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HBV抗原抗体检测意义与应用
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① HBsAg，抗HBs ② HBeAg，抗HBe
• 乙型肝炎抗原③抗体抗的HBc检Ig测M ：抗HBcIgG
–目前主要用血清学方法检测两对半
• 其中以HBsAg的检测最重要，作为筛 选血源必须检测的指标。
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豚鼠等的红细胞
– ②介导吸附和穿入宿主细胞
– ③免疫原性→相应抗体（血凝抑制抗体）
• 抑制血凝现象--血凝抑制试验
• 中和病毒，属主要的保护性抗体。
– ④划分亚型的主要依据
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（2）神经氨酸酶(NA) HA
NA
• 糖蛋白，蘑菇状突起
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二、致病性与免疫性
1、传染源为病人和携带者 2、传播途径
★经血传播 ★母婴传播
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二、致病性与免疫性
3、致病机制 与HBV在机体内持续增殖和机体由此产生免
疫病理损害有关。
（1）抗体介导的免疫病理损伤： （2）细胞介导的免疫病理损伤： （3）免疫复合物引起的病理损伤：
•核蛋白 •RNA多聚酶蛋白
核糖核蛋白 (RNP）
核衣壳， 螺旋对称
核蛋白抗原稳定，具型特异性。
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(二)分型与变异
• 1.分型：据NP和M蛋白的Ag性不 同
甲(A)型
将流感病毒分三型 乙(B)型
丙(C)型
• 甲型再据HA、NA抗原性不同进一 步分亚型（H5常N见病1毒、课件 H7N7等）。 13
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培养特性： （1）鸡胚羊膜腔（初次分离）或尿囊腔 接种（传代） ； （2）人胚肾或猴肾细胞培养 ； （3）动物接种——以雪貂最敏感。 抵抗力：
较弱，56℃30min灭活，室温下感染 性很快消失，对其他理化因素均敏感。
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二、致病性
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分节段的（-） SSRNA
NA
M1 M2
HA
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PB2 PB1
RNA多聚酶
PA
RN
A
RNP 核糖核蛋白（RNP）
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包膜:内层基质蛋白（M1） 外层----脂质双层 糖蛋白突起（HA、NA） M2组成
核衣壳:由病毒RNA（分7或8个节段） RNA 多聚酶、 核蛋白（NP）
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乙型肝炎病毒
Hapatitis B Virus
• 1963年Blumberg在多次输血的血友病 患者中发现澳抗，1970年Dane在电镜 下看到具有传染性的42nm病毒颗粒
• HBV在亚洲广泛流行，在中国约10%人 口携带该病毒，全球约3.5亿
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1.典型流感： 畏寒、发热、头痛、
肌肉酸痛、咳嗽、乏力、 咽痛、鼻炎等。可有肠胃 不适。少数病人继发细菌 性肺炎。
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二、致病性
2.流感病毒性肺炎：
少数患者，早期与典型流感相 同，但1-2天后症状迅速加重。 并常发生呼吸困难，病死率较 高。
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一、生物学性状
属嗜肝DNA病毒科 1、形态结构：电镜下可见三种形态
（1）大球形颗粒（Dane颗粒）：为完整的HBV （2）小球形颗粒：Ø22nm，为HBV外衣壳成分 （3）管形颗粒： Ø22nm，长50~700nm
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1、大球型颗粒
• 为完整的、有传染性的HBV颗粒，又称 Dane颗粒。直径42nm，具双层衣壳：
• 包括有编：码前DNSA2多基聚因酶:编码Pre S2 Ag
• S区
• C区 • P区
S+
编码HBxAg
L-
• X区
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3、HBV的复制
3.5Kb mRNA: 编码HBcAg,HBeAg, DNA聚合酶 复制模板--前基因组RNA
2.4Kb mRNA: 编码S蛋白。 0.7Kb mRNA: 编码X蛋白
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• 2、特异性预防
• 人工被动免疫：HBIG • （1）母亲HBsAg阳性的新生儿 • （2）与乙肝密切接触者 • 人工主动免疫：乙肝疫苗
（1）新生儿： （2）易感婴幼儿和儿童 （3）高危人群： （4）HBsAg阴性者
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肝炎病毒的主要特性
• 血中不易检测到 • 受感染的肝细胞表面可表达有HBcAg • HBc-抗体IgM阳性，提示HBV处于复制
状态。
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4、e抗原(HBeAg)
• 存在于HBV内衣壳中，亦可在HBV复制 时期，由病毒转录、游离于血清中
• HBeAg可作为体内HBV复制及血清具有 强传染性的一个指标
• 表面有两种刺突
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– 血凝素(HA)
– 神经氨酸酶(NA)
• HA和NA抗原性易变异。
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（1）血凝素(HA)
• 糖蛋白 • 三棱柱状突起
HA
NA
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• 作用：
HA
NA
– ①红细胞凝集作用：凝集人、鸡、
• 由HBsAg刺激机体产生的抗－HBs抗体 ，对机体有保护性
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• 2、PreS1、PreS2 吸附作用 抗原性强 抗—PreS1和抗—PreS2可阻断病毒与细
胞的结合
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35 下一页 退 出
3、核心抗原(HBcAg)
• 存在于Dane颗粒核心部位的表面，为内 衣壳成分
短股DNA
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内衣壳27
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2、小球形颗粒
• 直径22nm，大量存在于血流中，不含 DNA和DNA聚合酶, 由过剩的病毒
衣壳装配而成。
包
膜
HBsAg
类 脂
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3、管型颗粒
• 实际为一串聚合的小球型颗粒。
大分子蛋白
包膜类脂
HBsAg
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三、微生物学检查
HBV感染的血清学标志物
意义
HBsAg、Pre-S1、Pre-S2、HBV DNA、 HBeAg、
抗-HBs、抗-HBc （IgM 、IgG ）、抗- HBe
抗Pre-S1、抗Pre-S2（IgM）、
抗-HBe、抗Pre-S2（IgG）
检测方法：ELISA、PCR、RPHA、RIA等。
2.1Kb mRNA: 编码S1和S2蛋白。
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一、生物学性状
4、抗原成分 （1）外衣壳抗原：HBsAg、前S1抗原、
前S2抗原。 （2）内衣壳抗原：HBcAg、HBeAg。
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1、表面抗原(HBsAg)
• 存在于大球形颗粒外衣壳、小球形颗粒及 管型颗粒中，HBV感染的主要标志。
• 抗HBe对HBV感染有一定的保护作用。
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一、生物学性状
5、培养特性 黑猩猩是HBV动物模型；鸭是广泛应用；原代
巨噬细胞培养。 6、抵抗力：较强
耐热、干燥、低温和紫外线，对70%乙醇不 敏感，杀灭HBV可选用50mg/L环氧乙烷、2%戊二 醛、0.5%过氧乙酸、5%次氯酸钠等。
二、致病性
主要传染源：病人、病畜 隐性感染者
主要传播途径：经飞沫。 潜伏期：1~4d。 病程：一般5~7d。
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三、免疫性：细胞免疫、体液免疫
感染后可获得对同型病毒牢固的免疫力，主要依赖 于呼吸道局部的SIgA，其中抗HA抗体最为重要。
抗HA抗体阻止病毒吸附和穿入 抗NA抗体限制病毒释放和扩散
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二、致病性与免疫性
乙肝临床表现呈多样性——急性肝炎、慢性肝炎 、重型肝炎、无症状携带、肝外组织损伤等。与 原发性肝癌有一定关系。
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二、致病性与免疫性
4、病后主要依赖抗-HBs和抗Pre-S的保护。
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45 下一页 退 出
病毒 形态
传播途径
潜伏期
HAV
27nm， RNA
粪-口
30d
HBV HCV
42nm， 30~60nm，
DNA
RNA
血液、母婴 血液
90d
5w
HDV
36nm， RNA
血液
4~20w
HEV
27~38nm， RNA
粪-口
36d
起病 急性较多 多缓慢 多缓慢 多缓慢 急性较多
慢性或病 毒携带
检测
无
EIA、 RT-PCR
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（2）细胞介导的免疫病理损伤 ：
CTL：分泌穿孔素、淋巴毒素等直接杀伤靶细 胞 迟发型超敏反应：
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（3）免疫复合物引起的病理损伤：
• • • HBsAg • +抗-HBs •
•
肾小球 关节
补体--Ⅲ型超敏反应
肝内 → 栓塞→坏死→重症肝炎
第三节 常见病毒
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流感病毒
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• 流感病毒(influenza virus)是流感 的病原体。
• 分甲、乙、丙三型 • 引起人和动物流感
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一、生物学性状 形态与结构 呈球形，直径 80~120nm，由 核衣壳和包膜 构成。
有
有
EIA、PCR EIA、 RT-PCR
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有
无
EIA、 RT-PCR
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包膜内层
M1蛋白:
M1
M2
• 位于包膜的内层。
• 增加包膜硬度和厚度。
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• 保护核酸、维持病毒外形。
• Ag稳定，具型特异性。
• 相应抗体无保护作用。
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包膜外层
HA
NA
• 脂质双层结构
• M2蛋白:是膜通道蛋白。
– 外衣壳相当于一般病毒的包膜，由脂质双层和 蛋白质构成，含HBsAg；
– 内衣壳为20面体对称的核心结构，相当于一般 病毒的衣壳，含HBcAg和HBeAg；
– 其内部含HBV的DNA和DNA多聚酶。
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DNA多聚酶 HBsAg
长股DNA
HBcAg HBeAg
外衣壳
HBV微生物学检查的意义：
• (1)筛选血源 • (2)流行病学调查 • (3)乙肝疫苗接种后免疫效果的测定 • (4)诊断乙肝病 • (5)判断预后 • (6)判断传染性
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48 下一页 退 出
四、防治原则
1、一般措施： 加强血液及血制品管理、筛选供
血员—减低血液途径传播 加强婚前检查及性教育 严格消毒制度—防止医源性感染
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2、变异
• 甲型易变异，两种变异形式 ①抗原漂移 ②抗原转换
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抗原漂移
• 由于基因组自发的点突变导致的抗原小 幅度变异，称抗原漂移，属量变，引起 流感的中、小流行。
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抗原转换
• 由于基因组发生重新排列导致的抗原较 大幅度的变异，称为抗原转变，属质变， 产生新的亚种，往往引起流感大流行甚 至世界性大流行。
• 作用
– ①促进病毒释放：具酶活性→水解宿主细
胞表面N－乙酰神经氨酸。
– ②促进病毒扩散：液化细胞表面的粘液。
– ③NAAg→Ab，抑制NA的水解活性，无中和
作用。
– ④划分亚型的主要依据
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11 下一页 退 出
核心
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RNP
RNA多聚 酶蛋白
•单负股RNA(7～8节段)
中分子蛋白
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一、生物学性状
2、HBV的DNA
（1）长股（负股，L-） （2）短股（正股，S+）：为L股的50%~100%，
5'端固定，与L-5'端重叠互补。3'可变。
整个DNA包含4个开放读码区段（ORF）、 4个启动子和2个增强子。
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30 下一页 退 出
ORF四C前个基C区因基:因及编S前：基码S其与因 1H基CB:编基c编 因A码因g:码；编共H的B码同sPA抗编rge码原SH1BeAAgg
细胞免疫：亚型间交叉免疫
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21 下一页 退 出
四、微生物学检查
1、分离病毒 鸡胚羊膜腔。
2、血清学诊断 取双份血清测定血凝抑制
抗体效价效价增长4倍或4倍以上有诊断价值。
3、快速诊断 免疫荧光法、分子生物学 方法。
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22 下一页 退 出
五、防治原则
1、建立流感监测 站，及时发现与隔 离病人； 2、预防接种、环 境消毒； 3、中药与化学疗 剂防治。