通用检测方法和指导原则

小于5ml根据实际装量取或合并成不少于25ml，每
次取5ml
（2）有效读数不少于3个，取平均值计算
3、仪器校正
（1）标准粒子 10μm 相对标准偏差不大于5%
（2）8μm与10 μm或10 μm与12 μm两个通道的差值计数
10 μm通道的累计计数
≥68%
五、主要修订项目内容
可见异物检查法 1、合并原附录ⅨH及《可见异物检查法补充 规定》 2、10ml及以下规格，每次手持不超过2支 3、目视检测时间不超过20秒 4、所检样品必须系随机抽取
四、主要增订项目内容
制药用水 1、生产工艺 纯化水 饮用水经蒸馏、离子交换、反渗透等方法 注射用水 纯化水经蒸馏 灭菌注射用水 注射用水按注射剂生产工艺制备 2、修订后质量标准增二项检查 a、电导率检查 新增附录用于检查各种阴阳离子的污染 程度 b、总有机碳检查 控制有机污染（有机小分子、微生物） c、上述两项检查的在线检测可对制水系统进行实时流程 监控
可以有效地用光导纤维将各光学元件联结
样品可以包封在对激光光源透明的玻璃、塑料中或将样
品溶于水中
5、一些特殊的拉曼技术，如共振拉曼和表面增强拉曼光谱
可以使谱带强度增加103～106倍，使痕量物质的结构研
究成为可能。
四、主要增订项目内容
重金属检查与测定法
1、重金属检查法（化学法）
一法 硫代乙酰胺比色法 适用于溶于水、稀酸或乙醇等
的药物
甲（Pb） 乙（样品） 加设监控管丙（Pb+样品）
要求丙＞甲＞乙 合格
如丙＜甲
采第二法
二法 炽灼后的硫代乙酰胺比色法 适用于含芳环、芳杂
环以及难溶于水、稀酸或有机溶剂的药物。配成溶
液后同一法操作。
三法 硫化钠比色法 适用于碱溶性药物，同原附录未加
监控管。
四、主要增订项目内容
2、原子吸收与光焰光度法 无实质修改 3、等离子体质谱 修订附录
三、拟增修订项目
2、二部共45项，新增12项：
核磁共振波谱法 离子色谱法 电导率测定法 锥入度检查法 2-乙基己酸测定法 光学显微镜法 拉曼光谱法指导原则 溶出度测定指导原则 药物多晶型研究指导原则 蛋白质含量测定法 合成多肽中醋酸测定法 氨基酸测定指导原则
五、主要修订项目内容
渗透压摩尔浓度测定法 1、供试溶液的浓度 （1）由仪器可测定范围改为不大于700mOs mol/ ㎏ （2）经稀释的供试液，其渗透压摩尔浓度不能 简单地用实测值乘以稀释倍数表示，而应 将实测值和稀释倍数完整表述 2、扩大了应用范围，在制剂通则的注射剂和眼用 制剂项下有明确规定。 3、各类制剂的渗透压摩尔浓度范围暂不作统一规 定，原则要求与血液等渗或接近等渗（285～ 310mOs mol/ ㎏ ）
总有机碳检查
通过测定水中的二氧化碳，间接测量水被有机物污染的程度 （1）方法与原理
a.氧化:燃烧、氧化剂、光照 b.检测：直接电导、薄膜电导、非色散红外
（2）对TOC测量的各种原理和方法不作任何褒贬，只强调技术 要求 a、能区分水中的有机碳与无机碳，并能排除无机碳的 干扰 b、应满足系统适用性试验要求 85%＜ （rss-rw）/（rs-rw）×100＜115% c、具有足够的灵敏度（0.05mg/L）
四、主要增订项目内容
核磁共振波谱法 1、未知物的结构测定 2、已知物的结构确证 功能团分析 异构体分析 打假工作（肝素钠中的掺伪物在2.16ppm 有特征信号） 3、含量分析（多组份抗生素,对映异构体分析）
四、主要增订项目内容
离子色谱法 1、有机、无机阴阳离子和低分子量亲水性 有机分子的分离测定（电导检测器） 2、氨基酸不经衍生化直接测定 （脉冲积分 安培检测器） 3、某些抗生素的有关物质检查（脉冲积分 安培检测器） 4、金属的形态与价态分析
五、主要修订项目内容
3、多组份原料药的鉴别 可借鉴制剂鉴别的 方法
4、混晶中无效或低效晶型的限度控制 采用基线密度法计算指定谱带的吸光度后 再计算各晶型的相对含量（甲苯咪唑和棕 榈氯霉素）
五、主要修订项目内容
高效液相色谱法 1、色谱柱 （1）常用色谱柱填料粒径3～10μm （2）微径柱填料粒径 约2μm（UPLC或UFLC） 硬件须匹配 色谱条件可适当调整 以品种正文规定条件的测定结果为准 2、柱温 （1）通常为室温 （2）以硅胶为载体的普通色谱柱，最高使用温度不得超过 60℃，（HTLC） （a）提高灵敏度 峰高的对数与柱温呈线性关系 （b）改善选择性
急需、前瞻、先进、成熟
2、指导原则的增订，理由和意义要充分，应对药 品质量标准和质量控制有实际指导意义。
3、修订内容应紧密围绕药品标准以及药品监督管 理工作，修订必须有充分的理由和科学依据， 不轻易修改。
三、拟增修订项目
1、一部共16项，其中新增6项：
电泳测定法 渗透压摩尔浓度测定法 等离子体发射光谱法 大孔树脂有机残留物测定法 聚合酶链式反应法 中药特征图谱指导原则
《中国药典》2010年版附录
通用检测方法和指导原则 主要增修订内容
一、主要报告内容
1、附录增修订原则 2、拟增修订项目 3、主要增订项目内容 4、主要修订项目内容 5、评价与展望
二、附录增修订原则
1、新增通用检测方法应是目前药品检验检测急需 的、能解决目前存在突出问题的，并能引导药 品检验检测水平不断增高，能充分反映现阶段 国内和国际药品质量控制先进技术的成熟可靠 的方法。
电导率检查
1、对电导率仪的一般要求 a、仪器的最小分辨率和读数精度 0.1μS/cm b、电导率仪须定期校正 （a）采用电导标准溶液校正电导池常数，实测电 导池常数应在规定值的±2% （b）与校正过的仪器进行间接比对
2、影响制药用水电导率测定的因素 主要有温度、大气中二氧化碳的溶入、水的pH值
等
电导率检查
c、如b步读数＞2.1μS/cm，则依法测定水的pH值， 由表3查得对应的电导率限度，并与b步实测值比较， 如b读数不大于对应的限度值，则为合格，如b读数 大于限度值或pH值超出5.0-7.0，则不合格
表3 pH值和电导率的限度（略）
电导率检查
（3）灭菌注射用水 a、温度25℃ b、装量≤10ml，限度为25μS/cm c、装量＞10ml，限度为5μS/cm
V0=V+(a/a + b )△V=34.30+[1100/(1100+3600)] ×0.10=34.32ml
五、主要修订项目内容
不溶性微粒检查法
1、应用对象 由溶液型静脉注射液扩大至溶液型静脉注射
液，注射用无菌粉末、注射用浓溶液及注射用无菌原料
药
2、统一了操作方法
（1）取样体积 大于5ml取5ml
（2）分离度R（关键指标）
( ) t R2 - t R1
R=2 或R= ( ) W1 + W2
2 t R2 - t R1 1.70 W1, n 2 + W2, n 2
5、拖尾因子 必要时，应规定拖尾因子
五、主要修订项目内容
pH值测定法 1、pH的含义 pH=-log aH+ 2、pH值的测定 pH=pHs+（E-Es）/R R=0.05916+0.000198（t-25℃） 影响pH值测定的因素 表观pH值 3、弱缓冲液的pH测定 除另有规定外，按下法测定 先用苯二甲酸盐缓冲液（pH4.01）校正仪器，1min内 pH改变＜0.05时读数，再用硼砂缓冲液（pH9.18）校 正仪器，1min内pH改变＜0.05时读数，取二次读数的 平均值。 4、水的pH值测定 加KCl适量（由制药用水正文自行规定）
（3）TOC测量的意义 控制化学污染与微生物污染 A TOC measurement is not a replacement test for endotoxin or
microbiological control.While there can be a qualitative relationship between a food souce (TOC) and microbiological activity.there is no direct numerical correlation.
电导率检查
4、TOC和电导率检查用水 （1）TOC检查 TOC＜0.1ppm 电导率＜1.0μS/cm （2）电导率检查 电导率＜0.1μS/cm （3）可采用经超纯水装置制备并经检验合格的
水，如仍不理想，建议再经全玻璃重蒸
五、主要修订项目内容
紫外-可见分光光度法 1、波长校正 增加了高氯酸钬溶液的校正（以10%Biblioteka Baidu高氯酸为溶剂，配制含4%氧化钬的溶液） λmax nm：241.13，278.10，287.18，333.44， 345.47，361.31，416.28，451.30， 485.29，536.64，640.52nm。 2、波长允差 紫外区 ±1nm 500nm ±2nm 700nm ±4.8nm
五、主要修订项目内容
3、有些色谱条件可适当调整，但流动相比例的调整有明确规
定。组分比例较低者（＜50%）相对于自身的改变量不
超过±30%，相当于总量的改变量不超过±10%。如
±30%的相对改变量超过总量的10%时，则以后者为准。
4、系统适用性试验
（1）理论板数n
n=16（ tWR ）2或n=5.54（WtRn/2）2
五、主要修订项目内容
电位滴定 1、作图法 零阶 E～V曲线突跃部的中点或拐点所 对应的滴定液体积 一阶导数 一级微商（△E/△V）的极值 所对应的滴定液体积 二阶导数 二级微商（△2E/△V2）等于 零时所对应的滴定液体积
五、主要修订项目内容
2、计算法
二阶导数法较一阶导数法更准确，故最常用
34.20
470
15
34.30
514
44
34.40
569
55
34.50
588
19
34.60
599
11
7
34.70
606
△V
△E/△V
△2E/△V2
0.40
25
0.20
35
0.20
45
0.20
60
0.10
120
0.10
150
0.10
440
0.10
550
0.10
190
0.10
110
0.10
70
33 50 75 400 300 2900 1100 -3600 -800 -400
完善了原附录 增加了干扰与校正，样品溶液的制备以及 测定方法中增加了标准加入法等段落。 本法是重金属测定中最灵敏的一个方法（10-12～10-15） 4、等离子体发射光谱 新增附录 本法灵敏（10-9～10-12）、准确、线性范围宽、元素覆盖 范围宽、可实现多种元素同时测定。 5、离子色谱 新增附录 可实施金属的形态与价态分析 6、原子荧光 未收载 与ICP-MS和ICP-AES比 差 与AA比相仿
四、主要增订项目内容
拉曼光谱法指导原则
1、与红外光谱一样，同为分子的振动光谱
∞
IR
与偶极矩变化相关│Mnm│= ∫ΨnΡΨmdτ
-∞
a Raman 与极化率变化相关│( ij)nm│=
∞
∫Ψn a ijΨm dτ
2、两者选一律 互为补充
-∞
3、拉曼光谱测定快速、准确，样品制备简单甚至无需制备
4、拉曼光谱通常处于可见与近红外区
五、主要修订项目内容
红外光谱 1、原料药鉴别 遇多晶干扰 （1）按规定对样品进行预处理（重结晶与干燥） （2）采用对照品平行操作 （3）采用溶液法 2、制剂鉴别 （1）提取（溶剂的选择） 辅料无干扰，晶型不变 直接与标准光谱比对 辅料无干扰，晶型有变 与对照品同法处理后比对 辅料有干扰，晶型不变 在指纹区选择3～5个特征谱带 波数允差为0.5% 辅料有干扰，晶型有变 不宜采用红外鉴别
采用线性内插法
V0=V+
a a+ b
△V
式中 V0：终点时的滴定液体积
a：二级微商为零前的二级微商值
b：二级微商为零后的二级微商值
V：二级微商为a时的滴定液体积
V（ml） E(mv)
△E
33.00
405
10
33.40
415
7
33.60
422
33.80
431
9
34.00
443
12
34.10
455
12
3、判定标准 （1）纯化水 表1 温度与电导率限度（纯化水）（略） 采用内插法计算 （2）注射用水 表2 温度与电导率限度（注射用水）（略）
电导率检查
a、以小于测定温度的最接近温度所对应的电导率值 即为限度值
b、调水样（不少于100ml）温度至25℃，剧烈搅拌， 每5分钟测一次，当变化＜0.1μS/cm时记录读数， 读数应不大于2.1μS/cm（合格）