铜绿假单胞菌耐药性的临床实验
铜绿假单胞茵感染及多重耐药性检测
【 关键词 】 铜绿假单胞菌 ； 诱导型 Ｂ 胺酶 ； 一内 抗生素 ； 耐药性
１ 材 料 与 方 法
定、 哌拉西林 ／ 他唑 巴坦 、 妥布霉 素 、 哌拉西林 、 庆大霉素 、
氨 曲南 和头 孢 曲 松 。
１１ 菌种来 源 ．
为 ２０ ０ ７年 １月 ～ ０ ９年 １ 我院住院 ２０ ２
酶 抑 制 剂 克拉 维酸 所 分 解 。Ａ Ｃ酶 属 于 Ｉ Ｂ ｍｐ 类 一内 酰胺
Ｓ ｎ２ 析软件的专家 系统 对待测 菌株 自动检 测诱导 型 ｉ ２分 ｏ
２１ ６ ６株铜绿假单胞菌对亚胺培南 等 ｌ ． ２ ０种抗生 素的药 敏试验 ， 果见表 １ 结 表 １６ ６株铜绿假单胞菌对 １ ２ ０种抗生素的药敏情况
Ｂ一内酰胺 酶和对 ｌ Ｏ种抗生素 的敏感性 。 结果 ：２ ６ ６株铜绿假单胞菌对 ｌ Ｏ种抗 生素的敏感性高低依次为： 丁胺卡那 （Ｏ５ ） ８ ．１亚 胺培南（４２ ） ６ ．２ 环丙沙星 （ １ ２ 头孢他定（ ５５ ） ６． ） ８ ５ ． 哌拉西林 ／ ９ 他唑巴坦（４Ｏ ） 布霉 素（Ｏ０ 哌拉西林 （ｏ７ ）４ ． ） ５ ．１妥 ５ ．） ４ ．３ （ｏ６ 氨曲南 ４ （７８ ） ３．３ 头孢曲松（ ５ ４ 。６ ６株铜绿假单胞菌产诱导型 ｐ一内酰胺 酶者 ４ ７株 ， ６ ．％， １． ） ２ ３ ３ 占 ９８ 产诱 导型 ｐ一内酰胺 酶株对 哌拉 西林 ／ 三唑巴坦 、 阿米卡星 、 头孢他啶 、 环丙沙星 、 妥布霉素等抗生 素的敏感性显著高于不产诱导 型 Ｂ一内酰胺 酶株 。结论 ： 在 临床用药时应避免 与铜绿假单胞菌产酶的强诱导剂类抗生素联合 ， 合理联合使用抗生素以减少耐药性的发生。
一
符合报道 ， 在产诱导型 ８一内酰胺 酶菌株中， 哌拉西林 ／ 他 唑 巴坦 、 头孢他 啶 、 哌拉西林 、 氨曲南诱导铜绿假单胞菌产
铜绿假单胞菌的耐药性及多重耐药机制
3中外医疗中外医疗I N FOR I GN M DI L TR TM N T2008N O .26CH I NA FOR EI G N M EDI CAL TREATM ENT综述铜绿假单胞菌是医院内感染的重要病原菌,具有广谱耐药性的菌株日益增,其对妥布霉素、庆大霉素、丁胺卡那霉素、羧苄青霉素和氧哌嗪青霉素的耐药率在30％～60％之间,且不断上升。
1994年报道对氨曲南和泰能的耐药率分别为43.7％和35％。
目前对其耐药机制研究也越来越多。
目前认为耐药机制包括β——内酰胺酶的水解、外膜通透性降低、主动外排系统的排出等以及它们之间的协同作用,使细菌产生了高度耐药。
1β-内酰胺酶的水解铜绿假单胞菌通过酶对抗生素的水解作用,可以使产酶菌在有抗生素存在的环境下仍能够生存[1]。
由β-内酰胺酶介导的耐药机制主要有:(1)铜绿假单胞菌产碳青霉烯酶水解碳青霉烯类抗生素;(2)所有的铜绿假单胞菌都能够表达由染色体介导的A m pC 酶,但β-内酰胺类抗生素等诱导剂可增加表达水平。
铜绿假单胞菌产生的A m pC 酶微弱水解碳青霉烯,合并铜绿假单胞菌膜通透性下降而导致耐药性的产生,是铜绿假单胞菌对亚胺培南产生低水平耐药的主要机制。
2氨基糖苷类修饰酶耐氨基糖苷类抗生素的主要机制是产生纯化酶,催化氨基糖苷类抗生素氨基或羧基的共价修饰,导致氨基糖苷类抗生素与核糖体结合减少,促进药物摄取的E D P-l I 阻断而产生耐药性[2]。
国内从铜绿假单胞菌中检出4种A A C 基因和2种A N T 基因以及1种A PH 基因,一种氨基糖苷类修饰酶可修饰多种氨基糖苷类药物使之失活[3]。
3改变抗生素作用靶位细菌在抗生素作用下产生诱导酶对菌体成分进行化学修饰,使其与抗生素结合的有效部位变异,使药物不敏感而细菌本身的生物功能正常。
对作用于铜绿假单胞菌的β-内酰胺类抗生素的敏感性和耐药性,PBP5的β-内酰胺酶活性具有重要作用,PB P5缺失的铜绿假单胞菌可显示高敏特性[4]。
铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素耐药机制研究
ʌ综述ɔ铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素耐药机制研究∗徐雁峰１ꎬ王慧敏２ꎬ张㊀冬２(１.内蒙古科技大学包头医学院ꎬ内蒙古包头０１４０００ꎻ２.内蒙古科技大学包头医学院第一附属医院呼吸科)㊀㊀ＤＯＩ:１０.１６８３３/ｊ.ｃｎｋｉ.ｊｂｍｃ.２０１９.０９.０４８㊀㊀铜绿假单胞菌(ＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａꎬＰＡ)是目前临床上常见的革兰阴性杆菌ꎬ是最常见的引起严重院内获得性感染的条件致病菌之一ꎮ在机体抵抗力下降或免疫功能受损或是侵入性操作时(如留置尿管㊁呼吸机辅助通气)易引起各种感染ꎬ如泌尿系感染㊁呼吸道感染㊁脑膜炎㊁烧伤感染等ꎬ其中以下呼吸道感染最为常见ꎬ包括支气管扩张合并感染㊁慢性阻塞性肺疾病合并感染㊁呼吸机相关性肺炎等ꎬ且主要分布于重症监护病房ꎮ铜绿假单胞菌具有易定值ꎬ易变异ꎬ易耐药特点[１]ꎮ该菌可随着医护人员的手接触㊁医疗用水㊁机械通气等直接或间接性传播ꎻ在国外ꎬ慢性铜绿假单胞菌的定植是囊性纤维化(ＣＦ)肺病过程中的核心因素ꎬ是导致ＣＦ患者发病率和死亡率上升的主要原因ꎮＺａｖａｓｃｋｉ等[２]进行的研究表明ꎬ抗生素的选择压力和长时间使用加快了细菌突变的速度ꎮ因此抗生素的滥用ꎬ使得铜绿假单胞菌基因发生突变ꎬ导致耐药性在细菌间进行水平转移ꎬ使得铜绿假单胞菌耐药现象逐渐突显ꎬ出现多重耐药铜绿假单胞菌(Ｍｕｌｔｉｄｒｕｇ－ｒｅｓｉｓｔ￣ａｎｔｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａꎬＭＤＲＰＡ)ꎬ给人们的安全带来巨大的威胁ꎬ引起了感染相关专家对公共卫生的关注ꎮ由其所引起的疾病具有难治愈㊁高致死率及迁延不愈性等特点ꎬ给临床治疗带来巨大困难ꎬ严重威胁人类的健康ꎮ㊀㊀碳青霉烯类抗生素(Ｃａｒｂａｐｅｎｅｍａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ)是抗菌谱最广㊁抗菌活性最强的一类β－内酰胺类抗生素ꎬ曾一度是治疗铜绿假单胞菌感染的首选药物ꎮ２０世纪７０年代末期ꎬ默克公司研究人员从牲畜链霉菌中发现一类新的β－内酰胺类抗生素－硫霉素ꎬ这是历史上第一个碳青霉烯类抗生素ꎮ１９８７年ꎬ该公司通过对硫霉素的半合成结构修饰ꎬ成功开发出第一个用于临床的碳青霉烯类抗生素－亚胺培南ꎬ之后碳青霉烯类药物开始被陆续开发并广泛应用于临床各科室ꎬ目前以亚胺培南和美罗培南为代表的碳青霉烯类抗生素被临床广泛用于治疗铜绿假单胞菌感染ꎬ尤其在重症感染患者治疗上发挥了重要作用ꎮ然而近年来ꎬ世界各地逐渐出现了耐碳青霉烯类抗生素铜绿假单胞菌(Ｃａｒ￣ｂａｐｅｎｅｍ－ｒｅｓｉｓｔａｎｔｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａꎬＣＲＰＡ)ꎬ２０１７年世界卫生组织(ＷＨＯ)制定了一份关于全球耐药菌的排列名单ꎬ耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌与耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌ꎬ耐碳青霉烯类㊁第三代头孢菌素的肠杆菌科细菌排在最前ꎮ耐碳青霉烯铜绿假单胞菌的出现使得临床上对感染性疾病的治疗变得愈加困难ꎮＨｏｎｇ等[３]通过对５０个国家临床ＣＲＰＡ分离株的耐药情况进行分析ꎬ发现在巴西㊁秘鲁㊁哥斯达黎加㊁俄罗斯㊁希腊㊁波兰㊁伊朗和沙特阿拉伯等地铜绿假单胞菌对碳青霉烯类药物的耐药率均高于５０％ꎮ美国ＩＮ￣ＦＯＲＭ(Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌｎｅｔｗｏｒｋｆｏｒｏｐｔｉｍａｌｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｍｏｎｉ￣ｔｏｒｉｎｇ)监测了２０１２~２０１５年７９个美国医疗中心铜绿假单胞菌对美罗培南的耐药率ꎬ结果显示耐药率从１８.０％上升到１９.１％[４]ꎮ２０１５年㊁２０１６年㊁２０１７年中国细菌耐药性监测ＣＨＩＮＥＴ结果显示ꎬＰＡ对亚胺培南的耐药率为２７.６％㊁２８.７％㊁２３.６％ꎬ对美罗培南耐药率为２３.４％㊁２５.３％㊁２０.９％ꎮ一项对全球ＣＲ￣ＰＡ的流行病学报道显示ꎬ南美洲㊁欧州和西南亚地区是ＣＲＰＡ的主要地区ꎬ对碳青霉烯类抗生素的耐药率最高可达７５.３％ꎮ可见铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素具有很高的耐药性ꎮ㊀㊀ＣＲＰＡ的出现ꎬ给临床抗感染带来了严峻的考验ꎬ因此研究铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素的耐药机制具有重要意义ꎬ本文就其耐药机制做一综述ꎮ１ 产生碳青霉烯酶㊀㊀铜绿假单胞菌可产生β－内酰胺酶㊁氨基糖苷类钝化酶等多种酶ꎬ其中产β－内酰胺酶是ＰＡ耐药的主要机制ꎬ此酶可以通过水解或非水解方式破坏β－内酰胺酶的β－内酰胺环使抗菌药物失活而无法发挥抗菌作用ꎮ目前对于β－内酰胺酶的分类法主要有两类ꎬＡｍｂｌｅｒ分子结构法是１９８０年Ａｍｂｌｅｒ提出的ꎬ根据β－内酰胺酶氨基酸序列分为Ａ－Ｄ类ꎬ其中Ａ类㊁Ｃ类和Ｄ类β－内酰胺酶是依赖丝氨酸发挥作用ꎬ而Ｂ类β内酰胺酶是依赖金属离子发挥作用ꎬ是引起铜绿假单胞菌获得性耐药的主要酶ꎮ另一种分类方法是∗基金项目:内蒙古自治区自然科学基金项目[２０１７ＭＳ(ＬＨ)０８０３]通讯作者:张㊀冬Ｂｕｓｈ分类法ꎬ是Ｂｕｓｈ于１９９５年提出ꎬ他以酶作用的底物㊁抑制剂谱的不同将β－内酰胺酶分为四个大类(１－４)及六个亚类(ａ－ｆ)ꎬ主要包括超广谱β－内酰胺酶(ＥＳＢＬｓ)㊁金属酶(ＭＢＬｓ)㊁头孢菌素酶(ＡｍｐＣ)ꎬＯＸＡ型内酰胺酶等ꎮ碳青霉烯酶是一类能水解碳青霉烯类抗生素的β内酰胺酶ꎬ主要是指Ａｍｂｌｅｒ法的Ａ㊁Ｂ㊁Ｄ类ꎮ１.１㊀Ａ类碳青霉烯酶㊀Ａ类碳青霉烯酶包括ＫＰＣ型㊁ＧＥＳ型㊁ＳＭＥ型㊁ＩＭＩ型㊁ＳＦＣ型等ꎬ其中以ＫＰＣ型和ＧＥＳ型最为常见ꎬ以质粒形式存在ꎬ造成大范围耐药铜绿假单胞菌的传播ꎮ近年来对ＫＰＣ型碳青霉烯酶报道较多ꎬＫＰＣ多见于肺炎克雷伯杆菌ꎬ１９９６年首次在美国的一种肺炎克雷伯菌中检测到ꎮ２００６年ꎬ哥伦比亚国际医学研究和教育中心首次报道ＫＰＣ－２在假单胞菌中的存在情况ꎬ２０１１年浙江大学医学院附属第一医院报道了首例产ｂｌａＫＰＣ－２型碳青霉烯酶的铜绿假单胞菌ꎬ之后ＫＰＣ在铜绿假单胞菌的报道逐渐增多[５]ꎮＫＰＣ酶属于Ａｍｂｌｅｒ－Ａ类ꎬＢｕｓｈ－２ｆ类ꎬ位于质粒或染色体上ꎬ染色体编码的ＫＰＣ可能有利于产ＫＰＣ铜绿假单胞菌高风险克隆的扩散ꎮＧａｒｃｉａ等[６]通过比较产生ＫＰＣ酶的肺炎克雷伯菌感染爆发之前和之后铜绿假单胞菌分离株的耐药性ꎬ发现爆发后铜绿假单胞菌获得了ＫＰＣ基因ꎬ从而表明了ＫＰＣ基因可在细菌间传播导致铜绿假单胞菌获得对碳青霉烯类抗生素高水平的耐药性ꎮ目前已经鉴定出至少２３种ＫＰＣ蛋白变体ꎮ１.２㊀产金属β－内酰胺酶(ｍｅｔａｌ－β－ａｃｔａｍａｓｅｓꎬＭＢＬｓ)㊀金属β－内酰胺酶(ｍｅｔａｌ－β－ａｃｔａｍａｓｅｓꎬＭＢＬｓ)是以金属离子为活性中心的酶ꎬ可以水解大部分β－内酰胺类抗生素ꎬ且需要依赖金属离子Ｚｎ２＋发挥作用ꎮ首次发现是因蜡样芽胞杆菌产生能被ＥＤ￣ＴＡ抑制的β－内酰胺酶ꎬ之后世界各地相继报道了能产生ＭＢＬｓ的各种细菌ꎮ编码ＭＢＬｓ的基因位点存在于铜绿假单胞菌的质粒㊁转座子或染色体上ꎬ以基因盒存在于整合子之中ꎬ大部分位于Ⅰ类整合子ꎬ通过整合子传递作用ꎬ使耐药性在革兰阴性细菌间水平传播扩散ꎬ引起铜绿假单胞菌的多重耐药(ＭＤＲ)甚至泛耐药(ＸＤＲ)ꎬ进而导致感染的爆发ꎬ使得临床治疗变得复杂化ꎮＭＢＬｓ可分为天然和获得性金属酶ꎬ获得性ＭＢＬｓ主要为质粒介导的ꎬ随着质粒的移动将耐药基因播散在各个菌株ꎬ是临床上最多见的ꎮ天然ＭＢＬｓ为染色体编码的ꎬ存在于一些临床非重要致病菌中ꎬ不具有传导性ꎬ没有致病性ꎬ是细菌为适应生存环境而产生的酶ꎮ获得性ＭＢＬｓ是铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素产生获得性耐药的主要原因ꎮ脉冲场凝胶电泳实验(ＰＦＧＥ)发现ꎬ产ＭＢＬｓ铜绿假单胞菌在遗传学上紧密相关ꎬ表明ＭＢＬｓ基因的扩散是由耐药菌株的克隆传播或耐药基因在不同菌株间传递引起的[７]ꎮＭＢＬｓ属于Ａｍｂｌｅｒ－Ｂ类ꎬＢｕｓｈ－３类ꎬ目前发现的获得性金属酶包括ＩＭＰ㊁ＶＩＭ㊁ＧＩＭ㊁ＳＰＭ㊁ＳＩＭ㊁ＮＤＭ－１㊁ＦＩＭ－１ꎬ临床最常见的是ＩＭＰ和ＶＩＭꎮ近年来发现了ＭＢＬｓ的亚类ꎬ进一步说明了ＭＢＬｓ的持续多样化以及这些酶在革兰氏阴性菌种中的持续全球传播ꎮ㊀㊀ＩＭＰ－１是１９９１年日本研究者在粘质沙雷菌体内发现了第一个获得ＭＢＬｓꎬ之后不断发现新的获得ＭＢＬｓꎬ这些金属酶的宿主也从粘质沙雷菌扩大到了铜绿假单胞菌等肠杆菌科细菌ꎬ而铜绿假单胞菌是主要宿主ꎮ目前已发现了ＩＭＰ五十几种亚型ꎬ分别由相应编码基因的不同位点发生突变产生ꎮ１９９９年意大利在铜绿假单胞菌中发现首个ＶＩＭ－１型酶ꎬ随后在美国㊁法国㊁英国㊁意大利等国家相继发现铜绿假单胞菌产不同亚型ＶＩＭ基因ꎮ目前已发现了ＶＩＭ四十几种ꎬＶＩＭ－２是铜绿假单胞菌中分布最广的ＭＢＬꎬ并且是多次爆发的来源ꎮ㊀㊀ＮＤＭ－１是一种新型金属酶ꎬ最初在２００９年从一位感染肺炎克雷伯杆菌的瑞典患者分离发现ꎬ之后在铜绿假单胞菌㊁鲍曼不动杆菌和大肠杆菌中均有发现ꎮ２０１１年ꎬ首次在塞尔维亚患者中记录了铜绿假单胞菌中ＮＤＭ－１的存在ꎬ之后在世界各地耐药铜绿假单胞菌均有发现ꎬＮＤＭ－１可以水解大部分β内酰胺类抗生素包括碳青霉烯类抗生素ꎬ是最广谱耐药的金属酶ꎮＮＤＭ－１位于质粒上ꎬ不仅可以在细菌间转移ꎬ而且能使所在宿主菌成为超级细菌ꎬ严重威胁着人类健康ꎮＦＩＭ－１是２０１２年从佛罗伦萨血管移植物感染患者培养的多重耐药铜绿假单胞菌中分离出一种新型金属酶ꎬ位于染色体上ꎬ与ＮＤＭ表现出最高的相似性(约４０％氨基酸同一性)ꎬＦＩＭ－１具有广泛的底物特异性ꎬ优选青霉素和碳青霉烯类[８]ꎮ㊀㊀ＫＨＭ－１是１９９７年在日本的多重耐药柠檬酸杆菌分离物中鉴定出来的ꎬ之后再未报道过ꎮＰｆｅｎｎｉｇｗ￣ｅｒｔｈ等[９]在铜绿假单胞菌分离物发现了新的金属酶ＨＭＢ－１ꎬ与ＫＨＭ－１在核苷酸水平上的同一性为７３.６％ꎬ在氨基酸水平上的同一性为７４.３％ꎬ但在碳青霉烯酶水解方面表现出明显差异ꎬ通过测定最低抑菌浓度(ＭＩＣ)发现ＨＭＢ－１对亚胺培南的水解高于ＫＨＭ－１的２倍ꎬ而对美罗培南㊁厄他培南的水解效率非常相似ꎮ１.３㊀产ＯＸＡ型酶㊀ＯＸＡ型酶属于ＡｍｂｌｅｒＤ类ꎬＢｕｓｈ２ｄ类ꎬ因对苯唑西林或是氯唑西林等有很强的水解能力而得名ꎮＯＸＡ型超广谱β－内酰胺酶ꎬ是从２０世纪８０年代后期随着ＤＮＡ测序技术的发展才从丝氨酸β－内酰胺酶中分离出来ꎬ并单独成为一类ꎮ之后该酶在世界范围内陆续被检测到ꎬ如法国㊁西班牙㊁英国等许多国家均检出ꎬ近日秘鲁发现了同时表达ＯＸＡ－１的铜绿假单胞菌[１０]ꎮ国内在安徽㊁湖南㊁郑州㊁苏州㊁贵州等地也曾报道过ＯＸＡ型酶ꎮＯＸＡ型酶主要分布在鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌ꎮＢｅｒｔ等[１１]阐述了ＯＸＡ型酶分５组ꎬ其中ＯＸＡ－５㊁ＯＸＡ－１０㊁ＯＸＡ－１１㊁ＯＸＡ－１４㊁ＯＸＡ－１６㊁ＯＸＡ－１７㊁ＯＸＡ－３１等见于铜绿假单胞菌内[１２]ꎮＯＸＡ－１９８是２０１１年Ｅｌ等[１３]新发现的Ｄ类β内酰胺酶ꎬＯＸＡ－１９８基因位于ＩｎｃＰ－１１型质粒携带的Ⅰ类整合子上ꎬ易于在铜绿假单胞菌或大肠杆菌中转化ꎮ最近ꎬＢｏｎｎｉｎ等[１４]描述了产生ＯＸＡ－１９８的铜绿假单胞菌与医院相关的丛集事件ꎬ揭示ＯＸＡ－１９８的产生使碳青霉烯类药物敏感性降低ꎮ２㊀膜通透性下降㊀㊀细胞膜是药物进入细菌内发挥作用的第一道屏障ꎬ铜绿假单胞菌的细胞内膜由具有流动性的脂质双分子层组成ꎬ外膜包括脂蛋白㊁外膜蛋白和脂多糖等ꎬ脂多糖为６~７条链相互共价连接而成的脂肪酸链组成ꎬ这可降低外膜的流动性ꎬ阻碍脂溶性药物通过细菌外膜ꎮ碳青霉烯类抗生素进入体内发挥作用的靶位是位于内膜上的青霉素结合蛋白(ＰＢＰｓ)ꎬ需先通过外膜才能到达靶点ꎬ所以任何导致铜绿假单胞菌外膜通透性降低的因素都会导致抗菌药物无法到达作用位点ꎬ从而使细菌对该种抗生素耐药ꎮ２.１㊀膜孔蛋白的丢失㊀铜绿假单胞菌外膜上有许多微孔通道蛋白ꎬ如ＯｐｒＣ㊁ＯｐｒＤ２㊁ＯｐｒＥꎬ其中外膜孔通道ＯｐｒＤ２是以亚胺培南为代表的碳青霉烯类抗菌药物进入ＰＡ唯一通道ꎮＯｐｒＤ２的基因突变或者缺失致使ＯｐｒＤ２功能缺失或表达下调造成细胞外膜对抗菌药物通透性下降ꎬ是铜绿假单胞菌对亚胺培南等碳青霉烯类抗生素耐药的重要机制ꎮＯｐｒＤ２的缺失突变体现在编码区的一段片段缺失导致移码突变ꎬ形成新的密码子从而引起肽链异常ꎬ导致铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药ꎮＬｉｕ等[１５]通过对１７株耐亚胺培南㊁美罗培南的铜绿假单胞菌分析显示其中１４株ＯｐｒＤ２蛋白的基因由于移码ꎬ无义突变或大缺失㊁或是缺少终止密码子而导致密码子编码提前终止ꎬ进一步表明ＯｐｒＤ２的丢失使铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素产生耐药性ꎮ因此认为Ｏｐｒｄ２是造成ＰＡ对亚胺培南耐药的重要因素ꎮＯｐｒＤ２的基因突变体现在ＯｐｒＤ２结构基因㊁调控基因㊁调控因子等突变ꎬ进而影响ＯｐｒＤ２蛋白水平或空间构象的改变ꎮ此外插入ＯｐｒＤ２的序列(ＩＳ)元件也可导致ＯｐｒＤ２基因失活ꎬ世界范围内均有报告不同的插入元件ＩＳꎬ南非(ＩＳＰａ２６)㊁克罗地亚(ＩＳＲＰ１０)㊁伊朗(ＩＳＰａ１３２８)㊁西班牙(ＩＳＰａ１３３)㊁中国(ＩＳＰａ１３２８㊁ＩＳＰｒｅ２)等ꎮＳｈａｒｉａｔｉ等[１６]在ＯｐｒＤ２蛋白基因中发现了一个新的插入序列ＩＳＰｐｕ２１与铜绿假单胞菌的碳青霉烯耐药性密切相关ꎮ２.２㊀主动外排系统过度表达㊀铜绿假单胞菌细胞膜上存在着将抗菌药物排出体外的外排泵系统ꎮ根据染色体的不同同源性ꎬ可将外排泵系统分为易化子超家族(ＭＦＳ)㊁耐药结节化细胞分化家族(ＲＮＤ)㊁ＡＴＰ结合盒超家族(ＡＢＣ)㊁多重药物和毒性化合物外排家族(ＭＡＴＥ)和小多重性耐药家族(ＳＭＲ)五个超家族ꎬ其中ＲＮＤ外排家族与碳青霉烯抗菌药物的耐药有关也是最早发现的外排泵系统ꎬ主要分布在革兰阴性菌ꎬ参与多种抗菌药物的排出ꎮ１９９３年Ｐｏｏｌｅ等在铜绿假单胞菌中发现了第一个多药外排泵ＭｅｘＡＢ－ＯｐｒＭꎬ之后陆续发现多个外排泵系统如:ＭｅｘＡＢ－ｏｐｒＭ㊁ＭｅｘＸＹ－ｏｐｒＭ㊁ＭｅｘＣＤ－ｏｐｒＪ㊁ＭｅｘＥＦ－ＯｐｒＮ等ꎮ外排泵系统由膜融合蛋白如ＭｅｘＡ㊁ＭｅｘＣꎬ转运蛋白如ＭｅｘＢ㊁ＭｅｘＤ和外膜蛋白如ＯｐｒＤ㊁ＯｐｒＪ三部分组成ꎬ三种蛋白协同作用将进入菌体内的碳青霉烯类药物排除体外ꎬ任一环节出现问题即可导致多重耐药甚至泛耐药ꎮＢａｂａｋ等[１７]研究显示６２％的个体外排泵ＭｅｘＡＢ－ＯｐｒＭ基因过度表达ꎬ与先前报道的这些基因的过度表达超过５０％相符ꎮＭｅｘＸＹ－ＯｐｒＭ系统和ＭｅｘＡＢ－ＯｐｒＭ系统共用ＯｐｒＭ作为其外膜通道蛋白ꎬ因此ＭｅｘＡＢ－ＯｐｒＭ低表达也降低ＭｅｘＸＹ活性ꎬ此外ＭｅｘＣＤ－ＯｐｒＪ过表达可明显使ＭｅｘＡＢ－ＯｐｒＭ产生不足ꎮ外排泵系统具有可诱导性ꎬ抗生素的不规范使用可诱导其表达增加ꎬ曾章悦等[１８－１９]通过体外碳青霉素诱导实验对敏感铜绿假单胞菌进行诱导ꎬ发现铜绿假单胞菌经其诱导后对美罗培南的最低抑菌浓度升高ꎬ考虑铜绿假单胞菌对美罗培南的耐药与外排泵表达量增加有关ꎮ３㊀细菌生物被膜(ｂａｃｔｅｒｉａｌｂｉｏｆｉｌｍꎬＢＦ)形成㊀㊀１９７８年Ｃｏｓｔｅｒｔｏｎ首先提出生物被膜这一概念ꎬ细菌生物被膜(ｂａｃｔｅｒｉａｌｂｉｏｆｉｌｍꎬＢＦ)是指细菌附着于惰性物体或生物物体表面如医疗设备ꎬ留置导管或坏死的组织上ꎬ繁殖并分泌一些多糖基质和纤维蛋白等细胞外聚合物ꎬ将细菌粘连包裹其中而形成的膜样物ꎮＢＦ结构坚韧稳固ꎬ长期存在可作为细菌的保护伞使其逃避宿主免疫应答㊁抵挡抗菌药物的杀菌作用而难以根除ꎬ对抗生素产生耐药ꎬ进而导致难治性感染和慢性㊁持续性感染ꎮ铜绿假单胞菌生物被膜细胞外聚合物(ＥＰＳ)可延缓包括抗生素的扩散ꎬ导致细菌对抗生素耐受ꎮＥＰＳ是由胞外多糖㊁蛋白质㊁核酸组成ꎬ其中主要成分胞外多糖包括ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓｙｎｔｈｅｓｉｓｌｏｃｕｓ(Ｐｓｌ)ꎬｐｅｌｌｉｃｌｅＦｏｒｍａｔｉｏｎ(Ｐｅｌ)和藻酸盐(Ａｌｇｉｎａｔｅ)ꎬ尤其是Ｐｓ１对铜绿假单胞菌中ＢＦ形成具有重要作用ꎮＰｓｌ多糖的过量产生导致铜绿假单胞菌的细胞表面和细胞间粘附增强ꎬ形成微菌落ꎬ稳固生物被膜结构的同时对抗生素产生耐药ꎮ研究发现形成生物被膜的多糖物质Ｐｓｌ可作为一种信号分子通过调节鸟苷酸的产生形成一种正反馈ꎬ进一步促进细菌产生细胞外基质形成生物被膜ꎬ这对于研究铜绿假单胞菌的耐药具有重要作用[２０]ꎮｃ－ｄｉ－ＧＭＰ信号通路被发现是导致生物膜形成的主要机制ꎮ藻酸盐(Ａｌｇｉｎａｔｅ)是ＥＰＳ主要成分ꎬ可以形成稳固的保护屏障阻碍抗生素穿透生物被膜ꎬ难以对包裹其中的细菌产生抗菌作用ꎬ导致感染反复发作ꎮ小ＲＮＡ(ｓＲＮＡ)是铜绿假单胞菌生物被膜形成的重要机制ꎮＴａｙｌｏｒ等[２１]描述了一个新的非编码小ＲＮＡ(ｓＲＮＡ)转录物ｓｒｂＡ对生物膜的形成和毒力有重要影响ꎮ４㊀整合子(ｉｎｔｅｇｒｏｎ)的形成㊀㊀整合子是存在于细菌质粒㊁染色体或转座子上的一种具有识别和捕获各种耐药基因并通过移动ꎬ将耐药基因传播在同种和不同种细菌间ꎬ最终导致临床上耐药现象的泛滥ꎮ整合子是Ｓｔｏｋｅｓ和Ｈａｌｌ于１９８９年首次提出的ꎬ由两端的保守区和中间的可变区构成ꎬ可变区中含有多种基因盒ꎬ大部分为耐药基因盒ꎬ在５ᶄ端保守段包含有编码整合酶的ｉｎｔＩ基因和负责基因转录的启动子ꎬ当整合子捕获到耐药基因盒后ꎬ在启动子的作用下发生转录从而使细菌获得耐药性ꎮ整合子根据其整合酶编码基因序列的不同可分为６类ꎬ其中Ⅰ类整合子最为常见且与铜绿假单胞菌耐药密切相关ꎮ目前在Ⅰ类整合子可变区中发现多种耐药基因盒ꎬ如ＶＩＭ㊁ＩＭＰ㊁ＳＨＶ等ꎬ这些耐药基因使铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素产生高耐药水平ꎮＫｈｏｓｒａｖｉ等[２２]通过研究发现铜绿假单胞菌耐药性与整合子密切相关ꎬ发现大多数(９５.７％)分离株包含Ⅰ类整合子且对美罗培南耐药性可达到(９０.３２％)ꎬ对亚胺培南的耐药率达(８３.８７％)ꎮ㊀㊀总之ꎬ铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素的耐药现象是多种耐药机制协同作用的结果ꎬ并不单纯是由一种因素造成ꎮＣＲＰＡ的出现ꎬ给临床治疗造成了巨大的压力ꎬ这需要我们进一步深入研究其耐药及流行机制ꎬ为指导抗生素的合理使用及开发新的有效抗菌药物提供理论依据ꎮ近年来ꎬ多位点序列分型(Ｍｕｌｔｉ￣ｌｏｃｕｓｓｅｑｕｅｎｃｅｔｙｐｉｎｇꎬＭＬＳＴ)被广泛用于记录细菌基因的变异ꎬ进而实现耐药菌株的追踪ꎬ对研究铜绿假单胞菌的耐药机制具有重要意义ꎮ多位点序列分型是Ｍａｉｄｅｎ等人在１９９８年提出的用于分析基因的核苷酸序列ꎬ进而发现细菌基因的变异ꎮＭＬＳＴ通过使用管家基因中的序列变异来定义类型ꎬ以ＳＴ编号为基本分析单位ꎬ每一个ＳＴ标号代表一种核苷酸序列信息ꎬ目前应用于耐药菌株的追踪ꎮ通过对铜绿假单胞菌的７个管家基因(ａｃｓＡ㊁ａｒｏＥ㊁ｇｕａＡ㊁ｍｕｔＬ㊁ｎｕｏＤ㊁ｐｐｓＡ和ｔｒｐＥ)进行ＰＣＲ扩增纯化ꎬ产物测序后与ＢＬＡＳＴ对比得出七个管家基因等位基因谱编号ꎬ依据编号的组合即能够得到ＳＴ型ꎬ进而实现对全球铜绿假单胞菌的流行趋势及毒力进化变异的追踪调查ꎮ在铜绿假单胞菌中ꎬＭＢＬｓ的产生通常与序列类型(ＳＴｓ)１１１㊁１７５㊁３５７和２３５的多耐药高风险克隆相关ꎬ表明高风险克隆在成功传播临床重要抗药性决定因素中的重要作用ꎮＰａｐａｇｉａｎｎｉｔｓｉｓ等[２３]发现捷克医院中携带ＩＭＰ－７的铜绿假单胞菌中ＳＴ３５７克隆编码整合子Ｉｎ－ｐ１１０ꎬ证明大多数ＳＴ３５７分离株与ＩＭＰ型ＭＢＬｓ的产生相关ꎮＶａｎｅｇａｓ等[２４]研究表明高抗生素选择压力有利于多克隆的出现ꎬ这些克隆能够分别含有ＫＰＣ和ＶＩＭ碳青霉烯酶ꎬ主要是ＳＴ２３５和ＳＴ１１１ꎬ但同时出现其他克隆如ＳＴ１７５５㊁ＳＴ４６３ꎮ序列类型２３５(ＳＴ２３５)是重要的铜绿假单胞菌克隆ꎬ铜绿假单胞菌ＳＴ２３５可以通过突变和获得当地耐药基因ꎬ对碳青霉烯类抗生素产生耐药性[２５]ꎮ在ＳＴ２３５中已经描述了多种碳青霉烯酶ꎬ最常见的是ＶＩＭꎬ其次是ＩＭＰꎬＯＸＡꎬＧＥＳꎬＫＰＣ和ＮＤＭꎮ目前发现质粒编码的产ＮＤＭ－１的铜绿假单胞菌ＭＬＳＴ分型有ＳＴ２３５ꎬ染色体编码的ＫＰＣ基因可能有利于产生ＫＰＣ的铜绿假单胞菌ＳＴ２３５扩增时的传播ꎮＨｕ等[２６]首次报道了产生ＫＰＣ－２的ＳＴ４６３铜绿假单胞菌分离株的克隆ꎬ该克隆在浙江省快速出现和传播ꎮ参考文献[１]㊀中华医学会呼吸病学分会感染学组.铜绿假单胞菌下呼吸道感染诊治专家共识[Ｊ].中华结核和呼吸杂志ꎬ２０１４ꎬ３７(１):９－１６.[２]㊀ＺａｖａｓｃｋｉＡＰꎬＣａｒｖａｌｈａｅｓＣＧꎬＰｉｃãｏＲＣꎬｅｔａｌ.Ｍｕｌｔｉｄｒｕｇ－ｒｅ￣ｓｉｓｔａｎｔｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａａｎｄａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒｂａｕｍａｎ￣ｎｉｉ:ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｍｅｃｈａｎｉｓｍｓａｎｄｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓｆｏｒｔｈｅｒａｐｙ[Ｊ].ＥｘｐｅｒｔＲｅｖＡｎｔｉＩｎｆｅｃｔＴｈｅｒꎬ２０１０ꎬ８(１):７１－９３. [３]㊀ＨｏｎｇＤＪꎬＢａｅＩＫꎬＪａｎｇＩＨꎬｅｔａｌ.Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｙａｎｄｃｈａｒａｃｔｅｒ￣ｉｓｔｉｃｓｏｆｍｅｔａｌｌｏ－β－ｌａｃｔａｍａｓｅ－ｐｒｏｄｕｃｉｎｇｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａ[Ｊ].ｉｎｆｅｃｔｃｈｅｍｏｔｈｅｒꎬ２０１５ꎬ４７(２):８１－９７. [４]㊀ＳａｄｅｒＨＳꎬＨｕｂａｎｄＭＤꎬＣａｓｔａｎｈｅｉｒａＭꎬｅｔａｌ.Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙｒｅｓｕｌｔｓｆｒｏｍｆｏｕｒｙｅａｒｓ(２０１２ｔｏ２０１５)ｏｆｔｈｅｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌｎｅｔｗｏｒｋｆｏｒｏｐｔｉｍａｌｒｅ￣ｓｉｓｔａｎｃｅｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇｐｒｏｇｒａｍｉｎｔｈｅｕｎｉｔｅｄｓｔａｔｅｓ[Ｊ].Ａｎｔｉｍｉ￣ｃｒｏｂＡｇｅｎｔｓＣｈｅｍｏｔｈｅｒꎬ２０１７ꎬ６１(３):ｅ０２２５２－０２２６７.[５]㊀ＧｅＣꎬＷｅｉＺꎬＪｉａｎｇＹꎬｅｔａｌ.ＩｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆＫＰＣ－２－ｐｒｏ￣ｄｕｃｉｎｇｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａｉｓｏｌａｔｅｓｉｎＣｈｉｎａ[Ｊ].ＪＡｎｔｉ￣ｍｉｃｒｏｂＣｈｅｍｏｔｈｅｒꎬ２０１１ꎬ６６(５):１１８４－１１８６. [６]㊀ＧａｒｃíａＲＤꎬＮｉｃｏｌａＦꎬＺａｒａｔｅＳꎬｅｔａｌ.ＥｍｅｒｇｅｎｃｅｏｆＰｓｅｕｄｏ￣ｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａｗｉｔｈＫＰＣ－ｔｙｐｅｃａｒｂａｐｅｎｅｍａｓｅｉｎａｔｅａｃｈｉｎｇｈｏｓｐｉｔａｌ:ａｎ８－ｙｅａｒｓｔｕｄｙ[Ｊ].ＪＭｅｄＭｉｃｒｏｂｉｏｌꎬ２０１３ꎬ６２(Ｐｔ１０):１５６５－１５７０.[７]㊀万强ꎬ李娟ꎬ陈杨.辽宁省大连市耐亚胺培南铜绿假单胞菌产金属β－内酰胺酶基因检测及脉冲场凝胶电泳分型[Ｊ].疾病监测ꎬ２０１７ꎬ(１):３８－４２.[８]㊀ＰｏｌｌｉｎｉＳꎬＭａｒａｄｅｉＳꎬＰｅｃｉｌｅＰꎬｅｔａｌ.ＦＩＭ－１ａｎｅｗａｃｑｕｉｒｅｄｍｅｔａｌｌｏ－β－ｌａｃｔａｍａｓｅｆｒｏｍａＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａｃｌｉｎ￣ｉｃａｌｉｓｏｌａｔｅｆｒｏｍＩｔａｌｙ[Ｊ].ＡｎｔｉｍｉｃｒｏｂＡｇｅｎｔｓＣｈｅｍｏｔｈｅｒꎬ２０１３ꎬ５７(１):４１０－４１６.[９]㊀ＰｆｅｎｎｉｇｗｅｒｔｈＮꎬＬａｎｇｅＦꎬＢｅｌｍａｒＣＣꎬｅｔａｌ.Ｇｅｎｅｔｉｃａｎｄｂｉｏ￣ｃｈｅｍｉｃａｌｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆＨＭＢ－１ꎬａｎｏｖｅｌｓｕｂｃｌａｓｓＢ１ｍｅｔａｌｌｏ－β－ｌａｃｔａｍａｓｅｆｏｕｎｄｉｎａＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａｃｌｉｎｉｃａｌｉｓｏｌａｔｅ[Ｊ].ＪＡｎｔｉｍｉｃｒｏｂＣｈｅｍｏｔｈｅｒꎬ２０１７ꎬ７２(４):１０６８－１０７３.[１０]㊀ＲíｏｓＰꎬＲｏｃｈａＣꎬＣａｓｔｒｏＷꎬｅｔａｌ.Ｅｘｔｅｎｓｉｖｅｌｙｄｒｕｇ－ｒｅｓｉｓｔ￣ａｎｔ(ＸＤＲ)ＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄｉｎＬｉｍａＰｅ￣ｒｕｃｏ－ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇａＶＩＭ－２ｍｅｔａｌｌｏ－β－ｌａｃｔａｍａｓｅꎬＯＸＡ－１β－ｌａｃｔａｍａｓｅａｎｄＧＥＳ－１ｅｘｔｅｎｄｅｄ－ｓｐｅｃｔｒｕｍβ－ｌａｃｔａｍａｓｅ[Ｊ].ＪＭＭＣａｓｅＲｅｐꎬ２０１８ꎬ５(７):ｅ００５１５４. [１１]㊀ＢｅｒｔＦꎬＢｒａｎｇｅｒＣꎬＬａｍｂｅｒｔ－ＺｅｃｈｏｖｓｋｙＮ.ＩｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆＰＳＥａｎｄＯＸＡｂｅｔａ－ｌａｃｔａｍａｓｅｇｅｎｅｓｉｎＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａｕｓｉｎｇＰＣＲ－ｒｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎｆｒａｇｍｅｎｔｌｅｎｇｔｈｐｏｌｙｍｏｒ￣ｐｈｉｓｍ[Ｊ].ＪＡｎｔｉｍｉｃｒｏｂＣｈｅｍｏｔｈｅｒꎬ２００２ꎬ５０(１):１１－１８. [１２]㊀刘晓一ꎬ刘文恩.ＯＸＡ型超广谱β－内酰胺酶的研究进展[Ｊ].中国感染控制杂志ꎬ２０１０ꎬ(６):４６２－４６７. [１３]㊀ＥｌＧＦꎬＢｏｇａｅｒｔｓＰꎬＢｅｂｒｏｎｅＣꎬｅｔａｌ.ＯＸＡ－１９８ａｎａｃｑｕｉｒｅｄｃａｒｂａｐｅｎｅｍ－ｈｙｄｒｏｌｙｚｉｎｇｃｌａｓｓＤｂｅｔａ－ｌａｃｔａｍａｓｅｆｒｏｍＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａ[Ｊ].ＡｎｔｉｍｉｃｒｏｂＡｇｅｎｔｓＣｈｅｍｏｔｈ￣ｅｒꎬ２０１１ꎬ５５(１０):４８２８－４８３３.[１４]㊀ＢｏｎｎｉｎＲＡꎬＢｏｇａｅｒｔｓＰꎬＧｉｒｌｉｃｈＤꎬｅｔａｌ.ＭｏｌｅｃｕｌａｒＣｈａｒａｃ￣ｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆｏｘａ－１９８ｃａｒｂａｐｅｎｅｍａｓｅ－ｐｒｏｄｕｃｉｎｇｐｓｅｕｄｏ￣ｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａｃｌｉｎｉｃａｌｉｓｏｌａｔｅｓ[Ｊ].ＡｎｔｉｍｉｃｒｏｂＡｇｅｎｔｓＣｈｅｍｏｔｈｅｒꎬ２０１８ꎬ６２(６):ｅ２０４９６－２０５１７.[１５]㊀ＬｉｕＨꎬＫｏｎｇＷꎬＹａｎｇＷꎬｅｔａｌ.ＭｕｌｔｉｌｏｃｕｓｓｅｑｕｅｎｃｅｔｙｐｉｎｇａｎｄｖａｒｉａｔｉｏｎｓｉｎｔｈｅｏｐｒＤｇｅｎｅｏｆＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍａｈｏｓｐｉｔａｌｉｎＣｈｉｎａ[Ｊ].ＩｎｆｅｃｔＤｒｕｇＲｅｓｉｓｔꎬ２０１８ꎬ１１:４５－５４.[１６]㊀ＳｈａｒｉａｔｉＡꎬＡｚｉｍｉＴꎬＡｒｄｅｂｉｌｉＡꎬｅｔａｌ.Ｉｎｓｅｒｔｉｏｎａｌｉｎａｃｔｉｖａ￣ｔｉｏｎｏｆｏｐｒＤｉｎｃａｒｂａｐｅｎｅｍ－ｒｅｓｉｓｔａｎｔＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉ￣ｎｏｓａｓｔｒａｉｎｓｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍｂｕｒｎｐａｔｉｅｎｔｓｉｎＴｅｈｒａｎꎬＩｒａｎ[Ｊ].ＮｅｗＭｉｃｒｏｂｅｓＮｅｗＩｎｆｅｃｔꎬ２０１８ꎬ２１:７５－８０.[１７]㊀ＰｏｕｒａｋｂａｒｉＢꎬＹａｓｌｉａｎｉｆａｒｄＳꎬＹａｓｌｉａｎｉｆａｒｄＳꎬｅｔａｌ.Ｅｖａｌｕａ￣ｔｉｏｎｏｆｅｆｆｌｕｘｐｕｍｐｓｇｅｎｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎｒｅｓｉｓｔａｎｔｐｓｅｕｄｏ￣ｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａｉｓｏｌａｔｅｓｉｎａｎｉｒａｎｉａｎｒｅｆｅｒｒａｌｈｏｓｐｉｔａｌ[Ｊ].ＩｒａｎＪＭｉｃｒｏｂｉｏｌꎬ２０１６ꎬ８(４):２４９－２５６.[１８]㊀曾章锐ꎬ王卫萍ꎬ王莹ꎬ等.碳青霉烯类抗生素诱导铜绿假单胞菌外膜蛋白及外排系统突变的机制研究[Ｊ].临床检验杂志ꎬ２０１３ꎬ(６):４５０－４５４.[１９]㊀ＣｈｏｕｄｈｕｒｙＤꎬＤａｓＴＡꎬＤｕｔｔａＣＭꎬｅｔａｌ.Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌａ￣ｎａｌｙｓｉｓｏｆｍｅｘａｂ－ｏｐｒｍｅｆｆｌｕｘｐｕｍｐｓｓｙｓｔｅｍｏｆｐｓｅｕｄｏ￣ｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａａｎｄｉｔｓｒｏｌｅｉｎｃａｒｂａｐｅｎｅｍｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｉｎａｔｅｒｔｉａｒｙｒｅｆｅｒｒａｌｈｏｓｐｉｔａｌｉｎｉｎｄｉａ[Ｊ].ＰＬｏＳＯｎｅꎬ２０１５ꎬ１０(７):ｅ０１３３８４２.[２０]㊀ＨａＤＧꎬＯ'ＴｏｏｌｅＧＡ.ｃ－ｄｉ－ＧＭＰａｎｄｉｔｓｅｆｆｅｃｔｓｏｎｂｉｏｆｉｌｍｆｏｒｍａｔｉｏｎａｎｄｄｉｓｐｅｒｓｉｏｎ:ａｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａｒｅｖｉｅｗ[Ｊ].ＭｉｃｒｏｂｉｏｌＳｐｅｃｔｒꎬ２０１５ꎬ３(２):ＭＢ－０００３－２０１４. [２１]㊀ＴａｙｌｏｒＰＫꎬＶａｎＫｅｓｓｅｌＡＴＭꎬＣｏｌａｖｉｔａＡꎬｅｔａｌ.ＡｎｏｖｅｌｓｍａｌｌＲＮＡｉｓｉｍｐｏｒｔａｎｔｆｏｒｂｉｏｆｉｌｍｆｏｒｍａｔｉｏｎａｎｄｐａｔｈｏｇｅ￣ｎｉｃｉｔｙｉｎＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａ[Ｊ].ＰＬｏＳＯｎｅꎬ２０１７ꎬ１２(８):ｅ０１８２５８２.[２２]㊀ＫｈｏｓｒａｖｉＡＤꎬＭｏｔａｈａｒＭꎬＡｂｂａｓｉＭＥ.Ｔｈｅｆｒｅｑｕｅｎｃｙｏｆｃｌａｓｓ１ａｎｄ２ｉｎｔｅｇｒｏｎｓｉｎＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａｓｔｒａｉｎｓｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍｂｕｒｎｐａｔｉｅｎｔｓｉｎａｂｕｒｎｃｅｎｔｅｒｏｆＡｈｖａｚꎬＩｒａｎ[Ｊ].ＰＬｏＳＯｎｅꎬ２０１７ꎬ１２(８):ｅ０１８３０６１.[２３]㊀ＰａｐａｇｉａｎｎｉｔｓｉｓＣＣꎬＭｅｄｖｅｃｋｙＭꎬＣｈｕｄｅｊｏｖａＫꎬｅｔａｌ.Ｍｏｌｅｃ￣ｕｌａｒｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆｃａｒｂａｐｅｎｅｍａｓｅ－ｐｒｏｄｕｃｉｎｇｐｓｅｕｄｏ￣ｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａｏｆｃｚｅｃｈｏｒｉｇｉｎａｎｄｅｖｉｄｅｎｃｅｆｏｒｃｌｏｎａｌｓｐｒｅａｄｏｆｅｘｔｅｎｓｉｖｅｌｙｒｅｓｉｓｔａｎｔｓｅｑｕｅｎｃｅｔｙｐｅ３５７ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇＩＭＰ－７Ｍｅｔａｌｌｏ－β－Ｌａｃｔａｍａｓｅ[Ｊ].ＡｎｔｉｍｉｃｒｏｂＡｇｅｎｔｓＣｈｅｍｏｔｈｅｒꎬ２０１７ꎬ６１(１２):１８１１－１８１７.[２４]㊀ＶａｎｅｇａｓＪＭꎬＣｉｅｎｆｕｅｇｏｓＡＶꎬＯｃａｍｐｏＡＭꎬｅｔａｌ.Ｓｉｍｉｌａｒｆｒｅ￣ｑｕｅｎｃｉｅｓｏｆｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａｉｓｏｌａｔｅｓｐｒｏｄｕｃｉｎｇｋｐｃａｎｄｖｉｍｃａｒｂａｐｅｎｅｍａｓｅｓｉｎｄｉｖｅｒｓｅｇｅｎｅｔｉｃｃｌｏｎｅｓａｔｔｅｒｔｉａ￣ｒｙ－ｃａｒｅｈｏｓｐｉｔａｌｓｉｎｍｅｄｅｌｌíｎꎬｃｏｌｏｍｂｉａ[Ｊ].ＪＣｌｉｎＭｉｃｒｏ￣ｂｉｏｌꎬ２０１４ꎬ５２(１１):３９７８－３９８６.[２５]㊀ＴｒｅｅｐｏｎｇＰꎬＫｏｓＶＮꎬＧｕｙｅｕｘＣꎬｅｔａｌ.ＧｌｏｂａｌｅｍｅｒｇｅｎｃｅｏｆｔｈｅｗｉｄｅｓｐｒｅａｄＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａＳＴ２３５ｃｌｏｎｅ[Ｊ].ＣｌｉｎＭｉｃｒｏｂｉｏｌＩｎｆｅｃｔꎬ２０１８ꎬ２４(３):２５８－２６６.[２６]㊀Ｃａｒｒａｒａ－ＭａｒｒｏｎｉＦＥꎬＣａｙôＲꎬＳｔｒｅｌｉｎｇＡＰꎬｅｔａｌ.Ｅｍｅｒ￣ｇｅｎｃｅａｎｄｓｐｒｅａｄｏｆｋｐｃ－２－ｐｒｏｄｕｃｉｎｇｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａｉｓｏｌａｔｅｓｉｎａｂｒａｚｉｌｉａｎｔｅａｃｈｉｎｇｈｏｓｐｉｔａｌ[Ｊ].ＪＧｌｏｂＡｎｔｉｍｉｃｒｏｂＲｅｓｉｓｔꎬ２０１５ꎬ３(４):３０４－３０６.(收稿日期:２０１９￣０２￣２６)。
铜绿假单胞菌的耐药
药物治疗
• 传统药物治疗
哌拉西林，替卡西林 头孢他啶，头孢哌酮 哌拉西林/他唑巴坦 替卡西林/克拉维酸 头孢哌酮舒巴坦 环丙沙星，左氧氟沙星 多粘菌素类（多粘菌素类B、E）
新研发的抗假单胞菌药物
多利培南（Doripenem） 西他沙（sitafloxacin） 比阿培南（Biapenem）
ＰＡＥ对氨基糖苷类抗菌药物耐药是因为产氨基糖苷类修饰酶（ＡＭＥ ｓ）和作用靶位１６ＳｒＲＮＡ基因突变而致。 阿米卡星修饰酶ａａｃ（６′）和核苷转移酶ａｎｔ（２′）较常见。ａａ ｃ（６′）－Ⅰｂ引起对阿米卡星、妥布霉素耐药， ａａｃ（６′）－Ⅱ引起对庆大霉素、妥布霉素耐药，ａｎｔ（２′）－Ⅰ 引起对庆大霉素、妥布霉素耐药。 普通组PAE ａａｃ（６′）－Ⅰｂ、ａａｃ（６′）－Ⅱ检出率为100%， ａｎｔ（２′）－Ⅰ检出率为52.2％，但铜绿假单胞菌对阿米卡星、庆大 霉素、妥布霉素敏感。 泛耐药组基因检出率与耐药性成正比。产生ＡＭＥｓ不是细菌耐氨基糖 苷类抗菌药物的决定性因素。
铜绿假单胞菌对以下药物具有天然耐药性： 氨苄西林、阿莫西林、阿莫西林/克拉维酸、第一、 二代头孢菌素、头孢噻肟、头孢曲松、萘啶酸和甲性减低
2.主动外排泵系统
3.抗菌药物作用的靶位的改变
4.产生灭活酶 5.生物膜（BF）的形成
1. 外膜通透性障碍
抗生素通过两种途径进入细菌外膜，亲水性抗生素的孔蛋 白通道和疏水性抗生素的脂质介导通道。如果这些通道改 变或缺失，抗生素将不能进入细菌到达作用靶位，从而使 细菌产生耐药性。 PA的外膜通透性极低，仅为大肠埃希菌的1%-8%，这是 PA对多种抗生素天然耐药的重要原因之一。β内酰胺类、 四环素、氯霉素、喹诺酮类只能通过孔蛋白提供的水通道 跨越外膜。
ICU铜绿假单胞菌感染耐药分析
２０ 年 １ 月 ０８ ２
河
北
职
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医
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学
报
Ｖ０ ． ． １ ２５ Ｎｏ６
Ｄｅ ． ０ ８ ｃ ２ ０
Ｊ ｕ ｎ ｌ ｆ ｂ ｉ ｄ ｃ ｌ ｏｌｇ ｏ ｏ ｔ ｕ ｎ ｄ ｃ ｔ ｎ ｏ ｒ ａ ｏ ｅ Ｈｅ Ｍｅ ｉａ ｌ ｅｆｒＣ ｎｉ ｉ ｇＥ ｕ ａｉ Ｃ ｅ ｎ ｏ
种抗生素中， 亚胺培南 的体外抗菌活性最好 ， 耐药率最低 为 １．％， ５７ 其次为阿米卡星 ３ ．％。结论 ０６ 菌的首选药物 。 Ｕ中铜绿假单 胞菌 的耐药性应引起高度重视 。 Ｉ Ｃ 关键词 ： 铜绿假单胞菌 ； Ｕ； Ｉ 耐药性 ； Ｃ 感染
中图分 类号 ：３ ８ ９ Ｒ ７． １ ９ 文 献标 志码 ： Ａ 文章 编 号 ：０ ８ ６ ９ （０ ８ 一 ６ ０２ — ２ １０ — ６ ２ ２０ ）０ — ０ １０
１ 方法 抗生素纸片除亚胺培南为英 国 Ｏ Ｏ Ｉ ． ２ Ｘ Ｄ
公 司外 ， 其余 均购 自北 京天 坛 生物药 品公 司 。 养基 培 采 用 Ｍ—Ｉ 养其方 法 。 Ｉ培 １ ． 菌 种鉴 定方 法 ．１ ２
收稿 日期 ：０ ８ ０ — ２ ２０—７０
２ 铜绿假单胞 菌的耐 药情况 ． ２
亚胺培南是治疗铜绿假单胞
重症 监 护病房 对 于挽救 生命 垂危 的病人 具有 重
要 意义 ，细胞 感染 是 引起 Ｉ Ｕ病 人死 亡 的重要 原 因 。
２ ， 《 ５ 按 全国临床检验操作规定》ｌ ｈ ｔ ｚ 要求进行鉴定 。 主 要 特 征有 ： 兰 阴性 杆 菌 ， 革 大部 分 有 绿 色素 ， 液 粘
８ ７株铜绿假单胞
铜绿假单胞菌耐药性分析及耐药基因检测
ＤＯＩ：１０．３７６０／ｃｍａ．ｊ．ｉｓｓｎ．１６７４ ２３９７．２００９．０３．００７基金项目：浙江省医药卫生科技计划项目（２００８Ａ１２９）作者单位：３１０００６杭州市第一人民医院检验科通信作者：周田美，Ｅｍａｉｌ：ｚｈｏｕｔｍｈｚ０５７１＠１６３．ｃｏｍ·论著·铜绿假单胞菌耐药性分析及耐药基因检测周田美 余道军 董晓勤 沈强 汪涛 童文娟 方翔 【摘要】 目的 观察杭州市第一人民医院临床分离的铜绿假单胞菌的耐药性变迁及相关耐药基因。
方法 采用ＷＨＯＮＥＴ软件对２００３—２００７年临床分离的１４８９株铜绿假单胞菌的药物敏感性试验结果进行统计分析；用琼脂稀释法测定１１种抗菌药物对３６株多药耐药铜绿假单胞菌的最低抑菌浓度（ＭＩＣ）；用ＰＣＲ法检测β 内酰胺酶、氨基糖苷类修饰酶等编码基因，并对ＰＣＲ扩增产物进行测序分析。
结果 铜绿假单胞菌对氨曲南、亚胺培南、头孢他啶、头孢吡肟、哌拉西林、哌拉西林／他唑巴坦、头孢哌酮／舒巴坦、环丙沙星、左氧氟沙星、庆大霉素和阿米卡星的耐药率由２００３年的１３ ４％、１０ ６％、８ ７％、７ ９％、１２ ７％、１２ ７％、６ ７％、１５ ８％、２０ ５％、２４ ７％和１０ ９％分别增至２００７年的３５ ３％、４０ ９％、１８ ４％、３２ ４％、３２ ９％、３２ ０％、２１ ９％、３７ ８％、３８ ６％、３９ ４％和３４ ８％；１１种抗菌药物对多药耐药铜绿假单胞菌的ＭＩＣ９０均≥１２８μｇ／ｍＬ。
３６株多药耐药铜绿假单胞菌中，β 内酰胺酶编码基因阳性占５８ ３％（２１／３６），氨基糖苷类修饰酶基因阳性占８８ ９％（３２／３６），ｏｐｒＤ２基因缺失率为８０ ６％（２９／３６）。
结论 铜绿假单胞菌对常用抗菌药物的耐药率呈增高趋势，多药耐药情况严重，临床上应给予高度重视。
多药耐药铜绿假单胞菌携带多种β 内酰胺酶编码基因及氨基糖苷类修饰酶基因，ｏｐｒＤ２基因的缺失率高。
多重耐药铜绿假单胞菌
联合用药需要谨慎评估药物之间的相互作用和不 良反应，确保治疗过程中的安全性和稳定性。
替代疗法探索
替代疗法的前沿研究
目前，医学界正在探索多种 替代疗法，如免疫疗法、微 生物疗法等，这些新型疗法 为治疗多重耐药铜绿假单胞 菌提供了新的可能性。
微生物疗法的应用前 景
07 治疗手段更新
新型抗生素研发
新型抗生素研发现状
目前，科研人员已经研发出多 种新型抗生素，这些抗生素在 对抗多重耐药铜绿假单胞菌方 面展现出了显著的效果。
新型抗生素的优势与挑 战
新型抗生素以其独特的抗菌机 制和广谱抗菌性，对多重耐药 铜绿假单胞菌产生了强大的压 力。然而，其研发过程中也面 临着许多挑战。
微生物疗法是利用特定微生 物对抗病原微生物的一种疗 法，通过调整人体内微生物 群落的平衡，达到治疗疾病 的目的，具有广泛的应用前 景。
免疫疗法的研究进展
免疫疗法是通过激活或增强 人体自身的免疫系统来对抗 疾病的一种疗法，近年来在 治疗多重耐药铜绿假单胞菌 方面取得了显著的研究成果 。
08 未来研究方向
多重耐药铜绿假单胞菌解析
对抗超级细菌的策略与挑战
作者: xx 汇报时间: 2024/03/16
目录
01 铜绿假单胞菌概述
06 防控策略分析
02 多重耐药性解析
07 治疗手段更新
03 临床重要性探讨
08 未来研究方向
04 耐药机制研究
05 检测方法介绍
01 铜绿假单胞菌概述
铜绿假单胞菌定义
1 铜绿假单胞菌的特性
细菌间通过水平基因转移的方 式，可以快速传播其耐药基因 ，使原本不具有耐药性的细菌 也能产生耐药性，这是铜绿假 单胞菌产生多重耐药的重要机 制。
铜绿假单胞菌的药敏试验结果及耐药性分析
铜绿假单胞菌的药敏试验结果及耐药性分析【摘要】分析我院2008年1月-2009年12月份临床标本中分离出的115株铜绿假单胞菌对常用抗生素的药敏试验结果以及耐药趋势，为临床治疗铜绿假单胞菌感染提供参考。
方法用合肥恒星HX-21细菌鉴定药敏分析仪进行细菌鉴定和药敏试验，检测115株铜绿假单胞菌对临床常用抗生素的敏感性。
结果 1358份临床标本中共分离出115株铜绿假单胞菌，铜绿假单胞菌对亚胺培南、阿米卡星、哌拉西林、头孢他啶及环丙沙星的敏感率较高，而对头孢噻肟、庆大霉素、复方新诺明、氨苄西林等抗生素已表现出较高的耐药性。
而且耐亚胺培南铜绿假单胞菌比例也日渐增高。
结论近年来，铜绿假单胞菌的分离率已经很高，多重耐药菌日趋增多，耐药机制复杂。
因此，加强铜绿假单胞菌对常用抗生素的药敏试验监测可为临床提供最新的流行病学，尽量减少临床经验用药，避免盲目和滥用抗生素。
【关键词】铜绿假单胞菌药敏试验耐药趋势抗生素【Abstract】 Purpose It aims to analyze the drug susceptible experiment results and the drug resistant tendency of the commonly-used antibiotics under the influence of 115 pseudomonas ageruginosa， which were isolated from our hospital’s clinical specimen between January 2008 and December 2009. And meanwhile， it is expected to offer reference for curing pseudomonas ageruginosa infection in clinic. Usage method It utilizes HX-21 drug susceptible analysis instrument for bacterial appraisal of Hefei Hengxing Company to identify bacteria and carry out drug susceptible experiment， and then to check the susceptibility of the commonly-used clinical bacteria under the effect of 115 pseudomonas ageruginosa. Findings Among the 115 pseudomonas ageruginosa isolated from 1358 clinical samples， pseudomonas ageruginosa are found to be more sensible to amikacin， piperacillin，ceftazidime and ciprofloxacin， but show its drug resistance towards some antibiotics， such as cefotaxime， gentamicin， SXT and ampicillin. Plus， the proportion of pseudomonas ageruginosa resistant to imipenemis also increasing. Conclusion In recent years， the isolation rate of pseudomonas ageruginosa has been high. Multidrug-resistance bacteria are increasing and resistance mechanisms are complex. Thus， such drug susceptible experiment detest by combining Pseudomonas ageruginosa with commonly used antibiotics can provide the newest epidemic study for clinical medicine， help to reduce the use of medicine as much as possible， and avoid the abuse of antibiotics.【Key words】 Pseudomonas ageruginosa drug susceptible experiment resistance tendency antibiotics铜绿假单胞菌为临床最常见的条件致病菌，尤其是在医院感染中占有非常重要的地位。
铜绿假单胞菌耐药与多重抗药性机制解析
铜绿假单胞菌耐药与多重抗药性机制解析铜绿假单胞菌是一种常见的病原菌，具有广泛的耐药性和多重抗药性。
了解铜绿假单胞菌的耐药和抗药机制对于防治感染疾病具有重要意义。
本文将通过对铜绿假单胞菌的耐药和多重抗药性机制进行详细解析。
1. 铜绿假单胞菌的耐药机制铜绿假单胞菌的耐药机制主要包括药物内流、药物靶标突变、药物排出通道改变以及药物降解等多种方式。
首先，铜绿假单胞菌具有药物内流通道的改变能力。
细菌通过改变药物通道的结构和功能来限制药物进入细胞，从而减少药物的有效浓度。
比如，铜绿假单胞菌可通过调节外膜蛋白的表达量和构象来限制药物进入细胞。
其次，铜绿假单胞菌可以发生药物靶标的突变，从而降低药物对其的结合亲和力。
这种突变可能导致药物分子无法与目标蛋白结合，从而失去药物的作用。
例如，铜绿假单胞菌的GyrA蛋白具有突变位点，可导致青霉素等β-内酰胺类抗生素的失效。
此外，铜绿假单胞菌还可以改变药物排出通道，从而增加药物外流的速率。
这主要通过调节药物外排泵的表达量和功能来实现。
铜绿假单胞菌具有多种外排泵，如MexAB-OprM和MexXY-OprM等，这些泵能有效地将药物从细胞内排出，从而使得细菌对药物具有更高的耐药性。
最后，铜绿假单胞菌还可以通过药物的降解来降低药物的有效浓度。
菌体表面的酶可以降解一些抗生素，从而使得药物无法发挥作用。
此外，铜绿假单胞菌还可以产生β-内酰胺酶等药物降解酶，从而使得广谱抗生素失去活性。
2. 铜绿假单胞菌的多重抗药性机制多重抗药性是指细菌对多种抗生素产生耐药性的能力。
铜绿假单胞菌往往具有复杂的多重抗药性机制，其主要包括快速突变、基因水平的水平转移和基因调控的变化等。
首先，铜绿假单胞菌具有高度的突变率，导致其对不同抗生素产生快速适应和耐药。
这种快速突变能力使得铜绿假单胞菌能够在长期的抗生素选择压力下迅速适应新的环境，从而产生多重抗药性。
其次，铜绿假单胞菌具有基因水平的耐药基因转移能力。
细菌可以通过水平基因转移将耐药基因传递给其他菌株，从而扩大耐药菌株的范围。
中药抗耐药铜绿假单胞菌机制的研究进展
铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)又称绿脓杆菌,是一种条件致病菌,在临床上已成为最常见的医院内感染致病菌之一。
正常情况下,PA并不感染人体的任何组织,但是当人体免疫力降低时或进行有创医疗操作后,PA几乎可以感染人体任何组织。
临床可表现为局部化脓性炎症和全身性感染,其中呼吸道感染、心内膜炎、脑膜炎和败血症等可危及患者生命。
随着抗生素的广泛使用,多重耐药性铜绿假单胞菌(multiple-drug resistant Pseudomonas aeruginosa,MDR-PA)在临床上分离率逐年增高,是临床抗感染治疗中的一个棘手的问题。
PA在部分地区ICU病区对半合成青霉素类、头孢菌素类、碳青霉烯类、氨基糖苷类及氟喹诺酮类耐药率均不低于40%[1]。
MDR-PA 耐药机制复杂多变,且常由多种耐药机制同时作用产生多重耐药性,使得MDR-PA感染治疗更加困难,需要我们在原有的治疗方案基础上需求新的突破。
中药在抗感染治疗方面因抗菌谱广泛、不易耐药等优点逐渐成为研究的热点,中药抗菌的应用有望延缓、抑制甚至逆转PA的耐药性,中药抗耐药铜绿假单胞菌的机制主要有抑制抗菌药物水解酶,消除耐药质粒,恢复细菌对抗菌药物的通透性,抑制PA生物被膜的形成,抑制外排泵系统及调节机体免疫功能等。
本文对中药抗耐药铜绿假单胞菌机制研究进展综述如下:1PA的耐药机制PA的耐药机制复杂,变化迅速,主要有如抗菌药物水解酶、耐药质粒、外排泵系统、生物被膜、细胞通透性改变及药物作用靶位改变等。
1.1抗菌药物水解酶PA耐药机制之一是抗菌药物水解酶的产生,包括头孢菌素酶(AmpC)、超广谱β-内酰胺酶(extend⁃ed-spectrumβ-lactamases,ESBLs)及金属β内酰胺酶(metallo-β-lactamases,MBL)等。
AmpC酶全称是中药抗耐药铜绿假单胞菌机制的研究进展刘传铃王佳贺▲中国医科大学附属盛京医院老年病科,辽宁沈阳110004[摘要]铜绿假单胞菌已成为临床上最常见的医院内感染致病菌之一,其耐药性使临床上铜绿假单胞菌的抗感染治疗更加棘手。
铜绿假单胞菌群感效应机制和对抗生素耐药机制研究
铜绿假单胞菌群感效应机制和对抗生素耐药机制研究发表时间：2019-03-26T10:05:46.280Z 来源：《中西医结合护理》2019年第02期作者：李珊，仲苏月，王婉蓉，李浩明通讯作者[导读] 本文综述了铜绿假单胞菌PAO1中QS系统的复杂性及抗菌敏感性机制。
广东药科大学，广东广州510006摘要：随着耐药菌在世界范围内的出现和传播，替代疗法以弥补抗生素耐药的重要性愈发重要。
群感效应(Quorum sensing， QS)是通过感知细菌密度以调控相关基因表达的一种现象，涉及到包括毒力因素表达在内的各种常见细菌行为，据研究群体感应似乎与对抗细菌感染有关。
铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa， PAO1），一种常见的机会条件致病菌，是引起急、慢性感染的主要病原体。
其致病性与群体感应系统密切相关。
本文综述了铜绿假单胞菌PAO1中QS系统的复杂性及抗菌敏感性机制。
关键词：抗生素，耐药，群感效应，铜绿假单胞菌。
1.前言抗生素是目前用于细菌感染最有效的药物。
然而，由于细菌耐药性的反复发生大大限制了这些药物的有效性以及我们的治疗选择。
根据世界卫生组织（WTO）相关报告，多重耐药(multidrug-resistant，MDR)菌株的逐渐增多已经成为全世界关注的公共卫生问题。
能合成β-内酰胺酶的革兰阴性菌包括铜绿假单胞菌和大肠杆菌最容易出现多重耐药现象[1]。
细菌对抗生素的耐药性可以是固有的、突变产生的、也可以是通过编码不同菌株的遗传物质获得的[2]，因此，细菌能够逃避可能破坏物种可持续性繁殖的侵袭。
过度使用抗生素可能会产生高水平的选择压力，从而促进耐药菌的出现[2, 3]。
细菌对侵略性化合物的适应是一种非常复杂的保护机制。
在细菌行为方面的研究进展表明，细胞间存在一种称为QS的通讯机制能够调节细菌行为[4]。
实际上，群感效应是指细菌能够通过合成和释放自诱导分子（autoinducer，AI）来检测其种群密度，当达到一个临界浓度时，自诱导分子即信号分子就能启动相关基因的表达，调控细菌的生物行为[5]。
耐碳青霉烯类药物铜绿假单胞菌临床分布及耐药特点分析
作者简介：肖新荣，本科，主管检验师；研究方向：临床医学检验临床微生物技术；Ｅ ｍａｉｌ：ｘｘｒｘｉａｏ０９１０＠１６３．ｃｏｍ耐碳青霉烯类药物铜绿假单胞菌临床分布及耐药特点分析肖新荣 王福安 王曼雅石狮市医院检验科，石狮，３６２７００，中国【摘要】 目的：分析耐碳青霉烯类药物铜绿假单胞菌（ｃａｒｂａｐｅｎｅｍ ｒｅｓｉｓｔａｎｔｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａ，ＣＲＰＡ）在临床科室的分布情况，总结其耐药特点，探讨抗菌方法。
方法：选取２０２２年３月～２０２３年２月ＣＲＰＡ菌株８０株，设为观察组，采集同期不耐碳青霉烯类药物铜绿假单胞菌８０株，设为对照组，比较临床科室分布情况、ＣＲＰＡ耐药特点、ＭＢＬ表型阳性率与基因检测结果。
结果：临床分布比较，呼吸与危重症医学科、重症医学科与普外科ＣＲＰＡ检出率较高，差异显著（犘＜０．０５）；ＣＲＰＡ耐药特点显示，ＣＲＰＡ对替卡西林／克拉维酸耐药率显著高于其他药物，耐药率较低的常用抗菌药是阿米卡星与妥布霉素；ＭＢＬ表型阳性率较高，为９２．５０％（７４／８０），ＭＤＲ ＰＡ占比５３．７５％（４３／８０），ＸＤＲ ＰＡ占比２２．５０％（１８／８０）。
结论：ＣＲＰＡ较易发生在呼吸与危重症医学科和重症医学科，阿米卡星与妥布霉素等药物在ＣＲＰＡ感染中抗菌效果较好，ＣＲＰＡ抗感染治疗中应针对性用药。
【关键词】 铜绿假单胞菌；耐药特点；临床分布；感染防控【中图分类号】 Ｒ９６９ 【文献标识码】 Ａ 犇犗犐：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．２０９５ １３９６．２０２３．０５．００７犃狀犪犾狔狊犻狊狅犳犆犾犻狀犻犮犪犾犇犻狊狋狉犻犫狌狋犻狅狀犪狀犱犇狉狌犵犚犲狊犻狊狋犪狀犮犲犆犺犪狉犪犮狋犲狉犻狊狋犻犮狊狅犳犆犪狉犫犪狆犲狀犲犿犚犲狊犻狊狋犪狀狋犘狊犲狌犱狅犿狅狀犪狊犃犲狉狌犵犻狀狅狊犪ＸＩＡＯＸｉｎ ｒｏｎｇ，ＷＡＮＧＦｕ ａｎ，ＷＡＮＧＭａｎ ｙａＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＣｌｉｎｉｃａｌＬａｂｏｒａｔｏｒｙ，ＳｈｉｓｈｉＣｉｔｙＨｏｓｐｉｔａｌ，Ｓｈｉｓｈｉ，３６２７００，Ｃｈｉｎａ【犃犅犛犜犚犃犆犜】 犗犫犼犲犮狋犻狏犲：Ｔｏａｎａｌｙｚｅｔｈｅｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎｏｆｃａｒｂａｐｅｎｅｍ ｒｅｓｉｓｔａｎｔｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａ（ＣＲＰＡ）ｉｎｃｌｉｎｉｃａｌｄｅｐａｒｔｍｅｎｔｓ，ｓｕｍｍａｒｉｚｅｔｈｅｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ，ａｎｄｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌｍｅｔｈｏｄｓ．犕犲狋犺狅犱狊：Ａｔｏｔａｌｏｆ８０ＣＲＰＡｓｔｒａｉｎｓｆｒｏｍＭａｒｃｈ２０２２ｔｏＦｅｂｒｕａｒｙ２０２３ｗｅｒｅｓｅｌｅｃｔｅｄａｓｔｈｅｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎｇｒｏｕｐ，ａｎｄ８０ｃａｒｂａｐｅｎｅｍ ｒｅｓｉｓｔａｎｔＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａｓｔｒａｉｎｓｆｒｏｍｔｈｅｓａｍｅｐｅｒｉｏｄｗｅｒｅｃｏｌｌｅｃｔｅｄａｓｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ．Ｔｈｅｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎｏｆｃｌｉｎｉｃａｌｄｅｐａｒｔｍｅｎｔｓ，ｔｈｅｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆＣＲＰＡｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ，ｔｈｅｐｏｓｉｔｉｖｅｒａｔｅｏｆＭＢＬｐｈｅｎｏｔｙｐｅａｎｄｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｏｆｇｅｎｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｗｅｒｅｃｏｍｐａｒｅｄ．犚犲狊狌犾狋狊：Ｔｈｅｄｅｔｅｃ ｔｉｏｎｒａｔｅｏｆＣＲＰＡｗａｓｈｉｇｈｅｒｉｎｔｈｅｄｅｐａｒｔｍｅｎｔｓｏｆｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙａｎｄｃｒｉｔｉｃａｌｃａｒｅｍｅｄｉｃｉｎｅ，ｃｒｉｔｉｃａｌｃａｒｅｍｅｄｉｃｉｎｅａｎｄｇｅｎｅｒａｌｓｕｒｇｅｒｙ，ａｎｄｔｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｗａｓｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌｌｙｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ（犘＜０．０５）．ＴｈｅｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｒａｔｅｏｆＣＲＰＡｔｏｔｉｃａｒｃｉｌｌｉｎ／ｃｌａｖｕｌａｎｉｃａｃｉｄｗａｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈａｔｔｏｏｔｈｅｒａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ．Ａｍｉｋａｃｉｎａｎｄｔｏｂｒａｍｙｃｉｎｗｅｒｅｔｈｅｍｏｓｔｃｏｍｍｏｎａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓｗｉｔｈｌｏｗｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｒａｔｅ．ＴｈｅｐｏｓｉｔｉｖｅｒａｔｅｏｆＭＢＬｐｈｅｎｏｔｙｐｅｗａｓ９２．５０％（７４／８０），ＭＤＲ ＰＡａｃｃｏｕｎｔｅｄｆｏｒ５３．７５％（４３／８０），ａｎｄＸＤＲ ＰＡａｃｃｏｕｎｔｅｄｆｏｒ２２．５０％（１８／８０）．犆狅狀犮犾狌狊犻狅狀：ＣＲＰＡｉｓｍｏｒｅｌｉｋｅｌｙｔｏｏｃｃｕｒｉｎｔｈｅｄｅｐａｒｔｍｅｎｔｓｏｆｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙａｎｄｃｒｉｔｉｃａｌｃａｒｅｍｅｄｉｃｉｎｅａｎｄｃｒｉｔｉｃａｌｃａｒｅｍｅｄｉｃｉｎｅ．ＡｍｉｋａｃｉｎａｎｄｔｏｂｒａｍｙｃｉｎｈａｖｅｇｏｏｄａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌｅｆｆｅｃｔｓｉｎＣＲＰＡｉｎ ｆｅｃｔｉｏｎ．【犓犈犢犠犗犚犇犛】 ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａ；ｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ；ｃｌｉｎｉｃａｌｄｉｓｔｒｉｂｕ ｔｉｏｎ；ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎａｎｄｃｏｎｔｒｏｌｏｆｉｎｆｅｃｔｉｏｎ 铜绿假单胞菌（ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａ，ＰＡ）为非发酵、专性需氧菌，属于革兰阴性杆菌，是临床常见菌。
铜绿假单胞菌耐药机制及治疗技术研究新进展
[基金项目] 滨州医学院科研计划与科研启动基金项目（BY2020KYQD39）。
▲通讯作者铜绿假单胞菌耐药机制及治疗技术研究新进展张昊亭 高福泉▲ 张 斌滨州医学院附属医院呼吸与危重症医学科，山东滨州 256603[摘要] 铜绿假单胞菌（PA）是最常见的条件致病菌之一，严重危害人类的健康。
随着广谱抗生素的大量应用，导致多重耐药菌株的出现，从而使治疗更加棘手。
研究发现，免疫力低下的人群容易诱发PA 的感染，随着临床耐药PA 检出率的增加及抗生素的治疗效果减弱，部分患者的生活质量及预后受到很大影响。
PA 的感染难以控制的原因是复杂的耐药机制，其中包括生物膜的形成、孔蛋白的介导作用、外排泵以及抗菌灭活酶的产生等。
由于抗生素的应用不能有效控制PA 的感染，所以针对耐药机制在药物治疗方面进行研究，其中包括外排泵抑制剂、抗生素佐剂、相关灭活酶抑制剂、外膜透化剂。
此外，噬菌体疗法、中药疗法、一氧化氮疗法及纳米技术等特殊治疗也展现出良好的治疗效果，疫苗领域及增强自身免疫力也是未来预防PA 感染的重要研究方向。
因此，研究PA 的耐药机制及治疗技术对PA 感染的预防和治疗具有深远的意义。
[关键词] 铜绿假单胞菌；耐药机制；治疗技术；噬菌体疗法；中药疗法；纳米技术[中图分类号] R378.99+1 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616（2024）08-0053-05DOI:10.20116/j.issn2095-0616.2024.08.13New progress in research on drug resistance mechanisms andtreatment techniques of Pseudomonas aeruginosaZHANG Haoting GAO Fuquan ZHANG BinDepartment of Respiratory and Critical Care Medicine, Binzhou Medical University Hospital, Shandong, Binzhou 256603, China[Abstract] Pseudomonas aeruginosa (PA) is one of the most common opportunistic pathogens, which seriously endangers human health. With the widespread application of broad-spectrum antibiotics, the emergence of multi-drug resistant strains has made the treatment more challenging. Research has found that people with low immunity are prone to inducing PA infection. As the detection rate of clinically resistant PA increases and the therapeutic effect of antibiotics weakens, the quality of life and prognosis of some patients are greatly affected. The reason why PA infection is difficult to control is the complex drug resistance mechanisms, including the formation of biofilms, the mediation of pore proteins, efflux pumps, and the production of antibacterial inactive enzymes. Due to the inability of antibiotics to effectively control PA infection, research has been conducted on its drug resistance mechanisms in drug therapy, including efflux pump inhibitors, antibiotic adjuvants, related inactive enzyme inhibitors, and outer membrane permeabilizers. In addition, special treatments such as phage therapy, traditional Chinese medicine therapy, nitric oxide therapy, and nanotechnology have also shown good therapeutic effects. The field of vaccines and enhancing one’s immunity are also important research directions for preventing PA infection in the future. Therefore, studying the drug resistance mechanisms and treatment techniques of PA has profound significance for the prevention and treatment of PA infection.[Key words] Pseudomonas aeruginosa ; Drug resistance mechanism; Treatment technique; Phage therapy; Traditional Chinese medicine therapy; Nanotechnology铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa ，PA）又称绿脓杆菌，是一种普遍存在的革兰氏阴性杆菌，常见于许多环境中，特别是暴露于人类活动的土壤和水中[1]。
铜绿假单胞菌的临床分布及耐药分析
· ·International Infectious Diseases (Electronic Edition) June 2019, Vol.8 No.2 国际感染病学（电子版）2019年6月 第8卷 第2期铜绿假单胞菌的临床分布及耐药分析叶秋英1，付名丰2，丁岚1，许春11. 江西医学高等专科学校，江西 上饶 334000；2. 江西医专第一附属医院，江西 上饶 334000摘要：目的 研究分析铜绿假单胞菌的临床分布特点及耐药性。
方法 选取我院2016年3月-2018年6月住院患者送检的痰液、血液、尿液、分泌物等标本中分离出铜绿假单胞菌172株作为研究对象，铜绿假单胞菌分离培养要求参照《全国临床检验操作规程》，使用ID32GN对病原菌进行鉴定，药敏试验采用K-B纸片扩散法。
结果172株铜绿假单胞菌中，89株来自重症监护室、32株呼吸科、21株心内科、14株神经科、10株脑外科、3株骨科、3株泌尿外科。
铜绿假单胞菌的耐药率为米诺环素100%，哌拉西林20.5%，复方新诺明15.4%，环丙沙星15.4%，亚胺培南12.8%，左氧氟沙星12.8%，美罗培南12.8%，头孢他啶12.8%，头孢吡肟10.2%，庆大霉素5%。
结论 铜绿假单胞菌临床中主要分布在重症监护室，其次为呼吸科与心内科。
铜绿假单胞菌的耐药性中米诺环素耐药性最高，其次为哌拉西林。
关键词：铜绿假单胞菌；临床分布；耐药性感染论著铜绿假单胞菌原称绿脓杆菌。
属于自然界分布广泛，土壤中存在的最常见的细菌。
在水、空气、正常人的皮肤、呼吸道、肠道等处均有此菌。
铜绿假单胞菌为条件致病菌，是医院内感染的主要病原菌[1]。
此菌会引起术后伤口感染，也会引起褥疮、脓肿、化脓性中耳炎等病症，此外本菌导致的感染病灶会引起血行散播，甚至菌血症和败血症。
患者出现烧伤后感染铜绿色假单胞菌将影响患者的生活质量，严重时造成死亡。
铜绿假单胞菌会引起组织感染，并且感染多发于医院内，在洗涤槽、防腐溶液和贮尿容器中均可发现。
铜绿假单胞菌对氨曲南耐药的主要耐药机制
需要注意的是，铜绿假单胞菌的耐药机制可能是多种因素共同作用的结果，不同菌株之间 的耐药机制也可能存在差异。此外，铜绿假单胞菌的耐药性是一个严重的临床问题，对治疗 产生了挑战，因此对其耐药机制的研究和寻找新的治疗策略非常重要。
铜绿假单胞菌对氨曲南耐药的主要耐药机制
铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）是一种常见的革兰阴性杆菌，它具有广泛 的抗药性，包括对氨曲南（Amikacin）的耐药。铜绿假单胞菌对氨曲南的主要耐药机制包括 以下几个方面：
1. 产生酶：铜绿假单胞菌可以产生酶，如氨基糖苷酶（aminoglycoside-modifying enzymes），这些酶具有改变氨曲南的结构或降解氨曲南的能力，从而使其失去抗菌活性。
2. 降低药物进入细胞：铜绿假单胞菌可通过改变细胞外膜通道蛋白的表达或功能，限制氨 曲南进入细胞内部。这种机制称为外膜通道蛋白的改变，可以减少药物与细菌的相互作用， 从而降低药物的抗菌效果。
铜绿假单胞菌对氨曲南耐药的主要耐药机制
3. 多重耐药泵：铜绿假单胞菌具有多种耐药泵，如外膜泵（efflux pumps），这些泵能 够将药物从细胞内排出，从而减少药物在细胞内的浓度，降低药物的抗菌效果。这些耐药泵 能够识别和排出氨曲南，使细菌对氨曲南产生耐药性。
分析体外诱导铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南耐药性的比较
分析体外诱导铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南耐药性的比较目的：利用体外诱导铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南耐药性对比，观察两者耐药性时间，分析两种药哪一种对铜绿假单胞菌的耐药性更强。
方法：选取2013年7月—2014年7月我院住院部病患标本中分离的20株PA，与20株质控菌株。
两种物质对所有类别抗生素均敏感。
将两株菌的MIC含量测出，利用K-B 纸片结合扩散法对两者进行充分观察，对比两者的耐药性。
结果：病患PA对亚胺培南产生耐药性的评鉴时间为三天，对美罗培南的耐药时间平均在15天，质控PA对亚胺培南的耐药时间为4.5天，同样小于对美罗培南的耐药时间（16天）。
结论：亚胺培南的耐药性要强于美罗培南的耐药性。
标签：假单胞菌铜绿亚胺培南抗药性细菌亚胺培南是碳青酶烯的一种，属于第一代碳青酶烯。
有着抗菌性强的特点，对于PA有着良好的抑菌作用。
但随着该药物应用范围变广，PA呈现出了对亚胺培南的耐药性，且逐渐增长。
这已经成为了一个不容忽视的问题。
美罗培南也有着抗菌性强的特点，本实验收集40株对抗生素药物敏感的PA作为实验对象，分析研究亚胺培南和把美罗培南的耐药性，现报告如下：1.材料与方法1.1材料选取2013年7月—2014年7月我院住院部病患标本中分离的20株PA，与20株质控菌株。
两种物质对所有类别抗生素均敏感。
1.2试剂和培养基本次试验采用试剂为美罗培南和亚胺培南两种试剂。
以及全自动细菌分析仪。
药敏检测卡以及琼脂，药敏试片[1]。
1.3鉴定及药敏本实验对上述两种菌株利用全自动细菌分析仪进行相关分析。
鉴定之后，利用药敏检测卡对两株菌进行药敏实验。
值得注意的是，我在进行药敏试验的时候，应该利用K-B纸片的扩散法对两种菌株进行药敏对比，保证两种菌株完全敏感，才能作为实验用菌株。
相关操作步骤参照相关标准进行[2]。
1.4诱导使用肉汤为培养基对上述两种菌株进行体外诱导，利用皿平板将两株菌传代七次，之后利用稀释法，将两株菌的MIC含量测出，相关数据显示，病患PA對于亚胺培南的MIC含量为0.56 μg/ml，病患PA对美罗培南的MIC为0.07 μg/ml。
重症监护病房与普通病房铜绿假单胞菌耐药性比较及治疗效果差异
重症监护病房与普通病房铜绿假单胞菌耐药性比较及治疗效果差异目的通过对比重症监护病房（ICU）与普通病房（GW）铜绿假单胞菌（PA）的细菌耐药性情况，为临床合理用药提供依据。
方法用微量肉汤稀释法检测2010年8月—2014年8月分离出PA的最低抑菌浓度（MIC）并观察PA的细菌的形态及不同给药方案的治疗效果。
结果ICU分离出PA的MIC范围明显高于GW，两类病房PA的细菌形态无显著差异，ICU与GW治疗有效率分别为91.03%、92.70%。
结论PA在ICU耐药性明显高于GW，头孢他啶可作为GW 患者PA 感染的首选，对于ICU患者需联合用药。
[Abstract] Objective To provide a basis for clinical rational use of drugs by comparing the drug resistance of Pseudomonas aeruginosa （PA）in intensive care unit （ICU）with that in general ward （GW）. Methods The minimal inhibitory concentration （MIC）of PA was isolated from August 2010 to August 2014 by using broth dilution method. And the morphology of the bacteria and the effect of different treatment regimen for PA were observed. Results The MIC range of ICU was significantly wider than that of GW. And there was no significant difference between the two types of PA. The response rate was 91.03% and 92.70% respectively in ICU and GW. Conclusion The drug resistance of PA in ICU was significantly higher than that in GW. And ceftazidime was the first choice for PA infection in GW patients，but drug combination was necessary for ICU patients.[Key words] Pseudomonas aeruginosa；Drug resistance；ICU；General ward；Minimum inhibitory concentration；Treatment effect铜绿假单胞菌（PA）广泛存在于自然界，在土壤、水、空气、人体皮肤、肠道、呼吸道都广泛存在，是临床常见的条件致病菌，是目前医院感染最主要的病原菌之一[1]，分离率占9.76%[2]，其致病力强，耐药率高，已成为临床治疗的难题。
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１２ 实 验 方法 ．
发 展为败 血症或深部 感染 ， 其病 死率极 高 ， 严重 地 危 害着人类 的健康与生命 ， 抗生素研 发的速度 已远
远 赶 不 上 耐 药 菌 的产 生 速 度 ， 临床 上 急 需 一 种 杀 菌 效 果 好 ， 作 用 小 的新 型 生 物制 剂 。 噬 菌 体 因其 具 副 有 严 格 的活 组 织 寄 生 性 ， 备 了研 制 新 生 物 制 剂 的 具
黑 龙 江 科 学
２１年第 ３ ０２ 卷第 ２期
ＨＥＩＯＮＧＪＡＮＧ ＣＩ Ｌ Ｉ Ｓ ＥＮＣ Ｅ
铜绿假单胞菌耐药性的临床实验
Ｔｈｅ Ｄｒ ｇ Ｔｏ ｅ ａ ｅ ｏ ｅ ｄ ｍ ｏ ａ ｒ ｇｉ ｓ ｎ Ｃｌ ｃ ｌＴｒａ ｕ ｌ ｒ ｎｃ ｆＰｓ ｕ ｏ ｎ ｓＡｅ ｕ ｎｏ ａ ｉ ｉ ａ ｉ ｌ ｎｉ
孙建华 ， 于丽萍 ， 陈丽娟， 王金英 ， 陈静宇
（ 黑龙江省科学院 微生物研究所 ， 黑龙江 哈尔滨 １０ Ｌ ） ５ Ｏ Ｏ
Ｓ ｉｎ ｈ ａ ＹＵ Ｌ — ｉｇ Ｃ ＵＮ Ｊａ － ｕ ， ｉｐ ｎ ， ＨＥＮ Ｌ — ｕ ｎ Ｗ ＡＮＧ ｉ— ｉｇａ ｄ Ｃ ｉＪ ａ ， Ｊｎ ｙｎ ｎ ＨＥＮ Ｊｎ — ｕ ｉｇ ｙ
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脓 杆 菌 ） 临床 上 获 得 性 感 染 中重 要 的条 件 致 病 菌 是
分别从吉林市 医院 、 黑龙江省 医院 、 北京 ３２医 ０
院 、 阳 ２２医 院 、 尔 滨 医 科 大 学 第 二 附 属 医 院 沈 ０ 哈
之一 ， 呼吸系统 、 是 创伤 、 烧伤及免疫受 损肌体最容
易感 染 的细 菌 之 一 【１ １。我 国全 国性 医 院 内病 原 菌 耐
潜质 。 本 论 文 对 从 辽 宁 、 林 、 龙 江 及 北 京 医 院 采 吉 黑
（ 哈医大二院 ） 哈尔滨市医院采集 临床铜绿假单胞 、
菌 株 ４ ２株 ，经 分 离 纯 化 及 鉴 定 后 ，用 脱 脂 牛奶 ４
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药 性 监 测 （Ｐ Ｓ数 据 显 示 ： 绿 假 单 胞 菌 在 所 有 院 Ｎ Ｒ） 铜 内感 染 革 兰 氏阴 性 菌 中排 第 一 位 。该 菌感 染 一 旦
ｔ ａｎｃ ｅ．
Ｋｅ ｙ ｗｏｒ ｓ ｓ ｕ ｏ ｎ ｓａ ｒｇｎ ｓ ； ｒ ｇｓｎ ｉｉｉ ｅ ｔｄ ｇｒｓｓａ ｃ ｄ ：Ｐ ｅ ｄ ｍｏ ａ ｅ ｕｉｏ ａ ｄ ｅ ｓｔ ｔ ｔｓ； ｒ ｅｉｔｎ ｅ ｕ ｖｙ ｕ
铜绿假单 胞菌（ｓｕｏ ｏａ ａｒｇ ｏａ （ Ｐｅｄｍ ｎｓ ｅｔｉ ｓ ）简称绿 ｔｎ
关键词 ： 铜绿假单胞菌 ； 药物敏感性试验 ； 耐药性
中 图分 类 号 ： ７ Ｒ３８ 文 献 标识 码 ： Ａ 文 章 编 号 ：６ ４ ８４ （０ ２ ０ —０ ５ ０ １７ — ６ ６ ２ １ ）： ００ — ３ ２
Ａ ｂｓｒ ｃ ：Ｔｈ ｒｇ ｒｓｓａ ｅｏ ｓ ｕ ｏ ｎ ｓ ｒ ｎ ０ｗａ ｎａｙ ｅ ｏ ｅｅ ｒｈ ａ ｄ ｄ ｖ ｌｐ ｎ ｆｂｏｏ ｉａ ｇ ｎｓｆｏ Ｐ ｅ ｄ ｍｏ ａ ｅ ￣ ｉ ｔａ ｔ ｅｄｕ ｅ ｉｔｎｃ ｆＰ ｅ ｄ ｍｏ ａ Ｍ ∞ ｓａ ｌｚｄ ｆｒｒｓ ａｃ ｎ ｅ ｅｏ ｍｅ ｔｏ ｉｌｇｃ ｌａ ｅ ｔ ｒｍ ｓ ｕ ｏ ｎ ｓｏ ｒｇ —
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（ｎｔｕｅｏ ｃｏ ｉ ｏｙ Ｈｅｌｎ ａｇＡｃｄ ｍ ｃｅｃ， ｒ ｉ １０ １ ， ｈｎ ） Ｉｓｉ ｔ ｆＭｉｒｂｏ ｇ， ｉ ￣ｉｎ ｔ ｌ ｏ ａｅ ｙｏ ｉ ｅ Ｈａｂｎ ５ ０ ０ Ｃ ｉａ ｆＳ ｎ
摘要 ： 临床铜绿假单胞菌的耐药性研究可为研发绿脓杆菌噬菌体生物制剂奠定基础 。 对收集 的临床绿脓杆菌 ４ ２株进行分离鉴 ４
定， 采用微生物 ＫｒｙＢｕｒ ｉ － ａｅ药敏纸片法 ， ｂ 对临床绿脓杆菌做药敏实验验证 ， 筛选出多重耐药绿脓杆菌 １９ 。药敏实验确定临床绿 １株
脓杆菌对氨苄西林等抗 生素耐药达 １０ 对亚胺培南 的耐药性为 ４ ％。筛选出的 １９ ０ ％， ５ １ 株多重耐药绿脓杆菌从耐药性看具有较高的 代表 性。