酚氨咖敏片溶出度方法的建立及国内产品质量的考察

酚氨咖敏片溶出度方法的建立及国内产品质量的考察
雷琨;徐长根;李继;刘海静
【摘要】目的建立酚氨咖敏片的溶出度检查方法并对国内产品进行质量现状考察.方法采用转篮法,100 r·min-1,以900 mL 0.1 mol·L-1盐酸为溶出介质,高效液相色谱法测定,检测波长272 nm.结果经方法学验证,对乙酰氨基酚、咖啡因和氨基比林的检测质量浓度分别在0.034 9~0.244 0,0.006 2~0.043 7和0.022 5~0.157 4 mg·L-1范围内线性关系良好(r＞0.999 8),平均回收率均大于97.0% (RSD小于1.0% ).结论所建立的方法准确可靠,可作为酚氨咖敏片中各组分溶出度测定方法.%Objective To establish a method for determination of dissolution of Fen ankamin Tablets,and to assess the dissolution of Fen ankamin Tablets from domestic manufactures. Methods Rotating basket method was applied. The rotation speed was kept at 100 r · min-1 ,and 900 mL 0. 1 mol · L-1 hydrochloric acid was used as the solvent. The analysis was carried out by HPLC,and the detection wavelength was at 272 nm. Results A good linearity (r>0. 999 8) of acetaminophen, caffeine and aminopyrine were showed in the ranges of 0. 034 9-0. 244 0,0. 006 2-0. 043 7,and 0. 022 5-0. 157 4 mg · L-1,respectively. Conclusion The method is
simple,accurate,reproducible and reliable,and it could be used for the determination of dissolution of Fen ankamin Tablets.
【期刊名称】《西北药学杂志》
【年(卷),期】2013(028)001
【总页数】5页(P57-61)
【关键词】酚氨咖敏片;溶出度:高效液相色谱法
【作者】雷琨;徐长根;李继;刘海静
【作者单位】陕西中医学院,咸阳 712046;陕西省食品药品检验所,西安,710061;陕西省食品药品检验所,西安,710061;陕西省食品药品检验所,西安,710061
【正文语种】中文
【中图分类】R94
酚氨咖敏片原名克感敏片、扑感敏片，属于解热镇痛药，是常用的抗感冒药。

目前该产品执行《国家食品药品监督管理局国家药品标准化学药品地方标准上升国家标准第16册》的国家食品药品监督管理局国家药品标准 WS－10001－（HD－1021）－2002［1］，标准中规定了4种组分的含量测定方法，但对溶出度并没
有要求。

本研究采用HPLC法对收集到的6个厂家的17批样品进行了溶出度研究，为建立并完善药品质量标准，从而更好控制产品质量奠定基础。

1 仪器与试药
1.1 仪器高效液相色谱仪：Waters Alliance HT系统，2487紫外检测器；Waters Breeze系统，2487紫外检测器；色谱柱：Kromasil ODS C18色谱柱（天津天和公司，250mm×4.6mm，5μm）；Kromasil ODS C18色谱柱（天津天和公司，150mm×4.6mm，5 μm）；Diamonsil C18色谱柱（Dikma公司，250mm×4.6mm，5μm）。

1.2 试药对乙酰氨基酚、咖啡因和氨基比林对照品（购自中国药品生物制品检定所）；酚氨咖敏片（每片含对乙酰氨基酚150mg、氨基比林100mg、咖啡因
30mg、马来酸氯苯那敏2mg，市售国内产品，分别来自国内a～f 6个生产厂
家）；甲醇、二乙胺均为色谱纯；水为纯化水；其他试剂均为分析纯。

2 溶出量测定方法的建立
2.1 色谱条件与系统适用性用十八烷基键合硅胶为填充剂，以甲醇－10mL·L－1
冰醋酸溶液（用二乙胺调节pH值至3.7）（38∶62）为流动相，检测波长为
272nm。

理论板数按对乙酰氨基酚峰计算应不低于5 000，各组分峰之间的分离
度均应符合规定。

2.2 对照品储备液的配制精密称取经105℃干燥至恒质量的对乙酰氨基酚对照品、经80℃干燥4h的咖啡因对照品、经60℃干燥2h的氨基比林对照品适量，配制
对乙酰氨基酚、咖啡因和氨基比林的质量浓度分别为0.348 5，0.062 5和0.224
9mg·mL－1的混合对照品储备液；精密量取对照品储备液适量，用溶出介质稀释制成对乙酰氨基酚、咖啡因和氨基比林的质量浓度分别为0.179 2，0.031 24和0.111 2mg·mL－1的溶液作为混合对照品溶液。

2.3 专属性实验按照处方工艺，分别称取各厂家提供的不含对乙酰氨基酚、咖啡
因和氨基比林的空白辅料［2］，按照溶出度的实验方法，制备空白制剂溶液。

分别取不同厂家的空白制剂溶液、对照品溶液、供试品溶液各10μL，按2.1项下
色谱条件进样，记录色谱图（见图1）。

对照品溶液和供试品溶液中对乙酰氨基酚、咖啡因和氨基比林与其他杂质峰能达到基线分离，不含主成分的空白制剂溶液不干扰测定。

图1 专属性实验色谱图a，b，c，d，e和f分别为来自6个不同药厂的空白制剂；
g.混合对照品；h.溶出度样品；1.对乙酰氨基酚；2.咖啡因；3.氨基比林Fig.1 Chromatograms for specificity testsa，b，c，d，e and f are blank preparations from six separated pharmaceutical factories；g.mixed standards；h.sample from dissolution；1.paracetamol；2.caffeine；
3.aminophenazone
2.4 线性实验分别精密量取对照品储备液1，2，3，4，5，6和7mL置于10mL
量瓶中，用溶出介质稀释至刻度，摇匀，精密量取10μL，按2.1项下色谱条件进
样测定，并记录各峰面积。

以峰面积积分值为纵坐标（Y），各对照品的质量浓度为横坐标（X），进行线性回归，各对照品的线性方程及范围见表1。

表1 对乙酰氨基酚、咖啡因和氨基比林的线性方程及线性范围Tab.1 Regression linear formula and range of paracetamol，caffeine and aminophenazone
对照品名称线性方程相关系数线性范围／mg·mL－1对乙酰氨基酚 Y＝9 823 727.198 2X＋9 706.476 2 0.999 9 0.034 9～0.244 0咖啡因 Y＝27 321
861.090 8X＋45.428 6 0.999 9 0.006 2～0.043 7氨基比林 Y＝17 247 883.715 5X－5 041.523 8 0.999 8 0.022 5～0.157 4
2.5 精密度实验精密量取混合对照品溶液10 μL，按2.1项下色谱条件连续进样5次，计算各对照品溶液峰面积，对乙酰氨基酚、咖啡因、氨基比林峰面积的RSD
分别为0.32%，0.30%和0.25%，说明日内精密度良好。

精密量取混合对照品溶液10μL，分别于放置24，48和72h进样分析，计算混合对照品溶液峰面积，对乙酰氨基酚、咖啡因、氨基比林峰面积的RSD分别为
0.60%，0.48%和0.46%，说明日间精密度良好。

2.6 稳定性实验取3批溶出度实验样品，分别于放置12，24，48和72h取样，
按2.1项下色谱条件进样分析，3批样品的平均RSD值为0.12%，样品稳定性良好。

2.7 回收率实验按照处方工艺，取b制药厂提供的不含对乙酰氨基酚、咖啡因和
氨基比林的空白辅料，分别精密加入以下量的对乙酰氨基酚、咖啡因和氨基比林，分别制备50%，80%和100%的回收率样品［3］。

按2.1项下色谱条件进样分析，记录色谱图，根据各对照品的标准曲线方程，计算回收率，回收率实验结果见表2。

3 溶出度方法的考察
3.1 漏槽条件分别称取对乙酰氨基酚、咖啡因、氨基比林0.2，0.2和0.05g置250mL具塞三角瓶中，加溶出介质（水、0.1mol·L－1盐酸和pH6.8磷酸盐缓冲液）100mL进行溶解实验，结果表明溶解性良好（为酚氨咖敏片中各药物最大溶
出度的10倍以上）。

故溶出度实验选择900mL的水、0.1mol·L－1盐酸和
pH6.8磷酸盐缓冲液作为溶出介质，均满足漏槽条件。

表2 方法回收率实验结果Tab.2 Results of recovery rate项目对乙酰氨基酚加
入量／mg 测得量／mg 回收率／咖啡因%加入量／mg 测得量／mg 回收率／氨基比林%加入量／mg 测得量／mg 回收率／%50% 75.29 73.51 97.64 15.18 14.94 98.42 51.50 50.71 99.17 75.15 73.89 98.32 15.57 15.24 97.88 50.34 49.93 99.18 75.64 74.19 98.08 15.60 15.03 96.37 50.66 50.24 99.17 80% 120.46 117.70 97.71 24.14 23.64 97.93 75.05 73.41 97.81 120.03 117.36 97.77 24.17 23.81 98.50 80.76 80.46 99.63 120.21 116.72 97.10 24.61 24.36 99.00 101.20 101.25 100.05 100% 150.31 146.89 97.72 30.15 29.75 98.69 95.91 93.83 97.83 150.61 146.97 97.58 30.15 29.83 98.93 100.35 99.55
99.20 150.07 146.96 97.93 30.17 29.96 99.31 101.20 101.25 100.05平均回收率／% 97.76 98.34 99.12 RSD／%0.35 0.89 0.83
3.2 溶出装置、介质和转速的考察［4］结果见表3。

根据表3的实验设计，依次
开展以下实验，分别考察不同的溶出介质、不同的溶出方法、不同的转速对溶出的影响。

试药以a厂家（批号20110624）的酚氨咖敏片作为供试样。

溶出时的温度均为37℃。

取样时间为5，10，15，30，45，60和120min，每次取样5mL （同时补充溶出介质5mL），滤过，取续滤液作为供试品溶液。

精密量取供试品溶液和对照品溶液各10μL，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，并将咖啡因的计算结果与1.092 8相乘，计算每片溶出量，绘制溶出曲线。

其中pH6.8缓冲液配制方法为：取磷酸二氢钾1.7g和无水磷酸二氢钠1.775g，
加水适量使溶解，再加水稀释至1 000mL，即得。

表3 溶出度方法考察实验设计Tab.3 Design of the dissolution experiment溶
出介质转篮法／r·min－1桨法／r·min－1实验号75 10050 75 1水0.1mol·L－1盐酸pH6.8√√2 √ √3√√4√√5√√
3.3 实验结果漏槽条件考察表明，水、0.1mol·L－1盐酸和pH6.8磷酸盐缓冲液
作为溶出介质，均满足漏槽条件。

采用转篮法，水、0.1mol·L－1盐酸和pH6.8
磷酸盐缓冲液作为溶出介质，转速为100r·min－1，进行溶出度实验，结果见图2中A、B和C。

结果表明：酚氨咖敏片中氨基比林、对乙酰氨基酚和咖啡因在3种溶出介质中的溶出度均较好，在15min内均能溶出95%以上。

根据2009年新药评审中心组织翻译的美国FDA1997年发布的《口服固体制剂溶出度实验技术指导原则》，同时考虑到酚氨咖敏片为胃溶性制剂，故选择900mL 0.1mol·L－1盐酸为溶出介质。

以900mL 0.1mol·L－1盐酸为溶出介质，分别采用转篮法（转速为100r·min－1）和桨法（转速为75r·min－1）进行溶出度实验，结果见图2中A和D。

结果表明：酚氨咖敏片中氨基比林、对乙酰氨基酚和咖啡因以900mL0.1mol·L－1盐酸的溶
出介质，转篮法（转速为100r·min－1）的溶出曲线优于桨法（转速为75r·min－1）。

故选择转篮法。

以900mL 0.1mol·L－1盐酸为溶出介质，采用转篮法，转速为75和100r·min－1，进行溶出度实验，结果见图2中A和E。

结果表明：酚氨咖敏片中氨基比林、对乙酰氨基酚和咖啡因以900mL 0.1 mol·L－1盐酸为溶出介质，转速为
100r·min－1的溶出曲线优于转速为75r·min－1。

故选择转速为100r·min－1。

3.4 溶出均一度和取样时间点的确定取a药厂（批号20110624）的酚氨咖敏片作为供试样，以900 mL 0.1mol·L－1盐酸为溶出介质，采用转篮法，转速为
100r·min－1，进行溶出度实验，结果见表4。

由酚氨咖敏片中氨基比林、对乙酰氨基酚和咖啡因溶出均一性考察结果可知，
30min以后氨基比林、对乙酰氨基酚和咖啡因的溶出曲线基本均是平台区，故将
酚氨咖敏片中氨基比林、对乙酰氨基酚和咖啡因溶出取样点暂定为30min。

图2 a药厂酚氨咖敏片中对乙酰氨基酚、咖啡因和氨基比林的溶出曲线
A.0.1mol·L－1盐酸介质，转篮法，100r·min－1；
B.水介质，转篮法，100r·min －1；
C.pH6.8缓冲盐介质，转篮法，100 r·min－1；
D.0.1mol·L－1盐酸介质，
桨法，75r·min－1；E.0.1mol·L－1盐酸介质，转篮法，75r·min－1Fig.2 Dissolution curve of paracetamol，caffeine and aminophenazone in
Fen′ankamin Tablets from factory aA.0.1mol·L－1 HCl dissolution medium，rotating basket method，100r·min－1；B.water dissolution medium，rotating basket method，100r·min－1；C.pH6.8buffer salt dissolution medium，rotating basket method，100r·min－1；D.0.1mol·L－1 HCl dissolution medium，slurry method，75r·min－1；E.0.1 mol·L－1 HCl dissolution medium，rotating basket method，75 r·min－1
4 方法的确定
根据上述考察结果，最终确定酚氨咖敏片溶出度检查方法如下：
取本品1片，照溶出度测定法（《中国药典》2010年版二部附录ⅩC第一法）［5］，以900mL 0.1mol·L－1盐酸为溶出介质，转速为100r·min－1，经
30min，取溶液5mL，滤过，取续滤液，作为供试品溶液。

另精密称取经干燥至
恒质量的对乙酰氨基酚、咖啡因和氨基比林对照品适量，用水溶解并稀释制成每
1mL中分别约含0.179 2，0.031 24和0.111 2mg的溶液作为混合对照品溶液。

精密量取供试品溶液和对照品溶液各10μL，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，并将咖啡因的计算结果与1.092 8相乘，计算每片溶出量。

5 国内产品的溶出度质量现状考察
采用上述确定的溶出度测定方法对国内6个厂家生产的酚氨咖敏片进行溶出性能考察，结果见表5。

表4 酚氨咖敏片中对乙酰氨基酚、咖啡因和氨基比林累积溶出结果Tab.4 Results of total dissolution of paracetamol，caffeine and aminophenazone in Fen′ankamin Tablets／min 累积溶出百分率／%药物时间平均累积溶出百分率／%RSD／%1 2 3 4 5 6氨基比林 5 45.94 47.45 46.91 48.30 46.91 48.30 47.30 0.91.16 10 85.83 83.24 90.67 83.94 85.57 84.35 85.60 2.67 15 98.43 93.93 95.25 94.76 100.68 102.65 97.62 3.54 30 98.76 104.81 94.99 93.95 97.30 103.50 98.89 4.44 45 101.21 104.42 97.21 94.28 96.30 99.95 98.90 3.68 60 94.51 99.06 95.93 93.97 101.85 103.24 98.09 3.90 120 94.30 94.04 104.96 96.52 99.37 95.83 97.50 4.13对乙酰氨基酚 5 45.14 46.15 45.14 49.86 46.15 50.34 47.13 4.98 10 71.01 72.11 74.89 73.95 71.92 70.44 72.39 2.37 15 91.23 92.72 96.11 88.92 90.28 89.74 91.50 2.85 30 92.04 95.27 96.24 89.55 90.93 90.52 92.43 2.94 45 92.58 89.63 90.79 96.07 89.63 89.44 91.36 2.84 60 99.15 95.40 89.98 89.80 92.60 91.97 93.15 3.84 120 98.17 97.09 90.61 90.12 95.59 99.01 95.10 4.04咖啡因 5 46.19 45.80 46.19 45.80 46.14 46.68 46.13 0.70 10 75.93 82.88 81.76 76.81 76.59 76.08 78.34 3.98 15 96.76 87.38 91.23 94.77 93.66 94.27 93.01 3.53 30 97.78 88.19 91.33 95.75 93.93 94.85 93.64 3.64 45 96.86 96.66 95.31 89.01 95.81 92.63 94.38 3.22 60 91.95 88.59 100.03 93.85 97.40 95.66 94.58 4.29 120 87.49 96.82 96.97 92.53 99.83 89.31 93.83 5
表5 不同厂家酚氨咖敏片中对乙酰氨基酚、咖啡因和氨基比林溶出度实验结果Tab.5 Results of the dissolution experiment of paracetamol，caffeine and
aminophenazone from different factories生产厂家药物溶出度／%RSD／%a 氨基比林98.76 104.81 94.99 93.95 97.30 103.50 4.44对乙酰氨基酚 92.04 95.27 96.24 89.55 90.93 90.52 2.94咖啡因 97.78 88.19 91.33 95.75 93.93
94.85 3.64 b氨基比林 89.85 89.50 94.68 94.71 88.60 96.54 3.66对乙酰氨基酚
95.95 93.58 99.08 95.70 98.32 95.41 2.10咖啡因 89.78 88.98 94.22 90.78 93.26 90.17 2.28 c氨基比林 89.21 91.66 95.77 94.41 96.35 93.28 2.87对乙酰氨基酚 92.91 93.06 91.23 93.87 94.62 96.09 1.77咖啡因 94.13 94.41 97.05 105.08 94.76 93.98 4.47 d氨基比林 97.17 96.98 100.02 96.47 96.83 95.19 1.64对乙酰氨基酚 98.01 95.34 93.16 96.28 96.91 97.48 1.82咖啡因 99.35
94.15 94.15 97.77 90.66 107.40 6.00 e氨基比林 93.83 92.78 102.19 94.25
95.42 96.81 3.53对乙酰氨基酚 98.54 99.80 96.30 96.21 98.08 97.25 1.42咖啡因 91.40 92.60 94.63 98.59 96.50 90.64 3.28 f氨基比林 95.10 96.89 97.47 98.32 97.70 98.90 1.36对乙酰氨基酚 89.25 88.33 88.55 89.72 92.89 90.91 1.91咖啡因94.22 102.07 96.68 94.03 96.84 95.02 3.10
6 讨论
①酚氨咖敏片中氨基比林、对乙酰氨基酚、咖啡因、马来酸氯苯那敏在水、
0.1mol·L－1盐酸和pH6.8磷酸盐缓冲液中均可溶解，且均符合漏槽条件。

考虑到酚氨咖敏片为胃溶性制剂，以及国外药典中胃溶性制剂的常用溶出介质，笔者选择0.1mol·L－1盐酸为溶出介质。

②本实验中，采用桨法（转速为75r·min－1）进行溶出实验时，发现酚氨咖敏片有黏附溶出杯底部的现象。

这可能是桨法（转速为75r·min－1）的溶出度曲线劣于转篮法（转速为100r·min－1）的原因。

因为酚氨咖敏片黏附溶出杯底部后，导致制剂中药物的溶出变缓或溶出不完全。

③通过本实验可以看出，国内上述6个药厂酚氨咖敏片的处方组成、生产工艺等
虽然存在差异，但内在质量差别不大，均在30min时的溶出量超过标示量的90%。

但是，不同生产厂家的制剂却表现出不同的溶出曲线。

因此本方法不仅能有效控制产品的溶出情况，也能有效区分不同生产厂的制剂之间的差异，对市场起到重要的监督作用。

【相关文献】
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