机能学设计性实验苦瓜提取物对高血糖家兔的影响22页PPT
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脱色,滤过,滤 液减压浓缩,得 苦瓜提取物
乙醇洗脱液
高血高血糖糖模模型型家家兔5兔0只50只
家家兔兔1100只只
灌胃给 格列本 脲 75mg/k g
格列本 脲组10只
灌胃给 提取液 75mg/k g
灌胃给 提取液 150mg/k g
灌胃给提 取液 300mg/k g
生理 盐水 10ml/ kg
小剂量 组10只
机能学设计性实验苦瓜提取物对高血 糖家兔的影响
51、山气日夕佳,飞鸟相与还。 52、木欣欣以向荣,泉涓涓而始流。
53、富贵非吾愿,帝乡不可期。 54、雄发指危冠,猛气冲长缨。 55、土地平旷,屋舍俨然,有良田美 池桑竹 之属, 阡陌交 通,鸡 犬相闻 。
机能学设计性实验
苦瓜提取物对高血糖家兔的影响
实验目的
学习设计实验的基本方法 学习给家兔灌胃给药的方法及一些基本的 实验操作 了解糖尿病的危害、致病因素及治疗方法
糖尿病(diabetes)是由遗传因素、
免疫功能紊乱、微生物感染及其毒素、自由基 毒素、精神因素等等各种致病因子 蛋白质、脂肪、水和电解质等一系列代谢紊乱 综合征。
记录血糖值
各组血糖浓度值
组别
空白对照组 苦瓜小剂量组 苦瓜中剂量组 苦瓜大剂量组 格列本脲组 正常家兔组
血糖值(mmol/L) 给药前 1h末 2h末 3h末 4h末 5h末
根据实验结果可预测以下结论:
1、小剂量苦瓜提取液与优降糖比较, 有降血糖效果。 2、苦瓜提取液随着剂量的增加降血糖 效果更加明显。
数据处理方法
以血糖浓度为统计量,结果采用SPSS
统计软件进行组间χ2检验。
讨论
为什么选择苦瓜作为研究对象? 为什么要选用家兔作为实验动物?
6、最大的骄傲于最大的自卑都表示心灵的最软弱无力。——斯宾诺莎 7、自知之明是最难得的知识。——西班牙 8、勇气通往天堂,怯懦通往地狱。——塞内加 9、有时候读书是一种巧妙地避开思考的方法。——赫尔普斯 10、阅读一切好书如同和过去最杰出的人谈话。——笛卡儿
(二)、家兔经口灌胃给药方法
把实验兔放在实验台上,用左手掌从头部 握住兔头颈部,将其固定,用拇指和食指使 劲压迫其口角部使口张开。然后,右手持抽 好药液的灌胃器,用有弧度灌面从右口角处 慢慢插入。
苦瓜提取物的提取过程
苦瓜
苦瓜提取物
捣碎,用70%乙 醇回流提取3次
滤液
D-101大孔吸附 树脂柱,用水洗 至无色,然后用 90%乙醇洗脱
Thank you
中剂量 组10只
大剂量 空白对 组10只 照组10只
不做处理
给药前、给药后1h、2h、3h、4h、5h采集血液样本
血液样本
离心2000 转/5min
血清
酶酚混合试 剂3ml,加血 清0.02ml
测定各管的吸光度A
试剂与标本混 匀后,在37℃ 水浴箱内静置
10min 波长为:
520nm
血糖浓度=A标本/A标准×标准液浓度(标准液 为5mmol/L)
实验原理
苦瓜含有多种降糖成分,主要有甾苷、皂甙、脑 苷、生物碱及多肽类物质等。
降糖机制
抗自由基作用 类胰岛素作用 刺激B细胞分泌胰岛素 修复受损B细胞,改善其功能 影响葡萄糖代谢酶
实验动物
家兔,雌雄各半,体重2.0±0.2kg,50只(已制 成Ⅱ型糖尿病模型,选血糖值≥11.1 mmol·L的动 物作为高血糖模型),同期饲养的健康家兔10只, 雌雄各半,遵义医学院动物实验中心提供。
主要仪器及主要试剂、药品
兔灌胃器、离心机、兔实验台、722型分光光度仪、 D-101大孔吸附树脂柱等。
葡萄糖酶酚混合试剂、格列本脲、新鲜苦瓜、70 %乙醇、90%乙醇等。
实验方案
(一)、动物模型的制备
取质量(2.0±0.2)kg的健康家兔50只,正常饲料喂 养1周后,耳静脉注射四氧嘧啶120 mg·kg~,72 h 后耳后静脉取血(取血前禁食8 h),测空腹血糖,选 血糖值≥11.1 mmol·L叫的动物作为高血糖模型。