银杏叶提取方法

银杏叶提取方法
加入时间： 2007-3-1 9:35:35 浏览次数：301
有机溶剂提取法这是国内外使用最为广泛的方法。

由于银杏叶中含黄酮类化合物和内酯较少（分别为1.7%及0.6%左右），因此最终所得浸膏中此两类成分含量往往不高，所含杂质较多，离目前通行的“24+6”标准较远。

为得到能用于制药原料的GBE，则必须将此浸膏进行进一步的分离纯化。

常用的分离纯化方法有液-液萃取法、沉淀法和吸附洗脱法。

比较了两种方法，结果表明，树脂吸附精制法优于溶剂萃取精制法。

树脂吸附纯化法近年来有较大的发展。

将银杏叶以65%乙醇回流提取，减压浓缩， ZTC 澄清剂沉降。

其黄酮苷和内酯含量分别达到26%和6%以上。

对吸附银杏叶中银杏总内酯的树脂法进行研究，用50%乙醇沸提银杏叶干粗粉，滤液上724吸附树脂柱,最后得淡黄色粉末状提取物，含黄酮苷和银杏总内酯分别为27.4%，10.6%。

该法操作简单，能耗低，投资少，安全可靠。

树脂吸附生产工艺应用于银杏叶，其主要特点是成本低、回收率高、有机溶剂残留少。

研究者对银杏内酯A，B，C，J与白果内酯的制备分离进行了研究。

作者使用质量分数为6.5% NaOAc浸泡的硅胶柱，以中压液相色谱分离GA，GB，GC，GJ和BB的方法，先精制再分离，仅含1种内酯的色谱部位经重结晶3～4次可得纯品单体。

超临界CO2提取法近年来，随着国际上超临界流体提取技术的迅速发展，用该技术提取植物中的活性成分也越来越广泛。

与有机溶剂法相比，具有提取效率高，无溶剂残留，活性成分和热不稳定成分不易被分解破坏等优点，通过控制温度和压力以及调节改性剂的种类和用量，还可以实现选择性萃取和分离纯化，欧洲已有专利报道采用SFE技术除去银杏叶粗提物中的杂质。

近年来国内学者也开始探索和研究用该技术提取银杏叶黄酮类化合物，得黄绿色精提物，收率为4.1%，其中黄酮苷含量在35%以上。

专家以银杏叶有效成分分离为对象，建立了一套超临界流体小试、中试装置和实验方法，所得的提取物中银杏黄酮含量为 28%，银杏内酯含量为7.2%，均高于国际现行公认的质量标准。

据报道，以乙醇和用大孔树脂提取的银杏叶精提物，于CO2-SFE精制前，毒性成分白果酸含量为2.0%，而用CO2-SFE精提后，白果酸含量降低到0.02%，对SFE萃取银杏内酯和白果内酯进行研究，认为在萃取过程中必须有改性剂的参与。

用超临界CO2提取银杏叶中的药用成分，已引起各国学者关注，成为新热点之一。

高速逆流色谱技术提取法高速逆流色谱（high-speed counter current chromatogra phy, HSCCC）技术是一种不用任何固定载体的液-液分配色谱技术，具有两大突出优点：① 无因使用载体而固有的吸附现象；② 具有不同于一般色谱的分离方式，使其特别适用于制备性分离。

用HSCCC技术提取分离银杏叶中黄酮苷及总内酯成分，已引起各国专家的重视。

Yang等以及蔡定国等先后报道了应用HSCCC技术，从银杏叶提取物中分离纯化得到3种主要苷元：槲皮素、山奈素、异鼠李素。

我们还对HSCCC分离银杏总内酯的条件进行探索，目前已成功分离制得白果内酯单体，和以GA，GB为主要成分的混合物，并仍在继续摸索新的分离条件，以实现对银杏内酯的分离。

HSCCC对样品的高分离效率、高产品纯度、无吸附和污染等优点，将使其成为制备银杏黄酮苷元以及各银杏内酯和白果内酯对照品的较佳手段。

细胞和组织培养合成法银杏黄酮类化合物以及萜类内酯主要存在于银杏叶片和根皮中，其含量较低，易受地域、季节、气候及植株性别限制而发生较大的含量变化，且银杏总体资源十分有限，叶的采收具有季节性。

继1991年Carrier等首次肯定了银杏组织培养物中有银杏内酯存在后，陆续已有较多成功的实验室研究成果。

孙天恩等利用发根农杆菌的 Ri质粒转化成功银杏叶的发根，其中银杏内酯的含量比较接近叶片，而银杏黄酮的含量则偏低。

但
银杏发根具有生长速度快、有克隆性、遗传性稳定、筛选方便，无环境污染等优点，是继细胞培养后发展起来的又一新的培养系统，并已有有关专利公布。

虽然目前商品化产生银杏内酯还是以叶片提取为主，但利用组织法生产及发根培养技术的前景令人注目。