达科为科研仪器部培训

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2015/05/12
Vision CBA 特殊应用
肝原代细胞,脂肪细胞,干细胞等其它原代细胞分析
• Cellometer Vision 受10大制药企业xinlai 并用于对肝原代细胞的毒理学研究
• Cellometer Vision 可精确计数脂肪细胞 等大型细胞
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Celigo® Imaging Cytometry 全视野细胞筛选分析仪
Nexcelom Cellometer 细胞计数仪
三大类:
1. 明场细胞计数仪
2. 双荧光细胞活力分析仪 3. 细胞成像分析系统
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明场细胞计数仪
• Mini 外形小巧轻便、节省空间、性价 比高 Auto T4 强大的软件功能,能自动排 除细胞碎片、区分成团的细胞 Auto 1000 一体化设计,内置10寸触 摸屏显示系统,直观易于操作
达科为科研仪器部培训
广州办:曹忠健 2015-05-12
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• 转染仪:Lonza Amaxa Nucleofector™ • 计数仪:Nexcelom Cellometer
2015/05/12
Nucleofection®细胞核转染技术
一、Nucleofector 细胞核转染技术基本工作原理
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二、Nucleofector 细胞核转染技术的组成 1.Nucleofector Solution转染液 Nucleofector核转染试剂盒成分: a,细胞特异性细胞核转染液; b,电转杯; c,专用细胞转移tips; d,专利的pmaxGFP报告质粒 2.Nucleofector Device转染仪
Nucleofector™ 是指2B 4D-Nucleofector™ X Unit属 于4D高级平台
2015/05/12
2018/10/30
根据仪器的款式找出它对应的protocol, 每一个protocol都有提供该细胞相对应试剂盒 的货号,按照货号大家都可以在达科为生物 商城上查到相关信息。
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Nexcelom Cellometer
2003 2005 2008 2009 2010
2011
2012
2013
2003 CP2, disposable Hemacytometer 2005 Auto T4, automated cell counter offering trypan blue viability 2008 Vision, dual fluorescence imaging 2009 Auto X4, single fluorescence, user-changeable optics modules 2010 Vision HSL, high sensitivity, dual fluorescence, user-changeable optics modules 2011 Auto 2000, dual fluorescence, on-board computer & touch screen 2011 Vision CBA, FCS Express 4 software, high sensitivity, dual fluorescence, user-changeable optics modules 2013 Auto 1000, All-in-one, touch-screen instrument for accurate, automated trypan blue viability 2013 Mini, most affordable option for accurate, automated cell counting and trypan blue viability 2013 X1/X2, 10X lens and affordable single/dual fluorescence imaging, FCS Express 4 software 2013 K2,, FCS Express 4 software, affordable dual fluorescence imaging 2015/05/122015Leabharlann 05/12NEXCELOM
CONFIDENTIAL
细胞成像分析系统
• Auto X4, X1 & X2 专为酵 母细胞、血小板、藻类及 其他的小细胞计数和活性 检测
• K2 肝脏细胞、干细胞、 脾脏细胞、悬浮肿瘤细胞 等原代细胞的计数、活力 分析及其他的细胞功能分 析
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独特关系成像技术,通过明场和三个独立的荧光通道,对常规细胞培养 板进行全孔以及整板细胞成像分析,无需消化,任意时间点,多时间位 点分析细胞。快速生成整板细胞图像和统计数据。数据简单,结果一目 了然!
2015/05/12
2015/05/12
/products-services/bio-research.aspx
2015/05/12
• Cell & Transfection Database
2015/05/12
举例:293,右图 1. 介绍了细胞的来源和相关 信息 2. 转染信息里介绍了两款仪 器各自所需的protocol和 program
• Vision CBA 适用于基于细胞的分析:凋亡 、细胞周期、转染、细胞自噬、ABC转运蛋 白分析
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类流式分析
The Vision CBA 分析系统不仅得到细胞图像,而 且配合 FCS Express 4 流式软件对细胞进行分析
• • • • • • • •
Apoptosis Cell Cycle GFP, RFP, YFP Transfection Immunophenotyping Transporter Assays Mitochondrial Potential Autophagy Aggresome Detection …and More
2015/05/12
应用领域
• 免疫学及疫苗研发
PBMCs, Splenocytes
• 细胞治疗及再生医学
Stem Cells
• 器官移植
Nucleated Cells
• 转化医学(临床研究,动物及人体实验)
Primary Cells, PBMCs
• 肿瘤研究
Tumor Cell Suspensions, Cell Lines
Amaxa公司的Nucleofector细胞核转染技术是 ▪ 非病毒介导的转染, ▪ 仪器采用独特的电转参数(包括电流、电压、电击时间长短等) 以内存的优化转染程序名体现, ▪ 同时该技术的核心专利是细胞类型特异性的细胞核转染液,即针 对不同的原代细胞和传代细胞有各自特异的细胞类型特异性转染 液,为外源基因进入细胞核提供友好界面。结合优化转染程序和 细胞类型特异性转染液进行的转染能确保目的基因转入细胞核的 效率。 ▪ 该技术直接將外源基因送到細胞核內,因此转染效率不再依赖细 胞分裂,可以高效转染分裂增殖较慢甚至于不分裂的细胞。
2018/10/30
Nucleofector™
• • • • 4D-Nucleofector™ System Nucleofector™ 2b Device 96-well Shuttle™ System HT Nucleofector™ System
2015/05/12
2018/10/30
网络查询 Lonza最主要的两个数据库: • Cell & Transfection Database • Nucleofection™ Protocols


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明场客户群
• 干净的细胞
• 细胞系: cancer cells, endothelial cells, etc. • 原代细胞(ie. isolated T cells)
2015/05/12
双荧光细胞活力分析仪
Auto 2000 (明星产品) • 利用AO、PI染色能对背景复杂的原代进行精确的浓度计数 与活力分析 • 淋巴细胞、PBMC、干细胞等都可以做精确分析 • 双荧光细胞精确计算有核细胞转染效率及存活率, 20µl样 品,30秒能完成一个实验
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