核黄素微生物发酵工艺
维生素b2生产工艺流程
维生素b2生产工艺流程
《维生素B2生产工艺流程》
维生素B2,也称核黄素,是一种重要的维生素,对人体的新陈代谢和神经系统发挥着重要作用。它广泛存在于动植物的组织中,也称为天然维生素B2。由于维生素B2在人体内的代谢速度很快,因此每天需要通过食物摄入一定量的维生素B2来满足人体的生理需求。
维生素B2的生产工艺流程可以分为化学合成和微生物发酵两种方法。在化学合成方法中,通过一系列的有机合成反应,从简单的化合物中合成出维生素B2。这种方法具有工艺简单、生产成本低等优点,但同时也存在环境污染严重、原料利用率低等缺点。因此,目前工业上更多地采用微生物发酵法来生产维生素B2。
在微生物发酵工艺流程中,选择了产量高、生长速度快的微生物菌株,如链球菌和放线菌等,并通过不断地优化培养基、发酵条件和提高发酵产物的合成利用率,使得维生素B2的生产成本不断降低。此外,工艺流程中还会采取分离纯化、结晶等工艺步骤,以获取高纯度的维生素B2。
最终,经过多道工艺流程,生产出的维生素B2产品将符合国家标准,可以广泛应用于食品、医药等领域,满足人们对维生素B2的需求。
综上所述,《维生素B2生产工艺流程》是一种综合了化学合
成和微生物发酵两种方法的工艺流程,通过不断优化和改进,为人们提供了高质量的维生素B2产品。
维生素b2 合成法
维生素b2 合成法
维生素B2,又称核黄素,是一种水溶性维生素,对人体的生
长发育、调节新陈代谢等具有重要作用。以下是维生素B2的
合成方法:
维生素B2的主要合成方法为化学合成和微生物发酵两种。其中,化学合成法是通过有机合成的方式合成维生素B2,而微
生物发酵则利用某些微生物的代谢产物来自然合成维生素B2。
化学合成法:化学合成法主要是通过有机合成化学反应将简单化合物合成成维生素B2。该方法的主要步骤包括:
1. 预处理:将起始原料进行预处理,如氧化反应、酰化反应等。
2. 合成核黄素酮:使用特定的合成方法将起始原料合成成核黄素酮。
3. 还原:通过还原反应将核黄素酮还原成核黄素。
4. 活化:将核黄素进行活化,产生维生素B2。
微生物发酵法:微生物发酵法是利用某些微生物的代谢产物来自然合成维生素B2。一种常用的微生物发酵方法是利用大肠
杆菌进行发酵。具体步骤包括:
1. 选择菌株:选择适合合成维生素B2的菌株。
2. 培养基配方:选择合适的培养基并添加必需营养物质,如糖类和氮源等。
3. 发酵条件控制:控制发酵条件,包括温度、pH值、氧气供
应等。
4. 收获和提取:在发酵完成后,收获菌液并提取其中的维生素B2。
维生素B2合成法是通过化学合成和微生物发酵来实现的,两
种方法各有优劣。化学合成法可以在短时间内大规模生产,但对环境污染较大。微生物发酵法则更加环保,但生产效率较低。维生素B2,也被称为核黄素或核黄素磷酸盐,是一种重要的
维生素,它在体内参与能量代谢和细胞分裂过程。维生素B2
可以通过化学合成的方法获得。
维生素B2的化学结构由核黄素与磷酸盐组成,其合成方法主
维生素b2发酵生产工艺
维生素b2发酵生产工艺
维生素B2是一种重要的维生素,也被称为核黄素。它在人体内起着多种重要的作用,包括参与能量代谢、细胞增殖、神经系统正常功能等。因此,维生素B2的生产工艺对于满足市场需求和保障人们身体健康非常重要。
维生素B2的主要生产工艺是通过发酵生产。下面是维生素
B2的发酵生产工艺的简要描述:
首先,选择合适的微生物菌种。目前常用的微生物菌种有琥珀杆菌、毛球菌等。这些菌种具有较强的维生素B2合成能力和较高的发酵稳定性。
然后,制备菌种培养液。将选定的菌种接入菌种培养基中,通过搅拌培养、控制温度、pH值和营养物质浓度等条件,使菌种培养液优选培养。
接下来,进行发酵生产。将菌种接入生产发酵罐中,进行批量发酵。发酵罐内控制温度、pH值、氧气含量等条件,以达到最佳发酵状态。同时,添加适量的碳源、氮源、无机盐等营养物质,促进菌种维生素B2的合成。
同时,发酵过程中要进行增产调控。通过优化发酵条件、添加促进剂、调节发酵参数等手段,进一步提高维生素B2的产量和发酵稳定性。
发酵完成后,进行分离和提纯。将发酵液进行过滤、沉淀等操
作,分离出维生素B2。接着,通过提纯和结晶等工艺步骤,
得到纯度较高的维生素B2成品。
最后,对成品进行包装和质检。将维生素B2成品进行包装,
以确保其质量和安全性。同时,进行质量检验,包括成分分析、微生物检测等,以确保成品符合相关标准和要求。
维生素B2的发酵生产工艺在近几十年得到了不断改进和优化,以提高产量、质量和工艺稳定性。同时,随着生物工程和发酵技术的发展,新的生产工艺也在不断涌现,进一步推动了维生素B2的生产和应用。
维生素b2生产工艺
维生素b2生产工艺
维生素B2(又称核黄素)是一种水溶性维生素,具有重要的生理功能。它可以促进碳水化合物、脂肪和蛋白质的代谢,维持眼睛、皮肤和神经系统的健康状态。在工业上,维生素B2通常是通过微生物发酵生产的。
维生素B2生产工艺主要包括以下几个步骤:
1. 微生物培养:维生素B2的生产通常采用大肠杆菌或黄色链霉菌进行发酵。首先需要培养这些微生物,并提供适当的营养物质,如碳源、氮源和矿物质等,以促进它们的生长和繁殖。
2. 发酵过程:在发酵罐中,将培养好的微生物接种到发酵基质中。发酵基质通常由含有葡萄糖、磷酸盐和氨基酸等成分的培养基组成。在适当的温度、pH和氧气供应条件下,微生物会进行有氧呼吸并产生维生素B2。
3. 维生素提取:当发酵过程达到一定阶段时,维生素B2会被微生物分泌到发酵液中。然后可以采用离心或过滤等方法将微生物体和其他杂质分离,得到纯净的发酵液。
4. 结晶和纯化:发酵液中的维生素B2通过加盐酸以及其他化学药剂进行处理,使维生素B2结晶。然后,通过过滤、洗涤和干燥等步骤,将结晶的维生素B2纯化。
5. 包装和质量控制:纯化后的维生素B2会经过粉碎、筛分和包装等步骤,以便于使用和销售。同时需要进行质量控制,包
括对维生素B2含量、纯度和微生物污染等进行检测。
需要注意的是,维生素B2的生产过程需要保证微生物培养和发酵条件的稳定性,以获得高产量和高纯度的维生素B2。同时,工艺过程中需要控制污染和杂质的产生,以确保最终产品的质量和安全性。
以上是维生素B2生产的主要工艺步骤,通过合理的操作和控制,可以获得高质量的维生素B2产品,满足市场需求。随着科学技术的发展,维生素B2生产工艺也在不断改进和优化,以提高生产效率和产品质量。
核黄素微生物发酵工艺
核黄素微生物发酵工艺
动医104班17110417国梦婕
摘要:本文简介了核黄素的理化特性,概述了其在动物生长、饲料、疾病防治等方面的作用,重点介绍了微生物发酵产核黄素生产工艺的特点,工艺过程,设备,质量检测等内容,并展望了其发展。
关键词:核黄素;生产工艺;微生物;发酵
核黄素又称维生素B2(VB2)、维生素G或乳黄素,属于水溶性B族维生素,1920 年被第一次发现,1931 年第一次从卵蛋白中分离出来,1935 年核黄素的化学结构被鉴定[1]。其辅酶形式是黄素单核苷酸和黄素腺嘌呤二核苷酸。核黄素是自然界中存在广泛的一种氨基酸,是哺乳动物必需的一种营养物质。与其它的B族维生素相同,核黄素在动物体内的储存是有限的,因此,需要每日由饮食提供。
1核黄素的分子结构及理化特性
1.1核黄素的分子结构
核黄素的分子式是C17H20O6N4,分子量为376.36。系统
命名为7,8-二甲基-10-(1'-D-核糖基)-异咯嗪。
1.2核黄素的理化特性
核黄素是一种黄色到橙黄色细针状晶体,微臭,微苦,
是一个核糖醇侧链的异咯嗪的衍生物。其在常温下稳定,在
278~282 ℃熔融并且分解(约在240 ℃时变色),并且不受
氧气影响。核黄素微溶于水,在27.5 ℃下,溶解度为12 mg/100mL,核黄素水溶液呈黄色并有绿色荧光。其稍溶于乙醇、环已醇、苯甲醇、乙酸,不溶于乙醚、氯仿、丙酮和苯,可溶于氯化钠溶液,易溶于稀的氢氧化钠溶液,在碱性溶液中容易溶解,在强酸溶液中稳定。耐热、耐氧化。光照及紫外照射引起不可逆的分解。
2核黄素的生物作用
发酵法生产核黄素菌种和工艺
发酵法生产核黄素菌种和工艺
维生素B2(Vitamin B2)又称核黄素,是一种重要的维生素。 它是人体细胞中促进氧化还原的重要物质之一,还参与体内糖、蛋白质、脂肪的代谢,并有维持正常视觉机能的作用,人体如果缺乏核黄素,就会影响体内生物氧化的进程而发生代谢障碍,继而出现口角炎、眼睑炎、结膜炎、唇炎、舌炎、耳鼻粘膜干燥、皮肤干燥脱屑等。
2004年我国维生素B2出口1633吨,出口金额2433万美元。主要出口国为日本、美国、德国、韩国、西班牙、英国等。低含量饲料级VB2产品主要出口荷兰与美国。而高含量(96%和98%)主要销往印度、美国和德国。
国外的主要生产商与提供商为美国的罗氏、德国的巴斯夫与日本的武田等,而我国的主要生产商为湖北广济药业与上海迪赛诺两家,只有他们能够提供高质量的维生素B2,广济药业为发酵法生产,专业生产维生素B2及衍生产品。而上海迪赛诺主要用合成法生产。
未来的需求主要是在饲料级产品,欧洲与北美需求增长适中,中欧、俄罗斯,特别是亚洲需求旺盛。国内肉制品行业现在过多依赖这些饲料添加剂。
目前,维生素B2的市场缺口为2000-3000吨,且市场需求增长率为14-15%,而广济药业的生产能力每年1300吨,上海迪赛诺为每年700吨,最近完成检修扩产,再进一步扩产还没有计划。在此时期生产维生素B2进入市场,发展空间巨大,利润丰厚。由于市场前景广阔,德国BASF公司正在扩产。
我们的技术:
生产菌:枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)
发酵水平:20-25g/L
发酵时间:70小时
核黄素生产工艺
核黄素生产工艺
核黄素是一种维生素B族中的一员,也叫做维生素B2,是人
体必需的一种营养物质。在生产工艺中,核黄素的生产技术主要有化学法和微生物法两种方法。
1. 化学法
核黄素化学法生产流程包括以下几个步骤:
(1)预处理原料:将硫酸铵、氢氧化钠、硝酸、双氧水等原
料进行预处理,获得高纯度的原料。
(2)反应制备:将经过预处理的原料按一定比例混合,并经
过反应,产生核黄素中间体。
(3)还原反应:将核黄素中间体进行还原,获得核黄素。
(4)结晶:将还原后的核黄素溶液进行结晶,获得纯度较高
的核黄素晶体。
(5)干燥:将核黄素晶体进行干燥,获得最终产品。
2. 微生物法
微生物法生产核黄素的基本流程如下:
(1)选材:通过筛选和鉴定,选出一株产核黄素的高效菌株。
(2)预处理:将菌株进行预处理,获得高活性的菌种。
(3)发酵:在合适的发酵条件下,进行核黄素的生产。菌株
在一定的条件下,通过代谢生产核黄素。
(4)分离纯化:将发酵后的菌液进行分离纯化,分离出核黄素。
(5)结晶干燥:将分离出的核黄素进行结晶干燥,获得最终
产品。
微生物法相比于化学法,更加环保、节能、资源利用效果更好,但需要对生产设备、工艺、微生物用量等进行严密管理,确保产品质量和安全等因素。
总体来说,两种核黄素生产方法各有优缺点。化学法生产成本更低、稳定性更高,但生产过程中可能会产生环境污染。微生物法则更加环保,但生产周期长,成本也相对较高。当前,微生物法已经成为主流的核黄素生产方式,但化学法的开发仍持续进行,以降低其生产成本和对环境的影响,同时也能为某些化学产品提供相关支持和应用。
以豆渣为原料固态发酵生产核黄素
以豆渣为原料固态发酵生产核黄素
引言
核黄素(Riboflavin),又称维生素B2,是一种重要的水溶性维生素。它作为
辅酶参与人体内氧化还原反应,对维持细胞正常的新陈代谢起着重要作用。由于核黄素在人体内不能合成,因此必须通过食物摄取。目前,市面上的核黄素主要来自于化学合成,但这种方法产生的核黄素含有杂质,并且存在环境污染的风险。因此,寻找一种生产核黄素的新方法具有重要意义。
在过去的几年中,越来越多的研究者开始探索利用微生物发酵的方法来生产核
黄素。豆渣作为一种丰富的廉价资源,在固态发酵中展现了巨大的潜力。本文将介绍使用豆渣为原料进行固态发酵生产核黄素的方法和步骤。
材料和设备
材料
•豆渣:100克
•若干种核黄素发酵菌
•发酵基质(例如:麦麸、玉米粉等)
•高温、高湿度环境下的培养基
设备
•培养箱
•微量离心机
•无菌培养皿
•离心管
•称量仪器
实验步骤
步骤1:准备发酵基质
1.将麦麸或玉米粉等发酵基质加入适量的水中,混合均匀,形成糊状物。
2.将糊状物均匀地铺在培养皿中,覆盖好,放置在高温、高湿度的环境
中,进行预培养。
步骤2:准备发酵菌种
1.从已有的核黄素生产菌株中挑选出适合本实验的菌种。
2.将选好的菌株接种于适量的富含营养物的培养基中,进行静态培养。
3.培养一定时间后,通过离心,将菌体进行收获。
步骤3:发酵过程
1.将豆渣用清水冲洗干净,晾干备用。
2.将晾干的豆渣与发酵基质充分混合,使得豆渣与发酵基质均匀接触。
3.将均匀混合的样品装入无菌培养皿中,并在培养箱中进行发酵反应。
4.适时检测发酵样品的酸碱度、温度和湿度,并进行相应的调整。
维生素b2的发酵
• 这里需要指出的是,固体发酵工艺 比液体发酵操作简单方便,生产规 模可大可小,特别是固体发酵的设 备比液体发酵降低80%成本以上, 同时能大大减少能源的消耗,便于 推广和应用。
• 第三步,核黄素的提取。即从发酵
液中将核黄素提取出来。主要的提取
方法有:重金属盐沉淀法,酸溶液法
和碱溶液法。科学研究表明,碱溶液
Corynebactiaaminogensis
• 然而在利用棉囊阿舒氏酵母、解朊 假丝酵母和阿舒氏假囊酵母等真菌 进行核黄素生产时, 存在着发酵周 期过长、原料成分配比复杂、需加 入不饱和脂肪酸来促进核黄素的产 量等缺点。
• 随着基因工程技术的发展, 枯草芽 孢杆菌和产氨棒状杆菌等产核黄素 工程菌相继构建成功, 这些工程菌 具有发酵周期短( 2~ 3天) 、原料 要求简单、产量高等优点, 在核黄 素的微生物发酵生产中显示了强大 的生命力
维生素B2与发酵
第六组
维生素B2的概述
一、结构与性质
维生素B2又叫核黄素(riboflavin)。 是核醇与6.7一二甲基异咯嗪的缩合物。
核黄素味苦,在240℃时变暗色,熔 点为275℃~282℃,并在此温度下引起 破坏。
性质
核黄素为橙黄色结晶化合物,溶于水, 但溶解度很低,水溶液呈现黄绿色荧光
• (一)化学合成法制备维生素B2
• 将D-核糖与3,4-二甲基苯胺缩合,在氢化还原得 一仲胺此仲胺与苯氯化重氮化物反应,生成一种 偶氮染料化合物——3,4二甲基-6-苯偶氮-D –核 糖胺最后与巴比妥酸在乙酸存在下缩合即可得到 维生素B2。此维生素B2的生产工艺生产B2的产 率可达95.3%,纯度达96.8%。其中合成所用的 D-核糖目前是以D-葡萄糖为原料,经芽孢杆菌属 细菌发酵而成的,它代替了原先用D-葡萄糖经4步 反应合成D-核糖的方法。因为后者需要用到钠汞 齐,从而带来了很严重的环境污染问题。化学法 合成维生素B2可以利用传统的分批反应的设备, 但在纯化精制阶段,偶氮燃料中间物和维生素B2 均会生成细小晶体,给有效地过滤和洗涤带来了 较大的困难。同时由于这2种化合物的颜色都比较 深,也使工厂的车间管理较困难。
核黄素生产工艺
核黄素生产工艺
核黄素(Vitamin B2),也被称为黄色素、维生素G。它是一
种水溶性维生素,对人体具有重要的生理功能。核黄素在机体中作为辅酶参与多种酶的催化作用,对蛋白质、脂肪和碳水化合物的代谢起着重要的调节作用。由于核黄素的重要性,其生产工艺也备受关注。
核黄素的生产工艺可以分为天然源法和人工合成法两种。天然源法是通过酵母或霉菌发酵来产生核黄素,而人工合成法则是利用化学合成的方法来生产核黄素。
在天然源法中,首先要选取适合发酵的菌种。常用的菌种包括酵母菌和黑曲霉。这些菌种能够利用廉价的碳源(如糖蜜、麸皮)进行发酵,产生核黄素。同时还需要优化菌种培养条件,包括温度、pH值、氧气供应等参数的控制,以提高核黄素的
产量。发酵液经过过滤、浓缩、提纯等步骤后,得到核黄素的原料。
人工合成法是通过合成工艺来生产核黄素。原料通常是化学品,包括苯乙酮、裂解焦油等。这些原料经过一系列的化学反应,如羟甲基化、环化、加氢等步骤,最终合成核黄素。这种工艺的优点是可以实现规模化生产,而且产量较高。然而由于合成过程中使用了多种有机溶剂,处理废水和废气会带来一定的环境污染问题。
无论是天然源法还是人工合成法,提纯工艺都是核黄素生产的关键步骤。一般来说,提纯工艺包括沉淀、溶解、结晶、过滤
等步骤。由于核黄素的物理性质与其他杂质有所不同,因此可以通过适当的溶剂选择、温度控制和pH调节等方式,将核黄素与其他杂质分离。最终得到纯净的核黄素产品。
核黄素生产工艺的目标是提高核黄素的产量和纯度,并降低生产成本。为此,科研人员一直致力于寻找更高效的菌种、优化发酵条件,以及开发更环保的合成方法。同时,还需要加强废弃物的处理和资源利用,减少环境污染。
维生素b2生产工艺流程
维生素b2生产工艺流程
维生素B2,也被称为核黄素、维生素G,是一种重要的水溶
性维生素,对于人体的生长发育、维持神经系统功能以及促进能量代谢等具有重要的生理功能。下面是维生素B2的生产工
艺流程介绍。
1. 发酵培养:维生素B2是通过微生物发酵生产的。首先需要
选用产生维生素B2的微生物菌株,一般选择大肠杆菌、酵母
菌或者黄曲霉等。将菌株接种到培养基中并进行预培养,培养基中包含有机碳源、氮源、矿物质等营养物质供微生物生长所需。
2. 发酵过程控制:控制发酵条件对于维生素B2的产量和质量
至关重要。一般来说,酸碱度、温度、发酵时间以及氧气供应都是需要精确控制的参数。酸碱度一般保持在pH=6-7左右,
温度控制在25-30摄氏度,发酵时间一般为72-96小时。同时,通过氨基酸等添加物的控制,能够促进微生物对维生素B2的
合成。
3. 提取和纯化:发酵液中含有维生素B2、生物质和其他杂质。首先进行发酵液的离心分离,将微生物和培养基分开。然后采用醇类溶剂(如丙酮、乙醇等)进行提取,将维生素B2溶于
溶剂中,再通过快速扔速离心或蒸发浓缩将维生素B2纯化。
4. 结晶和干燥:将纯化的维生素B2溶液进行结晶处理,通过
降温或加酸等方法使维生素B2从溶液中析出。然后进行离心
或过滤,将晶体分离出来。最后,将分离出的维生素B2进行
干燥处理,去除水分以提高稳定性。
5. 包装和检验:经过干燥的维生素B2根据生产需求进行包装,并同时进行质量检验。质量检验包括外观检查、含量分析、溶解度测试等,以确保维生素B2的质量合格。
以上就是维生素B2生产工艺的主要流程。为了提高生产效率
核黄素工艺
发酵工艺
1、工艺流程图
2、设备流程图
3、各种培养基配比 3.1平板与斜面培养基
3.2种子罐及发酵罐培养基(摇瓶种子配方同一级种子罐)
4、工艺条件
4.1种子制备
4.1.1 摇瓶种子制备
(1)装液量:85mL/500mL
(2)接种量:每瓶接2支甘油管(1ml)
(3)培养条件:37℃,100rpm,培养7-12h
4.1.2 一级种子罐(5L)
(1)接种量5%
(2)装液量3L
(2)PH起始调至6.8
(3)起始转速:300rpm
(4)溶氧:不控溶氧,8小时开始每小时增加搅拌20,通风:1:1。
(5)转罐标准:20≤OD≤25,800≤FB≤1100,大概在18-21h
4.1.3 发酵罐(20L)
(1)装液量10 L
(2)三级发酵,接种量10-15%
(3)发酵温度40℃
(4)起始转速300-750 rpm
(5)通气量0.5-1.2
(6)溶氧不低于20%
(7)每3h检测菌浓度和残糖含量,后期补料后检测频率改为每2h取样一次(8)残糖控制6-10 g/L
(9)发酵终止在45-48h,发酵过程中体积过大分料
5、样品检测方法
维生素B2(核黄素)技术简介
维生素B2又称核黄素,它是人体细胞中促进氧化还原的重要物质之一,还参与体内糖、蛋白质、脂肪的代谢,并有维持正常视觉机能的作用,人体如果缺乏核黄素,就会影响体内生物氧化的进程而发生代谢障碍,继而出现口角炎、眼睑炎、结膜炎、唇炎、舌炎、耳鼻粘膜干燥、皮肤干燥脱屑等。
产品
经验式:C17 H20 N4Na O9P 2H20
分子量:514,36
结构式
产品规格
该产品可以98.%的结晶体出售,也可以20%的饲料配方出售。
2. 应用
动物饲料配方、药品食品营养强化剂
3. 市场
产量:2400 吨/年
市场价:18 美元/KG(结晶体)
4. 生产成本
原料+耗能<9美元/kg
我们提供菌种与技术诀窍
5. 工艺描述
菌株分类
生产工艺由芽胞杆菌(Bacillus subtilis)发酵来生产维生素B2
合成概要
种子罐为8立方的罐,灌注3立方的用水和原料,杀菌后,体积将至4立方,另外添加红霉素或链霉素溶液。
生产罐为1000立方的罐,灌注40立方无菌的用水与原料,如有必要,用氢氧化钠把PH调到最适的值,然后加入红霉素或者链霉素。
发酵后,收集发酵液,并送往提取系统。
流程图
发酵类型补料分批发酵
发酵时间hr 65-72
间歇时间, hr 12
周期, hr 77-84
发酵体积, [m3] 260
工作体积, [%] 75
收获体积, [m3] 195
最终产品浓度. [g/l] 20+10%
产物, [Kg/batch] 3510 + 10%
电能(搅拌.+ 冷却.), KWH/KG 12,7 压缩空气, KWH/KG 12,2
蒸汽,KG/KG 10,4
核黄素片剂制备工艺流程
核黄素片剂制备工艺流程
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核黄素生产工艺
核黄素生产工艺
一、概述
核黄素是一种重要的维生素,能够参与人体内多种代谢过程,对人体健康具有重要作用。本文将介绍核黄素的生产工艺。
二、原料准备
1. 糖类:糖蜜、葡萄糖等;
2. 氮源:酵母粉、氨水等;
3. 磷源:磷酸盐等;
4. 微量元素:镁盐、铁盐等。
三、发酵过程
1. 发酵菌株的选取:选择高效核黄素生产菌株进行培养和扩增;
2. 培养基配制:按照一定比例加入糖类、氮源、磷源和微量元素制成培养基;
3. 接种发酵罐:将培养基加入发酵罐中,经过灭菌处理后接种菌株,开始发酵;
4. 发酵条件控制:在适宜的温度(30-37℃)、pH(6-7)和通气条件下进行发酵,同时添加适量的氨水调节pH值;
5. 发酵时间控制:根据不同菌株和条件控制发酵时间,一般为24-48小时。
四、提取和纯化
1. 发酵液的收集:将发酵罐中的发酵液经过离心、过滤等处理,得到
含有核黄素的菌体和发酵液;
2. 菌体破碎:将菌体经过超声波、高压均质等处理,使其破裂释放出
核黄素;
3. 溶解和分离:将破碎的菌体在适宜条件下溶解,利用离子交换层析、凝胶层析等技术分离出核黄素;
4. 纯化和干燥:通过进一步的纯化步骤(如逆流层析、高效液相色谱等)得到高纯度的核黄素,并通过冷冻干燥等方法进行干燥。
五、质量控制
1. 原料检测:对原料进行检测,确保其符合生产要求;
2. 发酵过程监控:对发酵过程进行监控,确保温度、pH值、氨水用量等符合要求;
3. 产品检测:对生产出来的核黄素进行检测,确保其质量符合标准;
4. 环境卫生控制:对生产环境进行卫生控制,确保产品不受污染。
VB2的生产工艺说课材料
参考文献
• [ 1 ] 姚青青, 裘娟萍, 黄海婵.核黄素生物合成关键酶抑制剂的研究进展[ J ].
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• [ 3 ] 黄 林, 程 新, 涂晓嵘,李昆太. 核黄素产生菌阿舒假囊酵母发酵条
VB2的生产工艺
核黄素生产方法
• 目前, 主要有4种核黄素生产工艺: 植物体提取法、化ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ合
成法、微生物发酵法和半微生物发酵合成法,其中微生物 发酵法是近数年来发展起来的一种经济有效的方法, 生产 核黄素具有成本低、生产周期短、产品纯度较高等优点, 是国内外工业生产核黄素的发展趋势。广济药业目前是国 内主要的一家使用一步发酵法生产核黄素的生产商,生产 成本远低于其它使用半发酵/半合成方法的生产商。除了 从自然界筛选核黄素高产菌株外, 核黄素生产厂商还十分 重视抗反馈抑制突变株的选育和诱变育种。张星元等以 60Co辐射的γ射线为诱变剂, 以核黄素合成代谢的中间产物 的结构类似物为拮抗物, 从结构类似物抗性突变株中筛选 到数株高产核黄素的突变株, 其中杀结核菌素抗性突变株 T分30子,生核物黄学素技产术量的比发出展发,菌基株因提工高程4等0%先以进上手。段近已年经来应,用随于着 核黄素生产菌种育种中。
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核黄素微生物发酵工艺
动医104班国梦婕
摘要:本文简介了核黄素的理化特性,概述了其在动物生长、饲料、疾病防治等方面的作用,重点介绍了微生物发酵产核黄素生产工艺的特点,工艺过程,设备,质量检测等内容,并展望了其发展。
关键词:核黄素;生产工艺;微生物;发酵
核黄素又称维生素B2(VB2)、维生素G或乳黄素,属于水溶性B族维生素,1920 年被第一次发现,1931 年第一次从卵蛋白中分离出来,1935 年核黄素的化学结构被鉴定[1]。其辅酶形式是黄素单核苷酸和黄素腺嘌呤二核苷酸。核黄素是自然界中存在广泛的一种氨基酸,是哺乳动物必需的一种营养物质。与其它的B族维生素相同,核黄素在动物体内的储存是有限的,因此,需要每日由饮食提供。
1核黄素的分子结构及理化特性
核黄素的分子结构
核黄素的分子式是CHON,分子量为。系统命名为7,8-二甲基-10-(1'-D-核糖基)-异咯嗪。
核黄素的理化特性
核黄素是一种黄色到橙黄色细针状晶体,微臭,微苦,是一个核糖醇侧链的异咯嗪的衍生物。其在常温下稳定,在
278~282 ℃熔融并且分解(约在240 ℃时变色),并且不受氧气影响。核黄素微溶于水,在℃下,溶解度为12 mg/100mL,核黄素水溶液呈黄色并有绿色荧光。其稍溶于乙醇、环已醇、苯甲醇、乙酸,不溶于乙醚、氯仿、丙酮和苯,可溶于氯化钠溶液,易溶于稀的氢氧化钠溶液,在碱性溶液中容易溶解,在强酸溶液中稳定。耐热、耐氧化。光照及紫外照射引起不可逆的分解。
2核黄素的生物作用
核黄素是机体必需微量营养素之一,具有广泛的生理机能,被世界卫生组织(WHO)列为评价人体生长发育和营养状况的六大指标之一。在生物体内,核黄素以黄素单核苷酸和黄素腺嘌呤二核苷酸的形式存在,直接参与碳水化合物、蛋白质、脂肪的生物氧化作用,在生物体内具有多种生理功能。因而核黄素在食品、饲料、医药工业等方面具有广泛的应用前景[2-4]。
如果机体缺乏核黄素就会影响生物体正常的氧化作用, 引起物质代谢紊乱, 出现一系列的病症, 严重的将会导致死亡。如鸡的核黄素缺乏,就会导致其消化机能衰退,眼与皮肤抗抵力下降,从而使小鸡易患曲爪病,种鸡则会影响种蛋的孵化率。猪的核黄素缺乏,就会导致其生长迟缓,四肢僵硬,皮肤破裂,慢性腹泻,眼睛发炎等。因此,对于集约化养殖来说,核黄素是一种不可缺少的饲料营养成分。在饲料中适当添加核黄素,不仅能够满足畜禽生长和生产的需要,还能在一定程度上降低疾病的发病率。
3核黄素生产工艺
核黄素较早就实现了商业化生产。目前,国际生产核黄素的工艺方法主要有4种:植物抽提法、
化学合成法、微生物发酵法以及半微生物发酵半化学合成法[4]
。其中,微生物发酵法是近年来发展起来的一种经济有效的方法,其生产核黄素具有设备简单、对环境无污染、成本低、生产周期短、产品纯度较高等优点,已经成为国内外工业生产核黄素的发展趋势。以下将对微生物发酵工艺进行介绍。 微生物菌种
自然界中,可以代谢产生核黄素的微生物有很多,包括真菌(如酵母菌),细菌等,而应用于核黄素工业生产的菌种非常少。在微生物发酵法中,要提高核黄素产量和经济效益的,优良的菌种是必
要条件之一[5]
。常用的有棉病阿舒囊霉(Ashbya gossypii )、枯草芽孢杆菌(Bcillus subtilis )和
阿舒假囊酵母(Eremothecium ashbyii )等(表1)[4]
。
表1 核黄素工业生产中常用菌种
菌种名称 学名
分类地位 阿舒假囊酵母
Eremothecium ashbyii 酵母 Candida flareri
酵母
Saccharomyces cerevisiae
酵母 棉病阿舒囊霉 Ashbya gossypii 霉菌 枯草芽孢杆菌
Bcillus subtilis
细菌
生产过程
微生物发酵法生产核黄素,采用三级发酵法。将在25℃培养成熟的核黄素产生菌的斜面孢子用无菌水制成孢子悬浮液,然后接种于种子培养基中培养(30℃,30~40小时),最后将二级发酵液移种至三级发酵罐发酵(30℃,160小时),得到核黄素发酵液。
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图1 核黄素发酵生产主要工艺流程
随着分子生物技术、基因工程技术等的发展,核黄素生产菌将具备产量高、耗能低、产品纯度低等优点。姜小山等以阿舒假囊酵母为出发菌株,在合成培养基上诱变筛选得到了数株抗嘌呤拮抗物8-AG
的突变株,进行传代和摇瓶发酵试验,发现核黄素的产量比出发菌株最高提高%[6]
。由此可见,利用基因工程等手段选取优良菌种,是非常必要且有效的。
核黄素的微生物发酵法包括两种:固体发酵法和液体深层发酵法。固体发酵法是以豆渣为原料进行生产的,具有工艺设备简单,原料广泛,技术条件要求较低等特点,但又具有生产效率不高,劳动强度大,生产成本较高等缺点。液体深层发酵法适用于机械化大量生产,原料的利用率较高,有利于降低生产成本,但却需要较高的设备条件要求,所需原料量大。
图2 深层发酵法生产流程
将核黄素从发酵液中提取出来的方法,主要有四种:重金属盐沉淀法、Morehouse 法、酸溶液法和碱溶液法。过去,工业生产中多采用酸溶液法提取核黄素。但由于酸溶液法提取核黄素的耗能较大,经一次溶解、结晶,获得核黄素纯度只有60%~70%。章克昌等成功利用碱溶液法提取核黄素,并经二次
分离结晶,获得纯度达%的成品,使得核黄素的提取技术极大提高[7]
。碱溶法提取核黄素不仅收益率高,而且能耗低。随着离心分离设备的不断改进,碱溶法分离提取核黄素的优越性将越来越明显。
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28℃ →
9d
28℃ → 3-4d
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29-30
℃
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34-36
h
29-30
℃
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170d
发酵液