启动仪器，压力稳定后，在流动相出口处用事先清洗称重过的容量瓶收集流动相，同时用秒表计时，收集5 min 流出的流动相，在分析天平上称重，按式（1 ）、式（2 ）计算S S 和S R 。

%100/)(⨯-=s s m S F F F S （1）

%100/)(⨯-=m in m R F F F S （2）

式中：m F ――()()t W W F m *-=ρ/12, 流量实测值，mL/min ；

2W ――容量瓶+流动相的质量，g;

1W ――容量瓶的质量，g ；

ρ――试验温度下流动相的密度，g/mL ；

t ――收集流动相的时间，min ；

m F ――同一组测量的算术平均值，mL/min ；

S F ――流量设定值，mL/min ；

m F ――同一组测量中流量最大值，mL/min ；

in F ――同一组测量中流量最小值，mL/min ；

3.基线噪声和基线漂移

选用C 18色谱柱，以甲醇：0.02mol/L 乙酸铵=5：95为流动相，流速为1.0 mL/min ，紫外检测器的波长选在230nm ，检测灵敏度调到最灵敏档，开机预热，待仪器稳定后记录基线10 min ，由检测器的衰减倍数和测得的基线峰-峰高对应标度，计算基线噪声，用检测器自身的物理量（AU ）作单位表示。

KB N d = (3)

式中：d N ――检测器基线噪声；

K ――衰减倍数；

B ――测得的基线峰-峰高对应的记录仪标度，AU 。

基线漂移用1小时内基线偏离原点的值（AU/ h ）表示。

看基线噪声是否不超过5×10-4AU ，基线漂移是否不超过5×10-3AU/ h

4.整机性能（定性、定量重复性）

选用C 18色谱柱，根据检测器选择流动相和测量参数：以甲醇：0.02mol/L 乙酸

铵=5：95为流动相，流速为1.0 mL/min ，紫外检测器的波长选在230 nm ，基线稳定后由进样器注入20 µL 的25μg/mL 苯甲酸标准溶液，连续测量6次，记录色谱峰的保留时间和峰面积。按式（5）计算相对标准偏差RSD 。

%1001)16/()(612⨯⨯--=∑=x

x x

RSD i i （定性（定量）） （4） 式中：RSD （定性（定量））――定性（定量）测量重复性相对标准偏差； i x ――第i 次测量的保留时间或峰面积；

x ――6次测量结果的算术平均值；

i ――测量序号。

6．根据检测情况填写报告单，得出结论。