RNA 干扰 Cofilin-1基因沉默对人肝癌细胞株 Huh-7侵袭和转移能力的影响

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RNA干扰CD151基因表达抑制肝癌细胞侵袭

ｄｅｒ，ｈｅｎｃｅｎｏｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ．ＴｈｅｎｔｈｅｔｏｔａｌＲＮＡａｎｄｐｒｏｔｅｉｎｌｅｖｅｌｓｏｆＣＤ１５１ｗｅｒｅｍｅａｓｕｒｅｄｂｙｑＰＣＲａｎｄ
ＨｕａｚｈｏｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｗｕｈａｎ４３００３０，Ｃｈｉｎａ）［Ａｂｓｔｒａｃｔ］０ｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｓｔｕｄｙｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆＣＤ１５１－ｓｉＲＮＡｏｎｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＣＤ１５１ｇｅｎｅ，ｃｅｌｌｍｅ —
（中图分类号］Ｒ７３５．７
（文献标识码）Ａ
ＤＯＩ：１０．３８７０／ｚｇｚｚｈｘ．２０１４．０２．００１
ＥｆｆｅｃｔｏｆＣＤ１５１ＧｅｎｅｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｂｙｓｉＲＮＡｏｎｉｎｖａｓｉｏｎａｎｄｍｅｔａｓｔａｓｉｓｏｆｈｕｍａｎｈｅｐａｔｏｍａＨｅｐＧ２ｃｅｌｌｓ
第２３卷第２期
２０１４年Βιβλιοθήκη ４月中国组织化学与细胞化学杂志
ＣＨＩＮＥＳＥＪＯＵＲＮＡＬ０ＦＹＡＮＤＣＹＴ０ＣＨＥＭＩＳＴＲＹ

RNA干扰技术在抗癌研究中的应用

RNA干扰技术在抗癌研究中的应用引言：癌症是当今世界面临的一大挑战，而抗癌研究一直是科学家们的重点关注领域。

近年来，RNA干扰技术作为一种新兴的基因调控方法，正在逐渐展现其在抗癌研究中的巨大潜力。

本文将介绍RNA干扰技术的原理、应用以及在抗癌研究中的进展。

一、RNA干扰技术的原理RNA干扰技术是一种通过沉默特定基因表达的方法。

其原理是利用双链RNA分子（small interfering RNA，siRNA）或长链非编码RNA（long non-coding RNA，lncRNA）与目标mRNA序列互补配对，从而导致目标mRNA的降解或转录抑制。

这种基因调控机制被广泛应用于基因功能研究和药物开发领域。

二、RNA干扰技术的应用1. 基因功能研究：RNA干扰技术可以通过靶向特定基因，使其表达受到干扰，从而研究该基因在细胞生理和病理过程中的功能。

通过RNA干扰技术，科学家们可以揭示癌症相关基因的作用机制，为癌症的发生和发展提供新的认识。

2. 药物靶点筛选：RNA干扰技术可以通过沉默癌症相关基因，评估其在肿瘤生长和转移中的重要性，从而为药物靶点的筛选提供依据。

这种筛选方法可以加速抗癌药物的研发过程，提高药物的准确性和有效性。

3. 抗癌治疗：RNA干扰技术可以通过靶向癌症相关基因，抑制其表达，从而达到抗癌治疗的目的。

临床研究已经证明，RNA干扰技术对于某些癌症类型具有显著的治疗效果。

例如，通过靶向癌细胞中的特定基因，可以使癌细胞的增殖和转移受到抑制，从而延长患者的生存期。

三、RNA干扰技术在抗癌研究中的进展1. 抗血液系统肿瘤：RNA干扰技术在治疗白血病、淋巴瘤等血液系统肿瘤方面取得了显著进展。

通过靶向癌细胞中的特定基因，可以有效抑制癌细胞的增殖和转移，提高患者的生存率。

2. 抗实体肿瘤：RNA干扰技术在治疗实体肿瘤方面也取得了一定的突破。

通过靶向肿瘤细胞中的关键基因，可以抑制肿瘤细胞的增殖和侵袭能力，从而达到抗癌治疗的效果。

RNA干扰与基因沉默

RNA干扰与基因沉默RNA干扰（RNA interference, RNAi）是一种通过特定RNA分子介导的基因沉默机制，被广泛应用于生物学研究、基因治疗等领域。

本文将深入探讨RNA干扰的原理、应用及未来发展方向。

一、RNA干扰的原理RNA干扰是一种高度保守且广泛存在于真核生物中的生物学过程。

它主要通过三种类型的RNA分子实现基因沉默：microRNA （miRNA）、small interfering RNA（siRNA）和Piwi-interacting RNA （piRNA）。

其中，siRNA是最为常见和被广泛应用的一种。

在RNA干扰中，siRNA与RNA诱导酶复合物结合形成RNA诱导沉默复合物（RISC），RISC会通过碱基互补的方式与靶向RNA结合，并介导靶向RNA的降解，从而达到沉默该基因的效果。

这一过程使得基因的转录和翻译被有效地抑制，实现基因的沉默。

二、RNA干扰的应用1. 基因功能研究：RNA干扰技术被广泛应用于基因功能的研究中。

通过设计特定的siRNA，可以实现对目标基因的沉默，从而观察基因沉默对生物体的生理和生化过程产生的影响，揭示基因在细胞和生物体中的作用机制。

2. 疾病治疗：RNA干扰技术在基因治疗领域具有巨大潜力。

通过设计特异性的siRNA，可以实现对致病基因的沉默，从而治疗遗传性疾病、肿瘤和病毒感染等多种疾病。

此外，RNA干扰还可以用于研发新型药物和治疗手段。

3. 植物保护：在植物领域，RNA干扰技术也被广泛应用于植物保护。

通过设计特定的siRNA，可以实现对害虫和病原菌基因的沉默，从而提高作物的抗病虫性，减少对农药的依赖，实现绿色农业的发展。

三、RNA干扰的未来发展方向随着RNA干扰技术的不断发展，未来有望在以下几个方面取得重要进展：1. 靶向性增强：未来的RNA干扰技术将更加注重提高siRNA的靶向性，减少对非靶向基因的影响，从而提高沉黙效率和生物安全性。

2. 交叉学科应用：RNA干扰技术将与生物信息学、纳米技术等学科相结合，开拓全新的应用领域，如基因组编辑、精准医学等。

RNA干扰与基因沉默

RNA干扰与基因沉默随着生物技术和分子生物学的发展，RNA干扰技术被广泛应用于基因沉默、基因治疗和疾病研究等领域。

RNA干扰（RNA interference，简称RNAi）指的是一种生物体内通过RNA分子对特定mRNA（信使RNA）进行特异性降解的现象，是一种基因表达调控的机制。

该技术构建了一个全新的RNA干扰系统，在生物学领域具有重要的研究价值。

RNA干扰的基本原理和机制RNA干扰的基本原理是，人工合成一种小分子RNA（小干扰RNA，siRNA），并将其导入到细胞内，使其与同源性mRNA 配对结合，导致mRNA的降解或翻译过程的抑制，从而实现对该mRNA的沉默。

具体来讲，RNA干扰分为两类：siRNA阻遏和microRNA（miRNA）干预。

siRNA阻遏是指通过人工合成siRNA，将其导入细胞，进而与靶mRNA反向互补配对结合，触发RNA酶物质切割mRNA，从而导致其降解并沉默。

而miRNA干预是指基于细胞自然生理过程中存在的miRNA机制来进行干预。

在生物体内，miRNA通过与mRNA配对结合，形成mRNA与核酸互补序列，从而抑制mRNA的翻译或加速mRNA的降解。

RNA干扰通过维持siRNA或miRNA与mRNA的互补杂交，从而控制特定基因的表达。

RNA干扰的应用RNA干扰的应用主要有两种类型，基因沉默和基因治疗。

其中，基因沉默广泛应用于生物学研究领域，而基因治疗主要应用于临床医学领域。

在生物学研究中，RNA干扰被广泛用于功能基因组学、转录组学、生物工程和病毒抑制等领域。

例如，RNA干扰技术可以用于基因的敲除和去活、基因表达的高通量分析、蛋白质相互作用和信号转导的研究等。

在临床医学领域，RNA干扰主要用于基因治疗和肿瘤治疗。

基于RNA干扰技术，已经研发出多个RNA干扰药物，包括Alnylam、GeneSilencing、RiboBio等。

这些药物已经被用于治疗多种疾病，如糖尿病、癌症、病毒性感染等。

RNA干扰技术在基因沉默与功能解析中的应用

RNA干扰技术在基因沉默与功能解析中的应用引言RNA干扰（RNA interference，RNAi）技术是一种重要的基因调控方法，该技术可通过介导RNA的降解或抑制翻译的方式靶向沉默特定基因。

自从1998年发现RNA干扰的现象以来，科学家们已经广泛应用此技术在不同生物体系中研究基因功能。

本文将讨论RNA干扰技术在基因沉默与功能解析中的应用。

一、RNA干扰的基本原理RNA干扰是一种高度保守的生物学机制，在多种生物中都存在。

其基本过程分为两个阶段：小干扰RNA（small interfering RNA，siRNA）的产生和干扰复合体的形成。

小干扰RNA（siRNA）是RNA干扰的关键组分。

siRNA通过外源或内源方法产生，随后与RNA诱导沉默复合体（RNA-induced silencing complex，RISC）结合。

RISC复合体能够识别和结合与siRNA互补的特定RNA，导致降解或抑制这些RNA的翻译过程，从而实现靶向基因的沉默。

二、RNA干扰技术的方法RNA干扰技术有两种主要的方法：siRNA转染和慢病毒载体介导的siRNA表达。

1. siRNA转染siRNA转染方法是通过将合成的siRNA直接导入靶细胞来实现基因沉默。

这种方法简单、快速且可靠，并且可以应用于各种细胞和生物体系。

转染过程中，siRNA进入细胞胞质，并与RISC复合体结合，从而引发基因沉默。

然而，这种方法的持续性较短，需要定期重新转染。

2. 慢病毒载体介导的siRNA表达慢病毒载体介导的siRNA表达是通过将siRNA基因插入慢病毒基因组中，然后利用慢病毒进行基因转导。

这种方法可以实现持续的基因沉默，并且适用于细胞和整个生物体内的基因沉默。

然而，该方法需要特殊实验环境和技术，且过程较为复杂。

三、RNA干扰技术在功能解析中的应用RNA干扰技术已广泛应用于功能基因组学和分子生物学研究中。

通过将其与高通量筛选等技术相结合，科学家们能够更好地理解基因的功能及其在生物体内的作用。

RNA干扰沉默mTOR基因对肝癌HepG2细胞侵袭和转移的影响

RNA干扰沉默mTOR基因对肝癌HepG2细胞侵袭和转移的影响顾靓;张阳德【期刊名称】《中国医药导报》【年(卷),期】2011(8)6【摘要】目的:探讨RNA干扰技术对人肝癌HepG2细胞mTOR的表达及细胞侵袭与转移的影响.方法:体外合成mTOR siRNA,并转染HepG2细胞24h,同时设无义对照组(转染无义对照siRNA)、空白对照组(转染空脂质体)及正常对照组(不转染).采用western blot法检测各组HepG2细胞的mTOR蛋白表达;应用Transwell小室细胞体外实验检测转染后肝癌HepG2细胞的穿膜细胞数,评价肝癌细胞体外侵袭和转移能力的变化.结果:mTOR siRNA转染组HepG2细胞mToR 蛋白的表达低于各对照组(P<0.05);HepG2细胞侵袭和转移力均显著低于各对照组(P<0.05).结论:mTOR siRNA可有效抑制HepG2细胞mTOR蛋白的表达,且能抑制HepG2细胞的侵袭和迁移.%Objective: To study the effect of mTOR siRNA on the expression of mTOR gene, cell invasion and metastasis of human Hepatoma HepC2 cell.Methods: The oligonucleotide templates of mTOR siRNA were designed primarily, then were used to transfect HepG2 with 24 h, and the control groups were established accordingly by using siRNA with insignificant order, liposome only and no transfection.The level af protein of mTOR was measured by westem blot.Transwell chamber in vitro was to detect the cell count which were able to invade matrigel membrane to assess the ability of cell invasion and metastasie Results: The expressionof mTOR protein in the groups transfected with mTOR siRNA was lower than that of the control groups (P＜0.05).The invasion and metastasis of HepG2 cells transfected with mTOR siRNA we're decreased than those of the control groups (P＜0.05).Conclusion: RNA inierference of mTOR in HepG2 cell line could effetively restrain the expression of mTOR, which could significantly inhibit the invasion and metastasis of HepG2 cell.【总页数】3页(P14-16)【作者】顾靓;张阳德【作者单位】中南大学卫生部肝胆肠外科研究中心,湖南长沙,410008;中南大学卫生部肝胆肠外科研究中心,湖南长沙,410008【正文语种】中文【中图分类】R735.7【相关文献】1.RNA干扰技术沉默CDC25a基因对人肝癌细胞HepG2增殖的影响 [J], 李薇;曹骥;周玲丽;罗旺;杨春;骆成飘;李瑗;苏建家2.RNA干扰GCF2基因沉默对人肝癌BEL-7404细胞侵袭能力的影响 [J], 郭固楠;李金平;陈筠;熊彬;宁小梅;李福建;彭家茵;李玉保;钟明琳;黄植熙3.体外研究RNA干扰介导的SIAH2基因沉默对人肝癌细胞HepG2的影响 [J], 刘瑶;贺兴波;黄文峰;周云;黄才斌4.RNA干扰沉默mTOR基因对肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响 [J], 顾靓;张阳德;赵劲风;廖明媚;段菁华5.VEGF基因沉默对肝癌HepG2细胞侵袭和迁移的影响 [J], 宋向芹;司秀文;张芳;赵延婷因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

RNA干扰Notch1基因对乳腺癌MCF-7细胞增殖及凋亡的影响

设计并合成靶向Ｎｔｌｏｈ基ｃ摘要：目的探讨ＲＡ干扰技术沉默ＮｔｈＮｏｃｌ基因表达对人乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响。方法因的小分子干扰ＲＡ质粒，Ｎ在转染试剂Ｓｆｔ导下转染人乳腺癌细胞株ＭＣ－用Ｒ —Ｃｏｓ介ａＦ７，ＴＰＲ和Ｗｅｔｒｂｏ法检测转染前、ｓｎｌｅｔ
临床与实验病理学杂志
ＪＣｉＥｐＰｔｏ２１ａ；８１ｌｘａｌ０２Ｊｎ２（）ｎｈ
・１１・
ＲＡ干扰Ｎｔｌ基因对乳腺癌ＭＣ一胞增殖及凋ＮｏｃｈＦ７细亡的影响
毛俊，牟秋菊，李连宏，陶雅军，范姝君，王波，于晓棠
亡蛋白的表达，而影响细胞的凋亡和增殖，向Ｎｔ１的ＲＡ干扰技术在乳腺癌的基因治疗中具有一定的研究价值。进靶ｏｈｃＮ关键词：乳腺肿瘤；ｏｈ；ＮＮｔｌＲＡ干扰；ｃ凋亡
中图分类号：３．Ｒ７７９文献标识码：Ａ文章编号：０１３９２１）１０１０１０ —７９（０２Ｏ — ０１— ４
ＡｂｔａｔＰｒｏｅＴｘｌｒｈｒｌｅａｉｎａｄａｏｔｓｆｈｍａｒａｔｃｎｅＦ７ｃｌｂｐｌｉｇＲＮＡｉｔｒｅｅｃｅｈｓｒｃ：ｕｐｓｏｅｐｏｅｔｅｐｏｉｒｔｎｐｐｏｉｏｕｎｂｅｓａｃｒＭＣ一ｅｌｙａｐｙｎｆｏｓｎｅｒｎｅｔｃ — ｆｎｑｅｔｉｎｅＮｏｃｌｇｎ．ｅｈｄＦｕｍａｌｆｇｎｓｏｉｉｕｏｓｅｃｔｈｅｅＭｔｏｓｌｏｒｓｌｒｍｅｔｆｓａＲＮＡａｄｏｅｎｇｔｅｃｎｒｌｒｅｕｎｅｎｌｎｄｉｔｈｎｎｅａｉｏｔｅｓｑｅｃｄａｄｃｏｅｎｏｔｅｖｏｗｅｖｃｏ．ｈｅｏｉａｔｌｓｄｅｅｔｅｒｎｆｃｅｎｏｂｅｓｃｎｅｅｌｉｅＭＣ－ｙＳｆｓｔａｓｅｔｎａｓｙＴｅｔｎｃｉｔｎｅｔｒＴｅｒｃｍｂｎｎａｍｉｓｗｒｈｎｔｓｅｔｄｉｔｒａｔａｃｒｃｌｌＦ７ｂｏａｔｒｎｆｃｉｓａ．ｈｒｓｒｉｐａｎｏａｐｏａｄｔｎｌｔｎｌｖｌｏｔｈｅｐｅｓｏｅｅｄｔｃｅｙＲＴＰＲｎｅｔｒｌｔＭｅｎｈｌ．ｈｒｌｅａｉｎａｄａｏｔｓｓｏｎｒｓａｉｅｅｆＮｏｃｌｘｒｓｉｎｗｒｅｅｔｄｂ — ＣａｄＷｓｅｎｂｏ．ａｗｉｔｅｐｏｉｒｔｎｐｐｏｉｆａｏｅｆｏｔａｓｅｔｄｔｍｏｅｌｅｅｄｔｒｎｄｂｃ８ａｄｆｗｃｔｍｅｒｓａ．Ｔｅｐｏｅｎｅｐｅｓｏｓｏｒｎｆｃｅｕｒｃｌｗｒｅｅｍｉｅｙｃｋｎｏ．ｙｏｔａｓｙｈｒｔｉｘｒｓｉｎｆｓｌｙＮＦ— ＢａｄＣｓａｅ３ｗｒｅｅ — Ｋｎａｐｓ一ｅｅｄｔｃ

RNA干扰技术在癌症治疗中的前景

RNA干扰技术在癌症治疗中的前景《RNA 干扰技术在癌症治疗中的前景》癌症，这个令人闻之色变的疾病，一直以来都是医学界面临的重大挑战。

尽管在癌症的诊断和治疗方面已经取得了显著的进展，但仍有许多患者无法摆脱癌症的魔掌。

在不断探索新的癌症治疗方法的过程中，RNA 干扰技术逐渐崭露头角，为癌症治疗带来了新的希望。

RNA 干扰（RNA interference，简称 RNAi）是一种由双链 RNA 介导的基因沉默现象。

简单来说，就是通过特定的小分子 RNA 来阻止某些基因的表达，从而达到治疗疾病的目的。

这种技术就像是给细胞内的基因表达按下了“静音键”，让那些与癌症发生发展相关的“坏基因”无法正常工作。

那么，RNA 干扰技术是如何发挥作用的呢？首先，细胞内会产生一种叫做小干扰 RNA（small interfering RNA，siRNA）的分子。

这些siRNA 能够与一种叫做 RNA 诱导沉默复合体（RNAinduced silencing complex，RISC）的蛋白质结合。

然后，RISC 会识别并结合到与siRNA 互补的信使 RNA（messenger RNA，mRNA）上。

一旦结合成功，RISC 就会降解这些 mRNA，从而阻止相应蛋白质的合成。

由于蛋白质是细胞功能的执行者，没有了特定蛋白质的产生，与癌症相关的细胞过程就会受到抑制，例如细胞的过度增殖、血管生成、侵袭和转移等。

在癌症治疗中，RNA 干扰技术具有诸多优势。

其一，它具有高度的特异性。

通过设计针对特定癌症相关基因的 siRNA，可以精确地靶向那些导致癌症发生和发展的分子通路，而不会影响其他正常的细胞过程。

这就大大减少了治疗过程中的副作用。

其二，RNA 干扰技术具有可调节性。

可以根据患者的病情和治疗反应，适时调整 siRNA 的剂量和使用频率，以达到最佳的治疗效果。

其三，由于 RNA 干扰技术是从基因层面发挥作用的，因此有可能实现对癌症的根治，而不仅仅是缓解症状。

RNA干扰技术在基因沉默中的应用

RNA干扰技术在基因沉默中的应用随着基因工程和分子生物学领域的快速发展，科学家们对于基因功能的研究也越来越深入。

基因沉默是指通过特定的机制抑制或削弱基因的表达，从而影响相关基因的功能。

在这个过程中，一种被广泛应用的技术是RNA干扰（RNA interference，简称RNAi）。

RNA干扰技术通过介导RNA分子的降解或抑制靶向基因的翻译，实现基因沉默的目的。

本文将重点讨论RNA干扰技术在基因沉默中的应用。

一、RNA干扰技术的原理RNA干扰是一种天然的生物学过程，存在于真核生物的细胞内。

这个过程中，RNA分子通过特定的机制抑制目标基因的表达。

具体来说，RNA干扰包括两种类型：siRNA和miRNA。

1. siRNA（small interfering RNA）是一种双链RNA分子，由外源性的RNA分子引发。

当外源性RNA进入细胞后，它会被特定酶类切割成21-23个碱基的siRNA片段。

这些siRNA片段与RISC（RNA-induced silencing complex）结合，从而形成活化复合物。

这个复合物会识别并与靶向基因的mRNA结合，导致该mRNA降解，从而抑制基因的表达。

2. miRNA（microRNA）则是一类小RNA分子，由内源性的RNA分子产生。

与siRNA类似，miRNA也会与RISC结合形成复合物，进而靶向mRNA并抑制其翻译。

miRNA的特点在于可以与多个靶向基因结合，从而实现多基因调控。

二、1. 功能基因研究RNA干扰技术为研究基因功能提供了有力的工具。

通过使用siRNA或miRNA靶向特定基因的mRNA，科学家可以实现对目标基因的沉默。

通过观察基因沉默后的细胞或生物体的表型变化，可以推断出该基因在某个生物过程中的功能。

2. 疾病治疗基因沉默在疾病治疗中有着广阔的应用前景。

RNA干扰技术可以用于抑制某些机体内可能引起疾病的关键基因的表达。

例如，某些疾病可能由于某个基因的过度表达而引起，如癌症等。

RNA干扰技术与基因沉默

RNA干扰技术与基因沉默随着生物技术的快速发展，RNA干扰技术作为一种新兴的基因沉默方法，在基因功能研究和治疗疾病方面引起了广泛的关注。

本文将介绍RNA干扰技术的原理、应用以及未来的发展前景。

一、RNA干扰技术的原理RNA干扰是一种天然的基因沉默机制，通过特定的RNA序列介导靶基因的沉默。

RNA干扰主要包括两个过程：siRNA合成和RISC复合物介导的靶基因降解。

首先，双链RNA（dsRNA）通过核酸酶Dicer 的作用被切割成小片段的小干扰RNA（siRNA）。

然后，siRNA与RISC（RNA介导的靶基因沉默复合物）结合，形成RISC-siRNA复合物。

最后，RISC-siRNA复合物与靶基因的mRNA结合，从而导致靶基因的mRNA降解，从而实现基因的沉默。

二、RNA干扰技术的应用1. 基因功能研究：RNA干扰技术可用于研究目标基因的功能。

通过抑制特定基因的表达，研究人员可以了解该基因在生理和病理过程中的作用机制。

2. 肿瘤治疗：RNA干扰技术在癌症治疗中显示出巨大的潜力。

通过沉默癌基因的表达，可抑制癌细胞的生长和扩散，同时也可以提高传统化疗药物的疗效。

3. 病毒感染治疗：RNA干扰技术可以用于治疗病毒感染。

通过干扰病毒的基因表达，可以有效抑制病毒的复制和传播，从而达到治疗病毒感染的目的。

4. 农作物改良：RNA干扰技术可用于改良农作物。

通过沉默特定基因的表达，可以增加农作物的抗虫性、抗病性和抗逆性，从而提高农作物的产量和质量。

三、RNA干扰技术的发展前景随着对RNA干扰技术的研究不断深入，该技术在基因工程和生物医学领域的应用前景十分广阔。

目前，已经开发出多种基于RNA干扰技术的治疗方法，如siRNA递送系统、基因敲除技术等。

这些技术的不断发展和完善将进一步推动RNA干扰技术的临床应用。

然而，RNA干扰技术仍然存在一些挑战和限制。

首先，技术的特异性和稳定性仍需要进一步改进。

其次，RNA干扰技术在体内的递送效率和安全性也需要加以解决。

Chk1基因沉默增强姜黄素诱导肝癌细胞Huh7凋亡的敏感性

Chk1基因沉默增强姜黄素诱导肝癌细胞Huh7凋亡的敏感性王伟章;金小宝;毛建文;郑敏【摘要】背景与目的:Chk1和Chk2有望成为肿瘤放化疗增敏的新靶点,然而,Chk1/2能否作为姜黄素治疗肿瘤的增敏靶点却很少有研究报道.本研究旨在探讨Chk1/2小干扰RNA(siRNA)对姜黄素诱导肝癌细胞Huh7凋亡的影响,评价其作为姜黄素治疗肝癌增敏靶点的有效性.方法:Western blot方法检测姜黄素对肝癌细胞Huh7中细胞周期检测点信号通路蛋白的影响;RT-PCR和Western blot方法检测Chk1/2 siRNA对Chk1/2 nRNA和蛋白的沉默效果;DAPI核染色法分别检测Chk1/2 siRNA抑制Chk1/2表达后姜黄素诱导Huh7细胞凋亡的情况;流式细胞术检测Chk1/2表达被沉默后姜黄素对Huh7细胞周期的影响.结果:姜黄素明显抑制细胞周期检测点信号通路蛋白Chkl(S317),Cdc25C(S216)和Cdk1(Y15)蛋白的磷酸化水平;与si-NC转染组相比,Chk1/2siRNh使细胞中Chk1和Chk2 mRNA 水平分别下降了95%和60%,蛋白水平分别下降了92%和55%(P<0.01);抑制Chk1使姜黄素诱导的细胞凋亡率由(21.3±1.8)%上升到(29.5±2.6)%(P<0.05),抑制Chk2并无此作用;Chk1/2 siRNA对姜黄素处理后的Huh7细胞周期均无明显影响.结论:Chk1 siRNA能有效提高姜黄素诱导Huh7细胞的凋亡率,提示Chk1可能作为姜黄素治疗肝癌的有效增敏靶点.【期刊名称】《中国癌症杂志》【年(卷),期】2010(020)002【总页数】6页(P95-100)【关键词】Chk1基因;姜黄素;肝癌细胞Huh7;凋亡;敏感性【作者】王伟章;金小宝;毛建文;郑敏【作者单位】广东药学院基础学院生物教研室,寄生虫学教研室,广东,广州,510006;广东药学院基础学院生物教研室,寄生虫学教研室,广东,广州,510006;广东药学院基础学院生物教研室,寄生虫学教研室,广东,广州,510006;广东药学院基础学院生物教研室,寄生虫学教研室,广东,广州,510006【正文语种】中文【中图分类】R73-36+1;R735.7细胞周期检测点激酶1和2 (checkpoint kkii--nase，Chkl和Chk2)，是细胞周期检测中最关键的效应蛋白激酶，在药物、电离辐射(IR)和紫外线(NV)等引起的S 期和G2/M期检测点调节中发挥重要作用，有可能成为肿瘤放化疗增敏的新靶点［1］。

RNA干扰与基因沉默

RNA干扰与基因沉默在分子生物学领域中，RNA干扰（RNA interference，简称RNAi）被广泛应用于研究基因功能、调控基因表达以及对抗病毒感染等方面。

RNAi是一种通过特异性降解靶向mRNA分子的机制，使得目标基因的表达水平下降或沉默。

本文将介绍RNA干扰的原理、应用以及其在基因沉默中的作用机制。

一、RNA干扰的原理RNA干扰是一种由双链RNA介导的基因沉默过程。

在RNA干扰中，首先通过酶类（Dicer）作用将长的外源双链RNA或内源pre-miRNA等RNA前体分子切割成短的小干扰RNA（small interfering RNA，简称siRNA）或小RNAs（microRNAs，简称miRNA）。

然后这些小RNA结合到RNA诱导的靶向复合物（RNA-induced silencing complex，简称RISC）中，以靶向特定的mRNA分子。

通过RISC诱导的选择性降解或抑制靶向mRNA的翻译过程，从而实现对基因表达的调控。

二、RNA干扰的应用RNA干扰技术已被广泛应用于基因功能研究、疾病治疗和农作物改良等领域。

1. 基因功能研究：通过人为干扰目标基因的RNAi方法，可以研究该基因对于细胞生长、发育和代谢等方面的影响。

通过靶向不同基因的RNA干扰，可以获取大量有关基因功能的信息。

2. 疾病治疗：RNA干扰技术被广泛应用于治疗各种疾病，例如癌症、传染病和遗传病等。

通过特异性地沉默与疾病相关的基因，RNA干扰可以抑制病毒复制、遏制肿瘤生长以及修复遗传缺陷。

3. 农作物改良：RNA干扰技术可以应用于改良农作物的抗病性、抗虫性和耐逆性等特性。

通过使用RNA干扰技术抑制特定基因的表达，可以增强作物对病菌或害虫的抵抗能力。

三、RNA干扰与基因沉默RNA干扰通过特异性降解或抑制靶向mRNA来实现基因沉默。

基因沉默是细胞中一种常见的调控机制，对于维持正常细胞功能至关重要。

RNA干扰作为一种重要的基因沉默机制，发挥着重要的生物学功能。

RNA干扰技术在癌症治疗中的应用

RNA干扰技术在癌症治疗中的应用癌症，一直以来都是威胁人类健康的重大疾病之一。

随着科学技术的不断发展，新的治疗方法层出不穷，其中 RNA 干扰技术在癌症治疗领域展现出了巨大的潜力。

RNA 干扰（RNA interference，简称 RNAi）是一种由双链 RNA 诱发的基因沉默现象。

它通过降解具有同源序列的 mRNA，从而特异性地抑制基因表达。

这一机制的发现为癌症治疗提供了全新的思路和策略。

在癌症的发生和发展过程中，往往存在着多个基因的异常表达。

这些异常表达的基因可能促进癌细胞的增殖、存活、侵袭和转移，或者抑制癌细胞的凋亡。

RNA 干扰技术能够针对这些关键的基因进行特异性沉默，从而达到抑制癌症进展的目的。

例如，在乳腺癌中，HER2 基因常常过度表达，导致癌细胞的恶性增殖和侵袭。

通过 RNA 干扰技术特异性地沉默 HER2 基因的表达，可以有效地抑制乳腺癌细胞的生长和扩散。

同样，在肺癌中，EGFR 基因的突变和过表达也是常见的致癌因素。

利用 RNA 干扰技术靶向 EGFR 基因，能够显著降低肺癌细胞的活性，为肺癌的治疗带来新的希望。

RNA 干扰技术在癌症治疗中的应用方式多种多样。

其中，最常见的是使用小干扰 RNA（small interfering RNA，siRNA）。

siRNA 是一段长度约为 21-23 个核苷酸的双链 RNA，能够与特定的 mRNA 结合并诱导其降解。

为了将 siRNA 有效地递送到癌细胞内，科学家们开发了多种载体系统。

脂质体是一种常用的 siRNA 载体。

它具有良好的生物相容性和细胞摄取能力，能够将 siRNA 包裹在内部，并通过与细胞膜融合的方式将其递送入细胞。

纳米颗粒也是一种有潜力的载体，它们可以通过修饰表面特性，实现对癌细胞的特异性靶向传递，提高siRNA 的治疗效果。

此外，病毒载体在 RNA 干扰技术的应用中也发挥着重要作用。

腺病毒、慢病毒等病毒载体能够高效地感染细胞，并将携带的 siRNA 表达元件整合到细胞基因组中，实现长期稳定的基因沉默。

RNA干扰技术在基因沉默中的应用

RNA干扰技术在基因沉默中的应用众所周知，基因是决定生命活动的基础，人体的每一个细胞都含有相同的遗传信息，但是却可以分化成肌肉、神经、皮肤等等不同类型的细胞，这就是因为细胞中不同基因的表达量和方式不同。

基因表达受到复杂的调控机制，包括DNA启动子区域、转录因子、高级调控因子等的作用。

在过去，科学家通过人为改变或者去除基因使得重要问题得以解答，但是这种方法时间长、过程繁琐且伤及其它不相关的基因，因此需要一种更精确，更便捷的方式处理基因问题。

RNA干扰技术的应用为研究者提供了一种简便、快捷、可控的途经，对基因沉默将有巨大的意义。

RNA干扰技术（RNA interference，RNAi）是一种基于双链RNA介导的深度快速高效沉默靶基因的技术。

最初，RNA干扰技术被发现是在研究培养的线虫中，通过RNAi技术成功地沉默了lin-4、let-7等基因，为基因研究的发展提供了重要的思路。

随着技术的不断完善和发展，RNAi技术被应用到了各种生物体和临床实践中，并展现出广泛的作用和价值。

在各种领域的基础研究和治疗中，RNAi技术都有着广泛的用途。

RNAi技术为基因研究开创了新的方向。

传统的基因敲除技术通常需要长时间的制备和筛选纯合合子，操作手续繁琐，难度大，且对于一些有特殊要求的研究，如短期全局性基因沉默，快速筛查大量靶基因等，显然是不合适的。

而RNAi技术不仅具有方便快捷，还有靶向性、时限性和可控性高、概率高等优点。

RNAi技术可以通过设计合适的RNA合成靶向特定的mRNA，并介导靶向性特异性降解，从而操纵生物的基因表达，进而研究基因功能。

RNAi技术的应用范围非常广泛。

人类疾病与基因沉默的关系非常密切，RNAi技术可以在基因水平上实现疾病的治疗。

比如，研究表明，RNAi技术可以靶向α-晶体蛋白基因，从而降低组织不必要的沉积，有效预防伴随着老年性黄斑变性（AMD）的空洞病（type I aA PCD)。

此外，RNAi技术还可以靶向特定的肿瘤基因，在癌细胞中实现基因沉默，以达到治疗肿瘤的目的。

RNA干扰技术在癌症治疗中药物靶点筛选意义

RNA干扰技术在癌症治疗中药物靶点筛选意义随着癌症的发病率不断上升，寻找新的治疗手段成为科学家们的重要任务。

RNA干扰技术作为一种强有力的基因沉默工具，近年来在癌症治疗中发挥了重要作用。

该技术通过介导特定RNA序列的降解，达到沉默靶基因的效果，从而抑制恶性肿瘤的生长和扩散。

在癌症治疗中，RNA干扰技术可以被用来筛选药物靶点，这在新药开发中具有重要意义。

药物靶点是指药物与细胞分子相互作用的特定位点，通过调节靶点的功能，可以干扰细胞正常生理过程或恶性肿瘤的异常增生。

然而，在癌症治疗中，寻找适当的药物靶点一直是一个挑战。

RNA干扰技术通过可靠且高效的靶基因沉默，为确定药物靶点和研发新药物提供了有力的方法。

首先，RNA干扰技术可以通过筛选靶基因，帮助科学家们探究不同基因在癌症中的功能。

以RNA插入技术为例，通过将RNA序列导入到细胞中，靶向敲除特定基因，可以观察到该基因沉默所带来的细胞和生物学行为改变。

通过高通量筛选技术，可以在全基因组和一揽子基因组中快速鉴定出具有与癌症相关功能的潜在靶点。

这种筛选方法可以加速对癌症发生机制的理解，同时为新药物的开发提供有力的依据。

其次，RNA干扰技术可以用于筛选靶向治疗癌症的药物候选物。

现有的药物筛选方法往往只能针对单一的靶点进行研究，并且存在许多限制条件。

而RNA干扰技术可以同时对上千个基因进行靶向，通过高通量筛选技术，确定对于癌症细胞具有显著毒性的候选物。

这种方法可以更加全面地研究不同药物与靶基因的相互作用，从而提高筛选到具有较高疗效的药物几率。

此外，RNA干扰技术还可以用于筛选靶向癌症耐药性的药物。

癌症细胞的耐药性是临床治疗中常见的问题，导致药物治疗不彻底或无效。

通过RNA干扰技术，可以诱导细胞特定基因的沉默，从而模拟癌症耐药性状态。

研究人员可以利用这种方法，鉴定出对于治疗耐药癌症的药物候选物，为克服癌症耐药性提供新的思路。

最后，RNA干扰技术在癌症治疗中的意义还体现在个体化治疗方面。

TMSG-1基因沉默对人乳腺癌MCF-7细胞体外侵袭能力的影响

TMSG-1基因沉默对人乳腺癌MCF-7细胞体外侵袭能力的影响程庆;陈苏芳;王歧本;赵文健;资源【期刊名称】《湘南学院学报（医学版）》【年(卷),期】2016(018)003【摘要】目的研究靶向沉默肿瘤转移抑制基因1(tumor metastasis suppressor gene-1,TMSG-1,亦称LASS2基因)对人乳腺癌MCF-7细胞体外侵袭能力的影响,初步探讨其作用机制.方法构建TMSG-1的特异性干扰片段,通过脂质体转染技术,将靶向TMSG-1的siRNA转染MCF-7细胞,运用实时荧光定量PCR检测转染后TMSG-1 mRNA的表达,筛选有效的siRNA片段;选用最佳沉默片段siRNA-2和阴性对照siRNA-NC转染MCF-7细胞并设置空白对照组.采用Western印迹法和明胶酶谱法分析MCF-7细胞上清液中基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP-2)的表达及生物活性;采用V-ATP酶活性检测试剂盒来测定细胞内V-ATP 酶的活性;应用划痕修复实验检测MCF-7细胞体外迁移能力;Transwell体外侵袭实验检测细胞侵袭能力.结果实时荧光定量PCR检测结果发现,不同转染序列对TMSG-1基因的沉默效果不同,siRNA-2组和siRNA-3组中TMSG-1基因mRNA 的量与对照组、siRNA-NC组和siRNA-1组比较,表达明显减少,差异有统计学意义(P＜0.05),本实验选用siRNA-2组用于后续试验;Western印迹法检测结果显示,空白对照组、siRNA-NC组与siRNA-2组3组之间比较差异无统计学意义(P＞0.05);明胶酶谱法检测结果显示:siRNA-2转染组细胞培养上清液中MMP-2的活性是空白对照组的1.76倍,差异有统计学意义(P＜0.05),是siRNA-NC组的1.81倍,差异有统计学意义(P＜0.05);细胞内V-ATP酶的活性检测结果显示:转染siRNA-2组V-ATP酶活性明显高于空白对照组和siRNA-NC组(P＜0.05);划痕修复实验结果显示:siRNA-2转染组的迁移能力明显高于空白对照组和无关阴性对照siRNA组(P ＜0.05);Transwell侵袭小室实验检测结果显示,转染siRNA-2组细胞数目明显多于siRNA-NC组和空白对照组(P＜0.05).结论靶向沉默TMSG-1的siRNA能有效下调其表达,提高MCF-7细胞的体外侵袭能力.【总页数】6页(P1-6)【作者】程庆;陈苏芳;王歧本;赵文健;资源【作者单位】湘南学院医学技能实验中心,湖南郴州423000;湘南学院医学技能实验中心,湖南郴州423000;湘南学院医学技能实验中心,湖南郴州423000;湘南学院病理研究所,湖南郴州423000;湘南学院病理研究所,湖南郴州423000【正文语种】中文【中图分类】R737.9【相关文献】1.印甲薪对人乳腺癌细胞株MCF-7体外侵袭能力的作用研究 [J], 李毅;吴胤瑛;李恩孝;董丹凤2.RNAi沉默Rab5a基因对乳腺癌细胞MCF-7侵袭能力的的影响 [J], 查尼尔;李志高;谷新悦3.短发夹RNA沉默促肝细胞再生磷酸酶-3基因表达对乳腺癌MCF-7细胞生长和侵袭能力的影响 [J], 钟琰;吴爱国;纪术峰;沈三弟4.RNAi 介导 ObR基因沉默对人乳头状甲状腺癌 K1细胞增殖与侵袭能力的影响[J], 王帅;孔霞;张国安;侯森;崔文5.慢病毒介导CK18基因沉默对人乳腺癌BT549细胞增殖、凋亡和侵袭能力的影响 [J], 张青;黄钱;张春燕;刘晓燕;曾凡才;甘淋因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

RNA干扰与基因沉默机制

RNA干扰与基因沉默机制一、简介在细胞内，基因的表达是通过转录过程实现的，而RNA干扰（RNA interference，简称RNAi）是一种调节细胞基因表达的重要机制。

本文将探讨RNA干扰的原理以及其在基因沉默中的作用机制。

二、RNA干扰的原理RNA干扰是一种通过小分子RNA介导的基因表达调控过程。

它起源于植物的自我免疫系统，后来被发现在其他多细胞生物中也存在。

RNA干扰的主要原理如下：1. siRNA产生：在RNA干扰中，长双链RNA（dsRNA）首先被酶切成短小的双链小干扰RNA（small interfering RNA，siRNA）。

这一切割过程通常由一种酶类物质——核酶III完成。

2. siRNA复合物形成：siRNA与RNA诱导的沉默复合物（RNA-induced silencing complex，RISC）结合形成siRNA-RISC复合物。

这个复合物可以识别和靶向选择性地降解特定的mRNA。

3. 靶向mRNA降解：siRNA-RISC复合物识别并结合到目标mRNA的互补区域，导致该mRNA被切割降解。

这样，目标基因的mRNA水平将下降，从而实现基因沉默。

三、siRNA与miRNA的区别虽然siRNA和miRNA都参与了RNA干扰过程，但它们在功能和起源上存在一些区别：1. 起源：siRNA主要起源于外源基因或病毒RNA，而miRNA主要起源于内源性基因。

2. 目标：siRNA主要与特定的目标基因产生互补，直接导致该基因的沉默；miRNA则与多个目标基因产生部分互补，常常起到调控基因表达的作用。

3. 复合物结构：siRNA与RISC形成siRNA-RISC复合物；miRNA 与RISC形成miRNA-RISC复合物。

复合物的构成与功能在RNA干扰中起到关键作用。

四、基因沉默的应用基因沉默通过RNA干扰机制在生物学研究和应用中发挥着重要的作用：1. 基因功能研究：通过RNA干扰可以实现对特定基因的沉默，从而揭示该基因在细胞功能和生物过程中的作用。

RNA干扰和基因沉默的分子机制

RNA干扰和基因沉默的分子机制RNA干扰和基因沉默是两个密切相关的生物学概念，它们都是细胞内基因表达和遗传调控的重要机制。

本文将深入探讨这两个概念的分子机制，以及它们在细胞中的作用和应用。

一、RNA干扰的分子机制RNA干扰（RNA interference，RNAi）是一种由RNA分子介导的基因表达调控机制，通常可以被分为三个阶段：合成、激活和执行。

其中，RNAi起始于由RNA聚合酶 II识别和转录的长双链RNA，这些RNAs被退火酶（Dicer）和一些辅助蛋白质加工成细小干扰RNA（small interfering RNA，siRNA）或microRNA （miRNA）。

这些siRNA或miRNA被载入到RNA诱导寄生体激活的RNA-诱导寄生体复合物（RNA induced silencing complex，RISC）中，通过指导RISC与目标RNA相互反应，从而抑制目标RNA的翻译或导致其降解。

这种针对RNA分子序列特异性的调控被称为RNA干扰。

二、基因沉默的分子机制基因沉默（gene silencing）是RNA干扰的其中一种表型，意味着在特定细胞或特定发育阶段，一个基因或一组基因的转录和翻译被抑制。

基因沉默的机制多种多样，最常见的是DNA甲基化和组蛋白修饰。

DNA甲基化通常指DNA甲基转移酶指导的DNA分子5-甲基化，这种甲基化通常位于启动子和普遍的调控元素上，并且可能阻止RNA聚合酶的结合并抑制转录。

同时，组蛋白修饰（如乙酰化和甲基化）也是常见的基因沉默机制，这些修饰可以改变染色质的结构和DNA的可访问性，从而影响转录机器的进入和离开。

三、RNA干扰和基因沉默的应用RNA干扰和基因沉默的分子机制在细胞生物学研究和药物开发中具有广泛的应用价值。

例如，RNA干扰技术可以用于基因敲除或基因过度表达模型的建立，以及对哺乳动物的基因表达和疾病进程的研究。

此外，RNA干扰还可以被用来选择性地抑制病毒复制和肿瘤生长等生物学过程，以解决许多疾病问题。

RNA干扰A20基因的表达对人乳腺癌细胞MCF-7增殖、凋亡和迁移的影响

RNA干扰A20基因的表达对人乳腺癌细胞MCF-7增殖、凋亡和迁移的影响余明杰;徐元宏;王萍【摘要】Objective To study the effect of knockdown A20 expression on the proliferation, apoptosis and migra-tion of MCF-7 cells and to evaluate the potential value of the A20 gene as the therapeutic target of breast cancer. Methods Synthesized siRNA targeted to A20 gene or negative control siRNA were transfected into MCF-7 cells by using lipofectamine 2000. CCK8 assay, Annexin V and 7-AAD double staining cytometry, Transwell assay were performed to investigate the effect of knockdownA20 mRNA expression on the proliferation, apoptosis, migration of MCF-7 cells, respectively. Results It can inhibit the proliferation and migration as well as promote the apoptosis in MCF-7 cells by knockdown A20 mRNA expression. Conclusion A20 gene plays an important role in the prolif-eration, apoptosis and migration of MCF-7 cells and it could be a potential therapeutic target of breast cancer.%目的利用 RNA 干扰技术靶向沉默 A20 基因,对MCF-7细胞株增殖、凋亡和迁移的影响进行研究,探讨A20基因作为乳腺癌治疗靶点的潜在价值. 方法人工合成靶向A20基因的siRNA序列和阴性对照( NC) siRNA序列,利用脂质体转染技术将siRNA导入MCF-7细胞株,采用CCK-8细胞增殖实验、Annexin V、7-AAD双染流式细胞术检测凋亡实验和 Transwell 细胞迁移实验研究沉默 A20 基因对MCF-7细胞增殖、凋亡和迁移的影响. 结果靶向沉默A20基因表达能够有效抑制MCF-7 细胞的增殖和迁移,促进细胞凋亡的发生. 结论 A20基因在MCF-7细胞的增殖、凋亡和迁移过程中起重要作用,A20基因可能是针对乳腺癌抗肿瘤靶向治疗的潜在靶点.【期刊名称】《安徽医科大学学报》【年(卷),期】2015(050)009【总页数】5页(P1215-1219)【关键词】A20基因;人乳腺癌细胞株MCF-7;RNA干扰;细胞增殖;细胞凋亡;细胞迁移【作者】余明杰;徐元宏;王萍【作者单位】安徽医科大学第一附属医院检验科,合肥 230022;安徽省亳州市人民医院检验科,亳州 236800;安徽医科大学第一附属医院检验科,合肥 230022;安徽省亳州市人民医院检验科,亳州 236800【正文语种】中文【中图分类】R34RNA干扰A20基因的表达对人乳腺癌细胞MCF7增殖、凋亡和迁移的影响余明杰1，2，徐元宏1，王萍2作者单位：1安徽医科大学第一附属医院检验科，合肥 2300222安徽省亳州市人民医院检验科，亳州 236800作者简介：余明杰，男，硕士研究生；徐元宏，主任医师，教授，博士生导师，责任作者，E mail：xyhong1964＠163．com摘要目的利用RNA干扰技术靶向沉默A20基因，对MCF7细胞株增殖、凋亡和迁移的影响进行研究，探讨A20基因作为乳腺癌治疗靶点的潜在价值。

RNA干扰Notch1基因对乳腺癌MCF-7细胞增殖及凋亡的影响

RNA干扰Notch1基因对乳腺癌MCF-7细胞增殖及凋亡的影响毛俊;牟秋菊;李连宏;陶雅军;范姝君;王波;于晓棠【期刊名称】《临床与实验病理学杂志》【年(卷),期】2012(28)1【摘要】Purpose To explore the proliferation and apoptosis of human breast cancer MCF-7 cell by applying RNA interference technique to silence Notchl gene. Methods Four small fragments of siRNA and one negative control were sequenced and cloned into the vector. The recombinant plasmids were then transfected into breast cancer cell line MCF-7 by Sofast transfection assay. The transcription and translation level of Notchl expression were detected by RT-PCR and Western blot. Meanwhile, the proliferation and apoptosis of transfected tumor cells were determined by cck8 and flow-cytometry assay. The protein expressions of NF-kB and Caspase-3 were detected by Western Blot. Results The recombinant plasmids containing Notchl shRNA were successfully constructed. Notchl expression was significantly knocked down after shRNA plasmid transfection( P <0. 05 ). Notchl shRNA visibly inhibited the proliferation of breast cancer cell( P <0. 05 )and the apoptosis rate increased after 48 h transfection( P <0. 01 ). The expression of NF-kB decreased but the expression of Caspase-3 increased significantly. Conclusions Notchl gene silenced by shRNA can inhibit the proliferationand induce the apoptosis of human breast cancer cell line MCF-7 which may be regulated though NF-kB pathway, and the process might serve asa potential approach for breast cancer gene therapy.%目的探讨RNA干扰技术沉默Notch1基因表达对人乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响.方法设计并合成靶向Notch1基因的小分子干扰RNA质粒,在转染试剂Sofast介导下转染人乳腺癌细胞株MCF-7,用RT-PCR和Western blot法检测转染前、后Notch1基因的表达,挑选干扰效率最强的一组表达载体;cck8比色法检测分析各组细胞的存活率;流式细胞术检测细胞凋亡比例;Western blot法检测转染各组MCF-7细胞Notch1、NF-κB及Caspase-3蛋白表达.结果 Notch1-shRNA能有效封闭Notch1基因的表达,Notch1基因和蛋白表达水平明显降低(P<0.05);Notch1-shRNA能明显抑制细胞增殖(P<0.05);转染48 h后细胞凋亡比例增加(P<0.01).NF-κB蛋白水平表达降低,Caspase-3蛋白表达水平增高.结论利用RNA干扰技术沉默Notch1基因的表达可以明显抑制MCF-7细胞的增殖,促进MCF-7细胞凋亡,其机制可能通过NF-κB信号通路调节相关凋亡蛋白的表达,进而影响细胞的凋亡和增殖,靶向Notch1的RNA干扰技术在乳腺癌的基因治疗中具有一定的研究价值.【总页数】4页(P11-14)【作者】毛俊;牟秋菊;李连宏;陶雅军;范姝君;王波;于晓棠【作者单位】大连医科大学中日临床病理中心,大连,116044;大连医科大学中日临床病理中心,大连,116044;大连医科大学中日临床病理中心,大连,116044;大连医科大学中日临床病理中心,大连,116044;大连医科大学中日临床病理中心,大连,116044;大连医科大学中日临床病理中心,大连,116044;大连医科大学中日临床病理中心,大连,116044【正文语种】中文【中图分类】R737.9【相关文献】1.RNA干扰A20基因的表达对人乳腺癌细胞MCF-7增殖、凋亡和迁移的影响 [J], 余明杰;徐元宏;王萍2.下调MTDH基因表达对乳腺癌MCF-7细胞增殖及凋亡的影响 [J], 董超;罗春香;陈印;曾佳佳;吴仕贤;杨润祥3.RNA干扰hTERT基因对人乳腺癌细胞株MCF-7周期及凋亡影响的研究 [J], 许景伟;樊丽;刘哲丞;邹宇;关智勇4.SCO2基因沉默对乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的影响 [J], 陈汝诗;许译方;谭启杏;莫钦国;覃庆洪5.RASSF1A基因在人乳腺癌细胞株MCF-7中的表达及对细胞增殖凋亡、体内成瘤能力的影响观察 [J], 李一; 黄婷; 杨麟瀚; 吴池华因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。