常用细胞固定剂及其优缺点比较

经常使用细胞固定剂及其优缺点比力之蔡仲巾千创作
1、95%酒精：最经常使用的细胞学固定液, 能沉淀白卵白、球卵白和核卵白, 但核蛋沉淀后, 能溶于水, 因此, 经95%酒精固定的涂片, 染色前没有需要经过水洗.此固定液适用于苏木素-伊红染色和巴氏染色.固按时间根据标本的分歧, 时间也不尽相同, 一般标本固按时间为15-30分钟, 痰标本需要更长一些时间.经过95%酒精固定的标本, 细胞核保管较好, 结构清晰, 颜色鲜艳.如果在95%酒精液内加入聚乙二醇更佳, 可以呵护细胞免受空气干燥后的人工假象.
2、乙醚酒精液（1：1）：其效果与95%酒精相似, 但由于乙醚有很强的吸水性和特有的安慰性气味, 容易挥发, 长期低浓度吸入, 有头痛、头晕、疲倦、嗜睡、卵白尿、红细胞增多等不良反应.长期皮肤接触, 可发生皮肤干燥、皲裂.所以现在已经逐渐被95%酒精所取代.
3、甲醇：固按时间快, 细胞收缩小, 细胞核保管较好, 结构清晰, 染色鲜艳.常作为穿刺细胞涂片的固定液.对立原保管较好, 可作为细胞涂片免疫组化的固定液.缺点是具有挥发性和毒性, 年夜量接触与吸入对中枢神经有一定的伤害.甲醇的毒性与其代谢产物甲醛和甲酸的蓄积有关.以前认为毒性作用主要为甲醛所致, 甲醛能抑制视网膜的氧化磷酸化过程,使膜内不能合成ATP,细胞发生变性,最后引起视神经萎缩.近年研究标明,甲醛很快代谢成甲酸,
急性中毒引起的代谢性酸中毒和眼部损害, 主要与甲酸含量相关.
4、冰醋酸：5%水溶液可作固定用.不能沉淀白卵白, 但能沉淀核卵白.渗透性强, 固定快, 能使红细胞膨胀而破碎, 常与其它液体配合使用.
5、无水酒精：对糖原保管较好, 容易使细胞收缩, 其性能与95%酒精相似, 很少独自使用, 一般只用于糖原的固定.
6、丙酮：为易挥发的无色液体, 有安慰性气体.可使卵白质沉淀, 渗透性强, 细胞收缩严重, 对核的固定差.很少用于惯例细胞学的固定.广泛用于酶组织化学中的各种酶的固定, 也有人用于抗原的保管, 作为细胞涂片免疫组化的固定液.丙酮具有挥发性和毒性, 年夜量接触与吸入对肝、肾及中枢神经有一定的伤害.
7、Carnoy 固定液：配方：无水乙醇60ml, 氯仿30ml, 冰醋酸10ml
Carnoy液能固定胞浆和胞核, 尤其适宜于染色体等.经常使用于糖原及尼氏体的固定, 由于冰醋酸能溶解红细胞并可防止细胞由酒精引起的过渡收缩, 对固定有血的标本和显示DNA、RNA效果很好.缺点是每次固定后固定液内有年夜量的红细胞碎片和细胞脱落, 必需及时过滤, 否则容易造成污染.其次, 氯仿具有挥发性和毒性, 年夜量接触与吸入对肝、肾及中枢神经有一定的伤害.
8、10%中性缓冲甲醛液：
pH7.4的PBS90ml.
配方2：40%甲醛120ml, 蒸馏水880ml, 磷酸二氢钠（NaH2PO4;H2O）4g, 磷酸氢二钠（Na2HPO4）13g.
10%中性缓冲甲醛液对年夜大都抗原保管较好, 是免疫组织化学最经常使用的固定液, 组织穿透性好, 组织收缩较小.但此液体不适合固定湿固定的涂片, 可作为干固定涂片和细胞蜡块的固定液.甲醛也具有挥发性和毒性.年夜量吸入会呈现呼吸道的严重安慰和水肿、眼刺痛、头痛, 也可发生支气管哮喘.经常吸入少量甲醛, 能引起慢性中毒, 呈现粘膜充血、皮肤安慰症、过敏性皮炎、指甲角化和懦弱、甲床指端疼痛等.全身症状有头痛、乏力、胃纳差、心悸、失眠、体重减轻以及植物神经紊乱等.。