现代分子生物学复习题
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核酸结构与功能一、填空题1．病毒ΦX174及M13的遗传物质都是单链DNA 。
2．AIDS病毒的遗传物质是单链RNA。
3．X射线分析证明一个完整的DNA螺旋延伸长度为?3.4nm?。
4．氢键负责维持A-T间（或G-C间）的亲和力5．天然存在的DNA分子形式为右手B型螺旋。
二、选择题（单选或多选）1．证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是：肺炎球菌在老鼠体内的毒性和T2噬菌体感染大肠杆菌。
这两个实验中主要的论点证据是（CAB．DNACD．DNAE2．1953年AB．DNACDE3．DNA描述？（AB．依赖于C．是双链DE4．DNAB?5．在类似A．基于各个片段间的互补，形成反向平行双螺旋B．依赖于A-U含量，因为形成的氢键越少则发生碱基配对所需的能量也越少C．仅仅当两配对区段中所有的碱基均互补时才会发生D．同样包括有像G-U这样的不规则碱基配对E．允许存在几个只有提供过量的自由能才能形成碱基对的碱基6．DNA分子中的超螺旋（ACE?）。
A 仅发生于环状DNA中。
如果双螺旋在围绕其自身的轴缠绕后（即增加缠绕数）才闭合，则双螺旋在扭转力的作用下，处于静止B．在线性和环状DNA中均有发生。
缠绕数的增加可被碱基配对的改变和氢键的增加所抑制C．可在一个闭合的DNA分子中形成一个左手双螺旋。
负超螺旋是DNA修饰的前提，为酶接触DNA提供了条件D．是真核生物DNA有比分裂过程中固缩的原因E．是双螺旋中一条链绕另一条链的旋转数和双螺旋轴的回转数的总和7．DNA在10nm纤丝中压缩多少倍？（A??）A．6倍B．10倍C．40倍D．240倍E．1000倍8．下列哪一条适用于同源染色单体？（D）A．有共同的着丝粒????????????? B．遗传一致性C．有丝分列后期彼此分开D．两者都按照同样的顺序，分布着相同的基因，但可具有不同的等位基因E．以上描述中，有不止一种特性适用同源染色单体9．DNA在30nm纤丝中压缩多少倍？（?C ）A．6倍B．10倍C．40倍D．240倍E．1000倍10．DNA在染色体的常染色质区压缩多少倍？（E ）A．6倍B．10倍C．40倍D．240倍E．1000倍11．DNA12螺旋结构D13A E．以上都不正确三、判断题1X）23．DNA4构。
现代分子生物学复习题
一名词解释1缺口（gap）：DNA分子中，一条链上失去一段单链，称为gap。
切口（nick）：DNA分子中，一条链上失去一个磷酸二酯键称为nick。
DNA hellicase (DNA解链酶)：也叫DNA解螺旋酶，其通过水解ATP获得能量来解开双链DNA，每解开一对碱基，需水解2分子A TP→ADP+Pi(磷酸盐)拓扑异构酶：细胞内一类催化DNA拓扑异构体（topoisomerase）相互转化的酶，其为topoisomerase，其与DNA双条链形成共价结合的Pr-DNA中间体，在DNA双链骨架的3’，5’-磷酸二酯键处造成暂时的切口，使DNA的多聚核苷酸链得以穿越，通过改变DNA的连接数，而改变的分子拓扑结构。
3 无义突变(nonsense mutation)：DNA序列三联体密码子发生突变，导致AA密码子变为终止密码子，称为无义突变，其导致翻译提前结束而常使产物失活错义突变（missense mutation）：DNA序列三联体密码子发生突变导致pr中原来的AA被另一种AA取代。
4 转座子：是存在于染色体DNA上可自主复制和位移的基本单位。
DNA的转座：或称移位，是由可移位因子介导的遗传物质重排现象。
5转录单位：RNA链的转录起始于DNA模板的一个特定起点（启动子），并在一终点处（终止子）终止，此转录区域称为转录单位。
一个转录单位可是一个基因，也可是多个基因。
转录因子：RNA聚合酶起始转录需要的辅助因子称为转录因子。
其作用或是认别DNA的顺式作用位点，或是识别其他因子，或是识别RNA聚合酶。
6 复制子：DNA的复制单位。
终止子（Terminator）：模板DNA上提供转录停止信号得DNA序列。
7. 单顺反子mRNA：编码1条多肽链的mRNARNA编辑：是某些RNA，特别是mRNA的一种加工方式，其改变RNA的序列，而导致DNA所编辑的遗传信息改变。
8 起始tRNA：有一类能特异的识别MRNA摸板上起始密码子的tRNA多顺反子mRNA：编码多条多肽链的mRNA。
《现代分子生物学》期末考试试题库
1.简述转座子的发现过程和意义发现：转座子最初是Barbara McClintock 于1940年代在玉米的遗传学研究中发现的，当时称为控制元件。
McClintock 的发现并没有引起重视，直到20世纪60年代后期，Shapiro在大肠杆菌中发现一种由插入序列所引起的多效突变，之后又在不同实验室发现一系列可转移的抗药性转座子，才重新引起人们重视。
1983年McClintock被授予诺贝尔生理学与医学奖，距离她公布玉米调控因子的时间已有32年之久。
意义:2.请简述基因组DNA的半保留复制是如何证明的3.简述pull-down与co-IP的基本原理、应用和区别参见赵珊珊PPT区别：Co-IP和GST pull-down的区别Co-IP和GST pull-down都是用于检测蛋白相互作用的实验，两者有很多相似之处，如只能检测强相互作用、只能定量分析、不能检测瞬时相互作用等。
同时两者在原理及实验操作上也存在一定的区别，下文就Co-IP和GST pull-down在原理及操作流程上的区别做一简述。
Co-IP和GST pull-down原理区别GST pull-down方法的基本原理是：利用重组技术将探针蛋白与GST融合，融合蛋白通过GST与固相化的载体上的GTH亲和结合。
因此，当与融合蛋白有相互作用的蛋白通过层析柱时或与此固相复合物混合时就可被吸附而分离。
免疫共沉淀（Co-IP）原理为用某一蛋白的抗体，在细胞裂解液中与相应的蛋白（诱饵蛋白）结合，用Protein A/G将抗原抗体复合物拉下，最后在拉下的复合物中检测是否存在与诱饵蛋白相结合的目的蛋白。
Co-IP和GST pull-down实验操作区别Co-IP实验为体内实验条件，蛋白质的相互作用可以在天然状态下进行，其优点为可以避免人为影响，还可以分离得到天然状态下相互作用的蛋白复合体，缺点是无法证明两个蛋白之间是直接的相互作用还是间接的相互作用；GST pull-down实验为外实验条件，可以去除其它蛋白的影响，从而确定目的蛋白和待检测蛋白是否可以发生直接相互作用。
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（完整word版）[已整理]现代分子生物学复习要点及习题第一章绪论分子生物学分子生物学的基本含义(p8)分子生物学是研究核酸、蛋白质等所有生物大分子的形态、结构特征及其重要性、规律性和相互关系的科学，是人类从分子水平上真正揭开生物世界的奥秘，由被动地适应自然界转向主动地改造和重组自然界的基础学科。
分子生物学与其它学科的关系分子生物学是由生物化学、生物物理学、遗传学、微生物学、细胞学、以至信息科学等多学科相互渗透、综合融会而产生并发展起来的，凝聚了不同学科专长的科学家的共同努力。
它虽产生于上述各个学科，但已形成它独特的理论体系和研究手段，成为一个独立的学科。
生物化学与分子生物学关系最为密切:生物化学是从化学角度研究生命现象的科学，它着重研究生物体内各种生物分子的结构、转变与新陈代谢。
传统生物化学的中心内容是代谢，包括糖、脂类、氨基酸、核苷酸、以及能量代谢等与生理功能的联系。
分子生物学则着重阐明生命的本质----主要研究生物大分子核酸与蛋白质的结构与功能、生命信息的传递和调控。
细胞生物学与分子生物学关系也十分密切:传统的细胞生物学主要研究细胞和亚细胞器的形态、结构与功能。
探讨组成细胞的分子结构比单纯观察大体结构能更加深入认识细胞的结构与功能，因此现代细胞生物学的发展越来越多地应用分子生物学的理论和方法。
分子生物学则是从研究各个生物大分子的结构入手，但各个分子不能孤立发挥作用，生命绝非组成成分的随意加和或混合，分子生物学还需要进一步研究各生物分子间的高层次组织和相互作用，尤其是细胞整体反应的分子机理，这在某种程度上是向细胞生物学的靠拢。
第一章序论1859年发表了《物种起源》，用事实证明“物竞天择，适者生存”的进化论思想。
指出：物种的变异是由于大自然的环境和生物群体的生存竞争造成的，彻底否定了“创世说”。
达尔文第一个认识到生物世界的不连续性。
意义：达尔文关于生物进化的学说及其唯物主义的物种起源理论，是生物科学史上最伟大的创举之一，具有不可磨灭的贡献。
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（完整word版）现代分子生物学复习题现代分子生物学一.填空题1.DNA的物理图谱是DNA分子的限制性内切酶酶解片段的排列顺序。
2.核酶按底物可划分为自体催化、异体催化两种类型。
3.原核生物中有三种起始因子分别是IF-1、 IF-2 和IF-3 。
4.蛋白质的跨膜需要信号肽的引导，蛋白伴侣的作用是辅助肽链折叠成天然构象的蛋白质。
5.真核生物启动子中的元件通常可以分为两种：核心启动子元件和上游启动子元件。
6.分子生物学的研究内容主要包含结构分子生物学、基因表达与调控、DNA重组技术三部分。
7.证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是肺炎球菌感染小鼠、T2噬菌体感染大肠杆菌这两个实验中主要的论点证据是：生物体吸收的外源DNA改变了其遗传潜能。
8.hnRNA与mRNA之间的差别主要有两点：hnRNA在转变为mRNA的过程中经过剪接、mRNA的5′末端被加上一个m7pGppp帽子，在mRNA3′末端多了一个多聚腺苷酸(polyA)尾巴。
9.蛋白质多亚基形式的优点是亚基对DNA的利用来说是一种经济的方法、可以减少蛋白质合成过程中随机的错误对蛋白质活性的影响、活性能够非常有效和迅速地被打开和被关闭。
10.质粒DNA具有三种不同的构型分别是： SC构型、 oc构型、L构型。
在电泳中最前面的是SC构型。
11.哺乳类RNA聚合酶Ⅱ启动子中常见的元件TATA、GC、CAAT所对应的反式作用蛋白因子分别是TFIID 、SP-1 和 CTF/NF1 。
12.与DNA结合的转录因子大多以二聚体形式起作用，转录因子与DNA结合的功能域常见有以下几种螺旋-转角-螺旋、锌指模体、碱性-亮氨酸拉链模体。
13.转基因动物常用的方法有：逆转录病毒感染法、DNA显微注射法、胚胎干细胞法。
14.RNA聚合酶Ⅱ的基本转录因子有、TFⅡ-A、TFⅡ-B、TFII-D、TFⅡ-E他们的结合顺序是： D、A、B、E 。
其中TFII-D的功能是与TATA盒结合。
现代分子生物学
第一章绪论1、分子生物学是从分子水平研究核酸、蛋白质等所有生物大分子的形态、结构特征及其重要性、纪律性和相互关系的科学。
2、达尔文指出物种的变异是由于大自然的环境和生物群体的生存竞争造成的。
3、任何生存下来的个体都倾向于扩增其经过修饰的新性状，以保存生存优势。
4、列文虎克发明了显微镜，发现了细胞创立了细胞学说。
5、19世纪三大发现之一是细胞学说；核心是动、植物的基本单元是细胞。
6、所有组织最基本单元是形状非常相似而又高度分化的细胞。
7、生物化学家Buchner第一个实现用酵母无细胞提取液和葡萄糖进行氧化反应，生成乙醇，证明化学物质转换不需要完整的细胞而仅仅需要细胞中的某些成分。
8、20种氨基酸被相继发现（最晚分离的是苏氨酸，1935）.9、孟德尔一对形状F2代的分离率是3：1，两对性状的分离率是9：3：3：1.10、摩尔根第一个证明基因的科学家，果蝇的红白眼性状中白眼是伴X隐性遗传。
11、肺炎链球菌的转化实验证明DNA是遗传信息的载体。
细菌的毒性（致病力）是由细胞表表面荚膜中的多糖所决定的。
具有光滑表面的S型肺炎链球菌由于带有荚膜多糖而能使小鼠发病，具有粗糙表面的R型细菌由于没有荚膜多糖而失去致病力（荚膜多糖能保护细菌免受动物白细胞的攻击）。
（1）活S型菌体——小鼠死亡（2）死S型菌体——小鼠存活（3）活R型菌体——小鼠存活（4）死S型菌体+活R型菌体——小鼠死亡12、Hershey从事的噬菌体侵染细菌实验。
噬菌体专门寄生在细菌体内，它的头、尾外部都是由蛋白质组成的外壳，头内主要是DNA。
13、细菌体侵染细菌的过程：（1）噬菌体用尾部的末端（基片、尾丝）吸附在细菌表面；（2）噬菌体通过尾轴把DNA全部注入细菌细胞内，噬菌体的蛋白质外壳则留在细胞外面；（3）噬菌体的DNA一旦进入细菌体内，它能利用细菌的生命过程合成噬菌体自身的DNA 和蛋白质；（4）新合成的DNA和蛋白质外壳，能组装成许许多多与亲代完全相同的子代噬菌体；（5）子代噬菌体由于细菌的解体而被释放出来，再去侵染其他细胞，在这个过程中DNA起了关键作用。
现代分子生物学考研题库
现代分子生物学考研题库现代分子生物学是一门研究生物分子结构与功能、遗传信息传递及其调控机制的科学。
随着科学技术的不断发展，分子生物学已经成为生命科学领域的核心学科之一。
以下是一些现代分子生物学的考研题目，供考生复习参考：1. DNA复制的基本原理：- 描述DNA复制过程中的半保留复制机制。
- 解释引物在DNA复制中的作用。
2. RNA转录过程：- 阐述RNA聚合酶在转录过程中的功能。
- 描述转录后修饰对mRNA成熟的影响。
3. 蛋白质合成：- 描述遗传密码子与氨基酸的对应关系。
- 解释翻译过程中的起始、延伸和终止阶段。
4. 基因表达调控：- 阐述转录前调控机制，包括启动子、增强子和转录因子的作用。
- 描述转录后调控，包括mRNA加工、稳定性和翻译调控。
5. 基因编辑技术：- 介绍CRISPR-Cas9基因编辑系统的工作原理。
- 讨论基因编辑技术在医学和农业中的应用及其伦理问题。
6. 细胞信号传导：- 解释细胞信号传导的基本过程，包括受体激活、信号转导和效应器的响应。
- 讨论G蛋白偶联受体和酪氨酸激酶受体在信号传导中的作用。
7. 细胞周期与细胞分裂：- 描述细胞周期的各个阶段及其调控机制。
- 阐述有丝分裂和减数分裂的区别。
8. 遗传变异与进化：- 讨论基因突变的类型及其对生物体的影响。
- 解释自然选择、基因漂变和基因流在生物进化中的作用。
9. 分子遗传学的应用：- 描述分子标记在遗传病诊断和作物改良中的应用。
- 讨论基因组学在疾病机理研究和个性化医疗中的重要性。
10. 生物信息学在分子生物学中的应用：- 描述生物信息学的基本工具和数据库。
- 讨论如何利用生物信息学方法分析基因表达数据和蛋白质结构。
结尾：现代分子生物学的考研题库涵盖了从基础理论到前沿技术，从分子机制到应用实践的广泛内容。
考生在复习时，不仅要掌握理论知识，还要关注学科的最新进展，培养分析问题和解决问题的能力。
希望这些题目能够帮助考生更好地准备考试，深入理解分子生物学的核心概念和应用。
现代分子生物学复习资料
核酸结构与功能一、填空题1．病毒ΦX174及M13的遗传物质都是单链DNA 。
2．AIDS病毒的遗传物质是单链RNA。
3．X射线分析证明一个完整的DNA螺旋延伸长度为 3.4nm 。
4．氢键负责维持A-T间（或G-C间）的亲和力5．天然存在的DNA分子形式为右手B型螺旋。
二、选择题（单选或多选）1．证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是：肺炎球菌在老鼠体内的毒性和T2噬菌体感染大肠杆菌。
这两个实验中主要的论点证据是（C ）。
A．从被感染的生物体内重新分离得到DNA作为疾病的致病剂B．DNA突变导致毒性丧失C．生物体吸收的外源DNA（而并非蛋白质）改变了其遗传潜能D．DNA是不能在生物体间转移的，因此它一定是一种非常保守的分子E．真核心生物、原核生物、病毒的DNA能相互混合并彼此替代2．1953年Watson和Crick提出（ A ）。
A．多核苷酸DNA链通过氢键连接成一个双螺旋B．DNA的复制是半保留的，常常形成亲本-子代双螺旋杂合链C．三个连续的核苷酸代表一个遗传密码D．遗传物质通常是DNA而非RNAE．分离到回复突变体证明这一突变并非是一个缺失突变3．DNA双螺旋的解链或变性打断了互补碱基间的氢键，并因此改变了它们的光吸收特性。
以下哪些是对DNA的解链温度的正确描述？（ CD ）A．哺乳动物DNA约为45℃，因此发烧时体温高于42℃是十分危险的B．依赖于A-T含量，因为A-T含量越高则双链分开所需要的能量越少C．是双链DNA中两条单链分开过程中温度变化范围的中间值D．可通过碱基在260nm的特征吸收峰的改变来确定E．就是单链发生断裂（磷酸二酯键断裂）时的温度4．DNA的变性（ACE ）。
A．包括双螺旋的解链B．可以由低温产生C．是可逆的D．是磷酸二酯键的断裂E．包括氢键的断裂5．在类似RNA这样的单链核酸所表现出的“二级结构”中，发夹结构的形成（AD ）。
A．基于各个片段间的互补，形成反向平行双螺旋B．依赖于A-U含量，因为形成的氢键越少则发生碱基配对所需的能量也越少C．仅仅当两配对区段中所有的碱基均互补时才会发生D．同样包括有像G-U这样的不规则碱基配对E．允许存在几个只有提供过量的自由能才能形成碱基对的碱基6．DNA分子中的超螺旋（ACE ）。
现代分子生物学期末复习题
现代分子生物学复习知识点1．DNA的双螺旋模型特点：螺旋直径2nm，相邻碱基平面垂直距离0.34nm,螺旋结构每隔10个碱基对（base pair, bp）重复一次，间隔为3.4 nm。
其意义：该模型揭示了DNA作为遗传物质的稳定性特征，最有价值的是确认了碱基配对原则，这是DNA复制、转录和反转录的分子基础，亦是遗传信息传递和表达的分子基础。
2．核小体(nucleosome)：染色质的基本结构亚基，由约200 bp的DNA和组蛋白八聚体所组成。
每个核小体含有约200bp的DNA，核心组蛋白H2A、H2B、H3和H4各2份拷贝，1份拷贝的H1组蛋白位于核小体外侧。
H1组蛋白不同组织和物种之间有明显的差异(在酵母中不存在)。
微球菌核酸酶(micrococcal nuclease)处理染色体可得到单个核小体。
每个核小体有2圈DNA。
3．染色体(chromosome)：是指在细胞分裂期出现的一种能被碱性染料强烈染色，并具有一定形态、结构特征的物体。
携带很多基因的分离单位。
只有在细胞分裂中才可见的形态单位。
4．染色体的组成：组蛋白，非组蛋白，DNA ，少量RNA5．组蛋白的特性（组蛋白分为H1、H2A、H2B、H3、H4）：（1）进化上的极端保守性（2）无组织特异性（3）肽链上AA分布的不对称性（4）组蛋白的修饰作用（5）富含赖氨酸的组蛋白H5。
6．原核生物基因组结构特点：（1）基因组小；大多只有一条染色体，且DNA含量（2）结构简练；不转录部分很少且常是控制基因表达的序列（3）存在转录单元；多顺反子mRNA，这些功能相关的RNA和蛋白质基因协同表达。
（4）有重叠基因；同一段DNA能携带两种一同的蛋白质信息，主要是：一个基因完全存在于另一个基因内。
部分重叠：两个基因只有一个碱基对的重叠。
7．C值（C-value)：单倍体基因组中DNA的总量.在真核生物中，每种生物的单倍体，基因组的DNA总量总是恒定的，称为C-值8．C值矛盾（C-value paradox)：一个有机体的C值与它的编码能力缺乏相关性称为 C值矛盾。
现代分子生物学考试
1.简述DNA的一二三级结构特征？一级结构：就是指DNA四种脱氧核苷酸的连接及排列顺序，表示了该DNA分子的化学组成。
①DNA分子是由两条互相平行的脱氧核苷酸长链盘绕而成的；②DNA分子中的脱氧核糖和磷酸交替连接，排在外侧，构成基本骨架，碱基排列在内侧；③两条链上的碱基通过氢键相结合，形成碱基对，它的组成有一定的规律—碱基互补配对原则。
二级结构：是指两条多核苷酸链反相平行盘绕所生成的双螺旋结构。
右手螺旋A—DNA和B—DNA；左手螺旋Z—DNA。
三级结构：DNA双螺旋进一步扭曲盘绕所形成的特定空间结构。
超螺旋结构是DNA高级结构的主要形式，可分为正超螺旋和负超螺旋两大类。
2.DNA复制通常采取哪些方式？复制方式：原核生物和真核生物的DNA复制主要是从固定起点从双向等速复制方式进行。
⑴线性DNA双链的复制：线性DNA——DNA合成从5'端开始——复制叉前进——到达末端，单链被取代。
⑵环状DNA双链的复制：分为θ型、滚环型和D—环型。
①θ型：DNA双链解旋和松开形成两个相反方向复制叉。
②滚环型：单向复制的一种特殊方式。
双链环DNA——复制起始于某一条DNA链上——新生DNA链延伸不断取代母链——复制一圈产生单位长度线性DNA链——继续进行产生多元线性DNA链。
③D—环型：也是单向复制的一种特殊方式。
双链环DNA——固定点解开——高度不对称复制——开始仅以一条母链作为模板链——合成出互补链——代替另一亲本链——形成D环——D环扩增——替代链经过起始点也开始复制——最后形成两个双链环DNA。
3.什么是转座子?分几类？转座子：是存在于染色体DNA上可自主复制和转位的基本单位。
可分为插入序列转座子和复合型转座子。
插入序列转座子：是最简单的转座子，是细菌的一小段可转座元件。
它不含有任何宿主基因而常被称为插入序列。
它们是细菌染色体或质粒DNA的正常组成部分。
复合型转座子：两个插入序列包围一段中央区域，这两个序列中的一个或两个可能使整个元件DNA转座。
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（完整版）现代分子生物学试题现代分子生物学试题Chapter 3 生物信息的传递——从DNA到RNA一、名词解释：1、Transcription2、Coding strand (Sense strand)3、Intron4、RNA editing5、Messenger RNA (mRNA)二、判断正误：1、基因表达包括转录和翻译两个阶段2、mRNA是以有义链为模板进行转录的3、转录起始就是RNA链上第一个核苷酸键的产生4、σ因子的作用是负责模板链的选择和转录的起始5、聚合酶可以横跨40个碱基对，所以解旋的DNA区域也是40个碱基对6、流产式起始是合成并释放2~9个核苷酸的短RNA转录物7、启动子是有义链上结构基因5’端上游区的DNA序列8、大肠杆菌基因中存在-10bp处的TTCACA区9、-35区是指5’到3’方向-35区最后一个碱基离+1碱基为35个bp10、真核基因几乎都是单顺反子三、单选：1、_______号帽子存在于所有帽子结构中A、0号B、1号C、2号D、以上全不是2、在对启动子识别中起关键作用的是_______A、α亚基B、β亚基C、σ因子D、β’亚基3、RNA聚合酶中提供催化部位的是_______A、α+αB、α+βC、α+β’D、β+β’4、_______是细胞内更新率极高不稳定的RNAA、mRNAB、rRNAC、tRNAD、snRNA5、mRNA由细胞核进入细胞质所必需的形式是_______A、5’端帽子B、多聚腺苷酸尾C、ρ因子D、以上都不是6、真核生物RNA聚合酶II所形成的转录起始复合物不包括_______A、TBPB、TFIIAC、TFIICD、TFIID7、真核生物转录的所在空间是_______A、细胞质B、细胞核C、核孔D、线粒体8、ρ因子本质上是一种_______A、核苷酸B、蛋白质C、多糖类D、碱基9、下列不属于原核生物mRNA特征的是_______A、半衰期短B、多顺反子存在C、5’端没有帽子结构D、有内含子10、原核生物中抑制转录延伸的物质是_______A、利福平B、利迪链霉素C、肝素D、α-鹅膏蕈碱四、多选1、生物体内的RNA主要有：A、mRNAB、rRNAC、tRNAD、snRNA2、大肠杆菌的RNA聚合酶全酶是由_______组成A、2α+β+β+σB、2α+β+β’+ωC、σD、核心酶+σ3、三元复合物包括_______A、RNA聚合酶B、DNAC、新生RNAD、开放复合物4、原核生物的起始密码子有_______A、AUGB、AGUC、GUGD、UUG5、下列关于原核生物mRNA的说法正确的是_______A、基因转录一旦开始，核糖体就结合到新生RNA链的5’端B、绝大多数细菌mRNA的半衰期很短C、mRNA降解的速度等于转录的速度D、mRNA以多顺反子的形式存在6、真核生物mRNA中，上游启动子元件是指_______A、TATA序列B、CCAAT序列C、GC序列D、以上都是7、mRNA前体加工包括_______A、5’端加帽B、3’端加polyA尾C、RNA的剪接D、RNA的切割8、RNA的编辑形式有_______A、尿苷酸的缺失B、内含子的切除C、单碱基突变D、尿苷酸的添加9、真核生物mRNA的特点_______A 多顺反子B 单顺反子C 5’帽子结构D 3’多聚腺苷酸尾巴10、操纵子包括_______A 启动子B 调控基因C 结构基因D 终止子五、简答题1、指出DNA多聚酶催化的反应和RNA多聚酶催化的反应之间的差别2、解释两种类型的启动子突变3、为什么RNA聚合酶不需要单链结合蛋白4、开放启动子复合物和封闭启动子复合物间的差别是什么？5、试比较真核生物原核生物mRNA的特征现代分子生物学试题答案Chapter 3 生物信息的传递——从DNA到RNA一、名词解释：1、Transcription：转录是指DNA指导下，由依赖DNA（或DNA指导）的RNA聚合酶催化RNA合成的过程。
现代分子生物学
一．名词解释.1.RNA editing:某些RNA，特别是mRNA的一种加工方式，编辑过的mRNA序列发生了不同于模板DNA的变化,导致了DNA所编码的遗传信息改变。
（Protein which is derived from an RNA which has been modified by RNA editing, a process that changes the nucleotide sequence of an RNA from that of the DNA template encoding it. RNA editing can be due to nucleotide conversion, insertion and/or deletion.）2.S-D sequence：原核生物起始密码上游7-12核苷酸处的一保守且可与16S rRNA 3’端进行碱基互补配对序列称为SD序列,在核糖体与mRNA识别和结合过程中起重要作用。
（A short stretch of nucleotides on a prokaryotic mRNA molecule upstream of the translational start site, that serves to bind to ribosomal RNA and thereby bring the ribosome to the initiation codon on the mRNA. ）3.RT-PCR: 是一种在DNA扩增反应中，以萤光染剂侦测每次聚合酶链锁反应（PCR）循环后产物总量的方法.(Real-time PCR is a method of simultaneous DNA quantification and amplification based on incorporation of a fluorescent reporter dye.)4.promoter：DNA分子上能与RNA聚合酶结合并形成转录起始复合体的区域，在许多情况下，还包括促进这一过程的调节蛋白的结合位点（A region in a DNA molecule at which RNA polymerase and transcription factors bind to facilitates the transcription of a particular gene. Promoters are located near the genes they regulate, on the same strand and typically upstream）5.cis-acting element:影响自身基因表达活性的非编码DNA序列，组成基因转录的调控区。
现代分子生物学试题及答案
Evaluation Only. Created with Aspose.Words. Copyright 2003-2016 Aspose Pty Ltd.第三章DNA生物合成（复制）选择题【A型题】1．依据F．Crik中心法则，遗传信息的传递方式是A．蛋白质→RNA→DNAB．RNA→DNA→蛋白质C．RNA→RNA→DNAD．DNA→RNA→蛋白质E．DNA→DNA→蛋白质2．F．Crik中心法则遗传信息的传递方式不包括A．DNA→rRNAB．DNA→DNAC．RNA→蛋白质D．mRNA→DNAE．DNA→tRNA3．H.Temin对中心法则的补充内容是A．mRNA→蛋白质B．DNA→DNAC．RNA→DNAD．DNA→mRNAE．蛋白质→mRNA4．H.Temin对中心法则的补充内容是A.转录B.逆转录C.翻译D. DNA复制E. RNA复制5.下面说法不正确的是A．转座是RNA→RNAB．转录是DNA→RNAC．复制是DNA→DNAD．逆转录是RNA→DNAE．翻译是RNA→蛋白质6．M.Meselson和F.W.Stahl用15NH4Cl 证明的机制是A．DNA转录为mRNAB. DNA半保留复制C. mRNA翻译为蛋白质D. DNA混合式复制E. DNA全保留复制7．以15N标记DNA双链为模板，当以NH4Cl作氮源复制DNA时，开头产生不含15N的子代DNA分子时在A．第1代B．第2代C．第3代D．第4代E．第5代8．真核DNA生物合成的特点不包括A.半不连续复制B．多复制子复制C．半保留复制D．双向复制E．滚环复制9.假如以15N标记的DNA双链作模板，NH4Cl作氮源进行复制，对子一代DNA分子做密度梯度离心分析，其密度带应位于A．重DNA带下方B．一般DNA带C．一般DNA带上方D.重DNA带E．一般带与重DNA带之间10．证明DNA半保留复制的技术是A．Sanger法B.密度梯度离心C.α互补D．斑点杂交E.蛋白质印迹11．真核生物DNA复制的方式是A.滚环复制B. D环复制C.全保留复制D.混合式复制E.半保留复制12．DNA半保留复制使子代保留了亲代DNA的全部遗传信息，其表现形式是A. DNA互补双链碱基序列的全都性B.代与代之间DNA碱基序列的全都性C.偶数链DNA碱基序列的全都性D.有规律间隔的碱基序列全都性E.对应链DNA碱基序列的全都性13．关于双向复制，错误的是A.真核生物是多复制子复制B．原核生物只有一个复制起点C．原核生物是双复制子复制D．DNA从起始点向两个方向解链E．每个起始点产生两个复制叉14．有关DNA复制，错误的是A．领头链复制方向与解链方向相同B．领头链连续复制C．顺着解链方向生成的子链是随从链D．子链延长方向是5'→3'E．不连续片段称为岡崎片段15.关于复制的化学反应，错误的是A.新链延长只能是5'→3'方向B.形成3', 5'磷酸二酯键C.dNTP的β、γ-P以PPi形式释放D.DNA复制的底物是dNMPE.α-P与子链末端核糖3'-OH连接16．DNA-polⅢ具有的特点是A．α亚基是复制保真性所必需的B．α、β、θ亚基组成核心酶C．比活性低于DNA-pol ID．催化3'，5'磷酸二酯键生成E.具有5'→3'核酸外切酶活性17．关于DNA-polⅢ，不正确的是A．β亚基起夹稳模板链的作用B．3'→5'外切核酸酶作用C．5'→3'聚合酶活性作用D．线粒体DNA合成的酶E.核心酶以外的亚基称γ-复合物18．关于DNA-polⅢ的叙述，错误的是A．有3'→5'外切酶活性B．细胞中的分子数最少C．DNA复制延长的酶D．有5'→3'外切酶活性E．有5'→3'聚合酶活性19．DNA-polⅢ亚基功能的叙述，错误的是A．亚基形成异源多聚体B．α、ε、θ组成核心酶C．10种亚基构成全酶D．ε亚基与复制保真性有关E．10种亚基又称γ-复合物20．关于DNA-polⅠ，不正确的是A．5'→3'核酸外切酶活性B．3'→5'聚合酶活性C．5'→3'聚合酶活性D．3'→5'核酸外切酶活性E．Klenow片段有3'→5'外切酶活性21．DNA-polⅠ的作用不包括A．DNA修复时填补空隙B．DNA复制时填补空隙C．合成RNA引物D．校读复制中的错误E．能催化延长20个核苷酸左右22．关于DNA-polⅠ的叙述，错误的是A．3'→5'酶活性水解错配碱基B．填补复制中消灭的空隙C．5'→3'酶活性切除突变片段D．填补修复中消灭的空隙E．内切酶活性切除引物23．关于DNA-polⅠ的叙述，错误的是A．有即时校读功能B．细胞中的分子数最多C．能填补DNA修复中的空隙D．可被水解为大、小片段E．是大肠杆菌主要的复制酶24．关于DNA-pol的叙述，正确的是A．polⅡ能校读复制中的错误B．polⅢ参与SOS修复C．polⅢ是催化复制延长的酶D．polⅡ对模板的特异性最高E．polⅠ的比活性最高25．关于真核生物DNA-pol的叙述，不正确的是A．已发觉polα、β、γ、δ、εB．polβ还有拓扑酶的作用C．polε有校读、修复作用D．polα具有引物酶活性E．polγ催化线粒体DNA合成26．真核生物DNA-pol作用,正确的是A．pol-α有切除修复的功能B．pol-β是线粒体DNA复制的酶C．pol-γ有引物酶活性D．pol-ε作用与polⅡ相像E.pol-δ相当于原核生物pol Ⅲ27．原核和真核DNA-pol都不能A．辨别复制起始点B．以dNTP作底物C．5'→3'方向延长DNA子链D．生成冈崎片段E.需RNA引物28．DNA复制的保真性作用不包括A．真核生物DNA-polδ即时校读功能B．引物酶的即时校读功能C．DNA-pol对碱基的选择功能D．严格的碱基配对规律E.3'→5'外切酶活性切除错配碱基29．关于DNA解螺旋酶的叙述，错误的是A．Dna B蛋白是解螺旋酶B．rep蛋白是解螺旋酶C．rep蛋白作用时需ATP供能D．DnaC蛋白帮助Dna B发挥作用E．Dna B蛋白能辨别起始点30．下面的叙述，不正确的是A．DnaG蛋白催化游离NTP聚合B．DnaB蛋白就是rep蛋白C．DnaG蛋白是引物酶D．rep蛋白解链不须ATP供能E. rep蛋白又称解螺旋酶31．DNA拓扑异构酶的作用是A．辨别复制起始点B．复制时理顺DNA链C．稳定DNA分子拓扑构象D．解开DNA双螺旋间氢键E．使DNA分子成为正超螺旋32．DNA拓扑异构酶的作用不包括A．拓扑酶共有5种B．连接磷酸二酯键C．酶Ⅰ切断DNA双链的一股This document was truncated here because it was created in the Evaluation Mode.。
(已整理)现代分子生物学复习要点和习题
第一章绪论分子生物学分子生物学的基本含义(p8)分子生物学是研究核酸、蛋白质等所有生物大分子的形态、结构特征及其重要性、规律性和相互关系的科学，是人类从分子水平上真正揭开生物世界的奥秘，由被动地适应自然界转向主动地改造和重组自然界的基础学科。
分子生物学与其它学科的关系分子生物学是由生物化学、生物物理学、遗传学、微生物学、细胞学、以至信息科学等多学科相互渗透、综合融会而产生并发展起来的，凝聚了不同学科专长的科学家的共同努力。
它虽产生于上述各个学科，但已形成它独特的理论体系和研究手段，成为一个独立的学科。
生物化学与分子生物学关系最为密切:生物化学是从化学角度研究生命现象的科学，它着重研究生物体内各种生物分子的结构、转变与新陈代谢。
传统生物化学的中心内容是代谢，包括糖、脂类、氨基酸、核苷酸、以及能量代谢等与生理功能的联系。
分子生物学则着重阐明生命的本质----主要研究生物大分子核酸与蛋白质的结构与功能、生命信息的传递和调控。
细胞生物学与分子生物学关系也十分密切:传统的细胞生物学主要研究细胞和亚细胞器的形态、结构与功能。
探讨组成细胞的分子结构比单纯观察大体结构能更加深入认识细胞的结构与功能，因此现代细胞生物学的发展越来越多地应用分子生物学的理论和方法。
分子生物学则是从研究各个生物大分子的结构入手，但各个分子不能孤立发挥作用，生命绝非组成成分的随意加和或混合，分子生物学还需要进一步研究各生物分子间的高层次组织和相互作用，尤其是细胞整体反应的分子机理，这在某种程度上是向细胞生物学的靠拢。
第一章序论1859年发表了《物种起源》，用事实证明“物竞天择，适者生存”的进化论思想。
指出：物种的变异是由于大自然的环境和生物群体的生存竞争造成的，彻底否定了“创世说”。
达尔文第一个认识到生物世界的不连续性。
意义：达尔文关于生物进化的学说及其唯物主义的物种起源理论，是生物科学史上最伟大的创举之一，具有不可磨灭的贡献。
细胞学说建立及其意义德国植物学家施莱登和动物学家施旺共同提出：一切植物、动物都是由细胞组成的，细胞是一切动植物的基本单位。
现代分子生物学实验重点
现代分子生物学实验考试复习重点一．判断题1.Maker(分子量标准)在DNA电泳中起荧光染料（对照）的作用。
（错）2.用作DNA片段克隆的载体除质粒外，还有噬菌体和人工染色体等。
（对）3.PCR扩增的特异性取决于引物和模板DNA结合的特异性。
（对）4.碱变性发提取质粒是根据碱性条件下染色体DNA 不变性（变性）而质粒DNA变性（不变性）的原理。
（错）5.基因工程中常用的限制性内切酶可对DNA进行特异性的识别和切割。
（对）6.用于感受态细胞制备的大肠杆菌菌株一般为限制-修饰系统缺陷的变异株。
操作中需要无菌、低温且动作要轻柔。
（对）7.大肠杆菌转化过程中，细菌在LB液体培养基中进行恢复培养时，（不）应添加相应的抗生素。
（错）8、转化中的蓝白颜色筛选，在LB固体培养基的平皿中添加IPTG的作用是作为β-半乳糖苷酶作用的底物（诱导）。
（错）X-Gal为生色底物。
9.CTAB(十六烷基三乙基溴化铵)是一种去污剂，可破坏细胞膜，当低离子强度的溶液中CTAB与蛋白质和多聚糖形成复合物，而不（可以）能沉淀核酸，因此将核酸与蛋白质等细胞内容物分开。
（错）高离子强度的溶液不能沉淀核酸。
10.一般可以用异丙醇和乙醇沉淀DNA和RNA。
（对）二．问答1.PCR实验原理：聚合酶链式反应（polymerase chain reaction）简称PCR技术，是一种体外扩增特异DNA片段的技术。
PCR技术实际上是在模板DNA、引物和4种脱氧核苷酸存在的条件下依赖于DNA聚合酶的酶促合成反应。
PCR技术的特异性取决于引物和模板DNA结合的特异性。
反应分为三步：1.变性：在高温条件下，DNA双链解离形成单链DNA；2.退火：当温度突然降低时引物与其互补的模板在局部形成杂交链；3.延伸：在DNA聚合酶、dNTPs和Mg2+存在的条件下，聚合酶催化以引物为起始点的DNA链延伸反应。
以上三步为一个循环，每一循环的产物可以作为下一个循环的模板，几十个循环之后，介于两个引物之间的特异性DNA片段得到了大量复制，数量可达到~106~7个拷贝。
现代分子生物学期末试题
分子生物学期末考试试题一、名词解释1、反式作用因子：能直接或间接地识别或结合各类顺式作用元件核心序列，参与调控靶基因转录效率的蛋白质。
2、基因家族：在基因进化过程中一个基因通过基因重复产生两个或更多的拷贝，这些基因构成一个基因家族，是具有显著性的一组基因，编码相似的蛋白质的产物。
3、C值矛盾：C值是指真核生物单倍体的DNA含量，一般的，真核生物的进化程度越高，C值越大，但在一些两栖类生物中，其C值却比哺乳动物大的现象。
原因是它含有大量的重复序列，而且功能DNA序列大多被不编码蛋白质的非功能DNA所隔开。
4、反式作用因子：是能直接或间接的识别或结合在各类顺式作用元件核心序列上，参与调控靶基因转录效率的蛋白质5、核型：指一个物种所特有的染色体数目和每一条染色体所特有的形态特征。
6、RNA editing：转录后的RNA在编码区发生碱基的突变、加入或丢失等现象。
7、分子伴侣（molecular chaperone）是一类序列上没有相关性担忧共同功能的保守性蛋白质，它们在细胞内能帮助其他多肽进行正确的折叠、组装、运转和降解7、8、增强子：是指能使与它连锁的基因转录频率明显增加的DNA序列。
二、判断：1、真核生物所有的mRNA都有polyA结构。
（X ）组蛋白的mRNA没有2、由于密码子存在摇摆性，使得一种tRNA分子常常能够识别一种以上同一种氨基酸的密码子。
（√ ）3、大肠杆菌的连接酶以ATP作为能量来源。
（X ）以NAD作为能量来源4、tRNA只在蛋白质合成中起作用。
（X ）tRNA还有其它的生物学功能，如可作为逆转录酶的引物5、DNA聚合酶和RNA聚合酶的催化反应都需要引物。
（X ）RNA聚合酶的催化反应不需要引物6、真核生物蛋白质合成的起始氨基酸是甲酰甲硫氨酸（X ）真核生物蛋白质合成的起始氨基酸是甲硫氨酸7、质粒不能在宿主细胞中独立自主地进行复制（X ）质粒具有复制起始原点，能在宿主细胞中独立自主地进行复制8、RNA因为不含有DNA基因组，所以根据分子遗传的中心法则，它必须先进行反转录，才能复制和增殖。
现代分子生物学期末复习题
Evaluation Only. Created with Aspose.Words. Copyright 2003-2016 Aspose Pty Ltd.现代分子生物学复习学问点1．现代分子生物学争辩内容：DNA重组技术（基因工程），基因表达调控争辩，生物大分子的结构与功能争辩，基因组、功能基因组与生物信息学争辩。
2．人类基因组争辩包括遗传图（Genetic Map）绘制、物理图（Physical Map）构建、测序、转录图（Expression Profiling）绘制和人类基因组的序列图及基因鉴定等方面的工作。
3．DNA的双螺旋模型特点：螺旋直径2nm，相邻碱基平面垂直距离0.34nm,螺旋结构每隔10个碱基对（base pair, bp）重复一次，间隔为3.4 nm。
其意义：该模型揭示了DNA作为遗传物质的稳定性特征，最有价值的是确认了碱基配对原则，这是DNA复制、转录和反转录的分子基础，亦是遗传信息传递和表达的分子基础。
该模型的提出是20世纪生命科学的重大突破之一，它奠定了生物化学和分子生物学乃至整个生命科学飞速进展的基石。
4．一级结构的表示法：结构式，线条式，字母式5．双螺旋DNA的松开导致负超螺旋，而拧紧则导致正超螺旋。
负超螺旋是细胞内常见的DNA高级结构形式。
正超螺旋是过度缠绕的双螺旋，目前仅在一种嗜热菌内发觉了活体内的正超螺旋。
超螺旋DNA的性质：结构紧密，粘度较低，浮力密度大，沉降速度快。
6．复制子(replicon)：从复制原点到终点，组成一个复制单位，称为复制子。
7．复制眼（Replication eye）：在一个长的未复制区域内DNA已经复制的区域8．复制叉（Replication fork）:双螺旋DNA两条亲本链分开使复制能进行的部位。
9．半保留复制 (semiconsertive replication)：由于子代DNA分子中一条链来自亲代，另一条链是新合成的，这种复制方式称为半保留复制。
分子生物考试题库及答案
分子生物考试题库及答案一、选择题1. 基因突变是指：A. 基因序列中的一个或多个碱基发生改变B. 染色体结构的改变C. 基因表达的改变D. 基因在染色体上的移动答案：A2. 以下哪个不是DNA聚合酶的功能？A. 复制DNAB. 校对错误C. 切割RNAD. 连接DNA片段答案：C3. 转录过程中，RNA聚合酶的主要作用是：A. 连接氨基酸形成蛋白质B. 合成mRNAC. 校对DNA序列D. 催化DNA复制答案：B4. 以下哪个是真核生物特有的基因结构？A. 启动子B. 内含子C. 外显子D. 增强子答案：B5. 蛋白质合成过程中，tRNA的主要功能是：A. 携带氨基酸B. 提供能量C. 催化反应D. 校对氨基酸序列答案：A二、填空题6. DNA分子的双螺旋结构是由________和________两种碱基配对形成的。
答案：腺嘌呤（A）和胸腺嘧啶（T），鸟嘌呤（G）和胞嘧啶（C）7. 真核生物的基因表达调控主要发生在________阶段。
答案：转录8. CRISPR-Cas9系统是一种________技术，用于基因编辑。
答案：基因编辑9. 细胞周期中，DNA复制发生在________阶段。
答案：S期10. 核糖体是蛋白质合成的场所，它由________和________组成。
答案：rRNA和蛋白质三、简答题11. 简述PCR技术的原理及其应用。
答案：PCR（聚合酶链反应）技术是一种分子生物学方法，用于快速扩增特定的DNA序列。
它的原理是利用DNA聚合酶在已知引物的引导下，通过反复的变性、退火和延伸步骤，指数级增加目标DNA的数量。
PCR技术广泛应用于遗传疾病的诊断、法医学、遗传工程和生物多样性研究等领域。
12. 描述细胞凋亡与细胞坏死的区别。
答案：细胞凋亡是一种有序的、程序化的细胞死亡过程，通常由内部信号触发，对维持组织稳态和发育至关重要。
细胞凋亡过程中，细胞体积缩小，细胞核凝聚，最终细胞被邻近细胞或吞噬细胞清除，不引起炎症反应。
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现代分子生物学复习题现代分子生物学一.填空题1.DNA的物理图谱是DNA分子的限制性内切酶酶解片段的排列顺序。
2.核酶按底物可划分为自体催化、异体催化两种类型。
3.原核生物中有三种起始因子分别是IF-1、 IF-2 和IF-3 。
4.蛋白质的跨膜需要信号肽的引导，蛋白伴侣的作用是辅助肽链折叠成天然构象的蛋白质。
5.真核生物启动子中的元件通常可以分为两种：核心启动子元件和上游启动子元件。
6.分子生物学的研究内容主要包含结构分子生物学、基因表达与调控、DNA重组技术三部分。
7.证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是肺炎球菌感染小鼠、T2噬菌体感染大肠杆菌这两个实验中主要的论点证据是：生物体吸收的外源DNA改变了其遗传潜能。
8.hnRNA与mRNA之间的差别主要有两点： hnRNA在转变为mRNA的过程中经过剪接、mRNA的5′末端被加上一个m7pGppp帽子，在mRNA3′东隅已逝 2 桑榆非晚！末端多了一个多聚腺苷酸(polyA)尾巴。
9.蛋白质多亚基形式的优点是亚基对DNA的利用来说是一种经济的方法、可以减少蛋白质合成过程中随机的错误对蛋白质活性的影响、活性能够非常有效和迅速地被打开和被关闭。
10.质粒DNA具有三种不同的构型分别是： SC构型、 oc构型、 L构型。
在电泳中最前面的是SC构型。
11.哺乳类RNA聚合酶Ⅱ启动子中常见的元件TATA、GC、CAAT所对应的反式作用蛋白因子分别是TFIID 、SP-1 和 CTF/NF1 。
12.与DNA结合的转录因子大多以二聚体形式起作用，转录因子与DNA结合的功能域常见有以下几种螺旋-转角-螺旋、锌指模体、碱性-亮氨酸拉链模体。
13.转基因动物常用的方法有：逆转录病毒感染法、DNA 显微注射法、胚胎干细胞法。
14.RNA聚合酶Ⅱ的基本转录因子有、TFⅡ-A、TFⅡ-B、TFII-D、TFⅡ-E他们的结合顺序是： D、A、B、E 。
其中TFII-D的功能是与TATA盒结合。
15.酵母DNA按摩尔计含有32.8%的T,则A为_32.8%_,G为_17.2%_和C为_17.2%__。
16.操纵子包括_调控基因、调控蛋白结合位点和结构基因。
17.DNA合成仪合成DNA片段时，用的原料是模板DNA东隅已逝 3 桑榆非晚！‘TAQ 、引物、缓冲液、dNTP。
18.在琼脂糖电泳中，DNA会向正极移动。
19.染色体包括蛋白质、染色体两大部分。
20.环状DNA双链的复制主要可分为θ形、滚环形、D-环形三种类型。
21.转录的基本过程包括转录的起始、延伸、终止。
22.半乳糖对细菌有双重作用；一方面可以作为碳源供细胞生长；另一方面它又是细胞壁的成分。
所以需要一个不依赖于cAMP—CRP的启动子S2进行本底水平的永久型合成；同时需要一个依赖于cAMP—CRP的启动子S1对高水平合成进行调节。
有G时转录从 S2 开始，无G时转录从 S1 开始。
23.DNA重组技术也称为基因克隆或分子克隆。
最终目的是把一个生物体中的遗传信息DNA转入另一个生物体。
典型的DNA重组实验通常包含以下几个步骤：①提取供体生物的目的基因或称外源基因，酶接连接到另一DNA分子上克隆载体，形成一个新的重组DNA分子。
②将这个重组DNA分子转入受体细胞并在受体细胞中复制保存，这个过程称为转化。
③对那些吸收了重组DNA的受体细胞进行筛选和鉴定。
④对含有重组DNA的细胞进行大量培养，检测外援基因是否表达。
24.质粒的复制类型有两种：受到宿主细胞蛋白质合成的严格控制的称为严紧型质粒，不受宿主细胞蛋白质合成的严格控制称为松弛型质粒。
东隅已逝 4 桑榆非晚！25.PCR的基本反应过程包括：变性、退火、延伸三个阶段。
PCR的反应体系要具有以下条件： a、被分离的目的基因两条链各一端序列相互补的 DNA引物约20个碱基左右。
b、具有热稳定性的酶如：TagDNA聚合酶。
c、dNTP，d、作为模板的目的DNA序列26.哺乳类RNA聚合酶Ⅱ启动子中常见的元件TATA、GC、CAAT所对应的反式作用蛋白因子分别是 TFIID 、 SP-1和CTF/NF1。
27.RNA聚合酶Ⅱ的基本转录因子有、TFⅡ-A、TFⅡ-B、TFII-D、TFⅡ-E他们的结合顺序是：D、A、B、E。
其中TFII-D的功能是与TATA盒结合。
二.名词解释质粒:是染色体外能够进行自主复制的遗传单位，包括真核生物的细胞器和细菌细胞中染色体以外的脱氧核糖核酸(DNA)分子。
现在习惯上用来专指细菌、酵母菌和放线菌等生物中染色体以外的DNA分子。
在基因工程中质粒常被用做基因的载体。
启动子:是DNA分子可以与RNA聚合酶特异结合的部位，也就是使转录开始的部位。
在基因表达的调控中，转录的起始是个关键。
常常某个基因是否应当表达决定东隅已逝 5 桑榆非晚！于在特定的启动子起始过程。
信号肽：在蛋白质合成过程中N端有15~36个氨基酸残基的肽段，引导蛋白质的跨膜。
核受体:细胞内受体分布于胞浆或核内，本质上都是配体调控的转录因子，均在核内启动信号转导并影响基因转录，统称核受体。
hnRNA:核不均一RNA，即mRNA的前体，经过5’加帽和 3’酶切加多聚A，再经过RNA的剪接，将外显子连接成开放阅读框，通过核孔进入细胞质就可以作为蛋白质合成的模板了。
分子杂交:互补的核苷酸序列通过Walson-Crick碱基配对形成稳定的杂合双链分子DNA分子的过程称为杂交。
杂交过程是高度特异性的,可以根据所使用的探针已知序列进行特异性的靶序列检测。
基因组文库:将某种生物的基因组DNA切割成一定大小的片段，并与合适的载体重组后导入宿主细胞，进行克隆。
这些存在于所有重组体内的基因组DNA片段的集合，即基因组文库，它包含了该生物的所有基因。
密码的简并性:由一种以上密码子编码同一个氨基酸的现象称为密码的简并性衰减子：在色氨酸操纵子中，当mRNA合成起始以后，除东隅已逝 6 桑榆非晚！非培养基中完全没有色氨酸，否则，转录总是在长162bp的前导区终止，产生一个仅有140个核苷酸的RNA分子，终止trp基因转录，因为转录终止发生在这一区域，并且这种终止是被调节的，这个区域被称为衰减子。
DNA拓扑异构酶：DNA在细胞内往往以超螺旋状态存在，DNA 拓扑酶催化同一DNA分子不同超螺旋状态之间的转变。
DNA拓扑异构酶有两类，大肠杆菌的ε蛋白(MW-110000)就是一种典型的拓扑异构酶Ⅰ.它的作用是暂时切断一条DNA链，形成酶-DNA共价中间物而使超螺旋DNA 松弛化，然后再将切断的单链DNA连接起来，而不需要任何辅助因子。
而大肠杆菌中的DNA旋转酶(DNAgyrase)则的典型的拓扑异构酶Ⅱ，能将负超螺旋引入DNA分子，该酶能暂时性地切断和重新连接双链DNA，同时需要ATP水解为ADP以供能。
基因表达：遗传信息从DNA到RNA再到蛋白质的过程。
前导肽：分析色氨酸操纵子前导肽的序列发现，它包括起始密码子AUG和终止密码子UGA；如果翻译起始于AUG，应该产生一个14个氨基酸的多肽，这个假设的多肽被称为前导肽（实际上还没有观察到）。
启动子：启动子是DNA分子可以与RNA聚合酶特异结合的东隅已逝 7 桑榆非晚！部位，也就是使转录开始的部位。
在基因表达的调控中，转录的起始是个关键。
常常某个基因是否应当表达决定于在特定的启动子起始过程。
DNA分子克隆技术：（也称基因克隆技术）在体外将DNA分子片段与载体DNA片段连接，转入细胞获得大量拷贝的过程中DNA分子克隆(或基因克隆)。
其基本步骤包括：制备目的基因→将目的基因与载体用限制性内切酶切割和连接，制成DNA重组→导入宿主细胞→筛选、鉴定→扩增和表达。
载体（vecors）在细胞内自我复制，并带动重组的分子片段共同增殖，从而产生大量的DNA 分子片段。
主要目的是获得某一基因或NDA片段的大量拷贝，有了这些与亲本分子完全相同的分子克隆，就可以深入分析基因的结构与功能，随着引入的DNA 片段不同，有两种DNA库，一种是基因组文库（genomic library）,另一种是cDNA库。
G蛋白：受体与配体结合后即与膜上的偶联蛋白结合，使其释放活性因子，再与效应器发生反应。
位于受体与效应器之间的则是偶联蛋白。
目前所知的偶联蛋白种类较多，都属于结构和功能极为类似的一个家族，由于它们都能结合并水解GTP，所以通常称G蛋白，即鸟苷酸调节蛋白（guanine nucleotide regulatory东隅已逝 8 桑榆非晚！protein）。
受体型酪氨酸激酶：蛋白酪氨酸激酶(protein tyrosine kinase，PTK)是一组催化酪氨酸残基磷酸化的酶，他们通过从三磷酸腺苷上转移一个磷原子到酪氨酸残基上，而使底物蛋白活化. 目前，已发现PTK有100多个家族成员，他们通过活化底物蛋白，参与细胞的信号转导，最终，这些信号转导入细胞核内，引起某些基因表达水平的改变，使诸如细胞生长之类的复杂的细胞功能得以调节. 因此在调节细胞的分化、生长和激活中起到重要作用.根据PTK的结构，可分为受体型和非受体型PTK两大类，前者又称跨膜PTK，后者又称细胞内PTK. 生长因子受体PTK(受体型酪氨酸激酶或RTK): 这一类蛋白酪氨酸激酶为跨膜蛋白，其胞外部分为配体结合区，中间有跨膜区，胞内部分含有蛋白酪氨酸激酶的催化结构域. 根据他们的结构不同可分为，表皮生长因子受体(EGFR)家族、胰岛素受体家族、血小板衍生生长因子(PDGF)受体家族和成纤维细胞生长因子受体(FGFR)家族.cDNA与cccDNA：cDNA是由mRNA通过反转录酶合成的双链DNA；cccDNA是游离于染色体之外的质粒双链闭合环形DNA。
东隅已逝 9 桑榆非晚！CAP：环腺苷酸（cAMP）受体蛋白CRP（cAMP receptor protein ），cAMP与CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP（cAMP activated protein ）回文序列：DNA片段上的一段所具有的反向互补序列，常是限制性酶切位点。
micRNA：互补干扰RNA或称反义RNA，与mRNA序列互补，可抑制mRNA的翻译。
核酶：具有催化活性的RNA，在RNA的剪接加工过程中起到自我催化的作用。
信号肽：在蛋白质合成过程中N端有15~36个氨基酸残基的肽段，引导蛋白质的跨膜。
弱化子：在操纵区与结构基因之间的一段可以终止转录作用的核苷酸序列。
上游启动子元件：是指对启动子的活性起到一种调节作用的DNA序列，-10区的TATA、-35区的TGACA及增强子，弱化子等。
DNA探针：是带有标记的一段已知序列DNA，用以检测未知序列、筛选目的基因等方面广泛应用。
SD序列：是核糖体与mRNA结合序列，对翻译起到调控作用。