邻二氮菲分光光度法测定铁的含量(UV)
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准确吸取10ml的水样置于 的水样置于50ml容量瓶中，按 容量瓶中， 准确吸取 的水样置于 容量瓶中 上述标准溶液的配制方法依次加入各种试剂制 成供试液，测定其吸光度（ ）。从标准曲线 成供试液，测定其吸光度（Ax）。从标准曲线 上查出供试液的含铁量（ ），并计算水样的 上查出供试液的含铁量（Cx），并计算水样的 含铁量（C水样）。 含铁量（
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2、吸收曲线的绘制与测定波长的选择 、
以空白溶液（ 标准溶液） 以空白溶液（加 0.0ml Fe2+标准溶液）为参比 溶液， 之间， 溶液，在波长为 400～600nm 之间，用lcm 吸收池 ～ 测定标准系列中一中等浓度的溶液（加 3.0ml Fe2+） 测定标准系列中一中等浓度的溶液（ 中等浓度的溶液 的吸光度。以波长为横坐标，以吸光度为纵坐标， 的吸光度。以波长为横坐标，以吸光度为纵坐标， 绘制吸收曲线，并选择吸收曲线的最大吸收波长 绘制吸收曲线，并选择吸收曲线的最大吸收波长 吸收曲线 （λmax）为测定波长。 为测定波长。
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测量： 3、定量测量： 定量测量
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UV-Vis计的使用方法 计的使用方法-2 计的使用方法
1．按[ENTER]键进入，按[Mode]键返回。 [ENTER]键进入， [Mode]键返回。 键进入 键返回 2．主菜单：光度测量、光谱测量、定量测量、动力学测量、 主菜单：光度测量、光谱测量、定量测量、动力学测量、 数据处理、多波长测量、 数据处理、多波长测量、系统状态设置 3．选择“光谱测量”按[ENTER]键。 选择“光谱测量” [ENTER]键 4．设定参数，按[基线校正]，然后[start]开始扫描，得出 设定参数， 基线校正] 然后[start]开始扫描， [start]开始扫描 吸收曲线和最大吸收波长。 吸收曲线和最大吸收波长。 5．选择“定量测量”按[ENTER]键，测量方法选择“多点标 选择“定量测量” [ENTER]键 测量方法选择“ [ZERO]键blanking， 定”。按 [ZERO]键blanking，分别测定各标准溶液的吸 光度，得出标准曲线 标准曲线。 光度，得出标准曲线。 6．测定供试液的吸光度，由标准曲线得出样品含量。 测定供试液的吸光度，由标准曲线得出样品含量。 样品含量
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3、标准曲线的绘制
以空白溶液为参比溶液， 以空白溶液为参比溶液，在所选择的波长 吸收池测定各标准溶液的吸光度。 下，用1cm 吸收池测定各标准溶液的吸光度。 以吸光度为纵坐标，以Fe2+的质量浓度为横坐标， 的质量浓度为横坐标， 以吸光度为纵坐标， 绘制标准曲线。 绘制标准曲线。 标准曲线
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4、水样的测定
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【仪器与试剂】 仪器与试剂】
1．主要仪器： ．主要仪器：
紫外-可见分光光度计、容量瓶、 紫外 可见分光光度计、容量瓶、移液管 可见分光光度计
2．试剂： ．试剂：
标准铁溶液（ µ ）、醋酸盐缓冲溶液 标准铁溶液（50µg/ml）、醋酸盐缓冲溶液 ）、 ）、邻二氮菲溶液 （pH≈5）、邻二氮菲溶液（0.15%，临用新制）、 ）、邻二氮菲溶液（ ，临用新制）、 盐酸羟胺（ ）、水样 盐酸羟胺（2%，临用新制）、水样 ，临用新制）、
邻二氮菲分光光度法测定 水样中铁的含量
赣南医学院药学院，分析化学与药物分析教研室
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【目的要求】 目的要求】
1．掌握紫外可见分光光度计的使用方法； ．掌握紫外可见分光光度计的使用方法 使用方法； 2．掌握邻二氮菲分光光度法测定Fe2+的原 ．掌握邻二氮菲分光光度法测定 邻二氮菲分光光度法测定 理与方法； 理与方法； 标准曲线法的定量分析原理 3．掌握标准曲线法的定量分析原理。 ．掌握标准曲线法的定量分析原理。
C水样
C X × 50 = V水样
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【注意事项】 注意事项】
1、盛标准系列溶液及水样的容量瓶应编号，以 、盛标准系列溶液及水样的容量瓶应编号 编号， 免混淆。 免混淆。 2、测定溶液吸光度时应由稀至浓测定。 、测定溶液吸光度时应由稀至浓测定。 由稀至浓测定 3、盐酸羟胺易氧化，不宜久置。 、盐酸羟胺易氧化 不宜久置。 易氧化，
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光谱测量: 2、光谱测量:
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光谱测量： 2、光谱测量：峰/谷15ຫໍສະໝຸດ 2、光谱测量：存贮 光谱测量：
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测量： 3、定量测量： 定量测量
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测量： 3、定量测量：多点标定 定量测量
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定量测量 测量: 3、定量测量: [AUTU ZERO]
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测量： 3、定量测量： 定量测量
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【实验步骤】 实验步骤】
1、标准系列溶液的配制 、
分别精密吸取标准铁溶液 分别精密吸取标准铁溶液（ 50µg/ml ）0.0、 精密吸取标准铁溶液（ µ 、 1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml于6个50ml容量瓶中， 、 、 、 、 容量瓶中， 于 个 容量瓶中 依次加入醋酸盐缓冲溶液、盐酸羟胺溶液 溶液、 依次加入醋酸盐缓冲溶液、盐酸羟胺溶液、邻二 加入醋酸盐缓冲溶液 氮菲溶液各 溶液各5ml，每加入一种试剂后都要摇匀， 摇匀， 氮菲溶液各 ，每加入一种试剂后都要摇匀 最后用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，放置10min。 最后用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，放置 。
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【基本原理】 基本原理】
本实验测定Fe 的质量浓度，选择邻二氮菲为显色剂。 邻二氮菲为显色剂 本实验测定 2+的质量浓度，选择邻二氮菲为显色剂。在 pH＝3～9 溶液中，邻二氮菲与 2+生成稳定的橙红色配位离 橙红色配位离 ＝ ～ 溶液中，邻二氮菲与Fe 生成稳定的橙红色 子：
Fe3+能与邻二氮菲生成淡蓝色配合物（稳定性较差）， 能与邻二氮菲生成淡蓝色配合物（稳定性较差） 淡蓝色配合物 故显色前要加入还原剂盐酸羟胺使其还原为Fe 盐酸羟胺使其还原为 故显色前要加入还原剂盐酸羟胺使其还原为 2+：
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2、吸收曲线的绘制与测定波长的选择 、
以空白溶液（ 标准溶液） 以空白溶液（加 0.0ml Fe2+标准溶液）为参比 溶液， 之间， 溶液，在波长为 400～600nm 之间，用lcm 吸收池 ～ 测定标准系列中一中等浓度的溶液（加 3.0ml Fe2+） 测定标准系列中一中等浓度的溶液（ 中等浓度的溶液 的吸光度。以波长为横坐标，以吸光度为纵坐标， 的吸光度。以波长为横坐标，以吸光度为纵坐标， 绘制吸收曲线，并选择吸收曲线的最大吸收波长 绘制吸收曲线，并选择吸收曲线的最大吸收波长 吸收曲线 （λmax）为测定波长。 为测定波长。
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测量： 3、定量测量： 定量测量
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UV-Vis计的使用方法 计的使用方法-2 计的使用方法
1．按[ENTER]键进入，按[Mode]键返回。 [ENTER]键进入， [Mode]键返回。 键进入 键返回 2．主菜单：光度测量、光谱测量、定量测量、动力学测量、 主菜单：光度测量、光谱测量、定量测量、动力学测量、 数据处理、多波长测量、 数据处理、多波长测量、系统状态设置 3．选择“光谱测量”按[ENTER]键。 选择“光谱测量” [ENTER]键 4．设定参数，按[基线校正]，然后[start]开始扫描，得出 设定参数， 基线校正] 然后[start]开始扫描， [start]开始扫描 吸收曲线和最大吸收波长。 吸收曲线和最大吸收波长。 5．选择“定量测量”按[ENTER]键，测量方法选择“多点标 选择“定量测量” [ENTER]键 测量方法选择“ [ZERO]键blanking， 定”。按 [ZERO]键blanking，分别测定各标准溶液的吸 光度，得出标准曲线 标准曲线。 光度，得出标准曲线。 6．测定供试液的吸光度，由标准曲线得出样品含量。 测定供试液的吸光度，由标准曲线得出样品含量。 样品含量
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3、标准曲线的绘制
以空白溶液为参比溶液， 以空白溶液为参比溶液，在所选择的波长 吸收池测定各标准溶液的吸光度。 下，用1cm 吸收池测定各标准溶液的吸光度。 以吸光度为纵坐标，以Fe2+的质量浓度为横坐标， 的质量浓度为横坐标， 以吸光度为纵坐标， 绘制标准曲线。 绘制标准曲线。 标准曲线
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4、水样的测定
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【仪器与试剂】 仪器与试剂】
1．主要仪器： ．主要仪器：
紫外-可见分光光度计、容量瓶、 紫外 可见分光光度计、容量瓶、移液管 可见分光光度计
2．试剂： ．试剂：
标准铁溶液（ µ ）、醋酸盐缓冲溶液 标准铁溶液（50µg/ml）、醋酸盐缓冲溶液 ）、 ）、邻二氮菲溶液 （pH≈5）、邻二氮菲溶液（0.15%，临用新制）、 ）、邻二氮菲溶液（ ，临用新制）、 盐酸羟胺（ ）、水样 盐酸羟胺（2%，临用新制）、水样 ，临用新制）、
邻二氮菲分光光度法测定 水样中铁的含量
赣南医学院药学院，分析化学与药物分析教研室
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【目的要求】 目的要求】
1．掌握紫外可见分光光度计的使用方法； ．掌握紫外可见分光光度计的使用方法 使用方法； 2．掌握邻二氮菲分光光度法测定Fe2+的原 ．掌握邻二氮菲分光光度法测定 邻二氮菲分光光度法测定 理与方法； 理与方法； 标准曲线法的定量分析原理 3．掌握标准曲线法的定量分析原理。 ．掌握标准曲线法的定量分析原理。
C水样
C X × 50 = V水样
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【注意事项】 注意事项】
1、盛标准系列溶液及水样的容量瓶应编号，以 、盛标准系列溶液及水样的容量瓶应编号 编号， 免混淆。 免混淆。 2、测定溶液吸光度时应由稀至浓测定。 、测定溶液吸光度时应由稀至浓测定。 由稀至浓测定 3、盐酸羟胺易氧化，不宜久置。 、盐酸羟胺易氧化 不宜久置。 易氧化，
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光谱测量: 2、光谱测量:
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光谱测量： 2、光谱测量：峰/谷15ຫໍສະໝຸດ 2、光谱测量：存贮 光谱测量：
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测量： 3、定量测量： 定量测量
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测量： 3、定量测量：多点标定 定量测量
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定量测量 测量: 3、定量测量: [AUTU ZERO]
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测量： 3、定量测量： 定量测量
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【实验步骤】 实验步骤】
1、标准系列溶液的配制 、
分别精密吸取标准铁溶液 分别精密吸取标准铁溶液（ 50µg/ml ）0.0、 精密吸取标准铁溶液（ µ 、 1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml于6个50ml容量瓶中， 、 、 、 、 容量瓶中， 于 个 容量瓶中 依次加入醋酸盐缓冲溶液、盐酸羟胺溶液 溶液、 依次加入醋酸盐缓冲溶液、盐酸羟胺溶液、邻二 加入醋酸盐缓冲溶液 氮菲溶液各 溶液各5ml，每加入一种试剂后都要摇匀， 摇匀， 氮菲溶液各 ，每加入一种试剂后都要摇匀 最后用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，放置10min。 最后用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，放置 。
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【基本原理】 基本原理】
本实验测定Fe 的质量浓度，选择邻二氮菲为显色剂。 邻二氮菲为显色剂 本实验测定 2+的质量浓度，选择邻二氮菲为显色剂。在 pH＝3～9 溶液中，邻二氮菲与 2+生成稳定的橙红色配位离 橙红色配位离 ＝ ～ 溶液中，邻二氮菲与Fe 生成稳定的橙红色 子：
Fe3+能与邻二氮菲生成淡蓝色配合物（稳定性较差）， 能与邻二氮菲生成淡蓝色配合物（稳定性较差） 淡蓝色配合物 故显色前要加入还原剂盐酸羟胺使其还原为Fe 盐酸羟胺使其还原为 故显色前要加入还原剂盐酸羟胺使其还原为 2+：