氮源对隐甲藻_Crypthecodiniumcohnii生长_和DHA产量的影响
DHA的来源及寇氏隐甲藻生产DHA的研究
收稿日期:2011-05-12作者简介：姜剑锋（1984-），男，湖北武汉人，内蒙古农业大学硕士研究生，主要从事微生物油脂研究。
通讯作者：何东平（1957-），男，湖北武汉人，教授，博士,博士生导师，研究方向为微生物油脂与植物蛋白。
1DHA 的结构和功能1.1DHA 的结构DHA ，中文称之为二十二碳六烯酸，英文名Docosahexaenoic acid （简称DHA ，下同），化学名称为二十二碳-4,7,10,13,16,19-六烯酸（全顺式），简记为C22:6(ω-3)，属ω-3（n-3）系列长链多不饱和脂肪酸。
1.2DHA 的功能1.2.1健脑益智———人体“脑黄金”DHA 是人体大脑的主要组成成分之一，主要以磷脂的形式存在，约占脑细胞脂肪酸的10%左右。
在胎儿时期，DHA 必须从母体获得，妇女在怀孕期间，如果DHA 摄入量不足，会导致胎儿的脑细胞生长和发育不正常，严重的会产生弱智。
在婴幼儿时期，大脑处于生长发育阶段，研究表明，饮食中含DHA 丰富的婴儿，思维比一般的婴儿更加敏捷，语言能力和学习能力也较对照组高，患神经系统疾病（如神经官能症）的几率也低得多。
青少年学生，由于学习任务繁重，多摄入DHA ，可以增强记忆力、改善注意力等。
对成年人来讲，DHA 也是维持功能发挥必不可少的物质，特别是脑力劳动者和中老年人，如果DHA 摄入不足，则大脑功能会降低，会出现注意力不集中、心情抑郁和效率低下等状况，更严重的可能会导致老年痴呆症。
1.2.2预防和治疗心血管疾病DHA 具有抗凝血、抑制血小板凝集和血栓形成,从而预防心肌梗塞等心血管疾病的发生。
Mori 等人指出，DHA 具有降血压的功能，并且可以调节人体内血脂和脂蛋白的正常代谢，降低血液粘稠度和血液中胆固醇水平，增加高密度脂蛋白含量。
日本的科学家指出，DHA 可有效抑制血栓的形成，起到防止心血管疾病发生的作用。
Siscovick 等人指出，心脏病患者每日进食DHA ，可以有效降低心脏猝死的几率。
利用代谢组学研究隐甲藻葡萄糖耐受及DHA生物合成机制
利用代谢组学研究隐甲藻葡萄糖耐受及DHA生物合成机制Metabolomics Analyses of Glucose Tolerance and DHA Accumulationin in Crypthecodinium cohnii一级学科：化学工程与技术学科专业：生物化工作者姓名：李兴锐指导教师：张卫文天津大学化工学院二零一七年四月摘要寇氏隐甲藻是海洋微藻生产DHA研究领域关注的热点，因其油脂及DHA 含量高，且其他多不饱和脂肪酸在总脂肪酸中的百分含量不超过1%。
然而在隐甲藻生产DHA过程中葡萄糖抑制作用明显，因此选育耐受葡萄糖的隐甲藻对于改善DHA发酵能力具有重要的意义。
本文首次通过定向驯化获得了一株高耐受葡萄糖的隐甲藻驯化株。
驯化过程经历650天，驯化株在葡萄糖耐受性及油脂积累方面显著提高。
在45 g/L葡萄糖浓度条件下，比生长速率提高了2.8倍，平均倍增时间缩短了31.9%，葡萄糖消耗速率提高了2.6倍，油脂含量提高了15.5%。
代谢组分析结果表明驯化株相对于出发株，21个代谢物明显上调，甘油、谷氨酸、丙二酸及琥珀酸作为核心化合物和驯化株耐受性提高有关联。
研究从全局水平理解并探索适应性机制，可为隐甲藻的育种提供重要的依据。
另一方面，从代谢角度研究隐甲藻生长及DHA生物合成特性，对隐甲藻发酵生产DHA产业的发展具有重要意义。
本文首先建立了隐甲藻间歇补料培养体系，所收获的生物量、DHA产量及DHA产率都分别达到42.9 g/L，5.7 g/L及47.5 mg/L/h。
从48 h到72 h油脂积累显著，提高了27.5%，从72 h到96 h DHA积累显著，DHA在总脂肪酸的百分含量提高了17.8%。
继而利用热图分析代谢组数据，结果显示G6P、GAP、AKG、OXA、DHAP可能和隐甲藻不同生长时期的表型相关。
此外，氧气供应在工业微生物发酵中起着着举足轻重的作用，为了研究氧气供应对隐甲藻DHA生产的影响，本文考察了不同溶氧条件下隐甲藻DHA生产能力的变化。
一种提高隐甲藻DHA产量的方法[发明专利]
![一种提高隐甲藻DHA产量的方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/fe2059c5bcd126fff6050b93.png)
专利名称：一种提高隐甲藻DHA产量的方法 申请号：CN20181108034 0.4 申请日：20180917 公开号：CN109022509A 公开日：20181218
摘要：本发明属于藻类技术领域，公开了一种提高隐甲藻DHA产量的方法，其包括如下步骤：步 骤1）种子培养：将隐甲藻活化，然后接入装有摇瓶种子培养基的培养瓶中进行摇瓶种子培养，然后 接种到种子罐培养基中进行培养，得到隐甲藻种子液；步骤2）发酵：将隐甲藻种子液接种到含有发 酵培养液的反应池中，培养至72h时，往发酵培养液中添加花生四烯酸和没食子酸丙酯，继续培养 4 8‑72h，然后收集藻细胞，用于提取DH A。本发明方法简单可行，隐甲藻生物量和DH A产量均大幅 提高，能够实现工业化生产。
申请人：杭州园泰生物科技有限公司 地址：311400 浙江省杭州市富阳区场口镇工业园区上庄路3号第6幢 国籍：CN 更多信息请下载全文后查看
第07章 海洋藻类Crypthecodinium cobnii 异养生长生产二十二碳六烯酸可用的替代碳源 佘隽资料
第七章海洋藻类Crypthecodinium cobnii异养生长生产二十二碳六烯酸可用的替代碳源前言近年来，多不饱和脂肪酸备受关注，这是因为它们在人体中的有着各种生理功能，且有益人类健康。
至今，鱼油是主要的脂肪酸；一些海洋微藻种的单细胞油脂（SCO）也含有重要的多不饱和脂肪酸。
在本书的各章节中，这些油是主要的脂肪酸来源。
重要的异养海洋生物甲藻，Crypthecodinium cobnii，相关研究很多。
这仅是多不饱和脂肪酸的一类单细胞油脂DHA，C.cobnii 中积聚了高含量的DHA[脂肪酸总量的25-60%]。
优化DHA生产的重要参数，包括生长率、初始生物量、总脂含量以及脂类中DHA比例。
大部分商业化的培养过程中，葡萄糖是主要的碳源和能源。
葡萄糖是工业生产中容易获得的原料，从谷物淀粉中通过水解（化学、酶解）得到葡萄糖浆。
成本低、获取方便、能浓缩储存，以溶液灭菌，性质稳定。
制成水溶液便于发酵，且灭菌容易，传输到最终的发酵罐中是单一的溶液。
但它不可能仅满足作为底物的条件。
这一章讨论了利用替代碳源-乙酸和乙醇-生长，脂类积聚，DHA生产， C.cobnii批量分批补料式培养培养。
通常也将葡萄糖作为可用的原料。
乙酸在石化工业中生产的比例很大，其成本是葡萄糖的三倍，大约600美元/t。
发酵中大比例使用有缺陷，以浓缩的方式，要求操作小心，任何溢出物或接触到皮肤必须迅速处理。
将其归类为“强酸”，它没有盐酸或硝酸这些无机酸攻击性强。
因此，大量使用时不需要紧急警告。
乙醇能通过发酵生产，在巴西、新西兰、美国广泛生产，被视为“汽油醇”。
因为是用葡萄糖发酵生产，其成本高于葡萄糖。
“食品级”乙醇，需要满足“食品级”DHA 生产，售价760-800美元/t，现在比乙酸更贵。
这些底物，如葡萄糖，是水溶液，因此混在发酵媒介中没有问题。
这些底物都是“纯品”，作为人类消费品生产也是适当的。
他们没有残留，没有未发酵的化合物，最终的废物可以最小限度处理。
通过DHA藻粉的18S rDNA序列验证藻油脂肪酸组成推断DHA微藻属名
通过DHA藻粉的18S rDNA序列验证藻油脂肪酸组成推断DHA微藻属名常桂芳;柴丹;戴小军;田桂尾;王兴国【摘要】我国卫生部批准为新资源食品的DHA藻油包括产自裂壶藻(Schizochytrium sp.)、吾肯氏壶藻(Ulkenia ameoboida)和寇氏隐甲藻(Crypthecodinium cohnii).通过对几种商品DHA藻粉的18S rDNA进行扩增、测序和比对,结合藻油的脂肪酸组成,对藻油的生产藻种进行了鉴定.结果表明,基于18S rDNA序列分析数据建立的系统进化树可进一步确定DHA微藻属名.%DHA algal oil approved as novel food by Chinese Ministry of Health should be derived from Schizochytrium sp. , Ulkenia ameoboida and Crypthecodinium cohnii. The microalgae species were identified through 18S rDNA amplification, sequence analysis and comparison from commercial algal powder combined with the fatty acid composition of algal oil. The results showed that phylogenetic tree based on 18S rDNA sequence could further confirm the DHA producing microalgae species.【期刊名称】《中国油脂》【年(卷),期】2012(037)009【总页数】5页(P80-84)【关键词】DHA;裂壶藻;吾肯氏壶藻;寇氏隐甲藻;脂肪酸组成;18S rDNA【作者】常桂芳;柴丹;戴小军;田桂尾;王兴国【作者单位】丰益(上海)生物技术研发中心有限公司,上海200137;江南大学食品学院,江苏无锡214122;丰益(上海)生物技术研发中心有限公司,上海200137;丰益(上海)生物技术研发中心有限公司,上海200137;丰益(上海)生物技术研发中心有限公司,上海200137;江南大学食品学院,江苏无锡214122【正文语种】中文【中图分类】TS222;Q949.2Abstract:DHA algal oil approved as novel food by Chinese Ministry of Health should be derived from Schizochytrium sp.，Ulkenia ameoboida and Crypthecodinium cohnii.The microalgae species were identified through 18S rDNA amplification，sequence analysis and comparison from commercial algal powder combined with the fatty acid composition of algal oil.The results showed that phylogenetic tree based on 18S rDNA sequence could further confirm the DHA producing microalgae species. Key words:DHA;Schizochytrium sp.;Ulkenia ameoboida;Crypthecodinium cohnii;fatty acid composition;18S rDNADHA是人类大脑和视网膜组织中细胞膜的组成成分，对婴幼儿视觉和神经系统的发育有至关重要的作用，同时它在预防高血压、动脉硬化、关节炎以及癌症等疾病方面具有显著功效［1］。
环境条件对隐甲藻生长及DHA产量的影响
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寇氏隐甲藻生产DHA的研究进展
第49卷第12期2020年12月应用化工Applied Chemical IndustryVol.49No.12Dec.2020寇氏隐甲藻生产DHA的研究进展杨晓辉，贾晓强(天津大学化工学院系统生物工程教育部重点实验室，天津300354)摘要:介绍了当前国内外二十二碳六烯酸(DHA)的生产和研究现状,寇氏隐甲藻是有较高DHA生产能力的优势菌株。
由于当前我国DHA产能较低,需依赖进口满足需求，因此通过对优势生产菌株进行分析和改造来进一步提高DHA的产量迫在眉睫。
同时详细介绍了高产菌株隐甲藻的胞内生产机理，以及通过各种理性优化和分子改造手段提高隐甲藻产DHA能力的研究。
最后,针对利用隐甲藻生产DHA领域目前尚存在的问题进行总结并对应提出建议，为DHA生产相关研究进行了展望。
关键词:寇氏隐甲藻;二十二碳六烯酸;生产中图分类号:TQ95；Q81文献标识码:A文章编号：1671-3206(2020)12-3126-06Progress in production of docosahexaenoicacid by Crypthecodinium cohniiYANG Xiao-hui9JIA Xiao-qiang(Key Laboratory of Systems Bioengineering of Ministry of Education,School of Chemical Engineering andTechnology,Tianjin University,Tianjin300354,China)Abstract:The production and research status of docosahexaenoic acid(DHA)at home and abroad are introduced.Crypthecodinium cohnii is a dominant strain with high DHA production capacity.Due to the current low capacity of DHA in China and the need to rely on imports to meet demand,it is urgent to further improve the production of DHA through analysis and transformation of dominant production strains.At the same time,the mechanism of intracellular production of the high-yielding strain and the research of improving the DHA production ability of C.cohnii by various rational optimization and molecular transformation methods are introduced in detail.Finally,some problems in the production of DHA by C・cohnii are summarized and corresponding suggestions are put forward, and the research on DHA production is prospected.Key words:Crypthecodinium cohnii；docosahexaenoic acid；production脂肪酸是由桂链和竣基组成的有机化合物，多不饱和脂肪酸(Polyunsaturated fatty acid,PUFA)是其中的一类⑴。
几种重要微生物油脂在食品及饲料工业中的应用
几种重要微生物油脂在食品及饲料工业中的应用金青哲;王兴国【摘要】微生物油脂的经济可行性主要取决于其用途,目前微生物油脂已成为几种长链多不饱和脂肪酸的重要资源.对富含ARA、DHA和EPA的几类微生物油脂在孕婴食品、成人食品和水产饵料、饲料添加剂方面的应用进行了介绍.通过总结及展望,说明这几类微生物油脂将会在更多的配方食品中得到应用,微生物油脂产品的消费者将从特殊人群扩展到所有人群,并形成一个大产业.%The economic feasibility of microbial oils (SCO) depend largely on the way of their application. At the present, SCO have been the sources of key polyunsaturated fatty acids. The application of several key microbial oils such as DHA -SCO, ARA -SCO, EPA -SC0 in infant formulas, pregnant woman and adult foods, beverages, animal feeding and fish feeding were described. For the future, SCO will be increasingly utilized in more formulated foods;the potential customers of the fortified foods with SCO will not be confined to particular persons or groups and may be extended to all people. As a result,a huge, multimillion -dollar industry will take shape.【期刊名称】《中国油脂》【年(卷),期】2011(036)002【总页数】5页(P48-52)【关键词】微生物油脂;单细胞油脂;ARA;DHA;EPA【作者】金青哲;王兴国【作者单位】江南大学,食品科学与技术国家重点实验室,江苏,无锡,214122;江南大学,食品学院,江苏,无锡,214122;江南大学,食品科学与技术国家重点实验室,江苏,无锡,214122;江南大学,食品学院,江苏,无锡,214122【正文语种】中文【中图分类】TQ92;TS22微生物油脂(Microbial oils)又叫单细胞油脂(Single cell oils，SCO)，是指由霉菌、酵母菌、细菌和微藻等产油微生物(Oleaginous microorganism)在一定的培养条件下，利用碳源在菌体内大量合成并积累的三酰甘油、游离脂肪酸类以及其他一些脂质。
温度和碳源对隐甲藻生长及DHA积累的影响
中 图分 类号 ： Ｑ ９ ３ 文献标识码 ： Ａ 文章 编 号 ： １ ０ ０ ７—９ ０ ８ ４ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ５— ０ ５ ９ ７— ０ ７
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微生物发酵法生产EPA及DHA的研究进展
葡萄糖合成多不饱和脂肪酸的代谢途径和影响微生物合成多不饱和脂肪酸的因素出发 论述了微
生物发酵法生产 EPA 和 DHA 的研究现状和最新进展
关键词 二十碳五烯酸 二十二碳六烯酸 微生物发酵
中图分类号 TS201.3
文献标识码 A
文章编号 1005-9989(2004)06-0013-04
New development in production of DHA and EPA by microorganism fermentation
山 被 孢 霉 20-17 和 1S-4 的 EPA 产 量 分 别 达 到 490mg/L 和 300mg/L Shimizu 曾将 1S-4 外源添加 亚麻籽油下在 12 培养 9d 菌丝体再在 12 老化 7d 结果 EPA 产量达到 1.88g/L[9] 由 Mead acid 转 变为 EPA 并不需要 12 脱饱和酶 1S-4 突变株 Mut48 由于缺乏 12 脱饱和活力 外源添加 Mead acid 将可以大量产生 EPA 而没有 ARA 的存在 采 用含 3%亚麻籽油的培养基在 5L 罐 20 深层培养 Mut48 10d EPA 产量达到 1g/L 虽然 Mut48 EPA 产量低于 Shimizu 的结果 但是他们的生产率相差 无几 且 Mut48 总脂中 ARA 的含量远低于 1S-4 的 含量 由此也可以看到 EPA 的生物合成存在降温培 养和阻断突变型两条途径 Kendrick 等对多支真菌 的脂肪酸作了研究 发现 Thraustochytrium arueum Schizochytrium aggregatum 和 Saprolegnia parasitica 3 支菌 EPA 含量较高[10] Martek Bioscience 公司采 用 Nitzchiz 异养培养生产 EPA N alba 细胞浓度在 64h 内达到 45~48g/L EPA 每天产量大约是 0.25g/L
DHA 藻油制品-2023标准
DHA藻油制品1 范围本文件规定了DHA藻油制品的术语和定义、要求、试验方法、检验规则、标志、包装、运输和贮存。
本文件适用于DHA藻油制品，主要包括DHA藻油胶囊、DHA藻油凝胶糖果。
2 规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。
其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T 191 包装储运图示标志GB 2760 食品安全国家标准食品添加剂使用标准GB 2761 食品安全国家标准食品中真菌毒素限量GB 2762 食品安全国家标准食品中污染物限量GB 4789.2 食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定GB 4789.3 食品安全国家标准食品微生物学检验大肠菌群计数GB 4789.4 食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验GB 4789.10 食品安全国家标准食品微生物学检验金黄色葡萄球菌检验GB 4789.15 食品安全国家标准食品微生物学检验霉菌和酵母计数GB 5009.7—2016 食品安全国家标准食品中还原糖的测定GB 5009.11 食品安全国家标准食品中总砷及无机砷的测定GB 5009.12 食品安全国家标准食品中铅的测定GB 5009.22 食品安全国家标准食品中黄曲霉毒素B族和G族的测定GB 5009.27 食品安全国家标准食品中苯并（a）芘的测定GB 5009.168 食品安全国家标准食品中脂肪酸的测定GB 5009.227 食品安全国家标准食品中过氧化值的测定GB 5009.229 食品安全国家标准食品中酸价的测定GB 5009.236 食品安全国家标准动植物油脂水分及挥发物的测定GB 5009.257 食品安全国家标准食品中反式脂肪酸的测定GB 5009.262 食品安全国家标准食品中溶剂残留量的测定GB/T 5535.1 动植物油脂不皂化物测定第1部分：乙醚提取法GB 7718 食品安全国家标准预包装食品标签通则GB 8955 食品安全国家标准食用植物油及其制品生产卫生规范GB 14881 食品安全国家标准食品生产通用卫生规范GB/T 15688 动植物油脂不溶性杂质含量的测定GB/T 17374 食用植物油销售包装GB/T 24304 动植物油脂茴香胺值的测定GB 28050 食品安全国家标准预包装食品营养标签通则GB 31621 食品安全国家标准食品经营过程卫生规范LS/T 3243 DHA藻油SB/T 10021—2017 糖果凝胶糖果JJF 1070 定量包装商品净含量计量检验规则国家质量监督检验检疫总局[2005]第75号令《定量包装商品计量监督管理办法》3 术语和定义下列术语和定义适用于本文件。
隐甲藻发酵产DHA最佳无机盐浓度的确定
中图分类号： +,(’#
文献标识码： -
隐甲藻发酵产 ./- 最佳无机盐浓度的确定
王永华， 梁世中， 杨 博， 吴海珍
（华南理工大学食品与生物工程学院， 0#"(’" 广州市五山）
摘要： 探讨了在摇瓶条件下， 油脂和 ./- 积累的影响， 确定了 1234、 56! 7 、 89’): 对隐甲藻生长、 它们的最适浓度。1234 的最适浓度为 ";% 6 < =， >/! 89’ 的最适浓度为 ";$ 6 < =， 56! 7 的最适浓度为 此时， 单位体积 ./- 产率较高。 #! ??@4 < =， 关键词： 无机盐； 隐甲藻； 油脂； ./（二十二碳六烯酸） 是一种重要的不饱和脂 ./肪酸， 它是大脑灰质和视网膜的重要组成成分， 研究 ［#， !］ ， 它对婴幼儿的大脑神经和视力发育有重 表明 要作用， 补充 ./- 的婴幼儿， 其智商明显高于普通 婴儿。隐甲藻是一种海洋微藻， 它富含 ./-， 其含 而且脂肪酸组成简单， 非 量高达总脂肪酸的 0"A ， 因此， 有很大的工业化优势。 常有利于 ./- 的提取， 因此， 非常适合婴幼 而且其脂肪酸中几乎不含 B8-， 儿食品的添加。 无机盐在微生物的代谢中发挥了重要作用， 隐 甲藻生长在海水环境， 无机盐在其生长中可能具有 更重要的作用。本文讨论了 1234、 56! 7 、 89’) * 对其 生长、 油脂和 ./- 积累的影响。 ! 材料与方法 #;# 发酵用藻种 由香港大 隐甲藻 （ !"#$%&’()*+,+-. ()&,++ ） )"00(， 学惠赠。 （ =） #;! 菌种保藏和种子培养基 葡萄糖 0 6， 酵母粉 # 6， 胰蛋白胨 # 6， 人造海水 土壤水 ";# =， 蒸馏水 ";’ =。 ";0 =， （ =） #;) 发酵培养基 葡萄糖 !0 6， 酵母膏 ! 6， 人造海水 ";0 =， 土壤 蒸馏水 ";’ =。 水 ";# =， #;’ 实验方法 在 0"" ?4 的摇瓶中， 加入 $" #;’;# 摇瓶发酵培养： 培养基， 接种量 ， 于 ， 培养。 #"A !(C #’" D < ?EF ?4 干重法。 #;’;! 生物量测定：
氮源对杜氏盐藻生长及光合系统Ⅱ的影响
氮源对杜氏盐藻生长及光合系统Ⅱ的影响杨宋琪;王丽娟;谢婷;罗光宏;祖廷勋【摘要】In order to investigate the response of growth and PSⅡ of Dunaliella salina to different nitrogen sources,we performed experiments by using NaNO3,CO(NH2)2,NaNO2,and NH4Cl as nitrogen sources and-N control was set in this study.Our results showed that: (1) D.salina grew faster under CO(NH2)2 with a maximum growth rate[μmax,(0.482±0.032)/d] per day than under other nitrogen sources.(2) Results of chlorophyll fluorescence indicated no significantly different in the initial slope of the RLC before the onset of saturation (α),the maximum potential ETR (rETRmax),the maximum photochemistry efficiency (Fv/Fm),the maximum quantum yield of primary photochemistry (φP0),quantum yield for electron transport (φE0),probability(t=0) that a trapped exit on moves an electron into the electron transport chain beyond QA-(ψ0),absorption flux per RC (ABS/RC) and trapped energy flux per RC(t=0) (TR0/RC) amongNaNO3,CO(NH2)2,and NaNO2 groups (P>0.05),while there is significantly different in these parameters when compared with NH4Cl and-N controls (P<0.05).(3) Compared with the NaNO2,NaNO3,and CO(NH2)2 groups,the relative variable fluorescence (Vj) of D.salina increased significantly under nitrogen free treatment (P<0.05),which suggesting restriction of photosynthetic electron transport of D.salina from QA-to QB and accumulation of QA-.However,we can infer destroy of the oxygen evolving complex (OEC) of D.salina by the NH4Cl from the appearance of K phaseunder NH4Cl.As a whole,these results showed that D.salina grew much faster under CO(NH2)2 than that under NaNO3 and NaNO2,whereas the growth of D.salina was inhibited significantly by nitrogen deficiency,andthe number of reactive centers in PS II was decreased,and the electron transport was blocked.However,toxicity effect of NH4Cl on D.salina caused its death in a short time and the OEC of D.salina was damaged.%以NaNO3、CO(NH2)2、NaNO2、NH4Cl作为氮源,并设无氮处理,研究杜氏盐藻(Dunaliella salina)生长及其PSⅡ对不同氮源的响应特征,以明确杜氏盐藻对不同氮源的利用情况,为盐藻培养基的优化和营养盐的筛选提供理论依据.结果表明:(1)杜氏盐藻在CO(NH2)2环境中具更高的比增长速率[μmax,(0.482±0.032)/d].(2)NaNO2、NaNO3、CO(NH2)2作氮源时,杜氏盐藻快速光响应曲线的初始斜率(α)、最大光量子产率(Fv/Fm)及反应活性中心所捕获的光能(ABS/RC)、反应活性中心捕获的激发能用于还原QA的能量(TR0/RC)、最大光化学效率(φP0)、t=0时捕获的激子将电子传递到电子传递链中超过QA的其他电子受体的概率(ψ0)和t=0时用于电子传递的量子产额(φE0)在处理间均差异不显著(P>0.05),但三者与无氮和NH4Cl处理组相比均具有显著差异.(3)与NaNO2、NaNO3、CO(NH2)2处理组相比,无氮环境使得盐藻相对可变荧光(Vj)显著升高,盐藻光合电子从QA-到QB的传递受阻,导致QA-大量积累;而NH4Cl做氮源时,杜氏盐藻叶绿素荧光动力学曲线的K相出现,使得其PSⅡ放氧复合体(OEC)受损.研究认为,杜氏盐藻在NaNO3、CO(NH2)2、NaNO2作为唯一氮源时均可良好生长,并在CO(NH2)2环境中生长得更快;缺氮胁迫使得盐藻生长受到显著抑制,PSⅡ反应活性中心的数量降低,电子传递受阻;而NH4Cl对杜氏盐藻的毒性效应使得其PSⅡ放氧复合体(OEC)受损,藻体在短期内开始死亡.【期刊名称】《西北植物学报》【年(卷),期】2017(037)007【总页数】7页(P1397-1403)【关键词】杜氏盐藻;氮源;光系统Ⅱ;叶绿素荧光【作者】杨宋琪;王丽娟;谢婷;罗光宏;祖廷勋【作者单位】河西学院,甘肃省微藻工程技术研究中心,甘肃省河西走廊特色资源利用重点实验室,甘肃张掖 734000;河西学院,甘肃省微藻工程技术研究中心,甘肃省河西走廊特色资源利用重点实验室,甘肃张掖 734000;河西学院,甘肃省微藻工程技术研究中心,甘肃省河西走廊特色资源利用重点实验室,甘肃张掖 734000;河西学院,甘肃省微藻工程技术研究中心,甘肃省河西走廊特色资源利用重点实验室,甘肃张掖734000;河西学院,甘肃省微藻工程技术研究中心,甘肃省河西走廊特色资源利用重点实验室,甘肃张掖 734000【正文语种】中文【中图分类】Q945.11;Q945.79氮是蛋白质和叶绿素等物质的重要组成部分，对植物光合速率、暗反应主要酶以及光呼吸等都有显著影响[1]。
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氮源对隐甲藻 ( Crypthecodinium cohnii 生长) 和产量的影响DHA *王菊芳1吴海珍 1梁世中 1陈峰21华南理工大学食品与生物工程学院广州( , 510640 )2香港大学植物学系( 摘要 研究了氮源对隐甲藻生长及产量的影响采用单一氮源在总氮量浓度下蛋白胨培养时产量最高保持总氮量不变当混合氮源中蛋白胨时分别为DHA 2.98 g DW 和[13]其中的二十碳五烯酸和二十二碳六烯, EPA 酸在疾病预防及治疗方面已引起了广泛的兴趣DHA[4]¾-Ñо¿·¢ÏÖCrypthecodinium cohnii 本研究小组获得了一株异养生长速度快Crypthecodinium cohnii 本研究探讨了氮源对该藻种生长及产DHA 量的影响获得最佳氮源 DHA材料与方法１ 藻种及其培养1.1隐甲藻由香港大学植物学系陈峰博士筛选在条件下摇瓶培养每升基础培养基中含蒸馏水 500 mL400 Òȵ°°×ëËÆÏÌÑÌǵ°°×ëËÏõËáÄÆÄòËع²ÖÖ6 0.34 g/L pH 维持在之间以蛋白胨和硝酸钾为混合氮源设置不同的 6~6.8 含氮比硝酸根分别为Vol. 20No.5年月2001 10 MARINE SCIENCE BULLETIN Oct. 2001收稿日期期王菊芳等离心定期取出直至恒重含量测定1.5 DHA脂质成分加入一定量内标物十七烷酸用正己烷多次萃/取重新定容后用毛细管气相色谱法分析热导池检测器载气为氦气初温保留DB-50.35 mm15 m 20 mL/min170 2Æû»¯ÊÒζȼ°¼ì²âÆ÷ζȾùΪmin8 /min235 8 min265气相色谱法分析的标准品色谱图和样品色谱图见图对生长和积累有利的氮源是胰蛋白胨和蛋白胨培养物的干重分别可达和为2.78 g/L 2.70 g/L DHA我们检测培养液中338.56 mg/L NO3-和NH4+浓度而NH4+浓度维持培养开始时的浓度故只能利用硝酸盐不同氮源培养隐甲藻藻体内脂质含量及含量均有一定的差异达达339.58 mg/g DHA图标准品和样品色谱图1标准品样品海洋通报卷20 20 ÓлúµªÔ´¶ÔÒþ¼×ÔåÖ¬ÖÊ»ýÀ۱ȽÏÓÐÀûÔåÌåÄÚÖ¬Öʺ¬Á¿¾ù¸ßÓÚÎÞ»úµªÔ´ÅàÑø²ÉÓõ¥Ò»µªÔ´ÅàÑøÓõ°°×ëËÅàÑøÒþ¼×Ôå¶øÏõËá¼ØÒà¿ÉʹÒþ¼×ÔåÉú³¤Á¼ºÃ¿¼Âǵ½Òþ¼×ÔåµÄDHA DHA 营养要求及工业化生产的需要在降低成本的同时DHA 混合氮源对2.2 Crypthecodinium cohnii 生长和累积的影响DHA 从图可见硝酸根为隐甲藻有着最大的生物 4 -N -N1 2 量和产量而在其他配比条件下图显示即蛋白胨期王菊芳等时之后随硝酸根比例的增大干藻体内31 361.44 mg/g -N 含量以有机氮和无机氮比例为达DHA1 2 177.17 mg/g DW º¬Á¿¾ù³ÊÏÖϽµÇ÷ÊƱ£³Öº¬µªÁ¿ÎªÊ±ÏõËá¸ùµÄ±ÈÀý0.34 g/L -N -N 为最有利于隐甲藻的生长和的积累硝酸根中的氮占总氮量的三分之二的比例作为隐甲藻生长和产的优选氮DHA 源硝酸根-N-N 图混合氮源对 4 C. cohnii 生物量和产量的影响ATCC 30556 DHA ２５０２７０２９０３１０３３０３５０３７０脂质含量 （ｍｇ／ｇ）１００１２０１４０１６０１８０２００ＤＨＡ 含量（ｍｇ／ｇ）３：１２：１１：１１：２１：３蛋白胨海洋通报卷22 20 与从鱼油中提取相比可整年进行生 DHA DHA 1产从而能控制脂质产量和组成23含量高我们筛选出的隐甲藻ATCC30556具有较高的产能力有利于工业上 DHA DHA 开发利用营养方式是吞噬性营养正常状态下氮元素占隐甲藻细胞干重组成的是构成细胞氨基酸 1 % 10 %嘌呤与细胞内氨基酸代谢及呼吸作用密切相关等Tuttle [5]曾利用盐酸甜菜碱和盐酸组氨酸的氮源组合来培养 C. cohniiC. cohnii 其所用氮源为胰蛋白胨[7]Òò´Ë¶ÔÓÚ´ó¹æÄ£Éú²úÀ´Ëµ±ØÐëÕÒµ½¸üºÃµÄÎÒÃÇ×îÖÕÑ¡Ôñ±£³Ö×ܵªÁ¿Îª²»±äÏõ0.34 g/L 酸根中的氮占总氮量的三分之二的比例作为隐甲藻生长和产的优选氮源分别达到 DHA 2.98 g DW 和而且为探索工业化生产参考文献１９８９： ２５３２５９温少红鞠宝等微藻高度不饱和脂肪酸的研究海洋通报3 . . 200019486914 Gill I , Valivety R. Polyunsaturated fatty acids, Part I: Occurrence, biological activities and applications, TITECH, 1997, 15:1): 186 Jiang Y, Chen F, Liang S Z. Production potential of docosahexaenoic acid by the heterotrophic marine dinoflagellate Crypthe codinium cohnii.8 Bligh E G, Dyer W J. A rapid method of total lipid extractin and purificaiton. Can. J. Biochem. Physiol., 1959, 37: 911917作者简介女博士主要研究方向为利用海洋微藻培1973 9养生产有用药物12期王菊芳等。