RNA 干扰 Cofilin-1基因沉默对人肝癌细胞株 Huh-7侵袭和转移能力的影响

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RNA干扰CD151基因表达抑制肝癌细胞侵袭

RNA干扰CD151基因表达抑制肝癌细胞侵袭

d e r ,h e n c e n o t r a n s f e c t i o n .Th e n t h e t o t a l RNA a n d p r o t e i n l e v e l s o f CD1 5 1 we r e me a s u r e d b y q PC R a n d
Hu a z h o n g U n i v e r s i t y o f S c i e n c e a n d Te c h n o l o g y, Wu h a n 4 3 0 0 3 0 , C h i n a ) [ A b s t r a c t ] 0b j e c t i v e To s t u d y t h e e f f e c t o f C D1 5 1 - s i R NA o n t h e e x p r e s s i o n o f C D1 5 1 g e n e , c e l l me —
( 中 图 分 类 号] R7 3 5 . 7
( 文 献 标 识 码 ) A
DOI : 1 0 . 3 8 7 0 / z g z z h x . 2 0 1 4 . 0 2 . 0 0 1
Ef f e c t o f CD1 5 1 Ge n e i nh i b i t i o n b y s i R NA o n i nv a s i o n a nd me t a s t a s i s o f h u ma n h e p a t o ma He p G2 c e l l s
第 2 3卷 第 2期
2 0 1 4年Βιβλιοθήκη 4月 中 国 组 织 化 学 与 细 胞 化 学 杂 志
CHI NES E J OURNAL 0F Y AND CYT0CHEM I S TRY

RNA干扰技术在抗癌研究中的应用

RNA干扰技术在抗癌研究中的应用

RNA干扰技术在抗癌研究中的应用引言:癌症是当今世界面临的一大挑战,而抗癌研究一直是科学家们的重点关注领域。

近年来,RNA干扰技术作为一种新兴的基因调控方法,正在逐渐展现其在抗癌研究中的巨大潜力。

本文将介绍RNA干扰技术的原理、应用以及在抗癌研究中的进展。

一、RNA干扰技术的原理RNA干扰技术是一种通过沉默特定基因表达的方法。

其原理是利用双链RNA分子(small interfering RNA,siRNA)或长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)与目标mRNA序列互补配对,从而导致目标mRNA的降解或转录抑制。

这种基因调控机制被广泛应用于基因功能研究和药物开发领域。

二、RNA干扰技术的应用1. 基因功能研究:RNA干扰技术可以通过靶向特定基因,使其表达受到干扰,从而研究该基因在细胞生理和病理过程中的功能。

通过RNA干扰技术,科学家们可以揭示癌症相关基因的作用机制,为癌症的发生和发展提供新的认识。

2. 药物靶点筛选:RNA干扰技术可以通过沉默癌症相关基因,评估其在肿瘤生长和转移中的重要性,从而为药物靶点的筛选提供依据。

这种筛选方法可以加速抗癌药物的研发过程,提高药物的准确性和有效性。

3. 抗癌治疗:RNA干扰技术可以通过靶向癌症相关基因,抑制其表达,从而达到抗癌治疗的目的。

临床研究已经证明,RNA干扰技术对于某些癌症类型具有显著的治疗效果。

例如,通过靶向癌细胞中的特定基因,可以使癌细胞的增殖和转移受到抑制,从而延长患者的生存期。

三、RNA干扰技术在抗癌研究中的进展1. 抗血液系统肿瘤:RNA干扰技术在治疗白血病、淋巴瘤等血液系统肿瘤方面取得了显著进展。

通过靶向癌细胞中的特定基因,可以有效抑制癌细胞的增殖和转移,提高患者的生存率。

2. 抗实体肿瘤:RNA干扰技术在治疗实体肿瘤方面也取得了一定的突破。

通过靶向肿瘤细胞中的关键基因,可以抑制肿瘤细胞的增殖和侵袭能力,从而达到抗癌治疗的效果。

RNA干扰与基因沉默

RNA干扰与基因沉默

RNA干扰与基因沉默RNA干扰(RNA interference, RNAi)是一种通过特定RNA分子介导的基因沉默机制,被广泛应用于生物学研究、基因治疗等领域。

本文将深入探讨RNA干扰的原理、应用及未来发展方向。

一、RNA干扰的原理RNA干扰是一种高度保守且广泛存在于真核生物中的生物学过程。

它主要通过三种类型的RNA分子实现基因沉默:microRNA (miRNA)、small interfering RNA(siRNA)和Piwi-interacting RNA (piRNA)。

其中,siRNA是最为常见和被广泛应用的一种。

在RNA干扰中,siRNA与RNA诱导酶复合物结合形成RNA诱导沉默复合物(RISC),RISC会通过碱基互补的方式与靶向RNA结合,并介导靶向RNA的降解,从而达到沉默该基因的效果。

这一过程使得基因的转录和翻译被有效地抑制,实现基因的沉默。

二、RNA干扰的应用1. 基因功能研究:RNA干扰技术被广泛应用于基因功能的研究中。

通过设计特定的siRNA,可以实现对目标基因的沉默,从而观察基因沉默对生物体的生理和生化过程产生的影响,揭示基因在细胞和生物体中的作用机制。

2. 疾病治疗:RNA干扰技术在基因治疗领域具有巨大潜力。

通过设计特异性的siRNA,可以实现对致病基因的沉默,从而治疗遗传性疾病、肿瘤和病毒感染等多种疾病。

此外,RNA干扰还可以用于研发新型药物和治疗手段。

3. 植物保护:在植物领域,RNA干扰技术也被广泛应用于植物保护。

通过设计特定的siRNA,可以实现对害虫和病原菌基因的沉默,从而提高作物的抗病虫性,减少对农药的依赖,实现绿色农业的发展。

三、RNA干扰的未来发展方向随着RNA干扰技术的不断发展,未来有望在以下几个方面取得重要进展:1. 靶向性增强:未来的RNA干扰技术将更加注重提高siRNA的靶向性,减少对非靶向基因的影响,从而提高沉黙效率和生物安全性。

2. 交叉学科应用:RNA干扰技术将与生物信息学、纳米技术等学科相结合,开拓全新的应用领域,如基因组编辑、精准医学等。

RNA干扰与基因沉默

RNA干扰与基因沉默

RNA干扰与基因沉默随着生物技术和分子生物学的发展,RNA干扰技术被广泛应用于基因沉默、基因治疗和疾病研究等领域。

RNA干扰(RNA interference,简称RNAi)指的是一种生物体内通过RNA分子对特定mRNA(信使RNA)进行特异性降解的现象,是一种基因表达调控的机制。

该技术构建了一个全新的RNA干扰系统,在生物学领域具有重要的研究价值。

RNA干扰的基本原理和机制RNA干扰的基本原理是,人工合成一种小分子RNA(小干扰RNA,siRNA),并将其导入到细胞内,使其与同源性mRNA 配对结合,导致mRNA的降解或翻译过程的抑制,从而实现对该mRNA的沉默。

具体来讲,RNA干扰分为两类:siRNA阻遏和microRNA(miRNA)干预。

siRNA阻遏是指通过人工合成siRNA,将其导入细胞,进而与靶mRNA反向互补配对结合,触发RNA酶物质切割mRNA,从而导致其降解并沉默。

而miRNA干预是指基于细胞自然生理过程中存在的miRNA机制来进行干预。

在生物体内,miRNA通过与mRNA配对结合,形成mRNA与核酸互补序列,从而抑制mRNA的翻译或加速mRNA的降解。

RNA干扰通过维持siRNA或miRNA与mRNA的互补杂交,从而控制特定基因的表达。

RNA干扰的应用RNA干扰的应用主要有两种类型,基因沉默和基因治疗。

其中,基因沉默广泛应用于生物学研究领域,而基因治疗主要应用于临床医学领域。

在生物学研究中,RNA干扰被广泛用于功能基因组学、转录组学、生物工程和病毒抑制等领域。

例如,RNA干扰技术可以用于基因的敲除和去活、基因表达的高通量分析、蛋白质相互作用和信号转导的研究等。

在临床医学领域,RNA干扰主要用于基因治疗和肿瘤治疗。

基于RNA干扰技术,已经研发出多个RNA干扰药物,包括Alnylam、GeneSilencing、RiboBio等。

这些药物已经被用于治疗多种疾病,如糖尿病、癌症、病毒性感染等。

RNA干扰技术在基因沉默与功能解析中的应用

RNA干扰技术在基因沉默与功能解析中的应用

RNA干扰技术在基因沉默与功能解析中的应用引言RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术是一种重要的基因调控方法,该技术可通过介导RNA的降解或抑制翻译的方式靶向沉默特定基因。

自从1998年发现RNA干扰的现象以来,科学家们已经广泛应用此技术在不同生物体系中研究基因功能。

本文将讨论RNA干扰技术在基因沉默与功能解析中的应用。

一、RNA干扰的基本原理RNA干扰是一种高度保守的生物学机制,在多种生物中都存在。

其基本过程分为两个阶段:小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)的产生和干扰复合体的形成。

小干扰RNA(siRNA)是RNA干扰的关键组分。

siRNA通过外源或内源方法产生,随后与RNA诱导沉默复合体(RNA-induced silencing complex,RISC)结合。

RISC复合体能够识别和结合与siRNA互补的特定RNA,导致降解或抑制这些RNA的翻译过程,从而实现靶向基因的沉默。

二、RNA干扰技术的方法RNA干扰技术有两种主要的方法:siRNA转染和慢病毒载体介导的siRNA表达。

1. siRNA转染siRNA转染方法是通过将合成的siRNA直接导入靶细胞来实现基因沉默。

这种方法简单、快速且可靠,并且可以应用于各种细胞和生物体系。

转染过程中,siRNA进入细胞胞质,并与RISC复合体结合,从而引发基因沉默。

然而,这种方法的持续性较短,需要定期重新转染。

2. 慢病毒载体介导的siRNA表达慢病毒载体介导的siRNA表达是通过将siRNA基因插入慢病毒基因组中,然后利用慢病毒进行基因转导。

这种方法可以实现持续的基因沉默,并且适用于细胞和整个生物体内的基因沉默。

然而,该方法需要特殊实验环境和技术,且过程较为复杂。

三、RNA干扰技术在功能解析中的应用RNA干扰技术已广泛应用于功能基因组学和分子生物学研究中。

通过将其与高通量筛选等技术相结合,科学家们能够更好地理解基因的功能及其在生物体内的作用。

RNA干扰沉默mTOR基因对肝癌HepG2细胞侵袭和转移的影响

RNA干扰沉默mTOR基因对肝癌HepG2细胞侵袭和转移的影响

RNA干扰沉默mTOR基因对肝癌HepG2细胞侵袭和转移的影响顾靓;张阳德【期刊名称】《中国医药导报》【年(卷),期】2011(8)6【摘要】目的:探讨RNA干扰技术对人肝癌HepG2细胞mTOR的表达及细胞侵袭与转移的影响.方法:体外合成mTOR siRNA,并转染HepG2细胞24h,同时设无义对照组(转染无义对照siRNA)、空白对照组(转染空脂质体)及正常对照组(不转染).采用western blot法检测各组HepG2细胞的mTOR蛋白表达;应用Transwell小室细胞体外实验检测转染后肝癌HepG2细胞的穿膜细胞数,评价肝癌细胞体外侵袭和转移能力的变化.结果:mTOR siRNA转染组HepG2细胞mToR 蛋白的表达低于各对照组(P<0.05);HepG2细胞侵袭和转移力均显著低于各对照组(P<0.05).结论:mTOR siRNA可有效抑制HepG2细胞mTOR蛋白的表达,且能抑制HepG2细胞的侵袭和迁移.%Objective: To study the effect of mTOR siRNA on the expression of mTOR gene, cell invasion and metastasis of human Hepatoma HepC2 cell.Methods: The oligonucleotide templates of mTOR siRNA were designed primarily, then were used to transfect HepG2 with 24 h, and the control groups were established accordingly by using siRNA with insignificant order, liposome only and no transfection.The level af protein of mTOR was measured by westem blot.Transwell chamber in vitro was to detect the cell count which were able to invade matrigel membrane to assess the ability of cell invasion and metastasie Results: The expressionof mTOR protein in the groups transfected with mTOR siRNA was lower than that of the control groups (P<0.05).The invasion and metastasis of HepG2 cells transfected with mTOR siRNA we're decreased than those of the control groups (P<0.05).Conclusion: RNA inierference of mTOR in HepG2 cell line could effetively restrain the expression of mTOR, which could significantly inhibit the invasion and metastasis of HepG2 cell.【总页数】3页(P14-16)【作者】顾靓;张阳德【作者单位】中南大学卫生部肝胆肠外科研究中心,湖南长沙,410008;中南大学卫生部肝胆肠外科研究中心,湖南长沙,410008【正文语种】中文【中图分类】R735.7【相关文献】1.RNA干扰技术沉默CDC25a基因对人肝癌细胞HepG2增殖的影响 [J], 李薇;曹骥;周玲丽;罗旺;杨春;骆成飘;李瑗;苏建家2.RNA干扰GCF2基因沉默对人肝癌BEL-7404细胞侵袭能力的影响 [J], 郭固楠;李金平;陈筠;熊彬;宁小梅;李福建;彭家茵;李玉保;钟明琳;黄植熙3.体外研究RNA干扰介导的SIAH2基因沉默对人肝癌细胞HepG2的影响 [J], 刘瑶;贺兴波;黄文峰;周云;黄才斌4.RNA干扰沉默mTOR基因对肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响 [J], 顾靓;张阳德;赵劲风;廖明媚;段菁华5.VEGF基因沉默对肝癌HepG2细胞侵袭和迁移的影响 [J], 宋向芹;司秀文;张芳;赵延婷因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

RNA干扰Notch1基因对乳腺癌MCF-7细胞增殖及凋亡的影响

RNA干扰Notch1基因对乳腺癌MCF-7细胞增殖及凋亡的影响
设计并合成 靶向 N t l o h 基 c 摘要 : 目的 探讨 R A干扰技术沉默 N th N ocl基因表达对人乳腺 癌细胞增 殖和凋亡 的影 响。方法 因的小分子干扰 R A质粒 , N 在转染试剂 S f t 导下 转染 人乳腺癌 细胞株 MC - 用 R —C o s介 a F7, TP R和 Wetr bo 法检 测转染前 、 s n l e t
临床 与 实验 病 理 学 杂 志
JCi EpP to 2 1 a ;8 1 l x a l 0 2Jn 2 ( ) n h
・1 1・
R A干 扰 N t l基 因对 乳 腺 癌 MC 一 胞 增 殖 及 凋 N oc h F7细 亡 的影 响
毛 俊, 牟秋 菊 , 李连 宏 , 陶雅 军 , 范姝君 , 王 波, 于晓 棠
亡蛋 白的表达 , 而影响细胞 的凋亡和增殖 , 向 N t 1的 R A干扰技术在乳腺癌 的基 因治疗中具有一定 的研究价值 。 进 靶 oh c N 关键 词 : 乳腺 肿瘤 ; o h ; N N t l R A干扰 ; c 凋亡
中 图 分 类 号 : 3 . R7 7 9 文献标识码 : A 文 章 编 号 :0 1 3 9 2 1 ) 1 0 1 0 10 —79 (0 2 O — 0 1— 4
Ab t a t P r o e T x lr h r l e ai n a d a o t s fh ma r a tc n e F 7 c l b p li g RNA itre e c e h s r c : u p s o e p oe t e p oi r t n p p o i o u n b e s a c rMC 一 el y a p y n f o s n e r n e tc — f n q e t i n e Noc l g n . e h d F u malf g n s o i iu o s e c th e e M t o s l o rs l r me t fs a RNA a d o e n g t e c n r l r e u n e n ln d i t h n n e ai o t e s q e c d a d co e no t e v o we v c o . h e o i a t ls d e e te r n fce n ob e s c n e el i e MC - y S f s ta se t n a s y T e t n c it n e tr T e r c mb n n a mi sw r h n t se td it r a t a c rc l l F 7 b o a t r n f ci s a . h r s r i p a n o a po a d t n l t n lv lo th e p e so e e d tc e y RT P R n e tr lt Me n h l .h r l e ain a d a o tss o n r sai e e fNoc l x r s in w r e e t d b — C a d W se n b o . a w i t e p oi r t n p p o i f a o e f o ta se t d t mo el e e d tr n d b c 8 a d f w c t mer s a .T e p oe n e p e so so rn f ce u rc l w r ee mie y c k n o . y o t a s y h r ti x r s in f s l y NF— B a d C s a e 3 w r ee — K n a p s 一 e e d tc

RNA干扰技术在癌症治疗中的前景

RNA干扰技术在癌症治疗中的前景

RNA干扰技术在癌症治疗中的前景《RNA 干扰技术在癌症治疗中的前景》癌症,这个令人闻之色变的疾病,一直以来都是医学界面临的重大挑战。

尽管在癌症的诊断和治疗方面已经取得了显著的进展,但仍有许多患者无法摆脱癌症的魔掌。

在不断探索新的癌症治疗方法的过程中,RNA 干扰技术逐渐崭露头角,为癌症治疗带来了新的希望。

RNA 干扰(RNA interference,简称 RNAi)是一种由双链 RNA 介导的基因沉默现象。

简单来说,就是通过特定的小分子 RNA 来阻止某些基因的表达,从而达到治疗疾病的目的。

这种技术就像是给细胞内的基因表达按下了“静音键”,让那些与癌症发生发展相关的“坏基因”无法正常工作。

那么,RNA 干扰技术是如何发挥作用的呢?首先,细胞内会产生一种叫做小干扰 RNA(small interfering RNA,siRNA)的分子。

这些siRNA 能够与一种叫做 RNA 诱导沉默复合体(RNAinduced silencing complex,RISC)的蛋白质结合。

然后,RISC 会识别并结合到与siRNA 互补的信使 RNA(messenger RNA,mRNA)上。

一旦结合成功,RISC 就会降解这些 mRNA,从而阻止相应蛋白质的合成。

由于蛋白质是细胞功能的执行者,没有了特定蛋白质的产生,与癌症相关的细胞过程就会受到抑制,例如细胞的过度增殖、血管生成、侵袭和转移等。

在癌症治疗中,RNA 干扰技术具有诸多优势。

其一,它具有高度的特异性。

通过设计针对特定癌症相关基因的 siRNA,可以精确地靶向那些导致癌症发生和发展的分子通路,而不会影响其他正常的细胞过程。

这就大大减少了治疗过程中的副作用。

其二,RNA 干扰技术具有可调节性。

可以根据患者的病情和治疗反应,适时调整 siRNA 的剂量和使用频率,以达到最佳的治疗效果。

其三,由于 RNA 干扰技术是从基因层面发挥作用的,因此有可能实现对癌症的根治,而不仅仅是缓解症状。

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光定量 P C R检测 C o il f i n . 1基 因在肝癌组织 和癌旁组织 中的表达情况 ; 体 外合成 C o i f l i n . 1 序列特异性小干扰 R N A, 应用脂质体
转染 H u h - 7肝癌细胞株 , 实验分 C o f i l i n . 1 . s i R N A组 ( C o i f l i n . 1 . s i R N A转染 H u h - 7细胞 ) 、 非特异性. R N A组 ( C t r 1 . s i R N A组 , 非特 异性 s i R N A转染 H u h - 7细胞 ) 、 未转染组 ( 未转染 Hu h - 7细胞 ) ,每组 设 2个 平行 孔 。We s t e r n b l o t 鉴定 C o i f l i n 一 1 蛋 白水 平变
曹建 平 , 龙 晓 兰, 龚 勇 , 李晓杰 , 谢 海龙
【 摘 要 的发病过程 , 但 该基 因在肝细胞 肝癌 中表 达和作用不 明确 。文 中拟观察 C o i f l i n 一 1
采用实时荧
基 因在 人肝癌组织 中的表达情 况 , 探讨下调 C o i f l i n 一 1表达对肝癌细胞株 H u h - 7侵袭 和转 移能力的影响 。 方法
化 。细胞迁 移及 体外侵袭实验观察转染后 细胞的侵袭能力 的影响 。 结果
与癌旁组织相 比 , 肝癌组织 中 C o i f l i n 一 1 基 因表达
明显增 强[ ( 0 . 6 9 8± 0 . 1 5 6 ) ( 3 . 5 2 3±0 . 4 1 2 ) , P< 0 . 0 5 ] ; C o f i l i n . 1 . s i R N A组 C o f i l i n . 1的蛋 白量为 0 . 5 5 8± 0 . 0 3 3 , 明显 低于
[ ( 6 0 . 2 0±1 . 6 0 ) 个] 与未转染组 [ ( 5 1 . 5 0±1 . 1 4 ) 个] , 差 异有 统计学 意义 ( P< 0 . 0 5 ) 。 结论
达, 下调C o il f i n - 1 基 因的表达能抑制 肝癌细胞株 HU H- 7的侵袭 和转移能力 。
gene肝细胞肝癌hepatocellularcarcinomahcc是严重威胁人类生命的恶性肿瘤之一其发病率和死亡率在各种类型恶性肿瘤中更是位居前列超过50的新发病例发生在中国hcc早期并无特征表现早期发现难一旦出现症状大部分已发生转移虽然综合治疗hcc的措施不断改善但hcc患者预后仍然很差发病机理探讨hcc的早期转移及其高侵袭生长的分子病理机制发现病理过程中的重要环节和关键分子寻找具有hcc治疗价值的药物靶点将对hcc的肿瘤生物学研究药物研发及临床治疗奠定基础
E f e c t s o f R N A i ・ m e d i a t e d C o  ̄ / / n - 1 G e n e S i l e n c i n g o n p r o l i f e r a t i o n a n d i n v a s i v e n e s s i n h e p a t o c e l l u l a r c a r c i -
n o ma HI l l l - 7 c e l l s
C A O J i a n . p i n g , L O N G X i a o . 1 a n , G O N G Y o n g ,L I X i a o - j i e , X I E H a i 1 o n g
C o f i l i n 一 1 在 肝癌组 织 中高表
[ 关键词 】 肝 细胞 肝癌 ; C o i f l i n 一 1 ; 基因
【 中图分类号】 R 7 3 5 . 7
[ 文献标志码】 A
[ 文章编号】 1 0 0 8 — 8 1 9 9 ( 2 0 1 5 ) 0 5 - 0 4 6 5 - 0 5
( 1 . S c h o o l o fN u r s i n g, H u n a n P o l y t e c h n i c fE o n v i r o n m e n t a n d B i o l o g y , H e n g y a n g 4 2 1 0 0 5 , H u n a n ,C h i n a ; 2 . I n — s t i t u t e f o C a n c e r R e s e a r c h, U n i v e r s i t y fS o o u t h C h i n a , H e n g y a n g 4 2 1 0 0 1 , H u n a n , C h i n a ; 3 . D e p a r t en m t fP o a t h o l o — g Y , t h e P e o p l e s H o s p i t a l fC o h e n z h o u ,C h e n z h o u 4 2 3 0 0 0 , Hu n a n ,C h i n a )
C t r l — s i R N A组 ( 0 . 9 3 3- i - 0 . 0 1 5 ) 和未转染组 ( 0 . 9 6 1± 0 . 0 2 0 ) , 差异有 统计学 意义 ( P<0 . 0 5 ) ; 体外细 胞迁移 和侵袭 实验结果 均
显示 : 与C t r 1 . s i R N A组迁 移及侵袭 细 胞数 量 [ ( 7 9 . 0 0±1 . 3 3 ) 个] 和未 转染 组 [ ( 7 4 . 5 0 ±1 . 3 5 ) 个] 比较 , C o f i l i n - 1 - s i R N A组
[ ( 5 8 . 5 0±1 . 7 8 ) 个] 明显降低 ( P<0 . 0 5 ) ; C o f i l i n - 1 一 s i R N A组 穿膜 H u h - 7细 胞数 [ ( 3 6 . 5 0±0 . 8 3 ) 个] 明显低 于 C t r l — s i R N A组
医学 研 究 生 学 报 2 0 1 5年 5月 第 2 8卷 第 5期
J Me d P o s t e r a . V o 1 . 2 8 . N o . 5 .Ma y . 2 0 1 5
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( 基础 研 究)
R N A干 扰 C o il f i n 一 1 基 因沉 默对 人 肝癌 细胞 株 H u h 一 7 侵 袭 和 转 移 能 力 的影 响
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