补肾益脑胶囊将大鼠骨髓间质干细胞诱导为神经细胞的研究

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ＣｌｉｎｉｃａｌＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ２０１４Ｖｏ１．（６）Ｎｏ．１２
ＤＯＩ：ＩＯ．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７４ — ７８６０．２０１４．１２．０１６
ｏｂｓｅｒｖｅｄｕｓｉｎｇＮｉｓｓｌ ’ Ｓｓｔａｉｎｉｎｇｍｅｔｈｏｄ，Ｎｅｕｒｏｎ—ｓｐｅｃｉｉｃｆｅｎｏｌａｓｅ（ＮＳＥ），ｎｅｓｔｉｎ，ｇｌｉａｌｉｆｂｅｒａｃｉｄｉｃｐｒｏｔｅｉｎ（ＧＦＡＰ）ｗｅｒｅｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙ
彭志强黄天华郭杵强梁志榕吴敏玲陈永健何诚（１．广州市番禺区中医院，广东广州，５１１４００；２．广州中医药大学研究生院，广东广，ｊｑ１，５１０４０５）
中图分类号：Ｒ２８５．５
文献标识码：Ａ
补肾益脑胶囊将大鼠骨髓间质干细胞诱导为神经细胞的研究
Ｒｅｓｅａｒｃｈｏｎｂｏｎｅｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｅｉｎｔｏｎｅｕｒｏ－ｌｉｋｅｃｅｌｌｓｗｉｔｈｂｕｓｈｅｎＹｉｎａｏｃａｐｓｕｌｅｓ
ｏｆＬ — ＤＭＥＭ／１０％ＦＣＳ／ＢｕｓｈｅｎＹｉｎａｏＣａｐｓｕｌｅｓｆｏｒ２４ｈｏｕｒｓ，ｔｈｅｎｍｅｙｗｅｒｅｉｎｄｕｃｅｄｗｉｔｈｉｎｄｕｃｔｉｏｎｍｅｄｉａｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇｏｆＬ－ＤＭＥＭ／ＢｕｓｈｅｎＹｉｎａｏＣａｐｓｕｌｅｓ．Ｔｈｅｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃｃｈａｎｇｅｓｗｅｒｅｏｂｓｅｒｖｅｄｂｙｌｉｇｈｔｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ，ｔｈｅｓｐｅｃｉｉｃｆｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｔｒｕｃｕｒｔｅｓｏｆｎｅｕｒｏｎｓｃｅｌｌｓｗｅｒｅ
ＹｉｎａｏＣａｐｓｕｌｅｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓｗｅｒｅｏｂｔａｉｎｅｄｒｏｆｍｔｈｉｇｈｂｏｎｅｓｍａｒｒｏｗｏｆｒａｔｓａｎｄｅｘｐｅｎｄｅｄｉｎｃｕｌｔｕｒｅｍｅｄｉｕｍ．
・
ＢｕｓｈｅｎＹｉｎａｏＣａｐｓｕｌｅｓｗａｓｕｓｅｄｔｏｓｔｕｄｙｉｔｓｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｖｅｅｆｅｃｔｏｎＭＳＣｓ．ＭＳＣｓｗｅｒｅｐｒｅｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈｐｒｅｉｎｄｕｃｔｉｏｎｍｅｄｉｕｍｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ
文章编号：１６７４ — ７８６０（２０１４）１２ — ００３４ — ０３
证型：ＧＡ
【摘
要１目的：使用补肾益脑胶囊将大鼠骨髓间充质干细胞（ｒＭＳＣ）体外诱导为神经细胞。方法：体外扩增培养大鼠股骨骨
髓细胞。ＭＳＣ通过补肾益脑胶囊内药粉溶解液含１Ｏ％胎牛血清的Ｌ．ＤＭＥＭ预诱导２４ｈ后，用无血清Ｌ－ＤＭＥＭ内加入补肾益脑胶囊内药粉溶解液以正式诱导ＭＳＣ分化成神经细胞。通过倒置显微镜对比观察细胞前后的形态变化；神经细胞特征性结构则以尼氏染色法来观察；以免疫细胞化学鉴定有神经干细胞标志物巢蛋白（ｎｅｓｔｉｎ）、胶质纤维酸性蛋白（ＧＦＡＰ）和神经元烯醇化酶（ＮＳＥ）ｉｆ￣表达。结果：通过贴壁法成功将大鼠骨髓间质干细胞分离并在体外大量扩增，补肾益脑胶囊诱导３小时后，ＭＳＣ形态转变为典型的神经样细胞，尼氏染色法显示诱导后的细胞胞体中有尼氏体，免疫细胞化学染色鉴定显示其ＮＳＥ、ｎｅｓｔｉｎ表达皆为阳性，ＧＦＡＰ表达阴多种形态的神经样细胞。
【关键词１骨髓间质千细胞；神经细胞；补肾益脑胶囊；诱导
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｆｒｏｍｒａｔｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓ（ｒＭＳＣｓ）ｔｏｎｅｕｒｏｎ・ｌｉｋｅｃｅｌｌｓｗｉｔｈＢｕｓｈｅｎ